HPLC-MS/MS同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因含量的方法学研究

目的建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因浓度的HPLC-MS/MS法。方法以茶碱为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后直接进样。用Waters symmetry C18（150 mm×4.6 mm,5μm）为分析柱,甲醇-0.2%醋酸=35∶65（v/v）为流动相,流速为0.9 mL·min^-1,采用柱后分流,0.2 mL·min^-1进入质谱,柱温35℃。选择监测的离子为m/z152.1→109.9（对乙酰氨基酚）、m/z195.3→138.1（咖啡因）和m/z181.1→123.9（茶碱）。结果血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因的线性范围分别为0.02-4.04μg·mL^-1,5.05~1 010 ng·mL^-1;日内日间精密度RSD均〈7.94%。结论本方法专属性强,灵敏度高,操作简便、快速,符合生物样品分析要求,适用于临床药动学研究。

氨酚匹林咖啡因片人体药代动力学和生物等效性

目的:建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚、水杨酸和咖啡因浓度的高效液相色谱法,研究健康受试者口服氨酚匹林咖啡因片(每片含对乙酰氨基酚250mg、阿司匹林250mg、咖啡因65mg)后的人体药代动力学和生物等效性。方法:20名健康受试者单剂量交叉口服等剂量的氨酚匹林咖啡因受试片和参比片各2片后,0～24h内间隔取血,分离血浆,以对氨基苯甲酸为内标、经乙酸乙酯提取富集后,在苯基柱上以甲醇-pH5.2醋酸盐缓冲液(25∶75)为流动相分离,237nm检测,测定血浆样品药时过程,计算主要药代动力学参数,评价生物等效性。结果:口服受试和参比片后,对乙酰氨基酚的主要药动学参数C_(max),T_(max),t_(1/2)(λ_Z),MRT和AUC_(0～24)分别为(9.02±1.55)和(8.25±2.33)μg·mL^(-1),(0.70±0.20)和(0.70±0.20)h,(4.01±0.49)和(3.81±0.76)h,(4.81±0.52)和(4.86±0.86)h,(31.54±4.79)和(30.39±5.88)h·μg·mL^(-1);水杨酸(阿司匹林活性代谢物)的主要药动学参数分别为(42.60±9.20)和(32.74±7.83)μg·mL^(-1),(1.20±0.50)和(3.0±1.4)h,(2.95±0.73)和(2.87±0.55)h,(5.52±0.91)和(6.17±1.00)h,(254.82±58.90)和(244.93±56.80)h·μg·mL^(-1);咖啡因的主要药动学参数分别为(3.80±0.60)和(3.93±1.09)μg·mL^(-1),(0.90±0.30)和(0.90±0.60)h,(7.23±3.41)和(6.16±3.07)h,(9.49±3.60)和(8.76±3.77)h,(23.43±5.65)和(25.24±7.51)h·μg·mL^(-1)。由AUC_(0～24)估算,氨酚匹林咖啡因片受试制剂的对乙酰氨基酚、水杨酸、咖啡因的相对生物利用度分别为(107.5±28.0)%,(109.2±39.4)%,(99.2±40.0)%。结论:血浆样品中对乙酰氨基酚、水杨酸和咖啡因浓度的HPLC同时测定法专属性强,灵敏度适宜。药代动力学结果表明受试和参比制剂生物等效。

复方氨酚烷胺胶囊人体相对生物利用度研究

目的:研究复方氨酚烷胺胶囊人体相对生物利用度。方法:20例健康志愿者单剂量口服复方氨酚烷胺胶囊受试验制剂或参比制剂后12 h内多点采集血样,采用HPLC法测定人血清中对乙酰氨基酚和咖啡因的浓度。采用双周期两制剂交叉试验设计。血药浓度-时间数据经DAS软件处理后得药动学数据,并进行等效性检验。结果:2种制剂中对乙酰氨基酚和咖啡因的血药浓度经时变化和药动学参数相近,以参比制剂做对照,受试制剂中对乙酰氨基酚和咖啡因的相对生物利用度如下:F值(以AUC0-t计算)分别为(102．05±14．19)％和(112．39±32．24)％,F’(以AUC0-∞计算)分别为(101．32±15．49)％和(105．27±45．63)％,均符合生物等效性要求。结论:2种复方氨酚烷胺胶囊的口服生物利用度具有生物等效性。

LC-MS／MS法研究氨酚烷胺胶囊的人体药动学及相对生物利用度

目的:建立准确、灵敏的液相色谱-串联质谱法(LC—MS/MS)同时测定人血浆中的对乙酰氨基酚、盐酸会刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏浓度,并研究健康受试者单剂量口服氨酚烷胺胶囊参比制剂和试验制剂后的药动学和相对生物利用度。方法:24名健康男性受试者进行随机双交叉试验,随机单剂量口服1粒氨酚烷胺胶囊(每粒含对乙酰氨基酚250 mg、盐酸金刚烷胺100 mg、咖啡因15 mg 和马来酸氯苯那敏2 mg)参比制剂和试验制剂后采集血样,以盐酸克仑特罗为内标,采用 ESI 正离子选择性反应监测同时测定对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏血浆浓度,计算药动学参数及进行生物等效性评价。结果:由 AUC_(0-r)估算,试验制剂中对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷胺、咖啡因和马来酸氯苯那敏的相对生物利用度(F)分别为(99.2±21.4)%,(102.8±38.5)%,(112.0±53.1)%,(102.4±43.1)%。结论:建立的 LC—MS/MS 测定法准确、灵敏,结果可靠;统计分析表明氨酚烷胺胶囊试验制剂和参比制剂生物等效。

复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)人体药动学研究

目的:建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚、异丙安替比林和咖啡因浓度的HPLC法,研究健康志愿者口服复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)(每片含对乙酰胺基酚250 mg,异丙安替比林150 mg,咖啡因50 mg)后的人体药动学。方法:20例健康受试者单剂量口服复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)2片后24 h内间隔取血分离血浆。以茶碱为内标,血浆经乙酸乙酯提取后,用HPLC测定对乙酰氨基酚、异丙安替比林和咖啡因的血浆浓度。色谱条件为:Phe- nomenex Phenyl-BDS色谱柱(250 mm×4．6 mm,5μm),甲醇-醋酸盐缓冲液为流动相梯度洗脱分离,紫外260 nm检测。测定血药浓度经时过程,3P97程序计算主要药动学参数。结果:对乙酰氨基酚的主要药动学参数Cmax,Tmax, t1/2(λZ),MRT,AUC0-24h,CL／F和V／F分别为(3．57±0．82)μg·mL-1,(0．43±0．20)h,(4．27±0．76)h,(5．05±1．06)h,(13．17±3．27)h·μg·mL-1,(41．64±25．62)L·h-1和(166．57±109．80)L;异丙安替比林的分别为(2．50±0．69)μg·mL-1,(0．54±0．27)h,(2．01±0．44)h,(2．94±0．58)h,(6．37±1．80)h·μg·mL-1,(53．68±17．45)L·h-1和(106．86±21．42)L;咖啡因的分别为(1．23±0．33)μg·mL-1,(0．45±0．23)h,(5．49±1．44)h,(7．85±1．88)h, (8．78±3．20)h·μg·mL-1,(13．15±4．91)L·h-1和(87．51±15．06)L。结论:建立的HPLC方法专属、准确、灵敏度适宜,适用于复方对乙酰氨基酚片(Ⅱ)药动学研究。

单剂量口服复方氨酚烷胺胶囊在人体内的生物等效性

目的选择18名受试者单剂量交叉po两种复方氨酚烷胺胶囊,评价其生物等效性。方法用HPLC测定血中对乙酰氨基酚和咖啡因的药物浓度,用3p97软件计算药动学参数;用方差分析和双单侧t检验分析两种复方氨酚烷胺胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的主要药动学参数。结果对乙酰氨基酚的Tmax分别为0.99±0.47、0.88±0.39 h,Cmax分别为8.40±2.99、8.62±5.00μg.ml-1,AUC0-24分别为35.42±9.54、33.84±10.37 mg.h.L-1;咖啡因的Tmax分别为0.94±0.24、0.90±0.19 h,Cmax分别为1.22±0.31、1.26±0.42μg.ml-1,AUC0-24分别为8.80±2.01、8.43±2.23 mg.h.L-1。结论两种制剂具有生物等效性。

阿酚咖片中对乙酰氨基酸和咖啡因的相对生物利用度及其生物等效性

目的研究阿酚咖(AFC)片中的对乙酰氨基酚、咖啡因的相对生物利用度。方法采用RP-HPLC测定24名志愿受试者单剂量口服AFC片供试品与参比制剂后,血液中对乙酰氨基酚、咖啡因的变化。结果对乙酰氨基酚的相对生物利用度为100.72%±11.33%;供试品与对照品的AUC0→T分别为12.86±3.20、12.92±3.56μg.h.ml-1;Tmax分别为1.1±0.4、1.1±0.4 h;Cmax分别为3.25±0.57、3.31±0.61μg.ml-1。咖啡因的相对生物利用度为101.96%±13.65%;供试品与对照品的AUC0→T分别为10.61±1.50、10.32±1.80μg.h.ml-1;Tmax分别为1.0±0.4、1.0±0.3 h;Cmax分别是1.74±0.20、1.68±0.25μg.ml-1。结论两种制剂中的对乙酰氨基酚和咖啡因的AUC0→∞、AUC0→T、Tmax及Cmax经双单侧t检验,生物等效。

氨酚咖黄烷胺片在人体的生物等效性研究

目的:研究氨酚咖黄烷胺的药物动力学和生物等效性。方法:按双周期随机交叉试验设计,24名健康男性受试者分别单次口服受试试剂和参比试剂后,HPLC法测定血浆中对乙酰氨基酚、咖啡因的浓度,HPLC-MS/MS法测定血浆中金刚烷胺的浓度。结果:口服受试试剂和参比试剂后,对乙酰氨基酚的t_(1/2)分别为(3.93±1.66)和(3.56±1.38)h,C_(max)分别为(6.301 2±0.840 8)和(6.695 6±1.260 0)μg·ml^(-1),t_(max)分别为(0.79±0.42)和(0.77±0.59)h,AUC_(0-t)分别为(26.2±5.4)和(27.0±5.6)μg·h·ml^(-1);对乙酰氨基酚的相对生物利用度为(98.1%±15.1)%。咖啡因的t_(1/2)分别为(6.50±2.53)和(6.70±2.37)h,C_(max)分别为(795.1±182.5)和(811.8±194.1)ng·ml^(-1),t_(max)分别为(0.89±0.61)和(0.98±0.69)h,AUC_(0-t)分别为(7 008±2 615)和(7 330±2 669)ng·h·ml^(-1);咖啡因的相对生物利用度为(96.7%±18.7)%。金刚烷胺的t_(1/2)分别为(13.29±4.04)和(11.76±3.63)h,C_(max)分别为(295.3±80.5)和(303.0±72.4)ng·ml^(-1),t_(max)分别为(2.10±1.13)和(2.13±1.17)h,AUC_(0-t)分别为(4 158±1 653)和(4 097±1 366)ng·h·ml^(-1);金刚烷胺的相对生物利用度为(104.5±32.7)%。结论:受试试剂与参比试剂真有生物等效性。

氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的人体药动学

目的研究氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚和咖啡因的人体药动学。方法本试验采用HPLC法测定了18名健康男性受试者口服氨咖黄敏胶囊后不同时刻血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因的浓度,用3P97软件拟合房室模型并求出主要药动学参数。结果受试者口服含对乙酰氨基酚750 mg和咖啡因45 mg的氨咖黄敏胶囊制剂后,血浆中对乙酰氨基酚的t_(max)为(1.03±0.76)h,ρ_(max)为(12.00±3.10)mg·L^(-1),t_(1/2)为(4.33±1.18)h,用梯形法计算AUC_(0→t)为(52.51±16.81)mg·h·L^(-1),AUC_(0→∞)为(54.34±17.72)mg·h·L^(-1);血浆中咖啡因的t_(max)为(0.89±0.50)h,ρ_(max)为(1.290±0.379)mg·L^(-1),t_(1/2)为(5.37±2.15)h,用梯形法计算AUC_(0→t)为(7.19±3.03)mg·h·L^(-1),AUC_(0-∞)为(8.26±3.69)mg·h·L^(-1)。结论对乙酰氨基酚在人体内符合二房室模型,咖啡因在人体内符合一房室模型。

感冒灵颗粒中药成分对化药成分人体药动学的影响研究

目的研究感冒灵颗粒中中药成分对对乙酰氨基酚、咖啡因和氯苯那敏人体药动学的影响。方法 12名健康男性志愿者,按2×2交叉试验设计,分别单次、多次口服感冒灵颗粒（试验制剂）或相应的化药组合（参比制剂）,血浆中对乙酰氨基酚浓度采用HPLC-UV法测定,咖啡因和氯苯那敏的浓度采用HPLC-MS/MS测定,比较2组主要药动学参数的差异,评价中药成分对化药药动学参数的影响。结果试验制剂与参比制剂单次及多次给药后的药动学参数包括AUC0~t、Cmax、tmax间差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论感冒灵颗粒中的中药成分对各化药成分在人体的药动学无明显影响,其组方在药动学方面具有合理性。