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cDNA Cloning of Paramyosin from Several Kinds of Squid Mantle Muscle
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作者 Takayuki Kajita Yoshiko Takeda +3 位作者 Saki Yoshida Koki Yamada Masahiro Matsumiya Hideto Fukushima 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2018年第1期11-25,共15页
Paramyosin is a rod-shaped muscle protein found exclusively in invertebrates, with α-helices coiled around each other to form a coiled-coil structure. Marine organisms in which the primary structure of paramyosin has... Paramyosin is a rod-shaped muscle protein found exclusively in invertebrates, with α-helices coiled around each other to form a coiled-coil structure. Marine organisms in which the primary structure of paramyosin has been determined are mollusks, including abalone (Haliotis discus), mussels (Mytilus galloprovincialis), octopus (Octopus bimaculoides), and oyster (Crassostrea gigas). In contrast, the primary structure of squid paramyosin, which is of particular interest, has yet to be reported. In the present study, cDNA cloning of paramyosins from four squid species, the neon flying squid (Ommastrephes bartramii), the Humboldt squid (Dosidicus gigas), the golden cuttlefish (Sepia esculenta), and the clawed armhook squid (Gonatus onyx), was performed to determine the following: the 2605-bp O. bartramii paramyosin gene containing a 2574-bp open reading frame (ORF), the 2691-bp D. gigas paramyosin gene containing a 2640-bp ORF, the 2631-bp S. esculenta paramyosin gene containing a 2574 ORF, and the 2609-bp G. onyx paramyosin gene containing a 2574-bp ORF. The primary structure of the four squid paramyosins was found to contain heptad repeats and an ACD (assembly competence domain), which are characteristic of a coiled coil. A phylogenetic analysis was performed with paramyosin sequences from species including the four squid species examined in this study, the results of which indicated that the four squid paramyosins form a group independent from the paramyosins of other species, to which octopus paramyosins are closest. 展开更多
关键词 paramyosin SQUID cDNA Cloning MANTLE MUSCLE PHYLOGENETIC Analysis
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日本血吸虫97kDa DNA疫苗与致弱尾蚴疫苗诱导免疫应答特征的比较研究 被引量:21
2
作者 陈家旭 刘述先 +2 位作者 曹建平 宋光承 徐裕信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期257-261,共5页
目的 对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗 (Sjc97DNA)与紫外线致弱尾蚴 (UVC)疫苗免疫C5 7BL 6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征。 方法 以Sjc97DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C5 7BL 6小鼠共 2次 ,每次间隔 3wk ,末次... 目的 对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗 (Sjc97DNA)与紫外线致弱尾蚴 (UVC)疫苗免疫C5 7BL 6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征。 方法 以Sjc97DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C5 7BL 6小鼠共 2次 ,每次间隔 3wk ,末次免疫后 3wk攻击感染日本血吸虫尾蚴 ;UVC疫苗接种同种小鼠后 5wk攻击感染上述等量尾蚴。均于攻击感染后 7wk计数虫负荷及肝卵负荷。并设空质粒对照及感染对照组。用ELISA分析免疫鼠攻击感染前后血清特异性IgG、IgA及亚型抗体水平 ,以及脾淋巴细胞体外诱生的细胞因子水平。  结果 Sjc97DNA疫苗及UVC疫苗免疫小鼠均诱生出以Th1型免疫应答为主的IL 2、IFN γ及特异性抗AWA、SEAIgG2a、IgG2b亚型及IgA抗体 ,UVC疫苗组小鼠各细胞因子及抗体水平均显著高于Sjc97DNA疫苗组 ,但两疫苗组均未测及IL 4。攻击感染后 ,Sjc97DNA疫苗组的减虫率 3 6.3 %、减卵率 42 .4% ,明显低于UVC疫苗组的 66.9%和 75 .6%。攻击感染后 7wk ,两疫苗组小鼠Th2型免疫应答虽有所增强 ,但仍以Th1型免疫应答占优势 ;而空质粒对照组和感染对照组小鼠则以Th2型免疫应答为主。 结论 核酸疫苗与紫外线致弱尾蚴疫苗均能诱导产生抗感染免疫保护力 ,致弱尾蚴疫苗的免疫保护力高于Sjc97DNA。两疫苗诱导的抗感染? 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 核酸疫苗 紫外线致弱尾蚴 免疫效应 血吸虫病
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日本血吸虫副肌球蛋白全基因核酸疫苗对小鼠的抗病免疫效应 被引量:15
3
作者 陈家旭 刘述先 +2 位作者 曹建平 宋光承 徐馀信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期81-85,共5页
目的探讨日本血吸虫副肌球蛋白全基因核酸疫苗(Sjc97DNA)免疫小鼠诱导的抗病免疫效应。方法将40只C57BL/6小鼠随机分成4组:疫苗组,以Sjc97DNA疫苗100μg经后腿胫前肌注射免疫小鼠,共2次,间隔3周;空质粒组,以同法、同剂量的空质粒载体免... 目的探讨日本血吸虫副肌球蛋白全基因核酸疫苗(Sjc97DNA)免疫小鼠诱导的抗病免疫效应。方法将40只C57BL/6小鼠随机分成4组:疫苗组,以Sjc97DNA疫苗100μg经后腿胫前肌注射免疫小鼠,共2次,间隔3周;空质粒组,以同法、同剂量的空质粒载体免疫小鼠;上述2组分别于末次免疫后3周攻击感染30±2条日本血吸虫尾蚴;感染对照组,不作免疫,感染相同数量的日本血吸虫尾蚴;空白对照组,未作任何处理。攻击感染后7周剖杀小鼠,测量肝脏单个虫卵肉芽肿大小,测定鼠血清透明质酸及层黏连蛋白含量,PCR-ELISA检测肝组织转化生长因子(TGF-β1)mRNA的表达水平。结果Sjc97DNA疫苗组小鼠肝脏虫卵肉芽肿的直径为(183.75±42.36)μm,显著小于空质粒对照组的(303.12±37.36)μm和感染对照组的(304.38±53.23)μm(P<0.01)。血清透明质酸和层黏连蛋白水平,疫苗组显著低于感染对照组(P<0.01)。肝组织TGF-β1mRNA表达水平,疫苗组亦明显低于两对照组(P<0.05)。结论Sjc97DNA核酸疫苗具有一定的抗虫卵肉芽肿及抗肝纤维化作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 核酸疫苗 虫卵肉芽肿 纤维化 转化生长因子mRNA
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猪囊尾蚴副肌球蛋白核酸疫苗的免疫保护性研究 被引量:11
4
作者 王庆敏 陈蕊雯 +1 位作者 郭瀛军 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期504-507,共4页
目的 :研究猪囊尾蚴副肌球蛋白 (Ag B)核酸疫苗诱发的免疫应答。 方法 :将 pc DNA3- Ag B核酸疫苗肌注 4~ 6周龄的昆明种小鼠 ,从 2周后开始用 EL ISA方法检测小鼠体内 Ig G和 Ig G2 a的水平。另外将该核酸疫苗注射 C5 7BL / 6小鼠 ,... 目的 :研究猪囊尾蚴副肌球蛋白 (Ag B)核酸疫苗诱发的免疫应答。 方法 :将 pc DNA3- Ag B核酸疫苗肌注 4~ 6周龄的昆明种小鼠 ,从 2周后开始用 EL ISA方法检测小鼠体内 Ig G和 Ig G2 a的水平。另外将该核酸疫苗注射 C5 7BL / 6小鼠 ,体外培养小鼠脾细胞 ,用刀豆蛋白 A (Con A)和特异性抗原刺激 ,EL ISA试剂盒检测细胞因子 IL - 2和 IL - 4的水平 ,并观察脾淋巴细胞增殖反应。另外 ,将该核酸疫苗肌注瘦型仔猪 ,进行攻击实验 ,计算相对保护率。结果 :注射疫苗后的第 3周起 ,Ig G即为阳性 ,持续升高至第 8周 ;从第 2周起 ,小鼠血清 Ig G2 a为阳性 ,第 4周达到高峰。细胞因子检测表明 ,IL- 2水平远远高于空载体对照组 ,而 IL- 4含量却与空载体对照组无显著差异 ;实验组刺激指数明显高于空载体对照组。副肌球蛋白核酸疫苗对仔猪的相对保护率为 80 %。 结论 :猪囊尾蚴副肌球蛋白核酸疫苗在小鼠动物实验中引发了以 Th1型免疫应答占优势的全面免疫应答。pc DNA3- Ag B核酸疫苗对仔猪具有较好的免疫保护性。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 副肌球蛋白 核酸类 疫苗 TH1免疫应答
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日本血吸虫副肌球蛋白全基因核酸疫苗在小鼠诱生的保护性免疫力 被引量:9
5
作者 周生华 刘述先 +2 位作者 宋光承 徐裕信 孙文宇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期321-324,共4页
目的: 研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗免疫C57 BL/6 及BALB/c 小鼠诱生的保护性免疫力。方法: 将构建的日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗 (pCMV-SjC97) 经后腿胫前肌免疫C57B... 目的: 研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗免疫C57 BL/6 及BALB/c 小鼠诱生的保护性免疫力。方法: 将构建的日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗 (pCMV-SjC97) 经后腿胫前肌免疫C57BL/6及BALB/c小鼠, 共免疫3 次, 每次间隔3 w k。末次免疫后3 w k 以血吸虫尾蚴攻击感染, 6 wk 后计数成虫负荷及肝、脾、肠组织虫卵数。设不含SjC97 编码基因的空载体质粒免疫组为对照组。结果: pCMV-SjC97 免疫C57 BL/6 小鼠主要诱生IgG2a 和IgG2b 亚类, 而免疫BALB/c小鼠除诱生IgG2a 和IgG2b 亚类外, 还诱生IgG1。pCMV-SjC97 免疫C57BL/6 小鼠诱生较明显的减虫率 (35.5% ~41.1% ) 和减卵率 (肝、脾及肠组织减卵率分别为44.5% ~59.6% 、56.7% ~82.4% 及57.9% ), 而对BALB/c小鼠未诱生保护性。结论: pCMV-SjC97 核酸疫苗能对C57BL/6 小鼠诱生较明显保护性免疫力, 而对BALB/c 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 核酸疫苗 保护性免疫力
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日本血吸虫副肌球蛋白小鼠免疫试验 被引量:6
6
作者 林矫矫 田锷 +4 位作者 傅志强 叶萍 林邦发 石耀军 施福恢 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1996年第1期17-21,共5页
应用生物化学方法从日本血吸虫成虫中提取虫体副肌球蛋白,并把它结合佐剂FCA/FIA或BCG免疫两批BALB/c小鼠,获得了32.18%—48.52%的减虫率,但统计学上大都无显著差异.两次实验结果还表明,应用虫体副肌球蛋白结合FCA/FIA进行肌肉注射,和... 应用生物化学方法从日本血吸虫成虫中提取虫体副肌球蛋白,并把它结合佐剂FCA/FIA或BCG免疫两批BALB/c小鼠,获得了32.18%—48.52%的减虫率,但统计学上大都无显著差异.两次实验结果还表明,应用虫体副肌球蛋白结合FCA/FIA进行肌肉注射,和应用等量抗原结合BCG皮内注射免疫的BALB/c小鼠,获得的减虫率相当. 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 免疫试验
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猪囊尾蚴抗原-B基因cDNA编码区的克隆 被引量:13
7
作者 王庆敏 戴建新 +1 位作者 张平武 孙树汉 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期73-75,共3页
[目的 ]扩增和克隆猪带绦虫囊尾蚴 Ag B基因的 c DNA编码区。 [方法 ]提取猪囊尾蚴总 RNA中 ,利用 RT- PCR技术扩增出 Ag B基因 c DNA编码区 ,然后将其克隆到载体 p UC118中进行序列分析。 [结果 ]PCR反应产物为单一条带 ,大小为 2 .6 k... [目的 ]扩增和克隆猪带绦虫囊尾蚴 Ag B基因的 c DNA编码区。 [方法 ]提取猪囊尾蚴总 RNA中 ,利用 RT- PCR技术扩增出 Ag B基因 c DNA编码区 ,然后将其克隆到载体 p UC118中进行序列分析。 [结果 ]PCR反应产物为单一条带 ,大小为 2 .6 kb。测序结果与澳大利亚株猪囊尾蚴 Ag B序列有 99.8%的同源性 ,二者的氨基酸序列有 99.3%的同源性。 [结论 ]成功地克隆了猪囊尾蚴 Ag B基因 c DNA编码区。 展开更多
关键词 猪带绦虫囊尾蚴 AgB基因 cDNA编码区 基因克隆
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日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定 被引量:5
8
作者 王新军 张兆松 +9 位作者 王勇 吴海玮 张蕾 李光富 季旻珺 朱翔 蔡晓萍 刘丰 苏川 吴观陵 《热带医学杂志》 CAS 2004年第6期653-656,共4页
目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白的T细胞表位。方法用SYFPEITHI软件预测日本血吸虫(中国大陆株)副肌球蛋白的T细胞表位,候选表位分别命名为P20、P21、P22、P23、P24。设计并合成候选表位的编码核苷酸,定向克隆入融合表达载体pET-32c(+),... 目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白的T细胞表位。方法用SYFPEITHI软件预测日本血吸虫(中国大陆株)副肌球蛋白的T细胞表位,候选表位分别命名为P20、P21、P22、P23、P24。设计并合成候选表位的编码核苷酸,定向克隆入融合表达载体pET-32c(+),经酶切及测序鉴定出重组克隆。阳性克隆经IPTG诱导表达,表达产物以Ni2+-NTA柱亲和层析及透析纯化。纯化后的硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白体外刺激C3H/HeJ及C57BL/6小鼠腹股沟淋巴结或脾脏单个核细胞,3H-TdR掺入法检测其增殖。结果候选表位中P20、P21、P22、P23能有效刺激C3H鼠致敏淋巴细胞细胞增殖,P20、P22能刺激C57鼠致敏淋巴细胞增殖。结论P20和P22可能是日本血吸虫副肌球蛋白的通用性T细胞表位。 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 表位
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日本血吸虫副肌球蛋白全基因克隆、测序及体内表达 被引量:9
9
作者 周生华 刘述先 +1 位作者 宋光承 徐裕信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期196-199,共4页
目的: 将日本血吸虫大陆株副肌球蛋白( Sjc97) 编码区全基因克隆及测序, 并研究 Sjc97 全基因核酸疫苗在小鼠体内的表达。方法: 抽提日本血吸虫成虫总 R N A, 逆转录聚合酶链反应 ( R T P C R) 扩增编码... 目的: 将日本血吸虫大陆株副肌球蛋白( Sjc97) 编码区全基因克隆及测序, 并研究 Sjc97 全基因核酸疫苗在小鼠体内的表达。方法: 抽提日本血吸虫成虫总 R N A, 逆转录聚合酶链反应 ( R T P C R) 扩增编码 Sjc97的全基因c D N A, 双脱氧链末端终止法测 D N A 序列。构建含 Sjc97 全基因的质粒表达载体 (p C M V Sjc97) , 并用免疫荧光染色法研究p C M V Sjc97 在小鼠体内的表达特性。结果与结论: 用 R T P C R 扩增获得了 Sjc97 的编码区全基因c D N A, 并测定了该基因编码区的全序列。与日本血吸虫菲律宾株、日本株及曼氏血吸虫副肌球蛋白编码区全基因比较, 核苷酸序列同源性分别为: 994 % 、992 % 和910 % ; 推导的氨基酸序列同源性分别为:997 % 、998 % 和960 % 。p C M V Sjc97 核酸疫苗能在注射的小鼠局部肌肉组织表达 Sjc97 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 基因克隆 核酸疫苗
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猪囊尾蚴副肌球蛋白cDNA中CpG序列的免疫激活作用 被引量:4
10
作者 孙树汉 郭瀛军 +1 位作者 王庆敏 陈蕊雯 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期298-299,共2页
目的 探讨猪囊尾蚴副肌球蛋白 (又称为AntigenB ,AgB)cDNA中CpG序列的免疫激活作用。 方法 以pcDNA3 AgB质粒疫苗、CpG序列突变的pcDNA3 AgB′质粒疫苗、pcDNA3载体质粒和AgB蛋白质分别免疫C5 7BL/ 6小鼠 ,2wk后开始用ELISA检测小鼠... 目的 探讨猪囊尾蚴副肌球蛋白 (又称为AntigenB ,AgB)cDNA中CpG序列的免疫激活作用。 方法 以pcDNA3 AgB质粒疫苗、CpG序列突变的pcDNA3 AgB′质粒疫苗、pcDNA3载体质粒和AgB蛋白质分别免疫C5 7BL/ 6小鼠 ,2wk后开始用ELISA检测小鼠血清中IgG和IgG2a的效价。 结果 免疫接种的第 2周起实验组IgG与IgG2a效价开始升高 ,至第 4周达到峰值。其中以pcDNA3 AgB组升高最为显著 (P <0 0 5 )。 结论 pcDNA3 AgB核酸疫苗所诱导的小鼠免疫反应 ,不仅具有其表达产物AgB蛋白的抗原作用 ,AgBcDNA中的CpG序列也具有免疫激活作用。 展开更多
关键词 囊尾蚴 副肌球蛋白 核酸疫苗 CPG序列 免疫激活作用
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周期型马来丝虫副肌球蛋白基因真核表达重组质粒构建 被引量:4
11
作者 陈阳 方政 +3 位作者 黄为群 谢东方 姜声扬 吴建军 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期250-252,共3页
提取周期型马来丝虫总RNA。跟据已知的马来丝虫副肌球蛋白(BmPmy)基因序列,设计合成引物,并引入HindⅢ和BamHⅠ酶切位点,应用RT-PCR技术,扩增BmPmy基因片段,克隆至载体pGEM-T中,经PCR和双酶切鉴定后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),... 提取周期型马来丝虫总RNA。跟据已知的马来丝虫副肌球蛋白(BmPmy)基因序列,设计合成引物,并引入HindⅢ和BamHⅠ酶切位点,应用RT-PCR技术,扩增BmPmy基因片段,克隆至载体pGEM-T中,经PCR和双酶切鉴定后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-BmPmy,并转染COS-7细胞后进行RT-PCR分析。转染的COS-7细胞高水平表达周期型马来丝虫副肌球蛋白mRNA,结果与预期相符。 展开更多
关键词 周期型马来丝虫 副肌球蛋白 真核表达质粒 COS细胞
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兔疥螨副肌球蛋白基因的RT-PCR扩增克隆与序列分析 被引量:3
12
作者 陶玉顺 梁海英 +1 位作者 曾智勇 杨光友 《西南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期155-158,共4页
在首次建立兔疥螨人工感染增殖以及分离纯化方法的基础上,参考GeneBank中登录的红狐疥螨副肌球蛋白基因序列(AF462195)以及人疥螨副肌球蛋白部分基因序列(AF317670)所设计的特异性引物,首次用RT-PCR方法直接扩增出了兔疥螨副肌球蛋白部... 在首次建立兔疥螨人工感染增殖以及分离纯化方法的基础上,参考GeneBank中登录的红狐疥螨副肌球蛋白基因序列(AF462195)以及人疥螨副肌球蛋白部分基因序列(AF317670)所设计的特异性引物,首次用RT-PCR方法直接扩增出了兔疥螨副肌球蛋白部分基因(登录号为DQ131648).序列分析表明:兔疥螨与红狐疥螨及人疥螨副肌球蛋白的序列相似性分别为99.3%和99.4%,推导氨基酸序列的相似性分别为99.5%和100%.进化树分析可知,3者在亲缘关系上极为相近,而兔疥螨与人疥螨则更为接近. 展开更多
关键词 疥螨 副肌球蛋白 RT-PCR 克隆 序列分析
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日本血吸虫复合表位DNA质粒构建及鉴定 被引量:2
13
作者 娄培安 赵松 +5 位作者 桑兴旺 王晓婷 宋强 何洪江 余传信 朱荫昌 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第5期333-337,共5页
目的用GeneSOEing技术构建含日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶及副肌球蛋白T、B细胞表位的复合表位DNA质粒。方法将一个柔性的氨基酸“接头”插入真核表达质粒载体pcDNA3.1中,构建pcDNA3.1-linker。PCR法扩增磷酸丙糖异构酶表位基因... 目的用GeneSOEing技术构建含日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶及副肌球蛋白T、B细胞表位的复合表位DNA质粒。方法将一个柔性的氨基酸“接头”插入真核表达质粒载体pcDNA3.1中,构建pcDNA3.1-linker。PCR法扩增磷酸丙糖异构酶表位基因片段(T)。人工合成副肌球蛋白表位的基因片段,退火成双链(P)。分别将T、P片段克隆入改建的载体pcDNA3.1中link-er的上游和下游,构建T-P融合基因;同时还将T、P片段分别克隆入linker的下游和上游,构建P-T融合基因。重组质粒分别转化E.coliXL1-blue,抽提质粒,酶切鉴定。结果两个目的基因片段分别按顺序克隆入真核表达质粒载体pcDNA3.1中,构建成复合表位DNA质粒。结论成功地构建了复合表位DNA质粒,为制备多价表位DNA疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸丙糖异构酶 副肌球蛋白 DNA疫苗
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重组日本血吸虫副肌球蛋白诱导水牛保护性免疫的研究 被引量:6
14
作者 周金春 易新元 +5 位作者 曾宪芳 张顺科 曾庆仁 蔡春 Joanna Wong Don Mc Manus 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第4期282-284,共3页
为观察重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)对水牛的保护效果。 2 0头水牛随机分为佐剂 (Quil A)对照组和抗原 (r Sj97)免疫组。对照组仅注射 Quil A,而免疫组注射 Quil A加 r Sj97,在第 0、2、15周肌肉注射。第 3次免疫后两周经腹部贴... 为观察重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)对水牛的保护效果。 2 0头水牛随机分为佐剂 (Quil A)对照组和抗原 (r Sj97)免疫组。对照组仅注射 Quil A,而免疫组注射 Quil A加 r Sj97,在第 0、2、15周肌肉注射。第 3次免疫后两周经腹部贴片攻击感染 10 0 0条日本血吸虫尾蚴 ,感染后第 49d剖杀冲虫 ,计数虫数和肝卵数。结果显示 ,与对照组相比 ,r Sj97免疫组的减虫率为 49.9% (P<0 .0 5 ) ,肝脏减卵率 5 7.3% (P<0 .0 1)。提示 r Sj97可诱导水牛产生一定程度的抗血吸虫攻击感染的保护性免疫力 ,并具有一定程度的抗病作用 ,进一步证实了副肌球蛋白可作为抗血吸虫病的候选疫苗分子。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组副肌球蛋白 免疫 水牛
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日本血吸虫大陆株副肌球蛋白部分基因克隆 被引量:2
15
作者 邱持平 童小妹 刘述先 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期104-106,共3页
目的 :克隆日本血吸虫大陆株副肌球蛋白部分基因。方法 :用 PCR方法根据已发表日本血吸虫菲律宾株副肌球蛋白基因部分核苷酸序列扩增大陆株副肌球蛋白基因。结果 :获得一日本血吸虫大陆株 72 0 bp基因克隆。结论 :经核苷酸序列分析证实 ... 目的 :克隆日本血吸虫大陆株副肌球蛋白部分基因。方法 :用 PCR方法根据已发表日本血吸虫菲律宾株副肌球蛋白基因部分核苷酸序列扩增大陆株副肌球蛋白基因。结果 :获得一日本血吸虫大陆株 72 0 bp基因克隆。结论 :经核苷酸序列分析证实 ,本克隆基因与菲律宾株基因核苷酸同源性为 99.0 3%。 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 基因克隆 疫苗
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重组日本血吸虫副肌球蛋白诱导小鼠保护力的研究 被引量:1
16
作者 蔡春 周金春 +3 位作者 张顺科 曾庆仁 曾宪芳 易新元 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第4期198-200,共3页
目的 用重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)免疫小鼠 ,观察保护效果。方法 小鼠随机分为 3组 ,免疫组在 0、2、15周 ,皮下注射 r Sj97加佐剂 Quil A ,同一时间佐剂对照组和空白对照组注射等量 Quil A和缓冲液 A,第 3次免疫后 2周 ,每... 目的 用重组日本血吸虫副肌球蛋白 (r Sj97)免疫小鼠 ,观察保护效果。方法 小鼠随机分为 3组 ,免疫组在 0、2、15周 ,皮下注射 r Sj97加佐剂 Quil A ,同一时间佐剂对照组和空白对照组注射等量 Quil A和缓冲液 A,第 3次免疫后 2周 ,每鼠经腹部贴片攻击感染 5 0条尾蚴 ,感染后 45 d剖杀小鼠 ,观察其减虫和减卵效果。结果 与缓冲液和 Quil A对照组相比 ,r Sj97+Quil A免疫组的减虫率分别为 44 .1% (P<0 .0 1)和 17.8% (P<0 .0 5 ) ,每克肝组织虫卵数 (L EPG)减少率分别为76 .5 % (P<0 .0 1)和 16 .9% (P<0 .0 5 ) ,每雌肝组织虫卵数 (L EPF)减少率分别为 6 2 .2 % (P<0 .0 1)和 6 .1% (P<0 .0 5 )。结论  r Sj97加佐剂 Quil 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组副肌球蛋白 免疫 小鼠
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日本血吸虫(大陆株)基因工程重组抗原混合疫苗的研究 被引量:1
17
作者 刘述先 宋光承 +4 位作者 徐裕信 曹建平 孙文宇 缪应新 张威 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1998年第A07期78-78,共1页
3年来的主要进展为:完成了重组谷胱甘肽-S-转移酶(GST)免疫兔、牛的免疫持效观察.在国内外首先进行GST基因和K99基因共表达成功.表达产物分子量50kDa,以纤毛形成存在于细菌表面,并分别具有GST和K99抗原活性,为重组GST抗原与... 3年来的主要进展为:完成了重组谷胱甘肽-S-转移酶(GST)免疫兔、牛的免疫持效观察.在国内外首先进行GST基因和K99基因共表达成功.表达产物分子量50kDa,以纤毛形成存在于细菌表面,并分别具有GST和K99抗原活性,为重组GST抗原与幼畜腹泻疫苗在血吸虫病疫区联合应用打下基础.此外,还首次证明日本血吸虫GST与肝片吸虫(Fh)、猪蛔虫(As)有明星交叉保护性免疫力,并完成FhGST和AsGST基因的克隆测序及其与日本血吸虫GST基因同源性分析,对拓宽GST抗原的应用范围及价值有重要意义.天然TPI,Tropomyosin,Paramyosin免疫小鼠试验证明有明显免疫原性后,编码上述3个候选抗原基因均已克隆测序,部分表达或正在进行全基因表达的研究.血吸虫Tropomyosin的研究进展,首次证明该抗原有较强的免疫原性,可选择作为日本血吸虫基因工程混合疫苗的候选抗原之一. 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组抗原 疫苗 基因工程
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重组日本血吸虫副肌球蛋白的表达与纯化 被引量:3
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作者 周金春 易新元 +1 位作者 Kalinna BH Mc Manus DP 《湖南医科大学学报》 CSCD 2000年第2期106-108,共3页
用基因重组技术 ,将日本血吸虫副肌球蛋白 (rSj97)基因亚克隆至表达载体pQE30上。在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫副肌球蛋白在大肠杆菌中得以高效表达。通过快速蛋白质液相色谱仪 (FPLC) ,经TALON柱和离子交换柱两步分离纯化 ,获得大量... 用基因重组技术 ,将日本血吸虫副肌球蛋白 (rSj97)基因亚克隆至表达载体pQE30上。在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫副肌球蛋白在大肠杆菌中得以高效表达。通过快速蛋白质液相色谱仪 (FPLC) ,经TALON柱和离子交换柱两步分离纯化 ,获得大量高纯度的重组日本血吸虫副肌球蛋白 。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 副肌球蛋白 rSj97基因 亚克隆
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曼氏和日本血吸虫副肌球蛋白的抗原肽研究 被引量:1
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作者 杨俊海 许家喜 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第6期423-427,共5页
副肌球蛋白是世界卫生组织选取的用来发展血吸虫疫苗的重要候选蛋白之一 .在计算机辅助下 ,应用PC Gene程序 ,根据曼氏和日本血吸虫副肌球蛋白的氨基酸序列 ,通过对其亲水性、柔韧性、可接近性和二级结构分析预测出 8个抗原肽 ,并用固... 副肌球蛋白是世界卫生组织选取的用来发展血吸虫疫苗的重要候选蛋白之一 .在计算机辅助下 ,应用PC Gene程序 ,根据曼氏和日本血吸虫副肌球蛋白的氨基酸序列 ,通过对其亲水性、柔韧性、可接近性和二级结构分析预测出 8个抗原肽 ,并用固相法进行了合成 .经Dot ELISA法测定 ,其中的 2个对抗日本血吸虫免疫球蛋白多克隆抗体 (抗 Sj IgG PcAb)显示出抗原性 。 展开更多
关键词 曼氏血吸虫 日本血吸虫 副肌球蛋白 抗原肽 多肽疫苗 血吸虫病 治疗
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日本血吸虫大陆株副肌球蛋白部分基因的表达 被引量:1
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作者 邱持平 童小妹 +1 位作者 宋光承 刘述先 《实用寄生虫病杂志》 1997年第4期145-146,共2页
为了表达日本血吸虫大陆株副肌球蛋白部分基因,作者用PCR方法从日本血吸虫基因组DNA扩增出这一副肌球蛋白部分基因,然后将该基因重组于质粒体pBV220中,使其在大肠杆菌中表达。结果获得一32kDa的表达蛋白。免疫印迹分析表明感染兔血... 为了表达日本血吸虫大陆株副肌球蛋白部分基因,作者用PCR方法从日本血吸虫基因组DNA扩增出这一副肌球蛋白部分基因,然后将该基因重组于质粒体pBV220中,使其在大肠杆菌中表达。结果获得一32kDa的表达蛋白。免疫印迹分析表明感染兔血清可识别这一表达蛋白。该蛋白的纯化将有利于血吸虫病疫苗的进一步研究。 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 表达 疫苗 血吸虫病
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