野生牛肝菌纯种分离及液态培养促三萜类物质合成的诱导剂优化研究

目的:为获得牛肝菌人工纯菌株,提高液态培养菌丝及产三萜类物质的能力。方法:以云南鲜野生牛肝菌子实体为研究对象,采用组织分离法进行母体纯菌株分离并鉴定;以金属离子Ca^(2+)、亚油酸及香菇水提物作为诱导剂,研究其对液态菌丝体中三萜类物质含量的影响。结果:经多次分离纯化获得1株纯菌种NG-3,经rDNA-ITS分子生物学鉴定,NG-3为暗褐网柄牛肝菌(Phlebopus portentosus);对NG-3菌丝体进行SEM观察,在培养8~16 d时,出现具有结实能力的锁状联合形态菌丝。对3种诱导剂进行了响应面法优化,得到的结果为Ca^(2+)浓度12 mmol/L、亚油酸量4%、香菇水提物浓度150 mg/100 mL,此时三萜含量为6.77 mg/g,比未加诱导剂三萜含量提高了76.00%。结论:3种诱导剂复合使用能够促进三萜类物质合成,提高其含量,为解决野生资源不足、实现牛肝菌功能产品产业化提供技术参数。

沉默的“对抗”:数字原住民信息回避行为研究——以父辈向子辈转发的网络信息为考察对象

数字媒体时代,父辈通过微信向子辈转发网络信息是一种常见现象,但作为数字原住民的子辈通常以信息回避行为加以回应。文章基于压力源-应变-结果模型,探索父辈转发网络信息的消极特征对子辈信息回避行为的影响,并对亲子关系在其中所发挥的作用进行研究。结构方程模型分析显示:低可信度信源和低相关性内容均会触发子辈的信息倦怠,进而促使子辈产生信息回避行为;亲子关系则会正向调节信息倦怠与信息回避行为之间的关系。模糊集定性比较分析显示,分别有4个前因变量构型会触发高/低强度的信息回避行为。探索子辈对父辈转发网络信息回避行为的影响机制,可为优化线上的代际信息传播方式提供借鉴。

四种杂交组合奥尼罗非鱼及其亲本的生长对比研究

通过RFID电子标记注射、跟踪和生长性状测量,对2个奥利亚罗非鱼品系(ZZ、AA)、2个尼罗罗非鱼品系(XX、EE)自交群体及其杂交奥尼罗非鱼4个群体(XZ、XA、EZ、EA)进行生长对比研究,罗非鱼亲本来自国家罗非鱼产业技术体系研发中心。结果表明:XZ、XA、EZ、EA四个奥尼罗非鱼群体雄性率均达94%以上,全长、体长、头长、体高等性状特征值显著高于亲本品系(P<0.05),奥尼罗非鱼的生长速率相对其亲本品系具有一定的优势,同时4个奥尼群体间生长性状特征值也存在显著差异(P<0.05);生长性状相关分析显示罗非鱼各配组群体的体质量与尾柄长相关性较低(0.690—0.846),与全长、体长、体高、体厚相关性较高;对罗非鱼各配组群体的比例性状进行主成分分析,第1主成分主要代表BS、HS、CDS、BWS性状特征,第2主成分主要代表TS、HS、CLS性状特征,通过第1、第2主成分作图可将AA与其他6个罗非鱼配组群体有效区分。

金针菇杂交育种中亲本菌株的选择模式

对23个菌株进行ISSR聚类分析,选择遗传距离较远的5个菌株,通过PDA平板拮抗试验验证它们为不同的菌株;测定了这5个菌株的脱氢酶活性、羧甲基纤维素酶活性、菌丝生长速度,并建立了它们与产量的关系.结果表明:上述指标与产量有较高的线性正相关;用这些指标来预测菌株的产量和杂交优势,不需进行繁琐、周期较长的出菇试验;用这种模式来选择金针菇杂交育种中的亲本,具有简便、快速等优点,可以缩短杂交育种的周期.

姬菇杂交菌株的ISSR分析

采用ISSR标记技术对40个姬菇杂交菌株及2个亲本菌株进行分析，使用NTSYSpe2．1生物软件对42个供试菌株进行聚类分析，构建系统树。试验筛选出了11个扩增谱带清晰、多态性好的ISSR引物，共扩增出81条清晰易辨的多态性谱带。聚类分析结果表明，42个供试菌株遗传相似系数变异范围为0．4286～0．8537，在相似系数0．6680时，42个菌株聚为7类，两亲本各聚一类，杂交菌株与亲本菌株遗传差异较大。

海南橡胶园土壤微生物数量特征

[目的]了解植胶对土壤生物肥力的影响,促进橡胶种植业的可持续发展。[方法]采集海南具有代表性的橡胶园土壤作为研究对象,分析其微生物数量特征。[结果]橡胶园土壤中的微生物数量均呈细菌>放线菌>真菌的顺序分布,细菌所占比例大多在90.00%以上,甚至还有高达99.80%。3大类群微生物数量均以砂页岩母质土壤中最多,但不同母质发育的土壤中3大类群微生物数量所占总菌数的比例相近。种植RRIM600橡胶树土壤中的3大类群微生物数量都比种植PR107的多,尤其细菌数是PR107的2倍多,但各自3大类群微生物数量所占总菌数的比例相近。由于土壤养分差异较大,即使植胶时间一致,土壤微生物数量差异也很大。

假单胞菌JK45菌株lux基因标记及在土壤中的存活

为研究植物根部重要促生菌株的个体生态学,利用三亲接合法成功地将发光酶基因luxAB转入具有解钾能力的假单胞菌Pseudomonassp.JK45菌株中。研究表明,获得的标记菌株JK45-L具有发光活性和对Cm、Km、Tet3种抗生素的抗性,杂交比例以1∶1∶1适宜。JK45-L菌株在抗生素平板中传代15次,仍具发光活性和对3种抗生素的抗性,说明标记质粒在受体菌株中较为稳定,JK45-L菌株的生长及生理生化特性没有受到标记质粒的影响,其解钾能力也没有发生明显的变化。将JK45-L菌株接种到土壤中利用luxAB基因的活性研究菌株的存活情况,结果发现,标记菌株在灭菌土壤和自然土壤中均能很好的生存,在黄褐土和黄潮土中存活规律相似,说明JK45-L菌株具有在不同土壤中与土著菌株进行空间和营养竞争的能力。

家庭经济压力与青少年抑郁:歧视知觉和亲子依恋的作用

对703名初中生(平均年龄14.30岁)进行问卷调查,探讨了青少年歧视知觉、亲子依恋在家庭经济压力与青少年抑郁关系中的中介和调节作用。结果表明:(1)在控制了性别、年级后,家庭经济压力对青少年抑郁具有显著的正向预测作用;(2)在家庭经济压力对抑郁的正向预测关系中,歧视知觉起中介作用;(3)家庭经济压力通过歧视知觉对抑郁的中介作用受到亲子依恋的调节,相对于亲子依恋水平较高的青少年,中介效应仅在亲子依恋水平较低的青少年中显著。

应力应变对马氏体相变动力学及相变塑性影响的研究

针对应力应变对马氏体相变动力学及相变塑性的影响进行了研究，得到了应力作用下相变动力学和相变塑性的计算模型，而且发现相变前预应变限制了相变塑性的数量和相变反应的速度，使之不能用弹性状态下得到的模型进行简单的外推，并利用应力应变诱导相变。

水稻早世代稳定相关的SSR标记

以具有早世代稳定特性的9个水稻品系和7个栽培稻进行杂交得到130个杂交组合。发现在同一个组合的F2群体中除出现孟德尔式分离株系外还出现性状整齐一致的稳定株系,在F2群体中出现了32个不同农艺性状的稳定株系。SSR标记结果表明:稳定株系F2与其F1单株的标记一致,都是纯合的,且双亲的标记在后代都有出现,双亲的标记位点在后代的染色体上同时出现,说明稳定株系为真杂种;分离株系F2与其F1单株SSR标记均为杂合;大部分稳定株系在RM276、RM258、RM248、RM1这4个标记位点都较高频率地出现非父母带型。推测出现变异的配子激活杂种合子体细胞减数分裂,合子经过减数分裂后,4个单倍体细胞经过胚胎发育选择,其中一个细胞染色体加倍而发育为纯合的二倍体植株。

luxAB基因标记的K2116L菌株在棉花根际中的定殖

采用三亲本杂交法将发光酶luxAB基因转移进棉花根际促生菌芽胞杆菌K2116菌株中,获得标记菌株K2116L。标记菌株连续传代15次均未发生质粒丢失现象,表明标记菌株具有较好的遗传稳定性;K2116L菌株的生长及其释钾能力未受到标记质粒的影响。K2116L菌株在灭菌和非灭菌的黄褐土、黄潮土和红壤3种土壤中均能长期存活;在灭菌土壤中的数量稍高于非灭菌土壤;在3种土壤中的数量依次为:黄褐土>黄潮土>红壤;在不同土壤中,K2116L菌株具有与土著菌株进行空间和营养竞争的能力。采用根盒试验追踪标记菌株在棉花根部的定殖动态,棉花播种12d时标记菌株在0～2、2～4cm深度根际土壤定殖密度达到最大;18d时在4cm以下的深度达到最高水平。棉花播种18d时标记菌株在所有深度的根表均达到最高定殖水平,0～2cm根段定殖密度为1.76×106cfu.g-1,8cm以下根段达到1.6×105cfu.g-1。补充营养后,根际和根表标记的菌株数量均有明显上升。试验数据显示,随着根的生长标记菌株不断向根尖方向扩散。

柔嫩艾美耳球虫杂交株对亲本株的免疫保护性研究

为探讨柔嫩艾美耳球虫杂交株对亲本株的免疫保护性,本研究用柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)杂交株及其亲本广州株、长春株、黑龙江株分别对AA肉鸡进行免疫和攻虫,通过OPG计数、粪便计分、盲肠病变计分、增重测定和保护率等指标评价免疫保护效果。结果表明E.tenella杂交株对其亲本广州株、长春株、黑龙江株的感染具有较强的免疫保护效果,保护率分别为83.9%、79.1%和81.2%;杂交株免疫肉鸡的盲肠病变计分和粪便计分显著低于广州株、长春株和黑龙江株(p<0.05)。杂交株免疫后的肉鸡再用亲本株攻虫,采血进行CD4+T、CD8+T细胞检测,结果杂交株能引起两种T细胞数量增加,表明CD4+T、CD8+T细胞在球虫免疫中起着重要作用。

不同蔟中环境对夏芳、秋白原种蚕茧解舒影响试验

以夏芳和秋白的原种熟蚕为供试材料，分别置于一楼和二楼蚕室蔟，一楼的蔟中温 度为２４℃，干湿差１．５℃，相对湿度为８５％；二楼的蔟中温度为２５℃，干湿度差３℃，相对湿度为 ７３％。夏芳一楼上蔟的蚕茧解舒率为３１．８７％，二楼上蔟的解舒率６６．６７％，指数关系为一楼的 ２０９．１９，一楼上蔟蚕茧解舒丝长 ３３３．７６ｍ，二楼上蔟的解舒丝长８１５．２ｍ，为一楼的２４４．４５；秋白一 楼上蔟的蚕茧解舒率５４．８１％，二楼上蔟的解舒率８３．５４％，指数关系为一楼上蔟的１５４．４２，一楼上 蔟的蚕茧解舒丝长４２６．９３ｍ：二楼的解舒丝长为７２０．９１ｍ，指数关系为一楼的１６０．０２，试验结果充 分说明影响夏芳和秋白原种蚕茧解舒的主要因素是蔟中环境，而茧丝长因主要受品种遗传特性的 影响，在两种上蔟环境中差异不大。

狂犬病病毒rSRV_9减毒株与亲本SRV_9毒株的病毒毒力比较

通过半数荧光灶形成量(FFD50)试验、小鼠半数致死量(LD50)试验、免疫组织化学试验,对10个培养代次的狂犬病病毒SRV9亲本毒株和rSRV9减毒株的病毒滴度、毒力及其致病性等病毒生物学特性进行检测,以鉴定拯救狂犬病rSRV9减毒株与亲本SRV9毒株病毒滴度及毒力的差异性。试验结果显示,10个培养代次的狂犬病病毒rSRV9减毒株FFD50值为5.44～7.46logFFD50/0.1mL,LD50值为2.47～2.68logLD50/0.03mL;亲本SRV9毒株FFD50值为6.36～6.79logFFD50/0.1mL;LD50值为5.56～5.79logLD50/0.03mL,通过免疫组织化学试验,检测出脑内注射SRV9毒株和rSRV9减毒株死亡小鼠脑神经细胞内的狂犬病病毒。

利福霉素高产菌株快速筛选方法的建立及应用

利福霉素发酵过程中pH变化规律能够反映菌体对不同营养物质的利用情况及菌体生理特性的变化,并与最终放瓶效价有一定的关联。据此建立了一种以发酵前期(±50 h)pH变化为判断依据的新的快速筛选菌种的方法,即发酵前期pH下降到谷底较早的菌株高产的可能性很大(概率接近70%),并在双亲株灭活种间融合法选育利福霉素SV菌株中进行了应用,筛选到了高产融合菌株F-3及F-16,两菌株分别比出发菌株效价提高了11%和17%。同时,得到了两个亲株(利福霉素SV产生菌U-32、利福霉素B产生菌X#-1)的酶解条件(U-32:10 m g/mL、34°C、2 h;X#-1:10 m g/mL、34°C、3 h)及原生质体双灭活标记条件(U-32:UV 20 m in;X#-1:60°C、50 m in),双灭活原生质体用500 g/L PEG融合,融合频率约1.04×10-5。

大豆不同亲本组合对后代品系油分含量的影响

设置"高油×高油"、"中油×高油"和"中油×低油"3种组合类型,对各组合类型后代品系油分含量进行分析测定,研究了大豆不同亲本组合对后代品系油分含量的影响。结果表明,大豆杂交组合亲本油分含量通过杂交后代群体对后代品系有显著影响,亲本油分含量与组合后代品系油分含量呈正相关。不同油分含量的大豆杂交亲本组合类型对后代品系油分含量有显著影响,同时受人为选择方式的影响。试验明确了大豆杂交后代群体油分含量的遗传过程及选择作用对后代品系油分含量的影响,为大豆品质育种实践提供参考。

探索黄土实用湿化模型的研究方向

从对比分析半个世纪以来,国内外关于黄土的力学性质和工程特性研究中所采用的强度理论和数学模型出发,结合工程实际的条件和需要,提出建立简单实用的湿化模型,用来指导实际工程建设。

白羽半番鸭亲本专门化品系的选育

以北京鸭和法国杂交白番鸭为父母本材料,选育白羽半番鸭亲本专门化品系。结果表明:母系经过4个世代的选育,后代半番鸭A-B级的白羽率从19.55%提高到78.86%,A-C级白羽率从61.55%提高到99.17%;父系经过3个世代的选育,70日龄体重变异系数从12%下降到6%,种鸭150日龄体重♂4.94±0.27kg和♀2.75±0.16kg,父母系选育进展显著。同时表明研究所用的选育技术路线正确、有效和实用。

黑木耳菌种母种复壮培养基的筛选

为了解决黑木耳生产过程中菌种退化的问题,提高退化菌种的品质及产量,通过改良母种培养基的方法使菌种复壮,根据菌丝生长速度、密度、生物量、纤维素酶活性及出菇实验后子实体的产量等指标,从3种不同添加物的母种培养基中筛选出最优的母种复壮培养基。结果表明,在PDA培养基中添加稻杆浸出液且浓度为15 g·L^(-1)时,复壮效果最好,经过该培养基复壮后,菌丝密度增大,菌丝生长速度达到4.16 mm·d^(-1),菌丝生物量干重为1.301 g·100 mL^(-1),酶活性为3.86 U·mL^(-1),生物学效率达到82.3%,产量增加了29.5%,菌丝体品质及子实体的产量均有显著提高。选择合适添加物及正确添加量的母种复壮培养基,可以使退化的菌种得到很好的复壮。

雏鹅新型病毒性肠炎弱毒株免疫种鹅抗体消长规律及其与后代雏鹅被动免疫保护关系的研究

雏鹅新型病毒性肠炎(NGVE)CN40弱毒株经不同免疫途径、不同免疫次数免疫开产前的种鹅,利用斑点免疫金染色(Dot-IGS)法对其抗体消长规律及其与后代雏鹅获得保护力的关系进行了测定。结果表明,CN40弱毒株经皮下注射免疫种鹅效果最好,其余依次是肌肉注射、口服、滴鼻、滴眼和静脉注射。卵黄抗体滴度比血清抗体滴度稍低但却呈平行相关,种鹅免疫15天(Dot-IGSS血清抗体效价≥1:1570.13,卵黄抗体效价≥1:1536.00),其后代1日龄雏鹅抵抗1000个LD50/0.2mL的雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)强毒攻击。经1次免疫后,对后代免疫保护期达5.5-6.5个月,经2次免疫则可达6.5-7.5个月。CN40弱毒株在该病高发区免疫种鹅,可以极其显著地提高后代雏鹅的存活率。免疫种鹅是控制雏鹅NGVE的有效措施。