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鹦鹉博尔纳病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
黎金荣
陈武
+4 位作者
翟俊琼
关蕴
李婉萍
焦培荣
单芬
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期17-23,共7页
为建立鹦鹉博尔纳病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,通过扩增病毒M基因并与pMD19-T载体连接,构建重组质粒作为标准品,根据M基因序列设计特异性定量引物,进行了荧光定量PCR的敏感性、特异性、重复性试验。结果显示,荧光定量PC...
为建立鹦鹉博尔纳病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,通过扩增病毒M基因并与pMD19-T载体连接,构建重组质粒作为标准品,根据M基因序列设计特异性定量引物,进行了荧光定量PCR的敏感性、特异性、重复性试验。结果显示,荧光定量PCR比普通PCR检测灵敏度高100倍,可检出最低拷贝数为6.7×10^2 copies,μL的标准品,而普通PCR只能检测到最低拷贝数为6.7×10^4 copiesμL的标准品;用荧光定量PCR方法检测H5N6、H7N9、H9N2 AIV,NDV,IBV时均未见扩增;批内及批间重复变异系数均小于1%;对8只鹦鹉脑组织样品进行检测,荧光定量PCR检出阳性样品6份,普通PCR检出阳性样品4份,检出率两者相差25%。采用本方法对64份临床采集的鹦鹉粪便样本进行检测,结果筛选出阳性样品1份。以上结果表明,本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性,可用于鹦鹉博尔纳病毒4型的检测。
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关键词
鹦鹉博尔纳病毒
荧光定量PCR
快速检测
原文传递
题名
鹦鹉博尔纳病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
黎金荣
陈武
翟俊琼
关蕴
李婉萍
焦培荣
单芬
机构
广州动物园
华南农业大学
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期17-23,共7页
基金
广东省自然科学基金杰出青年项目(2014A030306046)
广州动物园(广州市野生动物研究中心)2017年园立科研项目《野生动物流感监测与新型疫苗的研制》。
文摘
为建立鹦鹉博尔纳病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,通过扩增病毒M基因并与pMD19-T载体连接,构建重组质粒作为标准品,根据M基因序列设计特异性定量引物,进行了荧光定量PCR的敏感性、特异性、重复性试验。结果显示,荧光定量PCR比普通PCR检测灵敏度高100倍,可检出最低拷贝数为6.7×10^2 copies,μL的标准品,而普通PCR只能检测到最低拷贝数为6.7×10^4 copiesμL的标准品;用荧光定量PCR方法检测H5N6、H7N9、H9N2 AIV,NDV,IBV时均未见扩增;批内及批间重复变异系数均小于1%;对8只鹦鹉脑组织样品进行检测,荧光定量PCR检出阳性样品6份,普通PCR检出阳性样品4份,检出率两者相差25%。采用本方法对64份临床采集的鹦鹉粪便样本进行检测,结果筛选出阳性样品1份。以上结果表明,本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性,可用于鹦鹉博尔纳病毒4型的检测。
关键词
鹦鹉博尔纳病毒
荧光定量PCR
快速检测
Keywords
parrot bornavir
urseal-time qPCR
rapid detection
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鹦鹉博尔纳病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
黎金荣
陈武
翟俊琼
关蕴
李婉萍
焦培荣
单芬
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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