肺炎链球菌青霉素耐药相关基因研究

目的 了解我国肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae,Sp)青霉素耐药相关基因的存在与突变状况。方法 设计、优化pbp1a、TEM基因PCR检测体系及扩增产物全自动DNA序列测定体系 ,对 3株分离自苏州地区患儿呼吸道的Sp(青霉素低耐株SR0 17、SR0 19;青霉素敏感株SR0 2 8,3株均苯唑青耐药 ,且SHV基因均为阴性 )进行检测 ,测得的pbp1aDNA序列与SpR6株 (青霉素敏感株 )DNA序列相比较 ;测得的TEM基因DNA序列与同院原分离的产超广谱 β内酰胺酶大肠埃希菌中检出的TEM 1DNA序列及已在GenBank登录的TEM基因序列相比较。结果 SR0 17、SR0 19、SR0 2 8之pbp1a基因均有突变 ,突变率为 2 1%、2 1%、0 .4 %。SR0 19株TEM基因阴性 ,SR0 17和SR0 2 8TEM基因阳性 ,测得DNA序列分别被证实为TEM 12 9和TEM 1,前者且是新型TEM ,作为新发现的菌种耐药基因均已登录美国国立生物信息中心GenBank ,登录号AY4 5 2 6 6 2、AY392 5 31;二者DNA序列与产超广谱 β内酰胺酶大肠埃希菌中检出的TEM高度同源 (99.7%、99.8% )。结论 我国Sp青霉素耐药可能存在产 β内酰胺酶 (获得TEM基因 )和pbp基因突变两种机制 ,TEM耐药质粒可能在不同种菌株间传播。