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Isolation and Preliminary Identification of Antibacterial Active Substances of Antagonistic Actinomycetes against Peach Crown Gall(Agrobacterium tumefaciens) 被引量:1
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作者 季敬霖 马焕普 刘志民 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2011年第3期1-5,共5页
[ Objective ] The paper was to isolate and preliminarily identify the antibacterial active substances of antagonistic actinomyeete strain G19 obtained from the soil highly affected by peach crown gall (Agrobacterium ... [ Objective ] The paper was to isolate and preliminarily identify the antibacterial active substances of antagonistic actinomyeete strain G19 obtained from the soil highly affected by peach crown gall (Agrobacterium tumefaciens). [ Method] The antibacterial substances of antagonistic actinomycete strain G19 were ex- tracted using protein precipitation method, then isolated and purified using high performance liquid chromatography and medium-pressure preparative chromatogra- phy. Its molecular weight was determined by MALDI-TOFMS method, and the related functional groups were verified through chemical color reaction. [ Result] Seven peptide portions were produced from the antibacterial substances of antagonistic actinomycete strain G19 with the molecular weights of 900 - 1 300 Da after isolation and purification. It could be also inferred that it contained Cys, and carried with H2O and Na+. Color reaction of functional groups verified that the sub- stance was polypeptide containing glycosyl. [ Conclusion] The result provided basis for the final definition of the structure of antibacterial substances in antagonistic actinomycete strain G19. 展开更多
关键词 peach crown gall ACTINOMYCETES Antibacterial peptides China
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38份桃及其野生近缘种抗根癌病评价 被引量:4
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作者 郝峰鸽 王新卫 +4 位作者 曹珂 方伟超 陈昌文 朱更瑞 王力荣 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1401-1407,共7页
【目的】筛选桃抗根癌病种质,为抗病育种提供抗性材料。【方法】通过苗木接种强致病力根癌土壤杆菌,60 d后测定最大瘿瘤直径,评价不同材料的抗病性,并以聚类分析确定各抗性等级的界限。【结果】对38份桃及其野生近缘种的972个单株的抗... 【目的】筛选桃抗根癌病种质,为抗病育种提供抗性材料。【方法】通过苗木接种强致病力根癌土壤杆菌,60 d后测定最大瘿瘤直径,评价不同材料的抗病性,并以聚类分析确定各抗性等级的界限。【结果】对38份桃及其野生近缘种的972个单株的抗根癌病能力进行评价,结果表明,每个群体中个体间均存在不同程度的抗性差异;其中伏牛山望10、蒙古扁桃、四道岭野生李、‘寿粉’4个群体高度抗病;广元1号等14个群体中度抗病;‘西伯利亚C’等16个群体中度感病;林州天平山-1等4个群体高度感病;群体变异系数为24.3%~201.4%,高度抗病的4份材料群体的变异极大。【结论】供试材料中不存在免疫个体,伏牛山望10、蒙古扁桃、四道岭野生李、‘寿粉’等为高抗根癌病种质。 展开更多
关键词 桃根癌病 根癌土壤杆菌 种质资源 抗性鉴定
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桃树根癌病的防治菌株荧光假单胞菌1-1-4 被引量:3
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作者 张春明 陆仕华 +1 位作者 魏春妹 赵建华 《上海农业学报》 CSCD 1991年第4期65-69,共5页
运用平皿相互拮抗筛选法,从上海市郊桃园土壤中分离得到一株编号为1-1-4的细菌菌株,田间防效可达95%以上。本文报道了菌株1-1-4细菌分类鉴定的结果。鉴定菌株细胞杆状,0.5—0.6×0.6×2—4μm,不产生芽孢和荚膜,极生鞭毛(鞭毛... 运用平皿相互拮抗筛选法,从上海市郊桃园土壤中分离得到一株编号为1-1-4的细菌菌株,田间防效可达95%以上。本文报道了菌株1-1-4细菌分类鉴定的结果。鉴定菌株细胞杆状,0.5—0.6×0.6×2—4μm,不产生芽孢和荚膜,极生鞭毛(鞭毛数目大于1),格兰氏染色阴性。在金氏(king)培养基上能产生黄绿色荧光色素。氧化酶阳性,葡萄糖氧化发酵试验显示氧化产酸,3-酮基乳糖的产生呈阴性,不需要特殊的生长因子,在细胞内不积聚β-羟基丁酸盐颗粒,能水解明胶等。在主要的形态和生理生化特征上比较鉴定菌株与荧光假单胞菌(Pseudomonas fluore-cens),两者十分相似,被认为是同一个种,明显不同于菌株 K84(Agrobacterium radiobacterK84) 展开更多
关键词 桃树 根癌病 防治 荧光假单胞菌
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鉴定桃砧木对根癌病敏感性的叶圆片转化系统的建立 被引量:10
4
作者 王志强 Sfal.,A 《果树科学》 CSCD 北大核心 1996年第3期145-148,共4页
以山桃、毛桃、Missouri和烟草为试材,以T2、2P和NCPPB1651三个根癌农杆菌菌系为病原,在离体条件下,研究建立了用叶圆片转化鉴定桃砧木对根癌病敏感性的方法,探讨了光照和病原菌浓度对接种结果的影响。该系统... 以山桃、毛桃、Missouri和烟草为试材,以T2、2P和NCPPB1651三个根癌农杆菌菌系为病原,在离体条件下,研究建立了用叶圆片转化鉴定桃砧木对根癌病敏感性的方法,探讨了光照和病原菌浓度对接种结果的影响。该系统可以在短时间内对桃砧木的感病性进行评价,筛选抗性种质,并可鉴定病原菌的致病力。 展开更多
关键词 砧木 根癌病 敏感性 鉴定 叶圆片转化
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桃根癌病病原菌的分离和桃砧木抗性试验研究 被引量:22
5
作者 武荣花 王献 +2 位作者 杨喜春 卢涛 王志强 《河南科学》 2007年第3期416-419,共4页
以从北京、郑州桃园采集的桃根癌瘤为材料,在无菌条件下于培养基上分离得到11个根癌土壤杆菌菌株.胡萝卜接种试验初步选出致病力强的菌株AT1-1、AT1-3、AT2-7、AT2-8、AT2-11、AT2-12.将菌株AT2-7、AT2-8、AT2-11、AT2-12接种于塑料大... 以从北京、郑州桃园采集的桃根癌瘤为材料,在无菌条件下于培养基上分离得到11个根癌土壤杆菌菌株.胡萝卜接种试验初步选出致病力强的菌株AT1-1、AT1-3、AT2-7、AT2-8、AT2-11、AT2-12.将菌株AT2-7、AT2-8、AT2-11、AT2-12接种于塑料大棚盆栽的山桃、毛桃、甘肃桃,进行桃砧木感病性评价试验.试验结表明:菌株AT2-7和AT2-8对桃砧木有很强的致病力,但在3种桃砧木中,毛桃对这两个菌株的抗性最强,甘肃桃次之,山桃最易感病. 展开更多
关键词 桃根癌病 桃砧木 抗性鉴定
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桃品种资源抗根癌病评价 被引量:3
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作者 郝峰鸽 王新卫 +4 位作者 曹珂 方伟超 陈昌文 朱更瑞 王力荣 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1606-1614,共9页
为了明确不同桃品种对根癌病的抗性,挖掘抗病基因,为抗病育种提供抗源材料。采用嫁接苗枝条接种强致病力根癌土壤杆菌AT4-3,60d后测定最大瘿瘤直径评价不同材料的抗病性。对179个桃栽培品种的抗根癌病能力进行评价,结果表明,不同品种的... 为了明确不同桃品种对根癌病的抗性,挖掘抗病基因,为抗病育种提供抗源材料。采用嫁接苗枝条接种强致病力根癌土壤杆菌AT4-3,60d后测定最大瘿瘤直径评价不同材料的抗病性。对179个桃栽培品种的抗根癌病能力进行评价,结果表明,不同品种的瘤直径平均值分别为3.44~25.48mm(2014年)和5.89~31.40mm(2015年);在2014年的抗性鉴定中,高度抗病材料1份,来源于华北平原区品种群,中度抗病材料20份;在2015年的抗性鉴定中,中度抗病材料2份,分别来源于华北平原区品种群和西北干旱区品种群。2a鉴定中抗性表现较好且稳定的品种有‘二接白’‘肉蟠桃’‘绯桃’‘红桃’‘砂子早生’‘南山甜桃’‘深州离核水蜜’‘张黄9号’‘鸳鸯垂枝’‘临白10号’等。 展开更多
关键词 根癌病 根癌土壤杆菌 桃品种 抗性鉴定
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土壤杆菌K1026对果树根癌病的生物防治(英文) 被引量:3
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作者 魏艳丽 杨合同 +3 位作者 李纪顺 扈进冬 李国田 RYDER Maarten 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期415-420,共6页
由致病性根癌土壤杆菌Agrobacterium spp.侵染引起的根癌病对山东及我国其他省份的樱桃、桃及其他果树生产造成严重的影响。土壤杆菌Agrobacterium rhizogenes K1026在澳大利亚已制成生防菌剂并在全球多个国家实现商品化,但在我国果树... 由致病性根癌土壤杆菌Agrobacterium spp.侵染引起的根癌病对山东及我国其他省份的樱桃、桃及其他果树生产造成严重的影响。土壤杆菌Agrobacterium rhizogenes K1026在澳大利亚已制成生防菌剂并在全球多个国家实现商品化,但在我国果树育苗和生产行业中还未得到广泛应用。本文从山东樱桃和桃树根癌组织及感病土壤中分别分离到100余株致病性土壤杆菌,经鉴定均属于生物Ⅱ型土壤杆菌;利用双层平板抑菌试验,检测了37株病原菌对菌株K1026的敏感性,结果显示,所有菌株均对K1026产生的抗生物质敏感,可以在Stonier’s培养基上产生5种以上不同类型的抑菌圈;胡萝卜切片试验显示,菌株K1026可完全抑制37株病原菌对胡萝卜的致瘤活性。上述结果为土壤杆菌K1026用于山东省樱桃及桃树根癌病的生物防治奠定了基础。 展开更多
关键词 根癌病 根癌土壤杆菌 生物防治 樱桃 桃树
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抗桃根癌病菌的耐氰放线菌筛选及其抑菌作用研究
8
作者 王树芳 季敬霖 +2 位作者 薛红燕 马焕普 刘志民 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第3期39-44,共6页
为了筛选耐氰并抗桃根癌病的微生物菌株,以不同浓度的KCN培养基作为选择培养基,以根癌农杆菌为靶标菌,通过平板对峙培养的方法,筛选出了耐氰放线菌G-19,其发酵液代谢产物对根癌农杆菌有明显的抑制作用,抑菌圈直径为21.66 mm。其抑菌作... 为了筛选耐氰并抗桃根癌病的微生物菌株,以不同浓度的KCN培养基作为选择培养基,以根癌农杆菌为靶标菌,通过平板对峙培养的方法,筛选出了耐氰放线菌G-19,其发酵液代谢产物对根癌农杆菌有明显的抑制作用,抑菌圈直径为21.66 mm。其抑菌作用主要表现在3个方面:使得病原菌的生长对数期缩短,菌体浓度处于低水平状态;使病原菌的细胞壁弯曲、皱缩,继之结构发生破裂,细胞质向边缘凝聚,中心变得稀薄,甚至形成空腔;使细胞膜的通透性增加,导致病原菌的细胞质液外泄;但未见到病原菌DNA的损伤。因此,认为G-19菌株抑菌的作用机理是使根癌病原菌的细胞壁结构破坏和膜透性增加。 展开更多
关键词 桃树根癌病 耐氰放线菌 筛选 抑菌作用
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宁夏设施毛桃根癌病发病情况调查及防治 被引量:1
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作者 李阿波 候玉霞 +4 位作者 郭凤萍 梁玉文 冯学梅 赵军 包长荣 《宁夏农林科技》 2013年第10期49-50,共2页
2012年,在宁夏银川市贺兰园艺产业园、银川市西夏区日光温室、青铜峡金沙湾园艺产业园对设施毛桃根癌病发生情况进行了调查。结果表明:宁夏设施毛桃根癌病在6、7月为病害高发期,病瘤大部分发生于树体的根、根颈和树干等部位。针对病情... 2012年,在宁夏银川市贺兰园艺产业园、银川市西夏区日光温室、青铜峡金沙湾园艺产业园对设施毛桃根癌病发生情况进行了调查。结果表明:宁夏设施毛桃根癌病在6、7月为病害高发期,病瘤大部分发生于树体的根、根颈和树干等部位。针对病情提出了防治措施。 展开更多
关键词 设施桃 根癌病 发病规律 病害防治
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2株桃树根际细菌Alcaligenes faecalis对根癌病的抑制作用 被引量:13
10
作者 高之蕾 李茜 +3 位作者 郭荣君 李世东 李世访 王红清 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期267-273,172,共8页
【目的】筛选拮抗根癌病的生防细菌,为根癌病的生物防治提供材料。【方法】采用平板拮抗法测定桃树根际、茎和土壤中细菌对根癌土壤杆菌Agrobacterium tumefaciens的拮抗活性;以向日葵和番茄为感病植物,测定拮抗菌的防病效果;通过形态... 【目的】筛选拮抗根癌病的生防细菌,为根癌病的生物防治提供材料。【方法】采用平板拮抗法测定桃树根际、茎和土壤中细菌对根癌土壤杆菌Agrobacterium tumefaciens的拮抗活性;以向日葵和番茄为感病植物,测定拮抗菌的防病效果;通过形态特征、生理生化特性和16S r DNA序列分析,明确高效生防菌的分类地位。【结果】利用平板拮抗法从125株桃根际细菌中,筛选出2株可在YEB培养基平板上产生抑菌圈的拮抗菌株51-A和51-B和5株没有抑菌圈但长势良好的菌株。将浓度为106cfu·m L-1的待测菌的菌悬液和A.tumefaciens菌悬液以10∶1的比例混和接种向日葵7 d后,菌株51-A和51-B可显著抑制根癌瘤的形成,防效分别为98.0%和97.0%;提前接种拮抗菌菌悬液,第2天接种病原菌菌悬液,可明显抑制番茄根癌瘤的形成,防效分别为91.9%和86.5%。通过形态特征、生理生化特性和16S r DNA序列分析,将51-A和51-B归为粪产碱菌A.faecalis。【结论】粪产碱菌A.faecalis 51-A和51-B对A.tumefaciens引起的根癌病具有强烈抑制作用,可用于根癌病的防治。 展开更多
关键词 拮抗菌 产碱菌 生物防治 桃根癌病
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拮抗根癌土壤杆菌的桃内生细菌的筛选鉴定 被引量:7
11
作者 李昱佳 李茜 +1 位作者 张志想 李世访 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第20期3918-3929,共12页
【目的】从对根癌病具有获得抗性(SAR)的桃单株"西北13-1"的枝条内分离鉴定内生细菌,分析其种群组成并从中筛选拮抗根癌土壤杆菌的高效生防菌,为桃根癌病的生物防治探索新方向并提供新的生防菌资源。【方法】首先,将根癌土壤... 【目的】从对根癌病具有获得抗性(SAR)的桃单株"西北13-1"的枝条内分离鉴定内生细菌,分析其种群组成并从中筛选拮抗根癌土壤杆菌的高效生防菌,为桃根癌病的生物防治探索新方向并提供新的生防菌资源。【方法】首先,将根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)接种到"西北13-1"的桃树枝条上,并以无菌水接种作为对照;然后,分别于接种前、接种后10 d和接种后60 d采集接种处理和对照处理的"西北13-1"枝条。表面消毒桃树枝条样品后采用涂布平板法分离内生细菌;并结合16S r DNA序列鉴定,比对初步鉴定菌株,分析内生细菌的数量及组成差异。采用平板拮抗法、温室防病效果测定筛选拮抗根癌土壤杆菌的活性菌株,通过生理生化测定和分子鉴定,明确其分类地位。为揭示拮抗菌可能具有的其他拮抗作用机制,通过电击转化将含有GFP基因的p BBR1MCS-2质粒导入拮抗菌株中,然后进行GFP标记菌株对根癌土壤杆菌的抑菌试验、生长动力学分析、稳定性测试。采用灌根法提前接种标记菌株菌悬液,第2天接种根癌土壤杆菌菌悬液,应用激光扫描共聚焦显微镜和平板稀释法研究标记菌株在番茄根部的定殖情况。【结果】从"西北13-1"桃枝条中共分离到108株内生细菌,基于16S r DNA序列,这些菌株分别属于伽马变形菌类(Gammaproteobacteria)、阿尔法变形菌类(Alpharoteobacteria)、放线菌类(Actinobacteria)、厚壁菌类(Firmicutes)、拟杆菌(Bacteroidetes),共计5个细菌类群17个属,显示了桃树枝条中内生细菌丰富的种群多样性。其中,伽马变形菌类的肠杆菌属(Enterobacter)、泛菌属(Pantoea)和根瘤菌属(Rhizobium)最多,其数量在接种根癌土壤杆菌后显著上升,包含了14株产抑菌圈的拮抗菌中的10株细菌。经鉴定,筛选出的两株抑菌活性较高、具有生防潜力的拮抗菌10DM4-1和10DI2-2分别为泛菌(Pantoea deleyi)和肠杆菌(Enterobacter cowanii),它们可显著抑制向日葵根癌瘤的形成,防治效果分别为86.08%和89.87%。标记菌株10DM4-1-gfp和10DI2-2-gfp灌根番茄后,可在根部细胞间隙观察到目标菌落,标记菌株的数量在0—10 d时呈现急剧下降趋势,最后保持相对稳定的较低水平(104CFU/g),说明了它们在番茄根组织内具有良好的生存和定殖能力。【结论】桃"西北13-1"的内生菌中存在着能够拮抗根癌土壤杆菌的细菌,这些具有拮抗活性的菌株与桃"西北13-1"具有根癌病抗性有关。分离得到的泛菌10DM4-1和肠杆菌10DI2-2可能通过产拮抗物质、占据根部有利生态位拮抗根癌土壤杆菌。 展开更多
关键词 桃根癌病 内生细菌 拮抗菌 生物防治 定殖
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桃根癌病菌拮抗放线菌抑菌活性物质的分离及其初步鉴定 被引量:5
12
作者 季敬霖 刘志民 马焕普 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第15期9013-9016,共4页
[目的]分离并初步鉴定从桃树高发根癌病土壤中获得的拮抗线菌G19菌株的抑菌活性物质。[方法]采用蛋白沉淀法对拮抗放线菌G19菌株的抑菌活性物质进行粗提,利用高效液相色谱仪、中压制备色谱仪对其进行分离、纯化,应用MALDI-TOFMS法进行... [目的]分离并初步鉴定从桃树高发根癌病土壤中获得的拮抗线菌G19菌株的抑菌活性物质。[方法]采用蛋白沉淀法对拮抗放线菌G19菌株的抑菌活性物质进行粗提,利用高效液相色谱仪、中压制备色谱仪对其进行分离、纯化,应用MALDI-TOFMS法进行分子量的测定,最后通过化学显色反应进行相关官能团的验证。[结果]经分离纯化后拮抗放线菌G19的抑菌物质被抨击出7个肽段,是分子量范围为900~1 300 Da,同时推断其含有一个Cys并携带H2O,Na+;官能团显色反应验证该物质为多肽且含有糖基。[结论]研究结果为拮抗放线菌G19菌株的抑菌物质结构的最终确定奠定了基础。 展开更多
关键词 桃树根癌病 放线菌 抑菌肽
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桃及其它果树根癌土壤杆菌的生化型测定 被引量:4
13
作者 陈龙瑛 吴印青 +1 位作者 朱天明 张春明 《上海农业学报》 CSCD 1992年第2期61-64,共4页
从沪、浙、皖的桃、梨、苹果、柿等发病果树上收集到33份根癌样品,从中分离得Agrobacterium tumefaciens菌株219株,经生化测定及选择培养基测试,其中212株分属生化Ⅰ型(占44%)、Ⅱ型(占27%)和不稳定型(29%),未发现生化Ⅲ型。还明确... 从沪、浙、皖的桃、梨、苹果、柿等发病果树上收集到33份根癌样品,从中分离得Agrobacterium tumefaciens菌株219株,经生化测定及选择培养基测试,其中212株分属生化Ⅰ型(占44%)、Ⅱ型(占27%)和不稳定型(29%),未发现生化Ⅲ型。还明确了上海地区桃树根癌病菌均为生化Ⅰ型或Ⅱ型,其比例各为50%。在被测梨、苹果、柿的根癌病菌中以生化Ⅱ型居多,分别为100.0%,73.6%,75.0%。该项结果为利用K84菌株生物拮抗作用,开辟新的防治途径。提供了理论依据。 展开更多
关键词 根癌 土壤 杆菌 果树 生化型 桃树
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不同地域来源桃根癌病病原菌及其致病性鉴定 被引量:4
14
作者 郝峰鸽 李桂荣 +3 位作者 王保全 蔡祖国 尤杨 牛生洋 《广东农业科学》 CAS 2019年第7期86-91,共6页
【目的】鉴定来自不同产区分离的桃根癌病病原菌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的致病力。【方法】利用根癌土壤杆菌与T-DNA转移和瘿瘤形成相关的virD2和ipt基因进行分子检测,利用3-酮苷试验等生物学手段对不同地区桃根瘤组织中... 【目的】鉴定来自不同产区分离的桃根癌病病原菌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的致病力。【方法】利用根癌土壤杆菌与T-DNA转移和瘿瘤形成相关的virD2和ipt基因进行分子检测,利用3-酮苷试验等生物学手段对不同地区桃根瘤组织中分离的桃根癌土壤杆菌进行致病性鉴定;并利用指示植物检测不同生物类型菌株的致病能力,最后在不同品种桃植株接种后验证其致病性。【结果】virD2和ipt基因两对特异引物在21株病原菌中均出现203 bp和427 bp的目的片段,表明分离的病原菌均属于根癌土壤杆菌。3-酮苷试验结果表明,有3株菌株由蓝变黄为生物Ⅰ型,其余18株颜色不变,为生物Ⅱ型。指示植物表明,虽然病原菌都能对植株形成瘤,但生物Ⅱ型菌株致病力明显强于生物Ⅰ型,将生物Ⅱ型病原菌接种于不同品种桃树均能长出明显的瘤,也验证了生物Ⅱ型病原菌具有更强致病力。【结论】不同产区分离的桃根癌病病原菌为根癌土壤杆菌,其中多数为生物Ⅱ型,具有强致病力,几乎能侵染所有的桃品种。 展开更多
关键词 根癌病 根癌土壤杆菌 接种 生物型
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桃根癌病菌拮抗放线菌抑菌物质的分离纯化与结构鉴定 被引量:2
15
作者 侯柄竹 王树芳 +1 位作者 马焕普 刘志民 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1186-1192,共7页
【目的】为明确根癌拮抗放线菌G-19的抑菌活性物质。【方法】采用Sephadex LH-20柱层析、高效液相色谱及中压制备色谱等技术,对桃根癌拮抗放线菌G-19发酵液中的抑菌活性成分进行分离纯化,并通过LC-MS、NMR对其结构进行鉴定。【结果】分... 【目的】为明确根癌拮抗放线菌G-19的抑菌活性物质。【方法】采用Sephadex LH-20柱层析、高效液相色谱及中压制备色谱等技术,对桃根癌拮抗放线菌G-19发酵液中的抑菌活性成分进行分离纯化,并通过LC-MS、NMR对其结构进行鉴定。【结果】分离得到化合物G-19-I的结构为邻苯二甲酸二丁酯(DBP),化合物G-19-II的结构为2-(4-羟基苯基)-3,4-二氢-2H-苯并吡喃-3,4,5,7-四醇,俗称无色天竺葵素。【结论】阐明了放线菌G-19抑菌活性成分的物质基础。 展开更多
关键词 桃树根癌病 放线菌 邻苯二甲酸二丁酯 无色天竺葵素
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