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桃潜隐花叶类病毒中国分离株P_3的克隆与序列分析 被引量:6
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作者 徐文兴 王国平 +1 位作者 何云蔚 洪霓 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期300-304,共5页
本研究以提取的类病毒cRNA为模板,采用RT-PCR方法,从5株表现明显花叶症状的'雨花露'桃树上检测到桃潜隐花叶类病毒(PLMVd),并对其中的样品P3通过2次RT-PCR扩增,然后分别将扩增产物回收、克隆测序,确定了该分离株(命名为PLMVd-P... 本研究以提取的类病毒cRNA为模板,采用RT-PCR方法,从5株表现明显花叶症状的'雨花露'桃树上检测到桃潜隐花叶类病毒(PLMVd),并对其中的样品P3通过2次RT-PCR扩增,然后分别将扩增产物回收、克隆测序,确定了该分离株(命名为PLMVd-P3分离株)的全长核苷酸序列,其cDNA分子全长为337 nt,这与已经报道的PLMVd典型分离株基因组大小相似.序列比较分析结果表明,该分离株与已经报道的不同地区来源的其它分离株相似性为90%~96%. 展开更多
关键词 桃潜隐花叶类病毒 RT-PCR 克隆 序列 生物学特性
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桃潜隐花叶类病毒RT-PCR和分子杂交检测技术的建立 被引量:1
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作者 徐文兴 王国平 洪霓 《植物检疫》 2005年第5期268-271,共4页
本研究从武汉周边采集表现典型花叶症状的桃样品,提取总RNA为模板,采用RT-PCR方法对这些样品进了分析,结果显示所分析的5个样品(P1~P5)均获得了预期大小约为337bp的目标扩增条带,表明样品均带有PLMVd.通过回收RT-PCR产物,用生物素标记... 本研究从武汉周边采集表现典型花叶症状的桃样品,提取总RNA为模板,采用RT-PCR方法对这些样品进了分析,结果显示所分析的5个样品(P1~P5)均获得了预期大小约为337bp的目标扩增条带,表明样品均带有PLMVd.通过回收RT-PCR产物,用生物素标记制备探针,分别采用DNA斑点杂交、RNA斑点杂交和组织印迹杂交3种杂交方法对这些样品进行检测比较,3种杂交方法中,组织印迹杂交操作步骤相对简单快捷,适合于对PLMVd进行大田快速检测. 展开更多
关键词 桃潜隐花叶类病毒 RT-PCR 分子杂交
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桃潜隐花叶类病毒花叶分离物的分子和生物学特性分析
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作者 张子萌 卢美光 +1 位作者 杨丽娟 李世访 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期259-268,共10页
桃潜隐花叶类病毒(peach latent mosaic viroid,PLMVd)是桃树上的重要类病毒。PLMVd侵染桃树后会引起花叶、黄化和白化等不同的叶片症状。目前,PLMVd侵染引发花叶的机制不明。本文克隆了来自我国田间油桃样品的花叶(M)分离物和无症状(N... 桃潜隐花叶类病毒(peach latent mosaic viroid,PLMVd)是桃树上的重要类病毒。PLMVd侵染桃树后会引起花叶、黄化和白化等不同的叶片症状。目前,PLMVd侵染引发花叶的机制不明。本文克隆了来自我国田间油桃样品的花叶(M)分离物和无症状(N)分离物的86条PLMVd全长序列,大小为336~338 nt。用DnaSP 5.0对克隆的序列进行分析,获得31条单体型(变体)序列,来自M分离物的单体型多样性(Haplotype diversity)较低为0.79,N分离物较高为0.90。与无症状的N分离物序列相比,M分离物序列变异主要发生在全序列的五个核苷酸区,来自M分离物的MY1单体型序列为优势序列,与少数其他序列变体聚在系统发育树的Group I,并与已报道的典型白化P1.148分离物序列相似性为89.4%。通过PLMVd侵染性克隆和基因合成的构建、接种方法的比较,构建了有侵染性的PLMVd二倍体和有效接种技术。构建的PLMVd MY1二倍体cDNA质粒,通过强化茎切接种法接种,能系统侵染山毛桃并表现典型的花叶症状。研究结果为进一步研究PLMVd引发花叶的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 桃潜隐花叶类病毒 桃花叶 序列 分子特征 生物学特性
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来源于沿叶脉褪绿症状桃的PLMVd分离物群体结构分析与序列测定 被引量:1
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作者 徐文兴 窦瑞木 +2 位作者 王国平 洪霓 王振华 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期317-321,共5页
Peach latent mosaic disease occurred in peach trees is distributed widely in China.The disease shows a wide range of symptoms in the fields and discoloration along leaf veins is easily found.To get insight into the co... Peach latent mosaic disease occurred in peach trees is distributed widely in China.The disease shows a wide range of symptoms in the fields and discoloration along leaf veins is easily found.To get insight into the correlation between the symptom and Peach latent mosaic viroid(PLMVd),leaves of a peach tree showing the symptom of discoloration along its veins were collected and subjected to PLMVd RNA extraction,and RT-PCR detection.The target amplified fragment was cloned,and some positive clones were then selected for analyzing population structure of the isolate by single-strand conformation polymorphism(SSCP) analysis.Three predominant clones of the isolate were sequenced and analyzed.This study would provide more information for understanding the correlation between the molecular characterization of PLMVd and the symptom of discoloration along leaf veins. 展开更多
关键词 病虫害防治 结构分析 序列测定
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