桃枝枯病病原菌鉴定及品种(种质)室内抗病性评价

【目的】明确桃枝枯病的病原菌以及不同桃品种(种质)对枝枯病的抗性。【方法】观察桃枝枯病田间症状。通过组织分离法对病样进行分离培养,观察分离物的形态特征,通过扩增测序其ITS、EF-1α和TUB基因序列进行分子鉴定,并对分离物进行致病性验证。选取优势病原菌种类,采用离体有伤接种枝条的方法测定37个桃品种(种质)对其的抗性,并根据病斑长度利用系统聚类方法对不同桃品种(种质)对枝枯病的抗性进行分级和评价。【结果】通过组织分离和纯化,获得54株分离物,经形态学观察和多基因系统发育分析结果显示,这些分离物有3个种,其中:35株为桃拟茎点霉(Diaporthe amygdali),5株为甜樱间座壳(Diaporthe eres),14株为葡萄座腔菌(Botryosphaer dothidea)。致病性测定试验表明,对接种后发病的病斑再分离鉴定,均能得到与原病原菌一致的菌株。抗性测定结果表明,根据病斑长度利用聚类分析将37个桃品种(种质)分为4类,类型Ⅰ有5个、类型Ⅱ有11个、类型Ⅲ有15个、类型IV有6个。抗性评价结果表明:供试品种(种质)中,免疫3个(光核桃、红花山桃和帚形山桃),占8.10%;抗病2个(白根甘肃桃和红根甘肃桃),占5.40%;中抗11个,占29.73%;感病15个,占40.54%;高感6个,占16.22%。【结论】无锡桃枝枯病的病原菌有3种分别为:D.amygdali、D.eres和B.dothidea,其中D.amygdali为优势种,分离频率为64.81%,不同桃品种(种质)对桃拟茎点霉菌的抗性不同,筛选到2个免疫品种(种质)、3个抗性品种(种质)。

桃拟茎点霉的侵染过程及其致病影响因子研究

[目的]桃枝枯病严重威胁着我国南方桃产业的发展,南方桃园中桃拟茎点霉(Phomopsis amygdali)属于桃枝枯病菌流行优势种,但其侵染过程及致病影响因子目前尚不清楚。因此,本文旨在探究P.amygdali侵染过程及其致病影响因子。[方法]探究桃拟茎点霉分生孢子的萌发过程,运用扫描电镜观察不同时间点分生孢子侵染桃嫩枝的部位,并在不同温度、湿度、光照时间的处理下探究该菌致病力的强弱,进一步运用商品化壳梭孢素对其进行毒力测定。[结果]桃拟茎点霉的甲型分生孢子在PDA固体培养基上培养3 h萌发率为66.4%,9 h后分生孢子萌发率为97.6%,24 h后分生孢子产生单根较长的芽管,30 h后菌丝产生隔膜,36 h后产生有分支的营养菌丝。扫描电镜结果显示,侵染菌丝主要入侵桃嫩枝木质部导管及中央髓部,并且破坏木质部导管的结构,然而,在韧皮部并没有观察到侵染菌丝的存在。温度和相对湿度是影响桃拟茎点霉致病力的主要因子,且病害流行的最适温度为30℃,最适相对湿度为98%。桃拟茎点霉产生的壳梭孢素是其致病因子。[结论]本文首次探究了桃拟茎点霉的侵染过程,并发现温度和相对湿度是影响该菌致病力的主要环境因子。

桃枝枯病病原鉴定

为明确近年来新发现的严重危害桃树的桃枝枯病病原种类,采集浙江和江苏两地的桃枝枯病病枝,对病原进行分离和鉴定。通过对真菌分离物培养性状、分生孢子器和分生孢子形态观察,两地真菌分离物均为桃拟茎点霉(Phomopsis amygdali)。ITS1-5.8SrDNA-ITS2序列分析表明两地真菌分离物为同一种病原菌,与GenBank中桃拟茎点霉序列具有99%的相似性,其ITS序列已在GenBank中登录(登录号分别为JX081273和JX182974)。离体和活体致病性测定结果表明,分离菌株均能使桃健康新梢产生枝枯病症状,从接种发病部位再次分离到病原菌,完成了柯赫氏法则(Koch’postulates)验证。结合其形态特征、ITS序列和致病性测定结果,浙江和江苏桃枝枯病病原确定为桃拟茎点霉。

不同杀菌剂对桃枝枯病菌的毒力和田间防效

【目的】为了有效防治我国近些年新发现的桃枝枯病,【方法】采用菌丝生长抑制法,测定了15种杀菌剂对桃枝枯病菌(Phomopsis amygdali)的毒力,筛选出高效药剂,并进行田间防治试验。【结果】室内毒力测定显示,咪鲜胺抑菌能力很强,EC50值为0.0047 mg·L-1;其次是多菌灵、苯醚甲环唑和烯唑醇,EC50值分别为0.0276、0.0692、0.0762mg·L-1。田间防病试验表明,花后连续喷雾3次(每次间隔10 d),40%咪鲜胺水乳剂800倍稀释液防病效果最好,药后15 d对病枝和枯枝的防效分别为95.7%和89.4%,药后40 d分别为90.4%和88.5%;其次是50%多菌灵可湿性粉剂500倍液和10%苯醚甲环唑悬浮剂600倍液,药后40 d防效在70%～80%。【结论】咪鲜胺、多菌灵和苯醚甲环唑对桃枝枯病菌有较强的毒力,且对桃枝枯病的田间防治效果明显,其中咪鲜胺的毒力最强、防效最好。

桃枝枯病菌生物学特性研究

桃枝枯病是近年来在江、浙、沪一带出现的一种新病害,为有效防控桃枝枯病,对其病原桃拟茎点霉(Phomopsis amygdali)的生物学特性进行研究。结果表明:桃枝枯病菌菌丝在PDA培养基、温度25℃、pH 6.0~7.0及光照12 h·d^(-1)条件下生长最好;菌丝生长最适碳源是蔗糖和葡萄糖,最适氮源是蛋白胨和牛肉浸膏。病菌在PDA上易产生分生孢子器和分生孢子。分生孢子在温度25℃、pH 6.0~7.0、光照12 h·d^(-1)及高湿(95%以上)条件下萌发率最高。综合而言,不同的营养(培养基、碳源、氮源)、温度、光照、pH、湿度等环境条件对桃枝枯病菌菌丝生长和孢子萌发有显著影响。

生物农药与化学农药复配对桃枝枯病菌的毒力

[目的]明确生物农药和化学农药复配对桃枝枯病菌的抑制效果。[方法]采用菌丝生长抑制法,测定10种生物药剂对桃枝枯病菌的毒力,将毒力强的生物农药与化学农药咪鲜胺、多菌灵和烯唑醇进行复配,探讨复配剂对桃枝枯病菌的联合毒力效果。[结果]毒力作用最强的生物农药是中生菌素,其次是申嗪霉素和梧宁霉素,其抑制中浓度(EC50)分别为0.041 9、0.231 4和0.655 4μg/m L,与3种化学药剂复配,发现申嗪霉素与3种化学农药复配均达到增效作用,而中生菌素和梧宁霉素与化学农药复配大多配比具有增效作用或相加作用。[结论]生物农药与化学农药复配能增加对桃枝枯病菌的毒力。

桃枝枯病花前田间化学防治效果研究

[目的]明确桃枝枯病的防治适期。[方法]研究在早春花前2个不同时间喷施杀菌剂对桃枝枯病的田间防治效果。[结果]3月4日（45%咪鲜胺水乳剂900倍稀释液＋50%多菌灵可湿性粉剂500倍稀释液）和3月19日（10%苯醚甲环唑水分散粒剂500倍稀释液＋50%多菌灵可湿性粉剂500倍稀释液）连续2次喷施杀菌剂的防治效果最好,药后20 d对“湖景蜜露”和“柳条白凤”病枝的防效分别为73.8%和63.2%,药后50 d的防效分别为68.3%和62.9%;3月4日和3月19日仅1次防治有一定的效果,药后50 d防效为23.8%~39.7%。[结论]早春花前防治,特别是2次用药能有效控制桃枝枯病。

10%苯醚甲环唑纳米乳剂的研制

桃枝枯病是为害我国桃产区桃树的重要病害,使用化学杀菌剂可有效防治其发生。为获得高效、安全和环保的防治药剂,选用环境友好型溶剂S-200,采用低能乳化法制备苯醚甲环唑纳米乳剂。通过对乳化剂种类、用量及乳化方法的筛选,最终确定了10%苯醚甲环唑纳米乳剂的优化配方:有效成分苯醚甲环唑、助溶剂乙醇、溶剂油S-200、乳化剂EL-40质量分数分别为10%、8%、8%、8%,用去离子水补足至100%。该纳米乳剂在室温、冷贮、热贮下稳定,各项技术指标符合要求。与其他剂型相比,该配方对桃枝枯病菌的抑菌活性更为明显。

地衣芽孢杆菌W10与咪鲜胺对桃枝枯病的协同防治作用

[目的]筛选出地衣芽孢杆菌W10与化学农药毒力增效复配剂,明确复配剂对桃枝枯病的田间防效。[方法]采用菌丝生长抑制法,测定W10菌液与化学农药不同配比对桃枝枯病菌的联合毒力,并评价复配剂对桃枝枯病的田间防效。[结果]W10与咪鲜胺1∶1和1∶2复配对桃枝枯病菌有明显的增效抑制作用。3年田间小区试验表明W10和咪鲜胺1:1复配对桃枝枯病防效达到或超过了咪鲜胺单剂。[结论]地衣芽孢杆菌W10可与咪鲜胺复配协同防治桃枝枯病,不仅提高生防比例和效果,还减少农药使用。

多效唑对桃枝枯病的调控作用研究

为明确植物生长调节剂多效唑对桃枝枯病的调控作用,通过毒力测定、离体枝条接种、H_2O_2和丙二醛(MDA)含量测定,研究多效唑对桃枝枯病菌的抑制作用及对病菌侵染和病害的控制作用。结果表明:多效唑对桃枝枯病菌的EC50值为1.623 mg·L^(-1),能显著破坏菌丝形态,使菌丝畸形、细胞膨大;400、500、600、700及800 mg·L^(-1)多效唑药液均能在一定程度上影响枝枯病菌在桃树离体枝条上的扩展,其中600 mg·L^(-1)多效唑抑制作用最为明显,病斑大小较清水对照和甲醇对照分别减少71.15%和69.70%。600 mg·L^(-1)多效唑对病菌侵染后枝条H_2O_2和MDA含量均有明显的降低作用。因此,一定浓度的多效唑能减轻病菌对寄主的危害,对病菌侵染的抑制作用可能与通过提高抗氧化物质活性和调控寄主抗病性有关。

吡唑醚菌酯及与生物农药复配防治桃枝枯病

[目的]明确吡唑醚菌酯及与生物农药复配防治桃枝枯病的作用效果。[方法]采用田间小区试验评价吡唑醚菌酯对桃枝枯病的防效,菌丝生长抑制法测定吡唑醚菌酯与生物农药复配对枝枯病菌的生物活性及对病害的抑制效果。[结果]吡唑醚菌酯对桃枝枯病的防效为72.99%,明显优于多菌灵和咪鲜胺等;吡唑醚菌酯与中生菌素或申嗪霉素复配对枝枯病菌ZN32和TBF1701均有较好的增效或相加作用,吡唑醚菌酯与中生菌素1:3或与申嗪霉素1:1、3:1复配对病害抑制作用显著。[结论]吡唑醚菌酯及与中生菌素或申嗪霉素复配对桃枝枯病有较好的防治作用。