Fluorescence quenching of triazatruxene-based glycocluster induced by peanut agglutinin lectin

A novel triazatruxene-based fluorescent glycocluster was synthesized and its selective binding interactions with PNA lectin were investigated by fluorescence spectroscopy,CD spectroscopy,and a turbidity assay.The glycocluster exhibited a strong binding affinity for PNA lectin with a Stern-Volmer quenching constant of 5.8×10^5 mol^-1L

益气化瘀方对大鼠腰神经根损伤后花生凝集素结合分子和施万细胞的作用

目的:研究大鼠L5神经根损伤后,益气化瘀方对神经肌肉接头部花生凝集素结合分子(peanutagglutinin-bindingmolecules,PNA-BMs)和施万细胞(Schwann'scell,Sc)的作用。方法:大鼠L5神经根损伤后,给与益气化瘀方治疗。于用药后第10、20、30、60天,采用免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜技术。观察PNA-BMs及作为Sc标记的S-100在大鼠比目鱼肌中的分布。使用NIH图像分析技术,定量测定PNA-BMs与S-100的重叠面积。结果:被PNA识别的细胞外基质(extra-cellularmatrix,ECM)在Sc延伸过程中起着重要的导向作用。益气化瘀方对Sc在神经肌肉接头部的聚集、出芽、延伸,以及与PNA-BMs的重叠面积均明显优于对照组。结论:益气化瘀方能明显促进ECM和Sc的生长,从而加速神经再生修复进程。

5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物的制备与结合率测定

采用碳二亚胺法将经过羧基化衍生的5-氟尿嘧啶连接到花生凝集素上,制备一种导向肿瘤的5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物,并应用改进的三硝基苯磺酸法测定药物结合率。测得的药物结合率为76.33%。结果表明碳二亚胺法可成功实现药物与花生凝集素的连接,该法制备得到的结合物其药物结合率高。

急性淋巴细胞白血病细胞花生凝集素受体表达及其意义

用系列单克隆抗体及标记的花生凝集素(PNA)对60例急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞行免疫分型并确定分化阶段,检测ALL细胞上PNA受体表达情况,与正常成熟淋巴细胞(NML)比较,发现ALL细胞大多表达PNA受体,而NML细胞极少表达PNA受体,两者有显著差异(P<0.01);经神经氨酸酶(NA)预处理后,ALL与NML细胞PNA受体表达增加(P<0.01),以NML细胞为明显;ALL细胞PNA受体表达与细胞分化程度存在显著等级负相关(r_s=-0.671 P<0.01);ALL细胞 NA预处理后PNA受体表达与细胞分化程度存在等级正相关(r_s=0.307 P<0.05)。结果表明ALL细胞表面D-半乳糖-β(1-3)-N-乙酰胺基半乳糖表达与唾液酸、细胞分化程度存在一定关系并对其关系进行了探讨。

人红细胞老化过程中花生凝集素和ConA受体电镜细胞化学研究

目的 观察人血液中 ,老化红细胞膜上花生凝集素 (PNA)和刀豆凝集素 (Con A)受体细胞化学反应的变化。 方法 应用金标花生凝集素 (PNAg)和刀豆凝集素 (Con Ag) ,对早期和老化红细胞膜上 PNA和 Con A受体进行电镜细胞化学显示 ,并用计算机图像分析系统对电镜照片进行定量处理。 结果 与早期红细胞相比 ,老化红细胞膜上 PNAg颗粒和 Con Ag颗粒均有明显增多。 结论 老化红细胞膜上唾液酸的丢失导致半乳糖基和甘露糖基暴露的相应增加 。

肠道疾病引起红细胞T活化的检查分析

目的探讨肠道疾病引起红细胞T活化的检查及特点分析。方法采用花生凝集素检测红细胞T活化,用多个同型献血者血清检测红细胞T多凝集。结果1 208例肠道疾病患者中有101例患者红细胞与花生凝集素呈凝集反应,占8.4%;101例红细胞花生凝集素阳性中有9例患者红细胞和多个同型献血者血清出现T多凝集,占红细胞花生凝集素阳性者8.9%。结论肠道疾病可引起红细胞T活化和T多凝集,对肠道疾病患者,如需输血治疗输血浆或血浆制品时,应用花生凝集素进行输血前筛查,避免因红细胞T活化而出现溶血性输血反应。

5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物的反应条件优化及性质研究

目的 优化5 -氟尿嘧啶(5 - Fu) -花生凝集素(PNA)结合物的反应条件,以期制备得到既有生物活性又有较高药物结合率的结合物。方法 采用单因素法优化反应条件,考察结合物稳定性,以药物结合率和体外活性为判断指标。结果 以优化条件:5 - Fu∶EDC∶NHS=1∶5∶2 ,D-半乳糖∶PNA (w/ w) =2 .5∶1,连接反应时间12 h制备得到了既有生物活性又有较高药物结合率的结合物。结论 D-半乳糖能保护花生凝集素的活性中心,在D-半乳糖保护下可以制备出既有生物活性又有较高药物结合率的结合物。结合物性质比较稳定。

大肠癌、癌前病变组织及直肠粘液中T抗原的分布与表达

血型前体物质T抗原(β-D-Grl(1→3)-D-Gal NAc)具有与花生凝集素(PNA)结合或被半乳糖氧化酶(GO)氧化的特性。作者采用GO酶组化和PNA免疫组化方法探讨T抗原在正常大肠粘膜、癌前病变和癌组织的表达,同时随机对25例T抗原粘液试验与组化结果比较。大肠癌与GO和PNA的T抗原表达分别是81.4%(57/70)、87%(61/70);癌前病变均为83.3%(10/12);移行粘膜50%(10/20),60%(12/20),而正常粘膜未见表达(0/12)。GO-S粘液试验阳性率80%(20/25);GO-S组化76%(19/25);PNA组化88%(22/25)。结果表明,GO或PNA对检测大肠癌或癌前病变组织中T抗原无显著差异,尤其是GO-S组织化学与粘液试验其结果几乎一致,提示这种试验方法可用于大肠癌普查或早期筛检。

氟尿嘧啶-花生凝集素结合物与LoVo细胞的结合特性研究

目的研究氟尿嘧啶-花生凝集素结合物与细胞的作用。方法采用一步法制备得到结合物。应用荧光显微镜定性观察结合物与细胞的结合。应用MTT法检测结合物的细胞毒作用。结果LoVo细胞与结合物呈浓度依赖性结合;但Chang细胞不结合结合物。结合物对癌细胞的细胞毒作用呈浓度依赖性和时间依赖性。结论结合物可选择性地与癌细胞结合,并保留抗癌活性。

痘苗病毒血凝素具有与免疫球蛋白及花生凝集素相似的分子结构

利用FASTP等微型计算机程序将痘苗病毒血凝素(VVHA)与NBRF蛋白质序列库进行了比较分析,发现VVHA分子的不同区段分别与免疫球蛋白超家族(Ig Superfamily)及花生凝集素(PNA)有相似的一级结构。对VVHA与免疫球蛋白间相似区一级结构细节的分析指出,VVHA分子N端20～120的区段具备了Ig超家族在一级结构上的所有特点,两者不但在总体上很相似,而且在半胱氨酸附近的区域集中了最为保守的残基,以Kyte-Doolittle法比较相似区的疏水性,并以Chou-Fasman法预测相应的二级结构,结果都支持两者分子结构的相似性,因此,我们认为成熟VVHA分子N端约100个残基很可能形成一个与Ig可变区(V区)相似的结构域,其功能很可能与病毒的释放及其在细胞间的传播有关,VVHA的245～298位与PNA的97～150位在一级结构上相似,预测的二级结构也比较相似,其功能有待进一步研究。

腰神经根受压后花生凝集素结合分子在大鼠肌肉神经再生期的分布变化

目的 研究腰神经根损伤后 ,花生凝集素结合分子 (penutagglutinin bindingmolecules ,PNA BMs)在大鼠比目鱼肌神经肌肉接头部的分布变化。方法 采用组织化学方法和激光共聚焦扫描显微镜技术及能与细胞外基质中配糖体 (glycoconjugate)特异性结合的PNA染色 ,在腰神经根受压后 10 ,2 0 ,30 ,及 60天 ,观察PNA BMs在神经肌肉接头部的分布 ,运用α bungarotoxin(α BTX)荧光结合剂显示运动终板 ,NIH图象分析技术测定PNA BMs与运动终板重叠面积。结果 肌肉失神经支配后 10天 ,神经肌肉接头部PNA染色大幅度消褪或消失 ,乙酰胆碱斑呈卷曲 ,不规则 ,或崩解。随着神经再支配的进行 ,乙酰胆碱斑形态逐渐趋于正常 ,PNA染色强度及范围也逐渐回升 ,最终局限于运动终板区域内。结论 PNA BMs在神经肌肉接头部的分布变化与肌肉失神经支配及神经再支配密切关联。

胎肺及肺癌花生凝集素受体的观察

应用生物素化花生凝集素(PNA)对胎肺及45例肺癌进行组织化学研究.结果显示:胎肺内支气管上皮顶部胞膜及胞质呈PNA阳性.肺鳞癌及肺腺癌PNA受体增多,且分布失去极性.本文提示PNA受体改变可作为内胚层肿瘤的标志之一,尤其对腺癌有相对特异性.PNA受体在胚胎及肺癌均表达可能提示PNA是一种癌胚抗原.

人胰腺癌组织中花生素受体表达

用酶标记的花生凝集素(PNA)对18例胰腺癌组织中的PNA受体进行了组织化学研究,并以正常胰腺组织(5例)和慢性胰腺炎(8例)作对照。结果表明:正常胰腺组织中无PNA受体,15例胰癌组织中含有PNA受体。3例慢性胰腺炎组织PNA染色阳性。胰癌细胞的PNA标记有3种分布形式:(1)沿癌细胞腺腔呈线型分布,(2)沿导管壁呈圆型分布,(3)弥漫性分布于癌细胞腔内并伴有点状加深。PNA的分布与胰癌的组织学类型及分化程度有一定的关系。

^(131)I标记花生凝集素的制备及其受体亲合活性

本文报道１３１碘－花生凝集素（１３１Ｉ－ＰＮＡ）的制备方法。采用Ｉｏｄｏｇｅｎ法进行放射性碘化标记，标记率为６４％～７１％，平均标记率６７．９％；放化纯度为８７％～９８％。经柱层析后得到纯品，通过纸层析鉴定为单一放射性峰，用自身取代法测定其比放射性为２０９～３１４ｋｂｑ／μｇ。它与ＰＮＡ受体结合，具有亲合力高及特异性强的生物活性。

胰腺干细胞负向筛选分子的鉴定

背景:利用胰腺干/祖细胞体外增殖分化形成β细胞是细胞替代疗法治疗糖尿病的潜在细胞来源之一。由于缺少有效的筛选分子,胰腺干细胞的分离及特性研究进展缓慢。目的:观察植物凝集素花生凝集素、菜豆凝集素和热稳定抗原对胰腺细胞的标记情况,以期找到胰腺干细胞的负向筛选分子。方法:采用荧光组织化学方法对植物凝集素(花生凝集素、菜豆凝集素)和细胞表面分子热稳定抗原抗体在成体小鼠胰腺、胚胎胰腺及切除后再生胰腺组织中进行化学及荧光组织化学检测;流式细胞仪分析负向筛选分子对胰腺细胞分群情况的影响;应用细胞培养方法对不同群细胞进行体外培养和观察。结果与结论:花生凝集素对胚胎胰腺中分化的腺泡细胞能较好标记,但不标记未分化的胰腺干/祖细胞及前体细胞;菜豆凝集素对未分化和分化的胚胎期胰腺细胞均有标记,热稳定抗原能标记正在分化的胚胎胰腺祖细胞、前体细胞和已分化胰腺细胞。在成体胰腺中,花生凝集素和菜豆凝集素均能标记胰腺腺泡和部分导管细胞,但不能标记胰岛细胞;热稳定抗原能特异标记腺泡细胞、导管细胞、血管内皮细胞、血细胞及再生胰腺新生区的导管样结构。PNA-/lowHSA-/low细胞占总细胞量的1.6%,对其培养观察发现,其中富含体积较小、三角形或多角形的上皮细胞,这些细胞可连续传代。提示协同使用花生凝集素与热稳定抗原可以筛除大部分分化的胰腺细胞及部分非胰腺细胞,从而富集胰腺干细胞。

花生凝集素受体在中华绒螯蟹生精细胞的分布

以中华绒螯蟹为材料,应用凝集素印迹法检测中华绒螯蟹生精细胞中的花生凝集素受体.以凝集素组织化学技术为手段,采用生物素标记的花生凝集素对中华绒螯蟹精子发生过程中花生凝集素受体进行了标记,研究精子发生过程中花生凝集素受体的分布特征.结果表明,中华绒螯蟹生精细胞中的花生凝集素受体的分子质量为72 ku;精子发生过程中,不同的生精细胞膜有不同程度的阳性标记.精原细胞质膜上有较强的阳性标记,呈深棕色;精母细胞的质膜阳性标记减少;精细胞与精母细胞染色程度相似.PNA受体在生精细胞中分布,可能与生殖细胞发育以及生殖细胞之间或者生殖细胞与体细胞之间的信息传递有关.精子质膜、顶体区域也有阳性标记,这可能与精卵识别及结合等受精过程息息相关.

大肠癌及癌旁组织中TAG-72抗原及两种凝集素PNA和DBA受体的表达

应用肿瘤相关糖蛋白７２抗原（ＴＡＧ－７２）的单抗７２－４５及两种凝集素ＰＮＡ和ＤＢＡ对不同组织分型的大肠癌及癌旁组织进行了研究。结果表明：大肠癌中ＴＡＧ－７２抗原及ＰＮＡ受体的表达阳性率分别为８５．３％和８９．３％，ＤＢＡ受体呈阴性；在癌旁组织中三者的表达阳性率分别为５０％、５３．３％和６３．３％；在正常大肠粘膜中ＴＡＧ－７２抗原及ＰＮＡ受体均呈阴性，而ＤＢＡ受体全部呈阳性。由此认为７２－４５单抗和ＰＮＡ可做为大肠癌的有效标记物，有助于大肠癌的诊断和预后。

喉癌组织中花生凝集素检测及意义

用免疫组化（ＡＢＣ法）和颈淋巴结连续切片相结合的方法，检测花生凝集素在喉癌组织中的表达特点和临床意义。发现花生凝集素在喉癌旁正常上皮中阳性表达为１５％，在癌组织中阳性表达为７７％；有潜在淋巴结转移组中阳性表达９５％，无转移组中阳性表达５７％（Ｐ＜０．０１）。表明喉癌组织中ＰＮＡ检测，对喉癌早期癌变的诊断，特别是对潜在淋巴结转移的诊断有意义。

急性淋巴细胞白血病细胞分化与花生凝集素受体表达

用系列单抗与标记的花生凝集素（ＰＮＡ）对３８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞行免疫分型与确定分化阶段，检测ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达情况，与正常成熟淋巴细胞（ＮＭＬ）对照。发现Ｔ－ＡＬＬ，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ细胞大多表达ＰＮＡ受体，而ＮＭＬ细胞极少表达ＰＮＡ受体，两者有显著差别（Ｐ＜０．０１）。经神经氨酸酶（ＮＡ）预处理后，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ与ＮＭＬ细胞ＰＮＡ受体表达明显增加（Ｐ＜０．０５），以ＮＭＬ为甚，而Ｔ－ＡＬＬ细胞ＮＡ处理前后ＰＮＡ受体表达未见明显区别；ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达与细胞分化程度存在显著的等级相关（ｒ８＝－０．３５７，Ｐ＜０．０５）。结果表明ＡＬＬ细胞上大多存在Ｄ－半乳糖－β（１－３）－Ｎ－乙酰氨基半乳糖基（Ｄ－Ｇａｌ－β（１－３）－Ｎ－ＧａｌＮＡＣ）；ＡＬＬ细胞分化程度越高。细胞上Ｄ－Ｇａｌ－β（１－３）－Ｎ－ＧａｌＮＡＣ连接唾液酸末端越多。

国外花生研究进展

介绍国外对花生的加工处理如烘烤和油炸,及对花生壳的利用。分析了对花生凝集素的研究,特别是控制黄曲霉毒素以实现花生的贮藏与加工的安全。