花生根细胞悬浮培养制备白藜芦醇条件的优化

以花生根愈伤组织为材料,采用二次通用旋转组合试验设计,优化花生根细胞悬浮培养产白藜芦醇的条件,探讨影响花生根细胞悬浮培养产白藜芦醇的最佳工艺参数。当摇床转速为130r/min、接种量为38.00g/L、pH5.80、蔗糖质量浓度为40.00g/L时,培养15d,花生根细胞增殖倍数最大为(4.71±0.04)倍,白藜芦醇产量达到907.3μg/g。

花生根边缘细胞发育影响因子的分析

以花生品种新昌小京生和江西一把抓为材料,采用种子悬空气培法,研究了根边缘细胞(BC)的数目、活性及其影响因子。结果表明,花生根长为1mm时开始产生BC,当根生长到13～17mm时,BC数目达最大值,约10000个。在根边缘细胞的发育过程中,根冠果胶甲酯酶(PME)的活性与根BC发育、诱导存在密切的相关性,说明PME在BC产生、发育和游离过程中起着重要作用。BC释放出的胞外抑制剂不但可以抑制BC的产生而且还能降低其活性,且浓度越高抑制作用越强烈。与BC活性相比,胞外抑制剂对BC的产生影响更大。高温和低温环境不但抑制花生根的生长,而且影响花生根BC的产生速度、最大值及其活性。与对BC产生的影响相比,温度对BC活性影响较大。根尖黏液层渗透势的维持可以使BC在较长时间内维持高活性。

铝对花生根尖细胞形态结构的影响

以花生为材料,结合根长实验、苏木精染色和根尖铝含量测定等方法,筛选出耐铝品种99-1507和铝敏感品种中花2号。99-1507半抑制浓度大于100μmol/L,中花2号约为60μmol/L。在铝诱导产生细胞程序性死亡后,经苏木精-伊红复染后,花生根尖细胞表现出细胞核致密,核型发生变化,呈新月状或椭圆状,出现类似凋亡小体。

花生对镉胁迫的生理响应及品种间差异

深入研究花生镉毒害机理对于筛选和利用抗镉污染花生种质资源具有重要的理论和实际意义.本文以14个花生品种为材料,以花期花生功能叶叶绿素含量、根系和叶片丙二醛含量、细胞膜透性和根系氧化活力等生理参数为指标,利用人工气候箱砂培试验,研究了6种Cd浓度胁迫下花生植株的生理毒害反应及其品种间遗传差异.结果表明:在0～60mg Cd·L-1范围内,随着营养液添加Cd浓度的增加,花生叶绿素含量和根氧化活力极显著降低,根、叶细胞膜透性和根、叶丙二醛含量极显著增加,且品种与Cd浓度间具有显著交互作用;花生根、叶细胞膜透性是对镉胁迫响应最为敏感的生理参数,而叶绿素含量对镉胁迫响应相对不敏感;各生理参数与营养液Cd浓度关系的线性回归方程的斜率(b)与截距(a)之比值的绝对值︱b/a︱能够较好地描述不同花生品种对镉胁迫的敏感性.对6个生理参数的︱b/a︱值进行综合赋值及敏感性五级聚类分析得知,在供试花生品种中,"中花4号"、"湘农55号"和"湘农3010-w"等3个品种对镉反应高度敏感(Ⅰ级);"莱农29"、"湘农小果w2-7"、"丰花2号"、"莱农13"、"豫花15号"和"丰花3号"等6个品种反应敏感(Ⅱ级);"湘农312"、"祁阳小籽"和"平度01"等3个品种反应一般(Ⅲ级);"花育23"和"花育20"等两个品种反应钝感(Ⅳ级).

益气化瘀方对大鼠腰神经根损伤后花生凝集素结合分子和施万细胞的作用

目的:研究大鼠L5神经根损伤后,益气化瘀方对神经肌肉接头部花生凝集素结合分子(peanutagglutinin-bindingmolecules,PNA-BMs)和施万细胞(Schwann'scell,Sc)的作用。方法:大鼠L5神经根损伤后,给与益气化瘀方治疗。于用药后第10、20、30、60天,采用免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜技术。观察PNA-BMs及作为Sc标记的S-100在大鼠比目鱼肌中的分布。使用NIH图像分析技术,定量测定PNA-BMs与S-100的重叠面积。结果:被PNA识别的细胞外基质(extra-cellularmatrix,ECM)在Sc延伸过程中起着重要的导向作用。益气化瘀方对Sc在神经肌肉接头部的聚集、出芽、延伸,以及与PNA-BMs的重叠面积均明显优于对照组。结论:益气化瘀方能明显促进ECM和Sc的生长,从而加速神经再生修复进程。

花生根细胞悬浮培养的动力学模型

通过测定花生根悬浮培养过程中的动力学曲线,建立了花生根细胞悬浮培养的非结构动力学模型,对花生根细胞生长、基质消耗和白藜芦醇合成的动力学进行了描述。并应用Origin7.0软件对模型中的参数进行求解,结果表明模型与实验数据具有较高的拟合度,得出其动力学方程。试验结果显示,花生根细胞的生长模式与普通单细胞的生长模式类似,也具有延滞期、对数期以及稳定期等特殊生长期。且推导出的公式与根细胞的生长模式相关性很高。对培养过程中营养物质的添加和白藜芦醇生产的优化控制具有重要的意义。

花生根细胞悬浮培养结构化动力学模型

以培养基中蔗糖在培养过程中所经历的途径为依据,建立花生根细胞悬浮培养结构化动力学数学模型;并采用该结构模型分析花生根细胞的生长、白藜芦醇的合成积累以及与培养基底物消耗的动态变化关系;通过试验测定、文献查阅和计算机求解等多途径确定动力学非线性微分方程组的模型参数。建模后各参数模型曲线与试验值比较,其模型计算与试验结果基本相符。

AhHDA1影响花生毛状根生长的研究

花生组蛋白去乙酰化酶AhHDA1转到花生毛状根中超表达后,短侧根的毛状根比例增加.基因表达检测结果显示,AhHDA1超表达后上调了细胞周期相关基因AhCYCD4和生长素信号转导相关基因AhIAA28的表达水平,而AhARF19的表达水平被显著抑制.进一步通过LUC实验发现,AhHDA1激活AhCYCD4和AhIAA28启动子的活性.说明AhHDA1可能通过调控生长素信号转导和细胞分裂影响花生毛状根侧根的生长.