大孔吸附树脂法及离子交换层析柱法精制纯化丹参多糖的研究

目的:对中药丹参中多糖成分进行提取、分离、精制和纯化研究。方法:丹参药材经过水提醇沉得到粗多糖(SMP)。采用大孔树脂法及离子交换层析柱法精制纯化粗多糖,综合比较D-101、AB-8、DB-301及MG-1等4种大孔吸附树脂对粗多糖的分离纯化效果,进一步以DEAE-52离子交换层析法对过AB-8柱制备得到的粗多糖进行分离精制。结果:粗多糖中总多糖含量为40.35%,蛋白质含量为8.96%,经4种大孔树脂初步纯化后发现AB-8、DB-301型的树脂效率高,纯化后多糖含量分别可达78.72%、80.45%。总多糖经DEAE-52离子交换树脂进一步分离得到SMP1、SMP2、SMP3三个组分。结论:AB-8、DB-301型大孔吸附树脂及DEAE-52型树脂可应用于丹参多糖的精制纯化。

大孔吸附树脂纯化花生根中白藜芦醇工艺及其动力学研究

以花生根白藜芦醇提取液为原料,对选取的5种大孔树脂进行静态吸附试验,确定DA-201树脂为最优吸附树脂。通过DA-201树脂吸附白藜芦醇的动力学试验、DA-201树脂等温吸附试验、上样量试验与动态洗脱试验以及考察上样流速、洗脱流速和洗脱溶剂浓度的三元二次通用旋转组合设计柱层析试验等研究发现:DA-201树脂等温吸附白藜芦醇过程符合Langmuir和Freundilch方程。在上样质量浓度为0.7 mg/mL,上样液pH 3,上样体积为20 mL,洗脱体积为15 mL的条件下,进行DA-201大孔吸附树脂柱层析纯化试验,建立了大孔吸附树脂柱层析纯化白藜芦醇的数学模型。经回归与方差分析,对方程进行局部寻优得出:在上样流速1.00 mL/min,洗脱流速1.60 mL/min,乙醇体积分数75%,其纯化后白藜芦醇的得率为(80.13±0.01)%,经HPLC检测其纯度可以达到39.61%。

虎杖中白藜芦醇的提取与分离工艺研究

目的优选虎杖的白藜芦醇最佳提取工艺。方法①采用正交实验法,以白藜芦醇提取量为指标,高效液相色谱法(HPLC)测含量,优选提取工艺条件。②以大孔树脂富集及色谱法分离、纯化白藜芦醇。结果乙醇提取最佳工艺为10倍量的90%乙醇回流提取2次,1 h/次。经AB-8树脂吸附富集,硅胶柱色谱纯化,可获得高纯度的白藜芦醇产品。结论该工艺可用于指导生产。

蝉花抗真菌活性成分的分离纯化研究

通过抗真菌实验进行活性跟踪,采用NKA大孔吸附树脂和硅胶两步柱色谱对蝉花中抗真菌活性成分进行分离纯化;并通过红外、质谱进行结构鉴定。结果表明,分离得到的抗真菌活性成分为多球壳菌素,对真菌的最小抑制浓度为0.02 mg/mL。本研究为进一步研究蝉花及制备医药工业所需的多球壳菌素提供了依据。

花生根中白藜芦醇分离纯化研究

研究了花生根中白藜芦醇的分离纯化。通过静态吸附解吸实验选出DM-130大孔树脂,并确定其最佳吸附条件为:上柱液流速为0.5 mL/min,白藜芦纯质量浓度为125μg/mL;最佳洗脱条件为:洗脱剂为60%(质量分数)的乙醇溶液,洗脱流速为1.5 mL/min,洗脱液经浓缩、冷冻干燥后,用高效液相色谱测其纯度为30.7%。

加压柱层析法纯化苦瓜总皂甙的工艺研究

采用乙醇提取苦瓜总皂甙,并利用加压柱层析法对其进行纯化,以提取温度、浸提时间、乙醇浓度、固液比为考察因素,通过单因素试验及正交试验确定了最佳提取条件:乙醇浓度80%(V/V)、温度80℃、浸提时间2h、固液比1:20;影响提取因素的主次顺序为:乙醇浓度>固液比>提取时间>温度;利用AB-8大孔吸附树脂加压层析柱法吸附纯化苦瓜总皂甙,吸附工艺条件为:吸附时间20h、流速2ml/min;洗脱条件为:洗脱时间60min、洗脱液乙醇浓度80%、洗脱液流速2ml/min。所得苦瓜总皂甙纯度为48%。

桑黄菌丝球多糖的分离纯化

桑黄菌丝球多糖经大孔树脂除蛋白、DEAE-纤维素初步纯化后得到三个组分,其中Ap2含量最多,且有两个峰部分重叠,将Ap2过Sephadex G-100凝胶柱层析进一步纯化,得到Ap2-1和Ap2-2两个单一多糖组分,纯化后的多糖各组分经紫外光谱分析不含蛋白质和核酸,整个分离纯化过程,多糖的回收率仅为48%,但纯度达到了96%。

大孔吸附柱色谱法优选接骨木的纯化工艺

目的:优选接骨木的纯化工艺。方法:以莫诺苷为指标,采用不同型号大孔吸附树脂优选接骨木根皮乙醇提取物的最佳纯化工艺。上样量小于1∶250(莫诺苷∶树脂)的接骨木醇提取物,水洗脱通过AB-8型大孔吸附柱色谱,弃去20倍柱体积的水洗脱液,以10%乙醇完全洗脱,洗脱液,浓缩,冷冻干燥,即得接骨木总苷。结果:总苷中莫诺苷含量大于50%。结论:该提取工艺简单、可靠、重复性好,适用于工业生产。

大孔吸附树脂对蓖麻变应原的分离纯化研究

为了提高蓖麻变应原的纯度,采用不同型号的大孔树脂对变应原进行了分离研究。通过静态吸附和解吸实验,对9种大孔树脂进行了筛选。结果表明:AB-8型大孔树脂表现出最好的吸附性能与解吸效果,是较好的分离、纯化蓖麻变应原的树脂;选择AB-8树脂柱层析,其较佳动态吸附条件为:蓖麻变应原提取液浓度2.0 g/L,pH 5.0,流速2.0 mL/min;较佳洗脱条件为:乙醇浓度25%,洗脱流速1.8 BV/h,洗脱体积9 BV。

大孔树脂分离纯化银杏叶提取物生产柱层析废液中奎宁酸

为探究银杏叶提取物生产柱层析废液中奎宁酸工艺的最佳参数。以吸附率和解析率为指标,采用静态吸附试验对10种大孔树脂进行筛选,并通过动态吸附试验纯化条件。结果表明D201树脂不易碎,经处理后,可反复利用,对奎宁酸有较好的吸附和解析附效果。最佳纯化工艺参数为:径高比为1:10的D201树脂,上样液pH 3~5,上样流速1 BV·h^(-1),纯净水除杂水洗到无色后,5 BV 2%甲酸进行洗脱。研究为银杏叶生产柱层析废液中奎宁酸回收利用提供了技术依据。

大孔吸附树脂结合硅胶柱层析纯化环孢菌素A

采用大孔吸附树脂层析结合硅胶柱层析,对环孢菌素A的分离纯化进行研究,确定了最佳层析条件,建立了工业化制备环孢菌素A的工艺。大孔吸附树脂层析选用D101树脂作为吸附介质,提取液丙酮含量控制在50%,最大吸附量为35 mg/g湿树脂,洗脱剂选用丙酮;硅胶柱层析选用42~64μm硅胶作为层析介质,最优层析条件为柱床高径比10∶1,流动相配比V（石油醚）∶V（丙酮）=70∶30,流速80 mL/m in,环孢菌素A上样质量浓度100 g/L,硅胶层析平均收率为84.2%,环孢菌素A纯度可达到97%以上,整个工艺总收率为65%~70%。

小曲酒酿造废水中高粱红色素的分离纯化工艺研究

用大孔树脂耦合硅胶柱层析法对小曲酒酿造废水中的高粱红色素进行分离纯化,通过单因素试验,确定了大孔树脂和硅胶层析柱的纯化条件。结果表明,一级纯化选择HPD600型大孔树脂,吸附容量为2BV,吸附液pH值为7,吸附速率为3BV/h,除杂水用量为5BV,洗脱剂为体积分数80%的乙醇,洗脱剂用量为2BV,洗脱速率为6BV/h;二级纯化用硅胶层析柱,流动相为石油醚∶乙酸乙酯=4∶1(V/V),目标收集液为2~3BV段的流动相收集液;经两级纯化后得到高粱红色素纯度达90%,废水中高粱红色素的回收率达67.2%。

大孔吸附树脂-硅胶柱层析法部分纯化藜麦β-蜕皮激素

本研究采用大孔吸附树脂-硅胶柱层析法分离纯化藜麦β-蜕皮激素。通过静态-动态吸附解吸实验确定大孔吸附树脂最佳纯化工艺:大孔吸附树脂为D101型,上样质量浓度为25 mg/mL、上样流速2.0 mL/min、洗脱剂乙醇体积分数30%和洗脱流速2.0 mL/min,得到纯度为12.12%的β-蜕皮激素。通过薄层色谱与硅胶柱层析实验,确定最佳洗脱条件为:洗脱剂V(三氯甲烷)∶V(甲醇)=4∶1。采用高效液相色谱法(HPLC)测定纯度,藜麦β-蜕皮激素的纯度提高至40.78%。藜麦β-蜕皮激素具有一定的抗氧化活性,其粗提物和纯化后产物总抗氧化能力分别为(0.44±0.01)mol/g和(6.46±0.46)mol/g;DPPH自由基清除能力的IC50值分别为(1.61±0.02)mg/mL和(0.16±0.01)mg/mL,表明部分纯化后其抗氧化活性提高。

大孔吸附树脂分离纯化巴豆中佛波醇

开发了一种从巴豆粗提液中分离佛波醇的绿色、快捷的工艺,利用大孔吸附树脂柱层析法,对粗提液进行纯化,考察了7种大孔吸附树脂的性能。结果表明D101型大孔吸附树脂具有最好的分离效果,该方法以乙醇-水作为溶剂系统进行梯度洗脱,佛波醇的回收率高达62.16%,高效液相色谱(HPLC)测得产品佛波醇质量分数为91.08%。

Box-Behnken Design响应面法优化银杏叶总黄酮柱层析纯化工艺

为得到质量分数较高的银杏叶总黄酮提取物,在单因素试验基础上,以上样质量浓度、乙醇体积分数、洗脱液接收体积和洗脱流速为考察因素,以银杏叶总黄酮质量分数、收率为考察指标,采用BBD(Box-Behnken Design)响应面法对银杏叶总黄酮柱层析纯化工艺进行优化。得到最佳工艺为上样质量浓度3.1 mg/mL,乙醇体积分数71%,洗脱液接收体积2 BV(BV为装柱体积)及洗脱流速2 BV/h。在最佳工艺条件下,完成三批验证实验,银杏叶总黄酮平均质量分数可达到35.77%,收率为93.30%,银杏总内酯质量分数达到《中国药典》标准。利用BBD响应面法优化银杏叶总黄酮柱层析纯化工艺是科学、合理、可行的,可为工业化大生产提供参考。

加工方式对黑果枸杞花色苷含量及胰脂肪酶活性的影响研究

花色苷类物质是黑果枸杞主要的功效成分,且不同加工方式对黑果枸杞花色苷含量及其功效影响较大。本实验分析比较了超微粉碎、喷雾干燥、冷冻干燥粉及柱层析纯化提取物等黑果枸杞不同加工方式所得花色苷产品中的花色苷含量及其胰脂肪酶体外抑制效果。结果表明,不同加工方式的产品中,黑果枸杞花色苷含量及其体外抑制胰脂肪酶作用差异较大。黑果枸杞喷雾粉花色苷含量最低,介于0.95~1.51 mg/g。其次是黑果枸杞超微粉,花色苷含量约为6.75 mg/g,提取物具有较高的花色苷含量;特别是经过大孔树脂、凝胶色谱进一步纯化后,花色苷含量分别为112.61±2.03 mg/g、278.62±1.85 mg/g。黑果枸杞花色苷含量与胰脂肪酶抑制效果呈显著正相关,其中,黑果枸杞花色苷含量较高的提取物与半抑制浓度(IC50)的相关系数为-0.87,黑果枸杞花色苷含量较低的加工产品与IC50相关系数为-0.92,且经过不同加工方式得到的黑果枸杞产品之间差异较大。本实验结果为黑果枸杞及其花色苷的进一步开发利用提供理论依据。

大孔树脂-硅胶柱层析法纯化花生根中白藜芦醇

研究了大孔树脂-硅胶柱层析法分离纯化花生根中白藜芦醇的工艺。通过动静态解吸附试验确立大孔树脂最佳分离工艺为:大孔树脂为聚酰胺,上样质量浓度26.58μg/mL,解吸剂为80%乙醇,洗脱流速2 BV/h。通过薄层色谱与硅胶柱层析试验,确定最佳纯化条件为:洗脱剂V(氯仿)∶V(甲醇)=40∶1、流速30 mL/min、m(硅胶)∶m(样品)=1∶1。产物经V(甲醇)∶V(氯仿)=3∶1重结晶后,采用高效液相色谱测定其纯度为97.01%。

柱色谱分离纯化五倍子没食子酸

目的:优化筛选分离纯化五倍子没食子酸的最优树脂及其工艺参数。方法:以五倍子水提取液为原料,比较NKA-2、LS303、HZ816、HP-20、XAD-16、HPD700、HPD500、S-8、AB-8、D101、D301 11种树脂对五倍子没食子酸的静态吸附与解吸效果,筛选最优树脂。采用单因素试验、正交试验与验证性试验,优化最优树脂动态吸附与解吸五倍子没食子酸的工艺参数。结果:NKA-2树脂为最优树脂,静态吸附量与解吸率分别达到94.856 mg/g和89.64%;当主要考虑没食子酸纯度时,其最优动态吸附与解吸工艺参数是:上样质量浓度7 mg/m L,上样体积7BV,上样流速2 BV/h,洗脱剂乙醇体积分数70%,洗脱体积2.5 BV,洗脱流速3 BV/h,所获五倍子没食子酸的纯度、得率分别为90.97%和78.84%;当主要考虑没食子酸得率时,最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度5 mg/mL,上样体积5 BV,流速3 BV/h,洗脱剂乙醇体积分数70%,洗脱体积2.5 BV,洗脱流速2 BV/h,所获五倍子没食子酸的得率、纯度分别为85.04%和87.10%。结论:NKA-2大孔吸附树脂是一种可应用于五倍子没食子酸分离纯化的较好树脂。

辅酶Q_(10)的纯化

应用大孔吸附树脂和硅胶柱色谱制备高纯度辅酶Q_(10)。检测了7种大孔树脂对辅酶Q_(10)的吸附及解吸性能,确定HZ816为最佳吸附剂。工艺条件为:以无水乙醇为溶剂,上样浓度1.6～1.8 mg/ml,吸附流速3 BV/h,上样体积14 BV;分步洗脱:先用5 BV无水乙醇洗脱,流速3 BV/h;然后用丙酮洗脱。经初步纯化,辅酶Q_(10)纯度从56.5%提高到93.4%,回收率78.4%。利用硅胶柱色谱进一步纯化,获得纯度99%的辅酶Q_(10)。