HPLC-ELSD测定彭泽贝母中的贝母辛

目的:建立HPLC-ELSD测定彭泽贝母中贝母辛的分析方法。方法:采用HPLC-ELSD含量测定法,Hypersil ODS(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.03%二乙胺水(36∶64)为流动相,流速1.0 mL/min;漂移管温度98.8℃;载气流速2.7 mL/min。结果:贝母辛在1.4～11.2μg呈线性,回收率为101.07%,RSD为2.86%。建立了HPLC-ELSD测定彭泽贝母中贝母辛的分析方法。结论:本法可快速、准确测定彭泽贝母中贝母辛含量,可用于彭泽贝母的质量控制。

不同生长年限太白贝母中贝母辛和总生物碱的含量测定

目的:测定不同生长年限太白贝母鳞茎中贝母辛和总生物碱的含量,为建立和完善中药材太白贝母的质量控制体系和适宜采收时间提供实验依据。方法:采用HPLC-ELSD法测定贝母辛,色谱柱为Agilent Extend C18(250 mm×4.0 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%二乙胺水溶液(10∶90),流速为1.0 mL/min,Alltech 2000蒸发光散射检测器;采用紫外分光光度法测定总生物碱。结果:生长2～3年的太白贝母贝母辛的含量随着生长年限的增加而增加,生长4～6年的太白贝母贝母辛的含量随着生长年限的增加而降低;生长2～4年太白贝母的总生物碱含量逐年增加,生长5～6年总生物碱含量逐年下降。结论:综合药用有效成分贝母辛和总生物碱的含量、贝母药材的产量以及土地利用率3个因素考虑,以4年生的太白贝母采收比较合适。

高效液相色谱法测定贝母中贝母辛的含量

建立了反相离子对高效液相色谱法分析贝母中的贝母辛,色谱柱为ODS柱,流动相为甲醇—水(69:31),内含7.5 mmol/L SDS。分析结果表明,供试12种贝母药材主要来源种中均含有贝母辛,引种栽培样品中贝母辛含量一般高于野生样品,贝母辛含量与生物碱总量有相关性。

HPLC-ELSD同时测定新疆贝母中贝母辛和贝母素乙的含量

目的：建立同时测定新疆贝母中贝母辛和贝母素乙含量的方法。方法：采用HPLC-ELSD法,色谱柱为Comatex C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.02%三乙胺水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;ELSD参数：漂移管温度90℃,雾化室温度35℃,载气压力46.2 psi。结果：贝母辛和贝母素乙线性范围分别为2.380~23.800μg（r1=0.9996）和1.440~14.400μg（r2=0.9997）,平均回收率分别为99.91%和100.15%。结论：该方法稳定、可靠、简便,适用于新疆贝母的质量控制。

贝母辛的结构修正

从川产家种华西贝母(Fritillaria siechuanica)鳞茎中分出贝母辛(peimisine)(碱Ⅲ)。应用光谱法(~1H—~1H,^(13)C—~1H COSY,2D—NOE),对文献报告的贝母辛的结构作了修正,并证明FR—5与贝母辛系同一化合物。指出湖贝辛结构的某些错误以及对松贝辛的结构提出怀疑,认为其可能为贝母辛。

高速逆流色谱法分离制备太白贝母中贝母辛

运用高速逆流色谱(HSCCC)技术从太白贝母中分离制备贝母辛。以正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水(体积比4∶5∶3∶5)为溶剂体系,转速800 r/min,流速2.0 m L/min,温度35℃,检测波长为215 nm,从50 mg太白贝母总生物碱中经一次HSCCC分离可得到5.3 mg贝母辛,纯度为96.3%,回收率为87.2%。并利用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(HPLC-QTOF MS)对贝母辛进行了结构确证。

贝母辛对肝纤维化大鼠肝组织α-SMA表达的影响

目的观察贝母辛对肝纤维化大鼠肝组织α-SMA表达的影响,探讨贝母辛抗肝纤维化的作用机制。方法采用四氯化碳腹腔注射方法制作大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组、肝纤维化模型组,贝母辛低、中、高剂量(2.5、5、10 mg/kg)组,疗程结束后,腹主动脉采血,检测血清ALT、AST、ALP、GGT表达。处死大鼠,取大鼠肝脏组织,Real time RT-PCR方法检测大鼠肝脏α-SMA mRNA表达水平;免疫组织化学检测α-SMA蛋白表达水平。结果模型组大鼠血清ALT、AST、ALP及GGT活性均显著高于正常对照组(P<0.01)。与模型对照组比,贝母辛低、中、高剂量组ALT、AST、ALP、GGT活性降低(P均<0.05)。Real time RT-PCR、免疫组化结果显示模型组α-SMA表达高于正常组,贝母辛中、高剂量组较模型组表达减少(P均<0.01)。结论贝母辛可有效抑制肝纤维化进展,其机制可能为干预肝星状细胞活化。

贝母辛的分子印迹固相萃取-化学发光传感器研究

采用分子印迹技术制备了贝母辛分子印迹聚合物,考察了贝母辛分子印迹聚合物和非印迹聚合物对贝母辛分子的选择吸附性能。实验结果表明,MIPs对贝母辛的吸附选择性能明显高于NIPs,贝母辛MIPs与NIPs的吸附量分别是67.59μmol/g和21.01μmol/g。研究发现,在碱性介质中,贝母辛可以加强鲁米诺-过氧化氢体系的化学发光。据此,提出了分子印迹固相萃取-化学发光传感器测定贝母辛的新方法,该方法的线性范围为1.0×10-5~1.5×10-3 mol/L,检出限为0.15×10-5 mol/L,11次平行测定的相对标准偏差为2.9%。此法简单、分析速度快,已成功应用于贝母属类植物中贝母辛的测定。

HPLC测定不同产地贝母中贝母辛的含量

目的:对8种不同产地贝母中贝母辛的含量进行测定。方法:采用Kromasil C18(4.6 mm×250mm,E76575)色谱柱,流动相为乙腈:0.2%二乙胺水溶液=40:60;流速:1.00mL/min;柱温:27℃;检测波长:205nm。测定了8种不同产地贝母中贝母辛的含量。结果:不同产地贝母中贝母辛含量有一定的差异,其中新疆贝母含量最高为0.02734%,伊犁贝母和康定贝母含量次之,其他5种贝母含量较少。结论:本方法灵敏度高,而且简便、准确、重现性好,可用于贝母的内在质量控制。

HPLC-ELSD法同时测定咳灵胶囊中的苦杏仁苷、桃叶珊瑚苷、哈帕苷、贝母辛、贝母素甲和贝母素乙

目的:建立HPLC-ELSD同时测定咳灵胶囊中的苦杏仁苷、桃叶珊瑚苷、哈帕苷、贝母辛、贝母素甲和贝母素乙含量的方法。方法:采用Ultimate XB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),蒸发光散射检测器(漂移管温度105℃,氮气流速2.0 L·min^(-1));以乙腈-甲醇(1∶1)与0.4%醋酸溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速:0.7 ml·min^(-1),柱温:35℃。结果:苦杏仁苷、桃叶珊瑚苷、哈帕苷、贝母辛、贝母素甲和贝母素乙的线性范围分别为13.56~271.20μg·ml^(-1)(r=0.999 2)、8.48~169.60μg·ml^(-1)(r=0.999 9)、4.89~97.80μg·ml^(-1)(r=0.999 7)、2.66~53.20μg·ml^(-1)(r=0.999 4)、1.82~36.40μg·ml^(-1)(r=0.999 8)、2.04~40.80μg·ml^(-1)(r=0.999 6);平均加样回收率(RSD)分别为97.90%(1.20%),99.21%(1.62%),97.68%(0.75%),98.36%(1.38%),99.70%(0.79%),97.95%(1.56%)(n=6)。结论:本文建立的方法结果准确,重复性好,样品处理简便,可作为咳灵胶囊的质量控制方法。

川贝母及其主要成分抗炎作用研究进展

背景:川贝母基源于百合科贝母属,常见于多种植物的干燥鳞茎,其主要活性成分为异甾体类生物碱,具有镇咳、抗炎、祛痰、镇痛、抗癌、抗氧化等多种功效。近年来,其抗炎作用越来越受到关注,成为炎症疾病防治的一个研究热点。目的:本文通过概述川贝母及其活性成分主要是贝母辛在哮喘、慢性阻塞性肺病、急性肺损伤疾病等中的治疗作用,以期为川贝母的进一步临床应用提供理论依据。方法:运用计算机检索中国知网、万方、PubMed、SinoMed数据库,对相关文献进行归纳整理与分析。检索的关键词为“川贝母、贝母辛、哮喘、急性肺损伤、慢性阻塞性肺病、癌症”。结果和结论:川贝母可以通过抑制JAK/STAT、MAPK等信号通路的激活,降低炎症因子和炎症细胞的聚集,从而起到抗炎作用。在炎症相关疾病中川贝母及其活性提取物的抗炎作用,具有多效应、多靶点、多信号通路的特点,且其具体作用机制较为复杂仍有待我们进一步探索。

HPLC-ELSD测定不同加工方法川贝母中3种生物碱

目的:建立同时测定川贝母中3种生物碱成分的方法,并考察不同加工方法对川贝母质量的影响。方法:采用HPLC-ELSD法同时测定川贝母中3种生物碱贝母辛、贝母甲素和贝母乙素的含量,采用的色谱柱:W aters XTerra MSC18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相:乙腈-水-碳酸氢铵(pH=10.10)。结果:本色谱条件下3种生物碱均具有良好的分离度,且3种成分的浓度与各自峰面积之间线性关系良好,精密度、重复性及加样回收率的RSD均小于3%。结论:该法简单、快速、可靠,可同时测定川贝母中的3种生物碱,可用于川贝母的质量控制,并建议水洗60℃烘干为川贝母最佳加工方法。

HPLC-ELSD法同时检测瓦布贝母三种生物碱的含量

为了建立高效液相色谱-蒸发光散射（HPLC-ELSD）测定瓦布贝母3种生物碱（西贝母碱、贝母辛和贝母素乙）含量的方法,本文以Tigerkin C18色谱柱（4.6＆#215;150 mm,5μm）作为分析柱,乙腈-0.1％二乙胺水（70∶ 30）作为流动相,流速1.0 mL· min-1,ELSD检测器参数设为以压缩空气为载气,流速2.5L·min-1,漂移管温度75℃进行了试验并确认其为适合的分离和检测条件.结果显示,西贝母碱、贝母辛、贝母素乙分别在0.192～3.84、0.191 ～3.82和0.178～3.55 μg范围内线性关系良好.精确度,稳定性和重复性试验的RSD均小于3％.平均加样回收率分别为97.75％、100.47％、99.40％,RSD分别为1.0％、2.6％、1.6％（n=6）.瓦布贝母样品含量测定值分别为0.0835％、0.0271％、0.0174％,RSD分别为1.3％、2.0％、2.6％（n=3）.此法用于测定瓦布贝母生物碱含量,操作简便、快捷,结果稳定可靠,可以为瓦布贝母的质量评价和控制提供参考.

不同生长年限野生和移栽彭泽贝母中3个生物碱含量的比较

目的：建立HPLC-ELSD同时测定彭泽贝母中贝母素甲、贝母素乙、贝母辛3个生物碱类成分含量的方法,并测定不同生长年限野生和移栽品种3个化合物的含量,观察其动态变化规律。方法：采用Hypersil ODS2色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈（A）-0.03%二乙胺（B）梯度洗脱,流速：1.0 m L/min,漂移管温度：99.5℃,载气流速：2.2L/min。结果：建立了HPLC-ELSD同时测定彭泽贝母中贝母素甲、贝母素乙、贝母辛3个生物碱类成分含量的方法,3个成分均达到基线分离,线性关系良好（r〉0.9991）;平均加样回收率（n=6）分别为96.6%、98.9%、96.2%。野生彭泽贝母中贝母素甲、贝母素乙、贝母辛的含量较移栽的略高,在一定年限内,随着生长年限的增加,这3种生物碱的含量逐渐增大。结论：该方法操作简单、快速、重复性好,为彭泽贝母药材的质量控制奠定了基础。3个生物碱总含量随生长年限的不同而异,野生4~5年生达到最高。

17个不同产地的川贝母总生物碱的含量测定

目的 :测定了中国药典收载的四基源种 17个不同产地的川贝母生物碱的含量。方法 :采用两相滴定法。结果 :川贝母的含量为 0 0 8% ,暗紫贝母为 0 0 4% ,梭砂贝母为 0 0 7% ,甘肃贝母为 0 0 5 %。结论 :17个不同产地的川贝母中总生物碱的含量以川贝母较高 。

太白贝母生物碱的HPLC指纹图谱研究

目的:建立太白贝母的HPLC指纹图谱,为评价其质量提供有效的参考方法。方法:采用HPLC-ELSD检测法,高效液相色谱柱为Agilent Extend-C18(4.0 mm×250 mm,5μm);以0.03%二乙胺水-甲醇为流动相梯度洗脱,柱温30℃;流速1 m L·min-1;进样量10μL。蒸发光散射检测器漂移管温度96℃;载气流速2.7 L·min-1。结果:14批太白贝母样品HPLC指纹图谱相似度都在82%以上,精密度、稳定性、重复性实验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均<4.5%,结果能较全面地反映太白贝母药材中主要成分的分布特征。结论:本研究可为太白贝母的质量控制研究提供参考。

宁国贝母中宁贝新甙的分离和结构鉴定

宁国贝母(Fritillaria ningguoensis S.C.Chert et S.F.Yin)为百合科贝母属新种,产于安徽皖南山区宁国县,具清热止咳、化痰散结功能,当地作贝母药用。我们曾从宁国贝母鳞茎中分得五种生物碱,分别鉴定为浙贝甲素,浙贝乙素、异贝母甲素,贝母辛及一新生物碱,命名为宁贝新(ningpeisine)。从宁国贝母总碱中又分得一种生物碱甙即宁贝甙Ⅰ和宁贝甙Ⅱ。宁贝甙Ⅰ经药理试验有明显的祛痰作用,本文报告其分离与结构鉴定。

瓦布贝母生物碱的分离与鉴定

从四川产家种贝母新种──瓦布贝母（ＢｕｌｂｕｓＦｒｉｔｉｌｌａｒｉａＷａｂｕｅｎｓｉｓＳ．Ｙ．ＴａｎｇｅｔＳ．Ｃ．Ｙｕｅｈ）鳞茎中分离出８种生物碱。经波谱分析，高效液相色谱，ＴＬＣ与对照品进行对照鉴定，确认碱Ⅰ为西贝索（ｉｍｐｅｒｉａｌｉｎｅ），碱Ⅱ为贝母辛（ｐｅｉｍｉｓｉｎｅ），碱Ⅱ为鄂贝乙素（ｅｂｅｉｎｏｎｅ），碱Ⅳ为异浙贝甲素（ｉｓｏｖｅｒｔｉｃｉｎｅ），碱Ⅴ为西贝素－β氮氧化物（ｉｍｐｅｒｉａｌｉｎｅ－β－Ｎ－ｏｘｉｄｅ）。作者对碱Ⅴ的１Ｈ，１３Ｃ化学位移作了归属，并首次获得碱Ⅴ的晶体Ｘ衍射结构数据。

中药川贝母定量分析方法研究

目的:研究常用中药川贝母的定量分析方法。方法:应用高效液相色谱法。以4种川贝母共有的有效成分贝母辛为指标;采用AgilentHypersilBDS C18(4. 0mm×2 5 0mm ,5 μm)色谱柱,以乙腈水 二乙胺(37∶6 3∶0 .0 3)为流动相,流速1 0mL·min-1;Alltech 2 0 0 0蒸发光散射检测器检测,外标两点法定量。结果:贝母辛在0 . 0 3188～1. 0 2 0mg·mL-1呈线性,回收率为10 2. 1% (n =5 ) ,RSD 3. 86 %。根据33批不同产地或来源的川贝母药材中贝母辛的含量结果,确定贝母辛的含量限度为0 . 0 0 70 %。结论:本法为良好的贝母辛的定量分析方法,可用于川贝母药材的质量控制。