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长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2互作蛋白的筛选与验证
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作者 杨桦 李祥乾 +2 位作者 王帆 方睿 杨伟 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2024年第1期87-97,共11页
【目的】筛选长足大竹象(Cyrtotrachelus buqueti)信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白,为实现利用信息物质对长足大竹象种群持续控制提供参考。【方法】利用GST pull-down联合质谱技术,对长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白进... 【目的】筛选长足大竹象(Cyrtotrachelus buqueti)信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白,为实现利用信息物质对长足大竹象种群持续控制提供参考。【方法】利用GST pull-down联合质谱技术,对长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2的互作蛋白进行筛选、鉴定和分析,并采用酵母双杂交试验验证了CbuqPBP2与信息素结合蛋白CbuqPBP1的特异性互作。【结果】GST pull-down共筛选出45个与长足大竹象信息素结合蛋白CbuqPBP2特异性结合的候选互作蛋白,包括CbuqPBP1、ND2、CYTB。这些互作蛋白主要参与细胞过程、定位、代谢过程、应激反应以及生物调控等多个生物学过程。使用酵母双杂交体系,构建了pGADT7-PBP1重组猎物质粒与pGBKT7-PBP2重组诱饵质粒,通过诱饵质粒毒性检测和自激活检测,表明重组诱饵质粒对Y2HGold酵母菌无毒性作用。共转化验证结果显示,诱饵质粒pGBKT7-PBP2共转化酵母菌株能够在TDO培养基上生长。【结论】CbuqPBP2和CbuqPBP1之间有相互作用,不同信息素结合蛋白间的互作对深入理解长足大竹象嗅觉感受机制提供了新的思路。 展开更多
关键词 长足大竹象 信息素结合蛋白 蛋白互作 酵母双杂交 GST pull-down
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妊娠晚期感染B族链球菌孕妇早产的危险因素及其pbp2x基因突变分析 被引量:1
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作者 文强 王秀 +2 位作者 丁小莉 胡芷晴 徐志红 《现代医药卫生》 2024年第13期2206-2210,共5页
目的 分析某院感染B族链球菌(GBS)孕妇发生早产的危险因素及观察早产孕妇感染GBS的pbp2x基因突变情况。方法 选取2022年1月至2023年5月在该院分娩且感染GBS的孕妇199例,根据早产与否分为观察组(41例)和对照组(158例)。采用二分类logisti... 目的 分析某院感染B族链球菌(GBS)孕妇发生早产的危险因素及观察早产孕妇感染GBS的pbp2x基因突变情况。方法 选取2022年1月至2023年5月在该院分娩且感染GBS的孕妇199例,根据早产与否分为观察组(41例)和对照组(158例)。采用二分类logistic回归模型和受试者操作特征(ROC)曲线分析感染GBS的孕妇发生早产的危险因素;对早产孕妇的GBS样本进行pbp2x基因一代测序分析。结果 199例感染GBS孕妇中发生早产41例,发生率为20.6%。Logistic回归分析显示,年龄[比值比(OR)=1.151,P=0.004)]和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)异常项数(OR=2.995,P<0.001)是感染GBS孕妇发生早产的独立危险因素。两危险因素联合预测早产的曲线下面积(AUC)为0.783,最佳敏感度为75.6%,特异度为69.0%,较单项危险因素预测价值高。pbp2x基因测序发现3个错义突变(1129G>A、1148T>G、1528A>G),未发现影响GBS对青霉素敏感性的基因突变。结论 年龄和OGTT异常项数是感染GBS孕妇发生早产的危险因素,两者联合预测的效能优于单项,早产孕妇感染的GBS中尚未发现影响青霉素敏感性的pbp2x基因突变。 展开更多
关键词 B族链球菌 孕妇 早产 危险因素 pbp2x基因
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异源表达盐单胞属(Halomonas)周质磷酸盐结合蛋白基因PBP降低转基因烟草砷积累研究
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作者 黄仁权 袁婷 +1 位作者 宋拉拉 秦利军 《中国农学通报》 2024年第12期70-79,共10页
为探讨PBP基因在异源烟草中的生物学功能,筛选出低砷(As)积累亲本烟草种质。以转PBP基因烟草T2代种子和野生型烟草(Nicotiana tabacum K326)种子为材料,利用Real-time PCR分析外源PBP的时空表达模式,测定As胁迫下转基因烟株抗氧化酶(AO... 为探讨PBP基因在异源烟草中的生物学功能,筛选出低砷(As)积累亲本烟草种质。以转PBP基因烟草T2代种子和野生型烟草(Nicotiana tabacum K326)种子为材料,利用Real-time PCR分析外源PBP的时空表达模式,测定As胁迫下转基因烟株抗氧化酶(AOEs)活性变化及分析转基因烟草株系中As积累差异。AOEs活性测定表明,As胁迫第5天时CK植株中SOD和POD酶活性达到极值,分别为80.25 U/g和152.02 U/g,显著高于转基因植株;在胁迫后期(3~5 d)CK植株中H2O2和MDA含量也显著高于转基因植株。另外,在第7天和14天时转基因植株中As含量比CK植株均显著降低。离子转运蛋白基因表达分析表明,As胁迫不仅诱导转基因植株PBP基因表达显著上调,而且也引起转基因和CK植株中HAK1和PHT4等通道蛋白基因的显著上调,且CK植株中HAK1和PHT4的平均表达水平为转基因植株的1.5倍和3.75倍。外源PBP基因导入可有效降低转基因烟草对As的积累。 展开更多
关键词 盐单胞属 周质磷酸盐结合蛋白 pbp基因 转基因烟草 低As积累
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穿心莲内酯对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌关键耐药蛋白PBP2a的抑制作用
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作者 李彩霞 刘盼盼 +2 位作者 陈晓慧 罗小凤 王桂琴 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期31-38,共8页
本试验旨在为探究穿心莲内酯(andrographolide, AP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)关键耐药蛋白青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a, PBP2a)的抑制作用。采用实时荧光定量... 本试验旨在为探究穿心莲内酯(andrographolide, AP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)关键耐药蛋白青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a, PBP2a)的抑制作用。采用实时荧光定量PCR检测AP对PBP2a编码基因mecA的转录影响,通过在线软件SWISS-MODEL等对蛋白质结构进行分析,经PyMOL以及AutoDock Tools软件进行分子对接来探究AP与PBP2a结合的可能机制,运用动力学模拟来验证AP与PBP2a蛋白结合的可靠性,进一步原核表达PBP2a并制备其多克隆抗体,通过蛋白质免疫印迹检测AP作用下MRSA中PBP2a蛋白含量的变化。结果显示:64μg/mL的AP即可显著下调mecA的转录水平,AP与PBP2a蛋白的GLU170、GLU239和THR238之间可以形成稳定的氢键作用力;成功表达并纯化获得38 kDa的PBP2a蛋白转肽酶区,且制备出的多克隆抗体可以与PBP2a蛋白特异性结合;随着AP浓度的升高,PBP2a的表达量逐渐降低。总之,本研究分子模拟提示AP对PBP2a蛋白存在抑制潜力,试验结果表明AP可以通过抑制mecA的转录进而抑制PBP2a表达,从而揭示了AP使MRSA对β-内酰胺类抗生素增敏的可能机制。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 pbp2A 穿心莲内酯 分子模拟
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基于Bouc-Wen前馈及模糊PID反馈的三层MFC-PBP并联变形翼大位移控制
5
作者 李兴秋 葛沪建 胡凯明 《航空科学技术》 2024年第5期110-117,共8页
三层预压缩压电宏纤维复合材料双晶片(MFC-PBP)并联变形翼存在较强的迟滞非线性,严重影响变形控制精度。为了实现对其的精确变形控制,本文提出了以Bouc-Wen逆模型为前馈补偿,以模糊PID作为反馈控制器的三层MFC-PBP并联变形翼的大位移跟... 三层预压缩压电宏纤维复合材料双晶片(MFC-PBP)并联变形翼存在较强的迟滞非线性,严重影响变形控制精度。为了实现对其的精确变形控制,本文提出了以Bouc-Wen逆模型为前馈补偿,以模糊PID作为反馈控制器的三层MFC-PBP并联变形翼的大位移跟踪控制策略。首先,利用遗传算法对Bouc-Wen模型进行参数识别,构建前馈模型并对变形翼进行开环控制;其次,加入模糊PID反馈控制器,得到可以自适应改变PID参数的闭环控制。变形跟踪控制试验结果表明,BoucWen前馈控制的相对误差(RE)约为13.5%,将Bouc-Wen前馈模型与模糊PID结合后控制的相对误差在4%以内,提高了变形控制精度。 展开更多
关键词 变形翼 压电宏纤维复合材料双晶片 变形控制 迟滞特性 BOUC-WEN模型 模糊PID
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家蚕蛹和成虫期GOBP/PBP亚家族基因簇基因定位与表达分析 被引量:8
6
作者 张升祥 张瑶 +4 位作者 徐世清 王更先 胡增娟 赵春晓 崔为正 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1069-1076,共8页
昆虫的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫与外界环境化学信息交流过程中起着重要作用,对昆虫觅食、求偶、繁殖具有重要意义。普通气味结合蛋白/性信息素结合蛋白(general odorant binding protein/pheromone binding p... 昆虫的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫与外界环境化学信息交流过程中起着重要作用,对昆虫觅食、求偶、繁殖具有重要意义。普通气味结合蛋白/性信息素结合蛋白(general odorant binding protein/pheromone binding protein,GOBP/PBP)是鳞翅目昆虫OBP家族的一个重要单系群。为进一步明确家蚕Bombyx moriGOBP/PBP基因的结构、表达及功能,本研究利用染色体定位及半定量表达分析方法对其进行了分析。染色体定位分析显示,这些基因以基因簇的形式存在于第19染色体的nscaf3052上,基因结构相似,转录方向一致,表明这些基因可能由同源基因复制产生,并具有类似功能。对家蚕蛹和成虫不同发育阶段的雌、雄虫多种组织中进行表达分析发现,这些基因的表达在不同发育时期和不同组织间差异明显(P<0.05),相对表达量均以触角中为最高,其他非嗅觉组织中也多有表达,性别间差异不大,说明了该基因簇基因除了具有嗅觉相关的功能外,很可能具有其他尚未被发现的功能。 展开更多
关键词 家蚕 气味结合蛋白 pbp1-GOBP2亚家族 基因簇 表达分析 染色体定位
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DnaJ类分子伴侣PBP基因的原核表达及兔抗PBP抗体的制备 被引量:2
7
作者 刘成刚 朱美财 +4 位作者 李文 石樱 占志 王荫静 向培德 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期456-458,共3页
目的:在原核系统中表达DnaJ类分子伴侣感光受体外周蛋白结合蛋白(PBP)基因,并制备兔抗PBP的抗体鉴定其特性。方法:应用RTPCR从人胎脑组织总RNA中扩增PBPcDNA。测序后将其克隆到表达载体pET28a中,并在大肠杆菌中以IPTG诱导表达。表达产物... 目的:在原核系统中表达DnaJ类分子伴侣感光受体外周蛋白结合蛋白(PBP)基因,并制备兔抗PBP的抗体鉴定其特性。方法:应用RTPCR从人胎脑组织总RNA中扩增PBPcDNA。测序后将其克隆到表达载体pET28a中,并在大肠杆菌中以IPTG诱导表达。表达产物经NiNTA亲和层析柱纯化后,用SDSPAGE进行鉴定。以所获纯化的PBP免疫新西兰白兔,制备兔抗PBP抗体。抗体的效价及特异性用Westernblot进行测定和分析。结果:扩增和克隆出了720bp的PBP基因。构建的重组质粒pET28aPBP在大肠杆菌中得到高表达,诱导表达的蛋白存在于包涵体和细菌裂解上清中,纯化的PBP经SDSPAGE鉴定呈单一条带。以纯化的PBP免疫兔,制备了兔抗PBP抗体。Westernblot鉴定证实,该抗体可与原核表达的PBP特异性结合,抗体效价为1∶1600。结论:在原核细胞中表达了具有生物学活性的PBP,并以其为免疫原制备了兔抗PBP的抗体,为进一步研究PBP的结构与生物学活性奠定了基础。 展开更多
关键词 pbp 热休克蛋白 基因表达 多克隆抗体
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布氏杆菌PBP_(39)蛋白抗原表达及免疫效果的研究 被引量:2
8
作者 罗德炎 曾政 +4 位作者 李非 高永辉 李鹏 王希良 何凤田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期817-820,共4页
目的 获得纯化的布氏杆菌PBP3 9重组蛋白抗原,观察PBP3 9重组蛋白的免疫原性。方法 扩增不同种布氏杆菌PBP3 9基因,测序、连接表达载体PET3 2a ,诱导表达,柱纯化PBP3 9重组蛋白抗原,免疫BALB/c小鼠,ELISA检测抗体及抗体亚型。结果 ... 目的 获得纯化的布氏杆菌PBP3 9重组蛋白抗原,观察PBP3 9重组蛋白的免疫原性。方法 扩增不同种布氏杆菌PBP3 9基因,测序、连接表达载体PET3 2a ,诱导表达,柱纯化PBP3 9重组蛋白抗原,免疫BALB/c小鼠,ELISA检测抗体及抗体亚型。结果 我国牛、羊、猪布氏杆菌PBP3 9基因与国外已报道的PBP3 9编码基因不完全相同。在蛋白N端5 8位碱基后多一G ,造成移码突变。故在85、86、87位编码终止子TCA。而在13 4、13 5、13 6位的ATG又编码了新的起始密码。布氏杆菌PBP3 9蛋白在大肠杆菌高效表达,表达量达40 % ,纯化重组蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,产生了较高水平的特异性抗体免疫应答,抗体亚型主要是IgG1。结论 我国牛、羊、猪布氏杆菌PBP3 9编码抗原蛋白同国外已报道的不完全相同,纯化的PBP3 9重组蛋白抗原可诱导高水平的抗体反应,为筛选布氏杆菌病新型疫苗保护性抗原分子奠定了基础。 展开更多
关键词 布氏杆菌pbp39 重组蛋白抗原 免疫原性
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浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌PBPs基因及氨基酸序列研究 被引量:3
9
作者 林峰 郑敏巧 +3 位作者 曾爱平 丁玎 文思远 王升启 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期965-971,共7页
为阐明浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)的青霉素结合蛋白(PBPs)的基因和氨基酸序列的变异特点,对温州医学院自2000年11月~2004年1月收集的26份肺炎链球菌进行分离、鉴定及青霉素药敏实验,并对每株链球菌的PBP1A、PBP2B、PBP2X基因... 为阐明浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)的青霉素结合蛋白(PBPs)的基因和氨基酸序列的变异特点,对温州医学院自2000年11月~2004年1月收集的26份肺炎链球菌进行分离、鉴定及青霉素药敏实验,并对每株链球菌的PBP1A、PBP2B、PBP2X基因进行PCR扩增和直接测序,通过序列比对与生物信息学分析.结果表明,研究中的PBP1A的主要突变位点是保守基序KTG之后的4个连续氨基酸替换Thr574Ala、Ser575Thr、Gln576Gly、Phe577Tyr和保守序列STMK内的氨基酸替换Thr371Ser;PBP2B的主要突变位点是保守序列SSN之后的氨基酸替换Thr451Ala;PBP2X的主要突变位点是保守基序STMK内的氨基酸替换Thr338Ala.以上突变类型以及菌株的青霉素耐药水平与文献报道相符.研究检测的PRSP的PBPs基因中暂未发现本地区特有的(新的)基因突变,也未检测出文献报道的某些与青霉素抗性相关的氨基酸替换. 展开更多
关键词 肺炎链球菌(SP) 青霉素耐药的肺炎链球菌(PRSP) 青霉素结合蛋白(pbps)
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农杆菌介导雪莲PBP基因对棉花的遗传转化研究 被引量:1
10
作者 李萍 艾秀莲 +4 位作者 危晓薇 孟庆玉 王博 王志方 黄乐平 《新疆农业大学学报》 CAS 2006年第4期32-36,共5页
雪莲磷脂酰乙醇胺结合蛋白(Phosphatidyl ethanolamine-binding family protein,PBP)基因表达产物与细胞膜的冷稳定性有关,可能在植物抗寒方面起一定作用。本研究将XLPBP基因以农杆菌介导的方法转化新陆早17号、新陆早13号、新陆早1号3... 雪莲磷脂酰乙醇胺结合蛋白(Phosphatidyl ethanolamine-binding family protein,PBP)基因表达产物与细胞膜的冷稳定性有关,可能在植物抗寒方面起一定作用。本研究将XLPBP基因以农杆菌介导的方法转化新陆早17号、新陆早13号、新陆早1号3个品种陆地棉,通过对不同激素浓度、预培养时间、菌液浓度和浸菌时间等因素对转化培养物的影响以及茎段外植体对卡那霉素(Kan)的敏感性等方面的探讨,确定了新陆早13号外植体材料(茎段)的最佳转化条件,即:在OD600为0.4的农杆菌菌液中侵染10 min,在茎段最适培养基(含0.1 mg/L KT和0.1 mg/L 2,4-D,pH5.8)上进行预培养2 d,共培养2 d,转至不含选择压的培养基(含Cef 500 mg/L)上进行延迟培养7 d,再进行选择培养,茎段愈伤分化达25%(诱导出愈伤组织的外植体数占接种的外植体数)以上;茎段转化适宜的选择压力为Kan 50 mg/L;在获得的抗性愈伤中8%左右经检测为GUS阳性。 展开更多
关键词 农杆菌介导 pbp基因 遗传转化 棉花
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PBP驱动器率相关迟滞特性研究及其线性化控制 被引量:6
11
作者 胡凯明 文立华 《机械工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第12期205-212,共8页
后屈曲预压缩压电双晶片(Post-buckling pre-compression,PBP)驱动器作为一种大行程压电舵机驱动器,存在着严重的率相关迟滞现象。为了使PBP驱动器能够作为具有较高控制精度的微小型飞行器舵机驱动器,利用基于Bouc-Wen模型的Hammerstei... 后屈曲预压缩压电双晶片(Post-buckling pre-compression,PBP)驱动器作为一种大行程压电舵机驱动器,存在着严重的率相关迟滞现象。为了使PBP驱动器能够作为具有较高控制精度的微小型飞行器舵机驱动器,利用基于Bouc-Wen模型的Hammerstein率相关迟滞模型对其进行参数识别,并通过试验验证了该模型能够较好地预测PBP驱动器的率相关迟滞特性;在此基础上为PBP驱动器设计一种具有在线自适应能力的前馈单神经元PID复合线性化控制器,在多种单复合频率信号作用下对其控制回路进行位移跟踪半实物仿真试验,并与基于径向基函数(Radial basis function,RBF)神经网络PID控制器进行对比,结果表明前馈单神经元PID控制器具有更快的响应速度和更高的控制精度。 展开更多
关键词 pbp驱动器 率相关迟滞 Bouc-Wen迟滞模型 HAMMERSTEIN模型 前馈自适应PID复合控制 神经网络
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PBP对土壤硝化作用的影响及对小白菜增产效应的研究 被引量:1
12
作者 牛治宇 何鹏 吴敏 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期228-230,共3页
采用盆栽试验方法研究了香蕉假茎汁液提取物—PBP对土壤硝化作用及对小白菜产量的影响。结果表明,PBP系列物质能抑制铵态氮在土壤中的转化,减缓土壤铵态氮的转化速率和土壤硝态氮的生成量、生成速率。同时,PBP系列物质对盆栽小白菜有显... 采用盆栽试验方法研究了香蕉假茎汁液提取物—PBP对土壤硝化作用及对小白菜产量的影响。结果表明,PBP系列物质能抑制铵态氮在土壤中的转化,减缓土壤铵态氮的转化速率和土壤硝态氮的生成量、生成速率。同时,PBP系列物质对盆栽小白菜有显著或极显著的增产效果。 展开更多
关键词 pbp 土壤 硝化作用 小白菜 增产效应 盆栽试验
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雪莲PBP基因表达载体的构建 被引量:7
13
作者 李萍 艾秀莲 +1 位作者 王志方 王博 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第2期11-13,共3页
目的:利用新疆雪莲特殊功能基因磷脂酰乙醇胺结合蛋白基因(XLPBP)与基础质粒构建植物表达载体pXLPBP,为介导该基因在植物中表达,以期提高植物抗寒力的转基因研究打下基础。方法:利用设计好的两端加有EcoRⅠ酶切位点的引物,对XLPBP全长... 目的:利用新疆雪莲特殊功能基因磷脂酰乙醇胺结合蛋白基因(XLPBP)与基础质粒构建植物表达载体pXLPBP,为介导该基因在植物中表达,以期提高植物抗寒力的转基因研究打下基础。方法:利用设计好的两端加有EcoRⅠ酶切位点的引物,对XLPBP全长基因片段进行PCR扩增,获得700bp左右大小的片段,将其纯化回收并与同样经过EcoRⅠ酶切的质粒pCAMBIA3301连接;然后采用冻融法和电击法,将含XLPBP基因的载体pCAMBIA3301转入根癌农杆菌中。结果:通过一系列分子克隆方法获得含雪莲XLPBP基因的植物表达载体,并经PCR实验证实。结论:利用以自身携带的非编码区为调控序列的XLPBP全长基因和双向表达载体pCAMBIA3301为基础构建植物表达载体,可望提高外源基因表达量。 展开更多
关键词 雪莲 磷脂酰乙醇胺结合蛋白 根癌农杆菌
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MRSA-PBP2a蛋白的体外诱导、抗体制备及鉴定 被引量:3
14
作者 苏明权 杨柳 +2 位作者 岳乔红 樊新 郝晓柯 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第9期802-804,共3页
目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)蛋白的体外诱导;抗MRSA PBP2a(pencillinbindingprotein2a,PBP2a)蛋白抗体的制备及效价鉴定.方法:采用NCCLS推荐的琼脂板稀释法和PCR法筛选MRSA,以... 目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)蛋白的体外诱导;抗MRSA PBP2a(pencillinbindingprotein2a,PBP2a)蛋白抗体的制备及效价鉴定.方法:采用NCCLS推荐的琼脂板稀释法和PCR法筛选MRSA,以β内酰胺抗生素作为诱导剂,进行体外诱导产生PBP2a蛋白.免疫家兔后产生抗MRSA PBP2a蛋白抗体,采全血分离血清,用改良双向免疫扩散法进行抗体滴度测定.结果:11株临床分离的金葡菌采用二种方法均检测出2株MRSA,SDS PAGE和Westernblot结果均显示从MRSA菌株中均能诱导出了PBP2a蛋白;免疫后均能产生较高的效价抗体,分别为1∶32和1∶64.结论:成功诱导出产生耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白菌株,并制备获得PBP2a蛋白,以及制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白抗体,为研究MRSA PBP2a蛋白活性、MRSA的免疫治疗和MRSA快速鉴定方法学的建立奠定基础. 展开更多
关键词 MRSA pbp2a蛋白 体外诱导 动物免疫
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肺炎克雷伯菌多重耐药性与基因PBP2、PBP3的相关性研究 被引量:4
15
作者 闫晓煜 肖创清 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第14期1873-1875,1878,共4页
目的探讨PBP2、PBP3基因在肺炎克雷伯菌对不同药物耐药中的作用与机制。方法收集该院2014年4月至2015年4月各科室临床标本中分离的非重复肺炎克雷伯菌203株,采用全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,提取细菌基因组DNA,用PCR... 目的探讨PBP2、PBP3基因在肺炎克雷伯菌对不同药物耐药中的作用与机制。方法收集该院2014年4月至2015年4月各科室临床标本中分离的非重复肺炎克雷伯菌203株,采用全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,提取细菌基因组DNA,用PCR扩增PBP2、PBP3产物并进行电泳,RT-PCR检测PBP2、PBP3的表达。结果 203株肺炎克雷伯菌中β-内酰胺类药物耐药105株(51.7%),敏感88株,对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为5.4%、3.9%;PCR扩增产物的电泳条带中PBP2与PBP3基因阴性18株,阳性185株,但不平行,分别有各自的阴、阳性菌株;PBP2、PBP3与KP多重耐药性无显著相关(P=0.295、0.628)。PBP2与碳青烯酶类药物无显著相关(P=0.637);PBP3与碳青烯酶类药物存在显著相关,但相关系数不高(P=0.041,r=0.148);耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的PBP2、PBP3逆转录后扩增产物电泳条带与16SrRNA扩增产物电泳条带的灰度比值进行统计学检验,其差异均无统计学意义(PBP2:P=0.331,PBP3:P=0.383)。结论基因PBP2、PBP3与肺炎克雷伯菌多重耐药性之间可能无显著相关。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 多重耐药性 pbp2 pbp3
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以PBP2a为靶点应用生物传感器技术筛选拮抗MRSA中药 被引量:2
16
作者 和生琦 李军 +5 位作者 吴翀 郑江 龙宇鹏 罗平 张蓉 周红 《解放军药学学报》 CAS 2007年第5期353-356,共4页
目的应用生物传感器技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗细菌PBP2a活性的中药并进行活性物质含量的排序。方法将可溶性PBP2 a包被于生物传感器的生物素化样品池以建立靶点,测定115种中药水煎液去鞣质后与PBP2a的亲和力;选择亲和力较高的2... 目的应用生物传感器技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗细菌PBP2a活性的中药并进行活性物质含量的排序。方法将可溶性PBP2 a包被于生物传感器的生物素化样品池以建立靶点,测定115种中药水煎液去鞣质后与PBP2a的亲和力;选择亲和力较高的25种药物水提液和醇提液与定量PBP2a(50ng.ml-1)37℃混合孵育30min,再测定其与PBP2a的亲和力,以评价中药里活性物质的含量。结果115种中药中,毛冬青、金荞麦、雷公藤等25种中药与PBP2a具有较高亲和力(大于100RU);黄药子、五倍子、半枝莲、山豆根、黄连、草果、核桃根等7种中药中与PBP2 a特异性结合的活性物质含量较高。结论应用生物传感器跟踪技术筛选具有结合PBP2a作用的中药具有可行性,筛选出的7种中药均含有非鞣质类能与PBP2 a发生特异性结合作用的活性物质,该7种中药能不同程度抑制MRSA的生长。 展开更多
关键词 pbp2A MRSA 生物传感器 中药 亲和力
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50株肺炎链球菌pbp2B基因突变与苯唑西林药敏相关性分析 被引量:2
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作者 丁云芳 糜祖煌 +2 位作者 张建华 陶云珍 秦玲 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2004年第10期1087-1090,共4页
目的 探讨我国耐青霉素肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae,SPN)pbp2B基因的突变与苯唑西林药敏表型相关性。方法 对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的 5 0株肺炎链球菌 ,用K B法进行苯唑西林药物敏感试验 ,用套式聚合酶链反应 (nPCR... 目的 探讨我国耐青霉素肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae,SPN)pbp2B基因的突变与苯唑西林药敏表型相关性。方法 对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的 5 0株肺炎链球菌 ,用K B法进行苯唑西林药物敏感试验 ,用套式聚合酶链反应 (nPCR)扩增pbp2B基因 ,对PCR产物直接进行DNA测序 ,测得序列与SPNR6株 (青霉素敏感株 )序列 [GenBank登录号 :NC 0 0 30 98]相比较。结果  2 9株无突变 ,2 1株有突变 ;突变的 2 1株中 2 0株为点突变 ,可分A、B、C、D 4个类型 ,分别占 71 4 %、14 3%、4 8%、4 8% ;另 1株为E型 ,除有点突变外 ,并有CCT碱基插入 ;无突变的 2 9株SPN菌中苯唑西林敏感率为 86 2 % ;有突变的 2 1株中苯唑西林敏感率为 9 5 % ,二者相比较差异有显著性 (P <0 0 0 1) ;5种突变类型均存在SPN菌对苯唑西林耐药。结论 SPN分离株pbp2B基因突变与其苯唑西林耐药性相关 。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 pbp2B基因突变 苯唑西林耐药
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MRSA-PBP2a单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立 被引量:3
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作者 徐霞 陈思聪 唐晓华 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期611-614,628,共5页
【目的】应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗... 【目的】应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗体浓度、乳胶浓度、偶联时间和偶联缓冲液)进行探索和优化,建立检测PBP2a的乳胶凝集法。【结果】140mg/L的抗体浓度与15g/L的羧化聚苯乙烯乳胶,在pH 5.8缓冲液中偶联8h后有较好的凝集效果和偶联效率,所建立的乳胶凝集法敏感性和特异性良好。【结论】初步建立了检测PBP2a的胶乳凝集法,为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 乳胶凝集法 单克隆抗体 检测法 pbp2A 辛酸-硫酸铵法 共价偶联 抗体浓度 聚苯乙烯
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肺炎链球菌中青霉素结合蛋白PBP3的功能与结构研究进展 被引量:2
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作者 周宇 王长振 +2 位作者 侯粲 李爽跃 杨曙明 《安徽农业科学》 CAS 2013年第8期3319-3322,共4页
PBP3作为肺炎链球菌唯一的D,D羧肽酶,能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-Ala,导致转肽反应中供体不可用,因此控制了肽聚糖的网状交联水平,在细胞分裂和生长中起重要作用。文中对PBP3的功能与结构进行了综述,为今后PBP3的深入研究与... PBP3作为肺炎链球菌唯一的D,D羧肽酶,能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-Ala,导致转肽反应中供体不可用,因此控制了肽聚糖的网状交联水平,在细胞分裂和生长中起重要作用。文中对PBP3的功能与结构进行了综述,为今后PBP3的深入研究与应用提供了基础资料。 展开更多
关键词 青霉素结合蛋白pbp3 肺炎链球菌 结构与功能
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耐甲氧西林金葡球菌PBPs的研究方法 被引量:1
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作者 李寨 李耘 李家泰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期281-284,共4页
描述了由我所在Sprat经典方法基础上加以改进的MRSAPBPs分离方法。包括:(1)细菌的培养;(2)膜蛋白的制备;(3)聚丙烯酰胺凝胶电泳;(4)放射自显影。
关键词 金葡萄球菌 MRSA 青霉素结合蛋白 pbps
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