新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽(PYY)mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系。方法选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-timePCR法和免疫组织化学法测定胃底组织GhrelinmRNA和蛋白、结肠组织PYYmRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达。结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠(P<0.05),结肠PYYmRNA表达则低于7日龄大鼠(P<0.01)。0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY蛋白表达均高于7日龄大鼠(P<0.05)。0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYYmRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性。

食欲调节肽的作用机制及研究现状

食欲调节肽是一类能够调节食欲的多肽,主要分布在胃肠道、脂肪组织等外周组织以及下丘脑中,按其作用机理的不同,可分为正向调节食欲肽和负向调节食欲肽。下丘脑在食欲调节的过程中扮演了重要角色,其与胃肠道、脂肪组织等外周组织的信息交流是食欲调节的重要方式。通过对神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)、胃饥饿素(Ghrelin)、肽YY(Peptide YY,PYY)和瘦素(Leptin)四种食欲调节肽以及食物与食欲调节肽关系的综述,利用数学和统计学方法探究食欲调节的热点问题及其关系,有助于了解食欲调节肽的作用机制和研究现状,以期通过食疗来调节食欲,预防疾病的发生,可为进一步研究食欲调节肽提供思路参考。

肠易激综合征模型大鼠血清酪酪肽水平及其受体特性的测定

目的通过测定肠易激综合征(IBS)大鼠血清酪酪肽(PYY)水平及其空肠黏膜上皮细胞PYY受体的变化,探讨IBS的发病机制。方法将SD大鼠随机分成IBS腹泻型组(D-IBS组)、IBS便秘型组(C-IBS组)及对照组,应用同位素放射免疫法测定各组PYY水平及反映受体特性的两个参数:平衡解离常数(Kd)和最大结合容量值(Bmax)。结果①D-IBS组血清PYY水平为(66.50±32.10)pg/mL,与正常对照组的(15.33±10.63)pg/mL比较,差异有统计学意义(P<0.001);C-IBS组血清PYY水平为(19.51±17.62)pg/mL,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。②D-IBS组Kd=203.29±77.14,Bmax=645.71±184.30;C-IBS组Kd=347.43±162.76,Bmax=671.86±162.96,与正常组(Kd=328.75±92.11,Bmax=880.00±410.70)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 IBS可能与血清PYY水平的高低有关而与其受体的变化无关。

大鼠空肠黏膜上皮细胞酪酪肽受体的分布与特性

目的检测正常大鼠空肠黏膜酪酪肽(PYY)受体的分布并测定反映酪酪肽受体特性的基本参数,初步阐明酪酪肽的作用位点和作用特点。方法用125I标记酪酪肽并对其进行受体放射分析,测得酪酪肽受体的平衡解离常数,最大结合容量及Hill系数。结果正常大鼠空肠黏膜上皮细胞酪酪肽受体的平衡解离常数(Kd)为(386.69±129.95)pmol/L,最大结合容量(Bmax)为(303.21±116.85)fmol/mg蛋白;Hill系数为1。酪酪肽受体为高亲和力受体。结论正常大鼠空肠黏膜上皮细胞有酪酪肽受体的分布,酪酪肽受体之间无正负协同效应;酪酪肽受体对PYY具有高亲和性;可能有PYY直接与空肠黏膜上皮酪酪肽受体结合而直接抑制空肠黏膜的分泌。

酪酪肽对全肠内营养支持小鼠残留小肠代偿的影响

目的:通过建立广泛小肠切除(mSBR)的酪酪肽(PYY)基因敲除(Pyy-/-)小鼠模型,研究早期在TEN支持下PYY对残留小肠的代偿作用。方法:将30只Pyy-/-小鼠分为三组,每组10只。假手术(Sham)组仅横断小肠但不切除小肠;广泛小肠切除(mSBR)组切除50%小肠,保留近段空肠约1 cm,远段回肠9 cm;广泛小肠切除加PYY(mSBR-PYY)组切除50%小肠,皮内注射PYY1~36。所有小鼠术后2~7 d均接受TEN。观察各组小鼠术后回肠黏膜的DNA和蛋白质含量、绒毛高度和隐窝深度、回肠隐窝细胞的增殖指数和绒毛上皮细胞的凋亡指数。结果:mSBR组小鼠回肠黏膜的DNA和蛋白质含量、绒毛高度、隐窝深度、回肠隐窝细胞的增殖指数和绒毛上皮细胞的凋亡指数,显著高于Sham组。mSBR-PYY组小鼠回肠黏膜的DNA和蛋白质含量、绒毛高度和隐窝深度,显著高于mSBR组;回肠隐窝细胞的增殖指数显著高于mSBR组;回肠绒毛上皮细胞的凋亡指数显著低于mSBR组。结论:在早期TEN支持下,PYY不仅能促进mSBR小鼠肠黏膜细胞的增殖,而且还能抑制其凋亡,在残留小肠的代偿中起重要作用。

溃疡性结肠炎大鼠血清酪酪肽水平及其受体特性的测定

目的通过测定溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清酪酪肽(PYY)水平及其空肠黏膜上皮细胞膜PYY受体的特性来观察UC时血清PYY水平及其受体的变化。方法将大鼠随机分成UC组、腹泻型肠易激综合征(D-IBS)组及对照组,用同位素放射免疫法分别检测各组的PYY水平及反映受体特性的两个参数:平衡解离常数(Kd)和最大结合容量值(Bmax)。结果UC及D-IBS组血清PYY水平高于对照组(P<0.001),且UC组亦高于D-IBS组(P<0.001);但UC组Kd及Bmax值与正常组和D-IBS组比较均无明显差异(P>0.05)。结论UC组PYY水平高于正常及D-IBS组,推测UC时PYY水平的变化可能与其腹泻症状和炎症病变的产生有关;UC组的Kd及Bmax与正常组比较无显著变化,推测UC可能与PYY受体的变化无关。

酪酪肽促进小鼠残留肠上皮细胞增殖的信号转导途径

目的:采用酪酪肽(PYY)基因敲除(Pyy-/-)小鼠,研究PYY促进肠上皮细胞增殖的主要细胞信号转导途径,建立小肠广泛切除的小鼠模型。方法:将24只成年雄性Pyy-/-小鼠分为三组,每组8只。假手术(Sham)组仅横断小肠但不切除小肠;广泛小肠切除(SBR)组切除50%小肠,保留近段空肠约1 cm,远段回肠9 cm;小肠广泛切除加PYY(SBR-PYY)组切除50%小肠,并于术后36 h皮内注射PYY1~36。各组小鼠均于给药后2 h处死,并取回肠组织,观察隐窝细胞的增殖指数、肠黏膜Y1受体的mRNA表达以及肠黏膜细胞膜蛋白激酶C-ε(PKC-ε)和磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(p44/42 MAPK)的蛋白质表达情况。结果:SBR组小鼠回肠隐窝细胞的增殖指数和肠黏膜磷酸化的p44/42 MAPK的蛋白质表达量显著高于Sham组,SBR-PYY组小鼠显著高于SBR组;SBR组小鼠回肠黏膜Y1受体mRNA的表达量和细胞膜PKC-ε的蛋白质表达量与Sham组无明显差异,SBR-PYY组小鼠显著高于SBR组和Sham组。结论:PYY结合Y1受体后可通过细胞膜的PKC-ε和细胞质的p44/42 MAPK磷酸化来促...

酪酪肽对胰腺癌细胞生长的抑制作用及Y受体在胰腺癌细胞的表达

目的观察酪酪肽(PYY)对体外培养的人胰腺癌Miapaca-2细胞的生长抑制作用及Y受体在胰腺癌细胞的表达。方法不同浓度的PYY分别作用于体外常规培养Miapaca-2细胞,采用MTT比色法检测细胞增殖情况,光镜观察细胞形态变化。RT-PCR法检测胰腺癌细胞Y受体亚型Y1、Y2、Y5 mRNA表达。结果 PYY对Miapaca-2细胞生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);胰腺癌Miapaca-2细胞表达Y1、Y2和Y5受体,Y2受体表达较强。结论 PYY对体外培养的胰腺癌细胞有明显的抑制作用,胰腺癌Miapaca-2细胞主要表达Y2受体。

加味异功散辅助马来酸曲美布汀治疗腹泻型肠易激综合征疗效及对结肠组织酪酪肽和密封蛋白1表达的影响

【目的】研究加味异功散辅助马来酸曲美布汀治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的临床疗效及对患者结肠组织中酪酪肽(PYY)和密封蛋白1(claudin-1)的影响。【方法】将160例脾胃虚弱型IBS-D患者随机分为观察组和对照组,每组各80例。对照组给予马来酸曲美布汀治疗,观察组在对照组的基础上联合加味异功散治疗,疗程为2周。观察2组患者治疗前后中医症状积分、血清胃肠激素和T淋巴细胞亚群水平,以及结肠黏膜组织PYY和claudin-1阳性表达率的变化情况,评价2组的中医证候疗效。【结果】(1)治疗2周后,观察组的总有效率为93.75%(75/80),对照组为75.00%(60/80),观察组的中医证候疗效明显优于对照组(P<0.01)。(2)治疗后,2组患者的中医症状总积分均较治疗前下降(P<0.05),且观察组对中医症状总积分的下降作用明显优于对照组(P<0.01)。(3)治疗后,2组患者血清5-羟色胺(5-HT),γ-干扰素(INF-γ)、神经肽Y(NPY)水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对血清5-HT、IFN-γ、NPY水平的降低作用均明显优于对照组(P<0.01)。(4)治疗后,2组患者血清胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)水平均较治疗前明显降低(P<0.05),P物质(SP)水平均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对血清VIP、MTL水平的降低作用和对血清SP水平的升高作用均明显优于对照组(P<0.01)。(5)治疗后,2组患者外周血CD3^(+)和CD4^(+)T淋巴细胞水平均较治疗前升高(P<0.05),CD8^(+)T淋巴细胞水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组对外周血CD3^(+)和CD4^(+)T淋巴细胞水平的升高作用和对CD8^(+)T淋巴细胞水平的降低作用均明显优于对照组(P<0.01)。(6)治疗后,2组患者结肠黏膜组织PYY的阳性表达率均较治疗前降低(P<0.05),而claudin-1的阳性表达率均较治疗前有所升高(P<0.05),且观察组对结肠黏膜组织PYY阳性表达率的降低作用和对claudin-1阳性表达率的升高作用均明显优于对照组(P<0.01)。【结论】加味异功散辅助马来酸曲美布汀治疗脾胃虚弱型IBS-D的疗效显著,能有效缓解患者炎症反应,调节患者胃肠道激素水平,增强患者机体免疫功能,对结肠黏膜PYY和claudin-1水平有良好的调节作用。

多囊卵巢综合征患者血清内源性YY肽水平的观察

目的观察新诊断多囊卵巢综合征(PCOS)患者75gOGTT中血清内源性YY肽(PYY)水平的变化。方法纳入48例PCOS患者(PCOS组)和32名健康体检者(NC组),比较两组血清PYY-0、30min水平。根据BMI水平,将PCOS组分为超重或肥胖(PCOSObesity)亚组与体重正常(PCOSLean)亚组,比较两亚组血清PYY-0、30 min水平。检测研究对象睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、FPG和胰岛素水平,并进行比较。结果 (1)NC组PYY-0、30min水平高于PCOS组(P<0.01);(2)PCOSLean亚组PYY-0、30min-水平高于PCOSObesity亚组(P<0.01);(3)PCOS组空腹血清PYY水平与WC、BMI呈负相关(P<0.01)。结论 PCOS患者OGTT中内源性PYY水平异常,但具体机制尚待深入研究。

黄连温胆汤调控SCFAs-GPR41/43-GLP1信号通路干预2型糖尿病模型大鼠的作用机制

目的:基于SCFAs-GPR41/43-GLP1信号通路研究黄连温胆汤对2型糖尿病模型大鼠的干预机制。方法:选择SPF级SD雄性大鼠80只,先随机分10只为正常对照组,其余大鼠以高糖高脂乳剂10 mL/kg灌胃,监测血糖1次/w, 8 w后,腹腔注射STZ 35 mg/kg诱导2型糖尿病模型,5 d后选取空腹血糖值大于11.10 mmol/L造模成功的大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍0.25 g/kg组和黄连温胆汤3、6、12 g/kg组。各组灌胃给予相应的药物或生理盐水,1次/d,连续给药4 w后,取材检测。生化试剂检测大鼠葡萄糖耐量(OGTT)、血脂全套指标;气相色谱法测定大鼠结肠内容物短链脂肪酸(SCFAs)含量;ELISA法检测大鼠结肠组织GLP1、PYY的含量;RT-qPCR法检测大鼠结肠组织G蛋白偶联受体41(Gpr41)、Gpr43、胰高血糖素样肽-1(Glp1)、肽YY(Pyy) mRNA的表达;Western blot法检测大鼠结肠组织GPR41、GLP1、PYY蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠OGTT试验中血糖含量明显升高,血脂中TC、TG、LDL-C、HbA1c含量显著升高,HDL-C含量显著下降(P<0.01);结肠内容物SCFAs中乙酸、丙酸、正丁酸的含量均显著下降(P<0.01);结肠组织GLP1、PYY含量显著降低,Gpr41、Gpr43、Glp1、Pyy mRNA和GPR41、GLP1、PYY蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,黄连温胆汤3、6、12 g/kg组和二甲双胍0.25 g/kg组大鼠OGTT血糖含量明显降低,血脂中TC、TG、LDL-C、HbA1c含量明显降低,HDL-C含量明显升高(P<0.05或P<0.01);结肠内容物乙酸、丙酸、正丁酸的含量明显升高(P<0.05或P<0.01);结肠组织GLP1、PYY含量明显升高,Gpr41、Gpr43、Glp1、Pyy mRNA和GPR41、GLP1、PYY蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:黄连温胆汤抗2型糖尿病作用机制可能与增加SCFAs,调控SCFAs-GPR41/43-GLP1信号通路,促进GLP1、PYY的分泌,降低体内血糖、血脂,改善机体胰岛素抵抗相关。