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Cloning and expression analysis of a long type peptidoglycan recognition protein(PGRP-L) from Xenopus tropicalis 被引量:2
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作者 齐志涛 张启焕 +4 位作者 王资生 王爱民 黄贝 昌鸣先 聂品 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期371-378,共8页
Peptidoglycan recognition proteins(PGRPs) are a family of pattern recognition receptors(PRRs) of the immune system,which bind and hydrolyze bacterial peptidoglycan.Here,a long type PGRP(PGRP-L) was first cloned ... Peptidoglycan recognition proteins(PGRPs) are a family of pattern recognition receptors(PRRs) of the immune system,which bind and hydrolyze bacterial peptidoglycan.Here,a long type PGRP(PGRP-L) was first cloned in the lower vertebrate species Xenopus tropicalis(Xt).The XtPGRP-L possessed a conserved genomic structure with five exons and four introns.The alignment and phylogenetic analysis indicated that XtPGRP-L might be a type of amidase-like PGRP.The 3-D model showed that XtPGRP-L possessed a conserved structure compared with the Drosophila PGRP-Lb.During embryonic development,XtPGRP-L was not expressed until the 72 h tadpole stage.In adult tissues,it was strongly expressed in the liver,lung,intestine,and stomach.Furthermore,after LPS stimulation,the expression of XtPGRP-L was up-regulated significantly in the liver,intestine and spleen,indicating that XtPGRP-L may play an important role in the innate immunity of Xenopus tropicalis. 展开更多
关键词 peptidoglycan recognition protein Gene clone Expression analysis Xenopus tropicalis
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Identification,Phylogeny and Expressional Profiles of Peptidoglycan Recognition Protein(PGRP)Gene Family in Sinonovacula constricta
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作者 MENG Yiping LÜLiyuan +3 位作者 DAI Wenfang ZHANG Weiwei LIN Zhihua DONG Yinghui 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2022年第4期1051-1060,共10页
Peptidoglycan recognition protein(PGRP)plays a vital role in invertebrate innate immunity system as a specific pattern recognition receptor for peptidoglycan.Bivalves possess various PGRP systems for self-defense;howe... Peptidoglycan recognition protein(PGRP)plays a vital role in invertebrate innate immunity system as a specific pattern recognition receptor for peptidoglycan.Bivalves possess various PGRP systems for self-defense;however,it has not been characterized in razor clam Sinonovacula constricta.In this study,eight PGRP coding sequences were identified and analyzed from S.constricta genome,which are designated as ScPGRP-S1,ScPGRP-S2,ScPGRP-S3,ScPGRP-S4,ScPGRP-S5,ScPGRP-S6,ScPGRP-S7,ScPGRP-S8.The results of molecular evolutionary analyses showed that all eight ScPGRP genes were highly conserved and exhi-bited a typical PGRP/amidase_2 domain as PGRP genes in other mollusks.Moreover,the presence of signal peptides was predicted in ScPGRP-S2,ScPGRP-S3 and ScPRP-S6,while a transmembrane structure only existed in ScPGRP-S6.Notably,a tertiary struc-ture analysis indicated that no disulfide bond was observed in ScPGRP-S5 and ScPGRP-S7.The mRNA transcripts analysis of ScPGRPs revealed that the high expression patterns of ScPGRP-S1 and ScPGRP-S4 were found in mantle,adductor muscle and foot,while those of ScPGRP-S2,ScPGRP-S3 and ScPGRP-S6 were observed in hepatopancreas.Furthermore,the temporal expression profiles of ScPGRPs in the hepatopancreas were analyzed by qPCR<https://www.sciencedirect.com/topics/immunology-and-microbiology/real-time-polymerase-chain-reaction>after Gram-negative Vibrio parahaemolyticus and Gram-positive Staphylococcus aureus challenges.The mRNA expressions of ScPGRP-S2,ScPGRP-S3 and ScPGRP-S6 could be induced by V.pa-rahaemolyticus and S.aureus.Overall,our findings indicated that ScPGRPs were involved in the immune defense against invaders,which constituted a comprehensive understanding of the potential role of PGRP genes in S.constricta. 展开更多
关键词 Sinonovacula constricta peptidoglycan recognition protein gene family gene expression
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Antiviral function of peptidoglycan recognition protein in Spodoptera exigua(Lepidoptera:Noctuidae)
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作者 Jie Li Jie Li +7 位作者 Zhaohao Jing Qianlong Yu Guiling Zheng Bin Zhang Longsheng Xing Huan Zhang Fanghao Wan Changyou Li 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期1092-1104,共13页
Peptidoglycan recognition proteins(PGRPs)are a class of molecules that play a critical role in insect immunity.Understanding the function of PGRPs is important to improve the efficiency of microbial insecticides.In th... Peptidoglycan recognition proteins(PGRPs)are a class of molecules that play a critical role in insect immunity.Understanding the function of PGRPs is important to improve the efficiency of microbial insecticides.In this study,we investigated the role of PGRP-LB(a long type PGRP)in insect immunity against viruses using Spodoptera exigua and Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus(SeMNPV)as an insect-virus model.We cloned and identified a PGRP-LB gene from S.exigua;the gene consisted of 7 exons that encoded a polypeptide of 234 amino acids with a signal peptide and a typical amidase domain.Expression analysis revealed that the abundance of SePGRP-LB transcripts in the fat body was greater than in other tissues.Overexpression of SePGRP-LB resulted in a significant decrease of 49%in the rate of SeMNPV-infected cells.In addition,the multiplication of SeMNPV was significantly decreased:a decrease of 79%in the production of occlusion-derived virion(ODV),and a maximum decrease of 50%in the production of budded virion(BV).In contrast,silencing of SePGRP-LB expression by RNA interference resulted in a significant 1.65-fold increase in the rate of SeMNPV-infected cells,a significant 0.54-fold increase in ODV production,a maximum 1.57-fold increase in BV production,and the larval survival dropped to 21%.Our findings show that SePGRP-LB has an antiviral function against SeMNPV,and therefore this gene may provide a target for lepidopteran pest control using virus insecticides. 展开更多
关键词 ANTIVIRAL long-type peptidoglycan recognition protein gene PGRP-LB Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus Spodoptera exigua
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强直性脊柱炎患者血清PGLYRP-1、PTX3水平及其与炎症水平、骨密度的相关性
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作者 田洪波 汲会静 胡敬暖 《检验医学与临床》 CAS 2024年第20期3063-3067,共5页
目的探讨血清肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP-1)、正五聚蛋白3(PTX3)水平及其与强直性脊柱炎(AS)患者炎症水平、骨密度(BMD)的相关性。方法选取2021年1月至2023年1月该院收治的68例AS患者作为AS组,另选取同期健康体检者68例作为非AS组。检测所... 目的探讨血清肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP-1)、正五聚蛋白3(PTX3)水平及其与强直性脊柱炎(AS)患者炎症水平、骨密度(BMD)的相关性。方法选取2021年1月至2023年1月该院收治的68例AS患者作为AS组,另选取同期健康体检者68例作为非AS组。检测所有研究对象血清PGLYRP-1、PTX3水平。采用Pearson相关分析AS患者血清PGLYRP-1、PTX3水平与炎症相关因子水平及不同部位处BMD的相关性。采用多因素Logistic回归分析PGLYRP-1、PTX3对AS发生的影响。结果AS组与非AS组工作状况、身高、身体质量指数、体质量、婚姻状况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。AS组红细胞沉降率、巴氏强直性脊柱炎疾病活动性指数评分、巴氏强直性脊柱炎功能指数评分均明显高于非AS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AS组PGLYRP-1、PTX3水平均高于非AS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AS组IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18、TNF-α、CRP水平均高于非AS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AS组腰椎、股骨颈、华氏三角、股骨粗隆处的BMD显著低于非AS组(P<0.05)。AS患者血清PGLYRP-1、PTX3水平与IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18、TNF-α、CRP水平均呈正相关(P<0.05)。AS患者血清PGLYRP-1、PTX3水平与腰椎、股骨颈、华氏三角、股骨粗隆处BMD均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,PGLYRP-1、PTX3水平升高均是AS发生的独立危险因素(P<0.05)。结论AS患者血清PGLYRP-1、PTX3表达水平较高,与炎症因子水平的上升有关,且与患者不同部位BMD呈负相关,可能成为AS病情监测的有效标志物。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 肽聚糖识别蛋白1 正五聚蛋白3 炎症水平 骨密度 相关性
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Comparative analysis of peptidoglycan recognition proteins in endoparasitoid wasp Microplitis mediator 被引量:4
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作者 Rui-Juan Wang Zhe Lin +5 位作者 Hong Jiang Jiancheng Li Tusar T. Saha Ziyun Lu Zhiqiang Lu Zhen Zou 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期2-16,共15页
Peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) are a family of innate immune receptors that specifically recognize peptidoglycans (PGNs) on the surface of a number of pathogens. Here, we have identified and characteri... Peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) are a family of innate immune receptors that specifically recognize peptidoglycans (PGNs) on the surface of a number of pathogens. Here, we have identified and characterized six PGRPs from endoparasitoid wasp, Microplitis mediator (MmePGRPs). To understand the roles of PGRPs in parasitoid wasps, we analyzed their evolutionary relationship and orthology, expression profiles during different developmental stages, and transcriptional expression following infection with Gram-positive and -negative bacteria and a fungus. MmePGRP-S1 was significantly induced in response to pathogenic infection. This prompted us to evaluate the effects of RNA interference mediated gene specific knockdown ofMmePGRP-S1. The knockdown of MmePGRP-S1 (iMmePGRP-S1) dramatically affected wasps' survival following challenge by Micrococcus luteus, indicating the involvement of this particular PGRP in immune responses against Gram-positive bacteria. This action is likely to be mediated by the Toll pathway, but the mechanism remains to be determined. MmePGRP-S 1 does not play a significant role in anti-fungal immunity as indicated by the survival rate of iMmePGRP-S wasps. This study provides a comprehensive characterization of PGRPs in the economically important hymenopteran species M. mediator. 展开更多
关键词 endoparasitoid wasp insect immunity microbial infection Microplitis mediator peptidoglycan recognition protein
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皱纹盘鲍肽聚糖识别蛋白的表达及免疫功能特性
6
作者 乔琨 郑春花 +5 位作者 陈贝 苏永昌 郝华 许旻 蔡水淋 刘智禹 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期947-955,共9页
为研究皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)肽聚糖识别蛋白HdhPGRP-SC2-like的免疫功能特性,利用RACE技术克隆了HdhPGRP-SC2-like基因的全长cDNA序列,采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析了HdhPGRP-SC2-like基因的组织分布特征,通过原核表达获... 为研究皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)肽聚糖识别蛋白HdhPGRP-SC2-like的免疫功能特性,利用RACE技术克隆了HdhPGRP-SC2-like基因的全长cDNA序列,采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析了HdhPGRP-SC2-like基因的组织分布特征,通过原核表达获得了重组蛋白rHdhPGRP-SC2-like,并对其酰胺酶活性及免疫特性进行了验证。结果表明:HdhPGRP-SC2-like基因的cDNA全长为938 bp,开放阅读框为780 bp,编码260个氨基酸,包含保守的PGRP结构域和Ami_2结构域;HdhPGRP-SC2-like属于短型PGRP,与软体动物近缘物种PGRP具有高度相似性;qPCR分析显示,HdhPGRP-SC2-like mRNA在皱纹盘鲍各组织中均有表达,其中,鳃中表达量最高,外套膜、消化腺中表达量次之,腹足和血细胞中表达量较低;进一步构建原核表达载体pET-28a(+)-HdhPGRP-SC2-like,经诱导表达、分离纯化获得重组蛋白rHdhPGRP-SC2-like,该蛋白具有肽聚糖结合活性,且在Zn2+存在的情况下显示出酰胺酶活性。研究表明,HdhPGRP-SC2-like能够结合细菌肽聚糖成分,在机体抵御入侵细菌等免疫防御中发挥重要作用。 展开更多
关键词 皱纹盘鲍 肽聚糖识别蛋白 酰胺酶活性 免疫防御 细菌结合
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ADA、PGLYRP2及PCT在耐多药肺结核诊断中的潜在价值 被引量:3
7
作者 王沛 《保健医学研究与实践》 2023年第4期42-45,共4页
目的探讨腺苷脱氨酶(ADA)、肽聚糖识别蛋白2(PGLYRP2)及降钙素原(PCT)在耐多药肺结核诊断中的潜在价值,以期为临床治疗提供参考。方法选取2019年5月—2022年1月在河南省禹州市疾病预防控制中心门诊就诊的110例耐多药肺结核患者作为耐药... 目的探讨腺苷脱氨酶(ADA)、肽聚糖识别蛋白2(PGLYRP2)及降钙素原(PCT)在耐多药肺结核诊断中的潜在价值,以期为临床治疗提供参考。方法选取2019年5月—2022年1月在河南省禹州市疾病预防控制中心门诊就诊的110例耐多药肺结核患者作为耐药组,同期选择在本院门诊就诊的首次发现痰检结核杆菌阳性且无耐药史的肺结核患者110例作为敏感组。分析ADA、PGLYRP2、PCT在耐多药肺结核诊断中的潜在价值。结果耐药组患者PGLYRP2、PCT水平高于敏感组,而ADA水平低于敏感组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC显示:ADA、PGLYRP2、PCT诊断耐多药肺结核的AUC分别为0.773(95%CI:0.700~0.845)、0.789(95%CI:0.707~0.871)、0.804(95%CI:0.669~0.939)。ADA的Cut-off=16.92 U/L、PGLYRP2的Cut-off=544.62 pg/mL、PCT的Cut-off=0.58 ng/mL,在该阈值下,诊断的灵敏度和特异度最高。结论PGLYRP2、PCT在耐多药肺结核患者体内呈高表达状况,ADA呈低表达状况,ADA、PGLYRP2、PCT水平与耐多药肺结核的发生存在相关性,可用于诊断耐多药肺结核。 展开更多
关键词 肽聚糖识别蛋白2 降钙素原 腺苷脱氨酶 耐多药肺结核
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亚洲玉米螟肽聚糖识别蛋白OfPGRP-SA的表达与功能分析 被引量:1
8
作者 王增霞 周婉 +4 位作者 涂美英 盛龙玉 杨文俊 毛燕 黄保宏 《安徽科技学院学报》 2023年第3期43-49,共7页
目的:明确肽聚糖识别蛋白PGRP在亚洲玉米螟先天免疫中的功能。方法:构建质粒表达载体,进行重组蛋白表达、纯化及Western blot鉴定,对获得的OfPGRP-SA重组蛋白进行抗菌活性、细菌凝集、酰胺酶活性、酚氧化酶反应和黑化反应等体外试验。结... 目的:明确肽聚糖识别蛋白PGRP在亚洲玉米螟先天免疫中的功能。方法:构建质粒表达载体,进行重组蛋白表达、纯化及Western blot鉴定,对获得的OfPGRP-SA重组蛋白进行抗菌活性、细菌凝集、酰胺酶活性、酚氧化酶反应和黑化反应等体外试验。结果:通过SDS-PAGE和Western blot鉴定,OfPGRP-SA蛋白纯化后条带单一,与预期大小一致。对重组蛋白体外活性分析表明,OfPGRP-SA对革兰氏阳性菌有较强的诱导作用,说明OfPGRP-SA可能参与Toll途径的激活。结论:进一步明确OfPGRP-SA在亚洲玉米螟先天免疫应答中的作用,有助于更好地利用病原微生物对亚洲玉米螟进行生物防治。 展开更多
关键词 亚洲玉米螟 肽聚糖识别蛋白 原核表达 先天免疫
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家蚕模式识别受体PGRP、βGRP编码基因的克隆鉴定及表达谱分析 被引量:19
9
作者 许平震 张美蓉 +3 位作者 程廷才 黄璐琳 谭祥 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期383-390,共8页
模式识别受体(PRR)是生物体先天免疫系统中免疫受体的代表,对生物体的生存极为重要。克隆鉴定了家蚕的14个模式识别受体编码基因,包括10个肽聚糖识别蛋白(PGRP)基因和4个β-葡聚糖识别蛋白(βGRP)基因,并得到了BmPGRP-S3、BmPGRP-S4和Bm... 模式识别受体(PRR)是生物体先天免疫系统中免疫受体的代表,对生物体的生存极为重要。克隆鉴定了家蚕的14个模式识别受体编码基因,包括10个肽聚糖识别蛋白(PGRP)基因和4个β-葡聚糖识别蛋白(βGRP)基因,并得到了BmPGRP-S3、BmPGRP-S4和BmPGRP-L5的完整编码序列。家蚕PGRP的长型和短型亚家族都具有典型的酰胺酶活性结构域,短型亚家族具有信号肽,长型亚家族则没有信号肽。5个PGRP长型亚家族基因成簇分布于第1号染色体;5个PGRP短型亚家族基因中有2个分布于第9号染色体,有3个分布于第16号染色体。家蚕βGRP家族成员都具有信号肽,其中BmβGRP1-3成簇分布于第11号染色体,编码蛋白不具有典型的葡聚糖结合结构域;BmβGRP4独立分布于第22号染色体,编码蛋白具有典型的葡聚糖结合结构域。基因芯片数据分析表明,BmPGRP-L5和BmβGRP1在5龄第3天幼虫各组织中没有表达,其余12个模式识别受体基因为多组织表达,但在丝腺组织中均无表达。在这12个模式识别受体基因中,BmPGRP-L3等6个模式识别受体基因在中肠组织中的表达水平偏高;BmβGRP3、BmβGRP4和BmPGRP-L3、BmPGRP-L4等在家蚕生殖腺中的表达水平较高。在生殖腺以外的其他各组织中,这12个基因的表达不具有雌雄差异性。BmβGRP1在家蚕各发育时期没有表达,BmPGRP-L5主要在变态发育的转折期表达,其余12个模式识别受体基因在各发育时期均有表达,并从5龄第3天幼虫到上蔟第2天有较高水平的表达,雌雄个体间无表达差异性。由此说明这些模式识别受体基因的表达具有一定的组织性和发育时期性。给人工饲料无菌饲养的家蚕5龄第3天幼虫分别添食大肠杆菌、家蚕黑胸败血菌和家蚕白僵菌,对免疫诱导3、6、12和24h的家蚕进行个体水平的实时荧光定量PCR检测,发现PGRP长型亚家族基因BmPGRP-L1、BmPGRP-L3和短型亚家族基因BmPGRP-S1-3均能被这3种微生物诱导上调表达;βGRP基因家族中的BmβGRP3、BmβGRP4也能被3种微生物诱导上调表达。同时对诱导12h时家蚕各组织中14个家蚕模式识别受体基因的表达谱进行分析,结果显示经3种微生物分别诱导后,家蚕头部组织中BmβGRP2、BmβGRP4、BmPGRP-L2和BmPGRP-S1、BmPGRP-S3-5均上调表达;表皮、中肠和脂肪体中仅有BmβGRP3、BmPGRP-L4等少数模式识别受体基因上调表达。 展开更多
关键词 家蚕 肽聚糖识别蛋白 β-葡聚糖识别蛋白 基因克隆 蛋白结构 时空表达谱 诱导表达 实时荧光定量PCR
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肽聚糖识别蛋白研究进展 被引量:7
10
作者 韦嵩 宋晓玲 +1 位作者 李赟 李海兵 《动物医学进展》 CSCD 2007年第1期61-64,共4页
肽聚糖识别蛋白(PGRPs)是一类可识别肽聚糖和含肽聚糖的细菌的模式识别受体,在天然免疫应答中发挥着重要的识别和调节功能。机体通过有限的模式识别受体迅速识别大量不同的病原微生物,进行及时有效的初步防御。近年来,学者们对昆虫和哺... 肽聚糖识别蛋白(PGRPs)是一类可识别肽聚糖和含肽聚糖的细菌的模式识别受体,在天然免疫应答中发挥着重要的识别和调节功能。机体通过有限的模式识别受体迅速识别大量不同的病原微生物,进行及时有效的初步防御。近年来,学者们对昆虫和哺乳动物PGRPs已有一定程度的研究,成功地克隆出多个PGRPs基因。对肽聚糖识别蛋白的认识,揭开了天然免疫系统研究的新篇章,对于了解整个免疫系统的反应机制有重要意义。文章就PGRPs基因、结构、表达、功能及进化等方面做了简述。 展开更多
关键词 肽聚糖识别蛋白 基因 表达 功能 进化
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非洲爪蟾短型肽聚糖识别蛋白基因的克隆与鉴定 被引量:3
11
作者 齐志涛 高谦 +2 位作者 黄贝 昌鸣先 聂品 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期922-926,共5页
采用生物信息学方法首次对非洲爪蟾短型肽聚糖识别蛋白(xePGRP-S)基因进行了克隆,并对其在胚胎发育和成年爪蟾各组织中的表达状况进行了分析。xePGRP-ScDNA全长720bp,开放阅读框为549bp,编码182个氨基酸。序列比对显示xePGRP-S与其他物... 采用生物信息学方法首次对非洲爪蟾短型肽聚糖识别蛋白(xePGRP-S)基因进行了克隆,并对其在胚胎发育和成年爪蟾各组织中的表达状况进行了分析。xePGRP-ScDNA全长720bp,开放阅读框为549bp,编码182个氨基酸。序列比对显示xePGRP-S与其他物种PGRP-S的序列相似性在42.4%—50.5%之间。RT-PCR显示在非洲爪蟾胚胎发育至3d时可以明显检测到xePGRP-S的表达,之后呈持续性表达,且在所检测的心、肝、脾、肺、肾、肠和胃这7种组织器官中呈组成型表达。 展开更多
关键词 非洲爪蟾 肽聚糖识别蛋白 克隆 同源性 组织表达
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昆虫肽聚糖识别蛋白研究进展 被引量:8
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作者 陈康康 吕志强 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期969-978,共10页
在脊椎动物和非脊椎动物中,识别非己是天生免疫反应中的第一步。肽聚糖是细菌细胞壁的必需成分,属于进化上保守的微生物表面病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP),可以被模式识别蛋白(pattern recognition pro... 在脊椎动物和非脊椎动物中,识别非己是天生免疫反应中的第一步。肽聚糖是细菌细胞壁的必需成分,属于进化上保守的微生物表面病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP),可以被模式识别蛋白(pattern recognition proteins,PRRs)如肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)识别。在昆虫的天生免疫系统中,有些PGRPs能够利用细菌独有的肽聚糖识别入侵细菌,并将细菌入侵信号传递给下游的抗菌肽(antimicrobial peptide,AMP)合成途径,启动抗菌肽基因的转录及合成;PGRPs对肽聚糖的识别也会启动酚氧化酶原途径的激活,引起黑化反应。有些具有酰胺酶活性的PGRPs可以促进吞噬作用;有些可以抑制抗菌肽合成以减弱过度免疫反应带来的损伤。还有一些PGRPs作为效应因子直接作用于细菌将细菌杀死。本文主要从昆虫PGRPs作为识别受体(recognition receptor)、调节子(regulator)和效应因子(effector)3个方面进行了综述,并分析了目前PGRPs研究中仍不清楚的问题和未来研究的方向。 展开更多
关键词 昆虫 天生免疫 肽聚糖 病原相关分子模式 肽聚糖识别蛋白
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肽聚糖识别蛋白 被引量:7
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作者 吕成伟 陈政良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第B06期88-90,共3页
天然免疫系统通过一系列高度保守的模式识别受体识别病原体相关分子模式。肽聚糖识别蛋白家族是重要的模式识别受体 ,从昆虫到人类均高度保守 ,可识别肽聚糖和含肽聚糖的细菌 ,在天然免疫和获得性免疫应答中发挥重要的识别和调节功能。
关键词 肽聚糖识别蛋白 天然免疫 模式识别受体
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黄颡鱼PGRP-L基因克隆及其对爱德华氏菌的反应(英文) 被引量:2
14
作者 隗黎丽 刘毅 +1 位作者 吴华东 周秋白 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期42-49,共8页
为了研究肽聚糖识别蛋白家族(Peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)在黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)先天免疫应答中发挥的作用,根据NCBI中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)PGRP-L的基因信息,采用简并引物和RAC... 为了研究肽聚糖识别蛋白家族(Peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)在黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)先天免疫应答中发挥的作用,根据NCBI中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)PGRP-L的基因信息,采用简并引物和RACE方法从黄颡鱼肝脏中克隆得到了一个长型PGRP(Pf PGRP-L)基因.Pf PGRP-L基因的全长c DNA序列大小为1617 bp,其中5′和3′非翻译区的长度分别为135和72 bp,开放阅读框为1410 bp,编码469个氨基酸.同源性和系统进化分析表明,黄颡鱼PGRP-L与虹鳟的同源性为60%,与脊椎动物的PGLYRP2或PGRP-L聚在一起.半定量RT-PCR分析发现Pf PGRP-L基因在黄颡鱼鳃、胸腺、肝脏、脾脏、肠道、肾脏、头肾、心脏、血液和肌肉组织中均有分布,但在肠道和脾脏中的表达量较为丰富,而在肌肉和血液中表达则很少.用爱德华氏菌刺激后,Pf PGRP-L在肝脏、脾脏、肠道及头肾中的表达明显上调.结果表明,Pf PGRP-L在黄颡鱼抵抗病原菌中具有重要作用. 展开更多
关键词 克隆 爱德华氏菌 表达 长型肽聚糖识别蛋白 黄颡鱼
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小鼠PGRP-L分子N端基因片段的克隆与原核表达 被引量:5
15
作者 何智 陈政良 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期370-374,共5页
采用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠肝组织总RNA中扩增到长约500bp的小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)分子N端基因片段,将其克隆入pUCm-T载体构建重组质粒pmGN,DNA测序表明该基因片段长530bp,序列与GenBank中的完全一致。应用PCR技术,从重组质... 采用RT-PCR技术,从BALB/c小鼠肝组织总RNA中扩增到长约500bp的小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)分子N端基因片段,将其克隆入pUCm-T载体构建重组质粒pmGN,DNA测序表明该基因片段长530bp,序列与GenBank中的完全一致。应用PCR技术,从重组质粒pmGN中扩增目的基因片段,插入表达质粒pET-28a构建重组表达载体pET-GN,导入大肠杆菌BL21中诱导表达目的蛋白,表达产物以Ni+-NTAagarose层析柱纯化。SDS-PAGE和Westernblot分析发现,表达产物主要以包涵体形式存在,相对分子质量约29000。ELISA表明,重组蛋白能被抗mPGRP-L分子N端单表位多克隆抗体所识别。为mPGRP-L分子的研究奠定了一定基础。 展开更多
关键词 小鼠肽聚糖识别蛋白 克隆 原核表达 单表位多克隆抗体 天然免疫
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抗小鼠PGRP-L单表位多克隆抗体的制备 被引量:1
16
作者 何智 张丽芸 陈政良 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期859-862,共4页
目的制备抗小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)单表位多克隆抗体。方法应用生物信息学技术预测小鼠mPGRP-L分子的B细胞优势表位,人工合成抗原肽,采用MBS法将其与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,免疫家兔获取mPGRP-L抗血清,采用HiTrap proteinG柱... 目的制备抗小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)单表位多克隆抗体。方法应用生物信息学技术预测小鼠mPGRP-L分子的B细胞优势表位,人工合成抗原肽,采用MBS法将其与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,免疫家兔获取mPGRP-L抗血清,采用HiTrap proteinG柱和抗原肽亲和层析柱纯化抗体,以ELISA和Western blotting进行鉴定。结果确定了位于mPGRP-L分子N端第85~104位残基的1个B细胞优势表位NH2-(C)DPHSLSPELQALISEVAQHD-COOH,合成短肽并制备KLH-肽偶联物,免疫家兔得到的抗血清效价达1∶256000。分别以HiTrapproteinG柱和抗原肽柱亲和层析纯化获得兔抗mPGRP-L单表位多克隆抗体mPGRP-Ln1和mPGRP-Ln2。纯化抗体能与重组蛋白pET-mPGRP-Ln结合,经Western blotting分析,在相对分子质量约29000处可见清晰的反应条带。结论获得抗mPGRP-L单表位多克隆抗体,为mPGRP-L分子的研究提供了工具。 展开更多
关键词 小鼠长型肽聚糖识别蛋白 单表位 多克隆抗体
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血清中IL-7、PGLYRP-1、SOST的表达水平对类风湿性关节炎的诊断价值 被引量:6
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作者 张卫华 刘才桢 +4 位作者 田俊容 熊思颖 王婷婷 王东梅 吴建红 《转化医学杂志》 2021年第6期362-365,共4页
目的探讨血清中白介素7(interleukin 7,IL-7)、肽聚糖识别蛋白1(peptidoglycan recognition protein 1,PGLYRP-1)、硬骨素(sclerostin,SOST)的表达水平对类风湿性关节炎的诊断价值。方法纳入2019年5月至2021年5月达州市中心医院收治的... 目的探讨血清中白介素7(interleukin 7,IL-7)、肽聚糖识别蛋白1(peptidoglycan recognition protein 1,PGLYRP-1)、硬骨素(sclerostin,SOST)的表达水平对类风湿性关节炎的诊断价值。方法纳入2019年5月至2021年5月达州市中心医院收治的类风湿性关节炎患者82例为类风湿组、非类风湿性关节炎患者82例为非类风湿组、健康体检者82例为对照组。检测3组受试人员血清中IL-7, PGLYRP-1, SOST的表达量;用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)的曲线下面积(area under curve,AUC)评估IL-7, PGLYRP-1, SOST检测在类风湿性关节炎中的诊断意义。结果类风湿组患者血清中的IL-7和SOST均低于非类风湿组和对照组(P<0.05),类风湿组患者血清中的PGLYRP-1高于非类风湿组患者和对照组(P<0.05)。IL-7、PGLYRP-1、SOST单向诊断类风湿性组患者与非类风湿组患者的灵敏度分别为90%、86%、98%,特异度分别为72%、89%、61%。血清中IL-7,PGLYRP-1, SOST联合对类风湿性关节炎的诊断的的灵敏度为91.46%,特异度为75.61%,准确度为80.89%。此外,非条件logistic逐步回归分析结果显示血清中IL-7, PGLYRP-1, SOST的表达水平均是患类风湿关节炎的重要危险因素。结论血清中IL-7、PGLYRP-1、SOST的表达水平可作为诊断类风湿性关节炎的潜在指标。 展开更多
关键词 白介素7 肽聚糖识别蛋白1 硬骨素 类风湿性关节炎 诊断
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小鼠长型肽聚糖识别蛋白的组织分布 被引量:1
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作者 何智 张丽芸 陈政良 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期364-367,共4页
采用RT-PCR、Northern blot以及免疫组织化学技术研究小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)在体内的表达情况。RT-PCR显示,mPGRP-L mRNA在肝脏、肾脏表达,在心、肺、脾、胸腺不表达;Northern blot结果表明,mPGRP-LmRNA在肝脏组织强表达,在... 采用RT-PCR、Northern blot以及免疫组织化学技术研究小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)在体内的表达情况。RT-PCR显示,mPGRP-L mRNA在肝脏、肾脏表达,在心、肺、脾、胸腺不表达;Northern blot结果表明,mPGRP-LmRNA在肝脏组织强表达,在脾脏和肾脏弱表达,在脑、心、肺、胃、骨骼肌、睾丸、胸腺、小肠不表达。组织切片免疫组织化学分析发现,肝、肾组织呈阳性结果,其余组织(心、脾、肺、脑、气管、胃、子宫、大肠、肌肉、小肠、膀胱)为阴性。本工作为研究mPGRP-L分子的生物学功能提供了重要的线索。 展开更多
关键词 小鼠长型肽聚糖识别蛋白 组织分布 RT-PCR NORTHERN BLOT 免疫组化
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眼斑拟石首鱼肽聚糖识别蛋白2的基因克隆与组织表达特性
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作者 毛勇 王军 +2 位作者 张之文 丁少雄 苏永全 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期850-857,共8页
采用同源克隆技术获得了眼斑拟石首鱼(Sciaenops ocellatus)的肽聚糖识别蛋白2基因(命名为So-pglyrp2).So-pglyrp2的cDNA全长1 729 bp,含有1个1 446 bp的开放阅读框,编码的482 aa前体蛋白带有1个21 aa信号肽;So-pglyrp2基因由4个外... 采用同源克隆技术获得了眼斑拟石首鱼(Sciaenops ocellatus)的肽聚糖识别蛋白2基因(命名为So-pglyrp2).So-pglyrp2的cDNA全长1 729 bp,含有1个1 446 bp的开放阅读框,编码的482 aa前体蛋白带有1个21 aa信号肽;So-pglyrp2基因由4个外显子和3个内含子构成.序列比对分析表明,So-pglyrp2存在1个保守的PGRP结构域,其氨基酸序列与已报道的脊椎动物pglyrp2的同源性最高,一致性为57.1%~82.8%.RT-PCR分析表明,So-pglyrp2基因在肝脏强烈表达,在性腺、肠和胃组织弱表达,在其他组织不表达.研究结果为阐明鱼类pglyrp2基因结构、了解低等脊椎动物pglyrp2的进化地位、探讨鱼类pglyrp2的免疫学功能奠定了坚实的基础. 展开更多
关键词 肽聚糖识别蛋白2基因 基因克隆 MRNA表达 眼斑拟石首鱼
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黄颡鱼长型肽聚糖识别蛋白(pfPGRP-L)原核表达和多克隆抗体的制备
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作者 杨竹青 钟烈鹏 +3 位作者 刘毅 王自蕊 熊六凤 隗黎丽 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期723-728,共6页
为进一步研究肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)在先天性免疫应答中的生物学功能,在前期克隆黄颡鱼长型肽聚糖识别蛋白(pfPGRP-L)c DNA全长的基础上,根据pfPGRP-L基因中高亲水性区域序列设计特异性引物扩增出... 为进一步研究肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs)在先天性免疫应答中的生物学功能,在前期克隆黄颡鱼长型肽聚糖识别蛋白(pfPGRP-L)c DNA全长的基础上,根据pfPGRP-L基因中高亲水性区域序列设计特异性引物扩增出编码序列,将该基因片段克隆到p GEX-4T-1质粒,构建重组表达载体。SDS-PAGE电泳检测该目的蛋白大小约为51 ku,与理论值大小符合,回收蛋白并纯化,与弗氏佐剂等量混合后注射新西兰大白兔制备多克隆抗体,用ELISA和Western blotting分别检测该抗体,结果显示:抗体效价可达1∶256 000,且有特异性条带,表明pfPGRP-L的多克隆抗体制备成功。此外,Western blotting检测黄颡鱼不同组织pfPGRP-L蛋白的表达,发现在鳃、胸腺、肝脏、肾脏、头肾、脾脏、血液和肠道等不同组织中都有目的条带,而在脾脏和肠道中表达更强。为pfPGRP-L的抗菌作用和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 长型肽聚糖识别蛋白 原核表达 多克隆抗体 黄颡鱼
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