人穿孔素羧基端肽段的表达纯化与活性鉴定

穿孔素 ,即成孔蛋白 (poreformingprotein ,PFP) ,其溶细胞作用与免疫调节和自身免疫病以及其它多种疾病过程中的免疫性病理损伤相关 .为得到足够量的PFP建立与之相关的免疫学研究手段用于基础和临床研究 ,在已克隆人PFPcDNA的基础上 ,用基因工程方法表达了人PFPC端 12 4个氨基酸肽段 (hPFP C) ,并通过谷胱甘肽琼脂糖亲和层析获得纯化的GST/hPFP C融合蛋白 ,经凝血酶酶切和再次亲和层析去除GST部分 ,得到了纯化的hPFP C蛋白 .纯化的hPFP C蛋白与兔红细胞共育 ,呈现钙依赖的溶血活性 .