基于共聚焦激光显微内镜的海水淹溺肺损伤大鼠肺通透性的实时活体评价

背景急性肺损伤是临床常见急危重症,其核心病理特征是气血屏障的破坏,目前对肺损伤中气血屏障结构及功能改变进行活体评估的研究甚少。目的使用共聚焦激光显微内镜实现大鼠肺的在体可视化成像和海水淹溺肺损伤大鼠肺通透性的实时动态活体评估。方法10只SD大鼠随机分为对照组和海水淹溺(seawater drowning,SW)组,每组5只;SW组通过气管滴注人工海水建立海水淹溺肺损伤模型,造模后3 h进行肺活体观察窗开窗手术,4 h时经股静脉推注0.2 mL异硫氰酸荧光素-葡聚糖(10 mg/mL);对照组不进行海水滴注,其余操作同SW组。使用共聚焦激光显微内镜对右肺下叶进行30 min活体观察,对成像0 min、10 min、20 min、30 min时的共聚焦图像进行染料渗漏指数及荧光分布均匀程度的分析;成像结束后处死大鼠,取肺组织、外周血及肺泡灌洗液,进行组织病理学检查、FITC-Dextran渗漏量检测、肺泡灌洗液蛋白含量检测及肺组织湿/干比测定。结果经静脉给予FITC-Dextran后,共聚焦激光显微内镜下可观察到肺微循环和肺泡结构的实时图像;对照组血管及肺泡结构较清晰,未出现血管外空间荧光强度的明显增加,而SW组血管结构随时间推移逐渐模糊,各时间点SW组的渗漏指数均高于对照组(P<0.05),10 min、20 min、30 min时荧光分布的变异系数均低于对照组(P<0.05);SW组的染料渗漏量、肺泡灌洗液蛋白含量及肺组织湿/干比均高于对照组(P<0.05)。结论海水淹溺造成大鼠肺组织结构破坏,肺通透性增加;利用共聚焦激光显微内镜可实现大鼠肺组织结构的在体可视化成像,通过对共聚焦图像的定量分析,还可实现大鼠气血屏障通透性的实时活体评估。

乌司他丁调控P38 MAPK信号通路降低大鼠肺缺血再灌注损伤血气屏障通透性的作用及机制研究

目的:研究乌司他丁对肺缺血再灌注损伤(LIRI)大鼠的保护作用及作用机制。方法:将24只SD大鼠随机分为4组,即正常通气组、生理盐水组、LIRI组和乌司他丁+LIRI组,每组6只。采用苏木精—伊红(HE)染色法评价缺血再灌注后肺组织的损伤程度,通过检测肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白浓度、伊文思蓝漏出量及肺组织中紧密连接蛋白-1(ZO-1)表达评估肺血气屏障通透性,Western blotting法检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)的表达。结果:与正常通气组和生理盐水组比较,LIRI组肺组织形态学和微结构发生明显改变,肺损伤评分明显升高(P<0.05),肺血气屏障通透性明显增强(P<0.05),p-p38 MAPK的表达水平显著增高(P<0.05)。给予乌司他丁预处理后,肺组织形态学和微结构发生明显改善,肺损伤评分明显降低,肺血气屏障通透性明显减弱,p-p38 MAPK表达水平明显下降(P<0.05)。正常通气组与生理盐水组各指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:乌司他丁可减轻LIRI,降低肺血气屏障通透性,其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路有关。

紧密连接对肺通透性影响的研究进展

肺组织受损时,肺泡上皮屏障和肺微血管内皮屏障会随之遭到破坏,从而影响肺的通透性,造成严重的肺水肿。紧密连接是一种上皮与内皮细胞间均存在的蛋白复合物,具有栅栏和屏障功能,对肺通透性的调节至关重要。本文主要就紧密连接(TJs)对肺通透性影响的研究进展进行了综述,以便加深对这一问题的理解,从而为临床治疗提供新的思路。