芍药苷对慢性支气管炎模型大鼠Th17及Treg细胞亚群的影响

目的:探究芍药苷对慢性支气管炎(CB)大鼠Th17、Treg细胞亚群、肺功能的影响以及药理作用。方法:将SD大鼠采用复合诱导法建立CB模型,随机分成CB组(生理盐水)、低剂量芍药苷组(50 mg/kg)、中剂量芍药苷组(100 mg/kg)、高剂量芍药苷组(200 mg/kg)和核酪组(阳性对照,核酪口服液),10只;另设对照组(生理盐水)10只,造模后按照分组灌胃2 ml/100 g相应药物。给药完成后,观察大鼠一般情况并进行肺功能及血气分析;HE染色观察肺组织形态;流式细胞仪检测大鼠肺组织CD4^(+)T、CD8^(+)T、Th17(CD4^(+)IL-17^(+)T)、Treg(CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)T)细胞;ELISA法检测肺组织中IL-10、IL-22、IL-17水平。结果:CB组大鼠活动迟缓,毛色暗淡,身体卷缩,伴咳嗽、鼻腔潮湿,肺组织可见淋巴细胞浸润、支气管壁变形、黏膜阻塞等病变;芍药苷各组及核酪组上述症状及损伤不同程度缓解,高剂量组最轻。与对照组比较,CB组气道阻力、动脉血二氧化碳分压(Pa‐CO_(2))、IL-17、IL-22水平及CD4^(+)T、CD8^(+)T、Th17细胞、Th17/Treg、CD4^(+)T/CD8^(+)T均升高,动脉血氧分压(PaO_(2))、IL-10水平及Treg细胞均降低(P均<0.05);与CB组比较,低、中、高剂量芍药苷组气道阻力、PaCO_(2)、IL-17、IL-22水平及CD4^(+)T、CD8^(+)T、Th17细胞、Th17/Treg、CD4^(+)T/CD8^(+)T水平依次降低,PaO_(2)、IL-10水平及Treg细胞依次升高(P均<0.05);中剂量芍药苷组气道阻力等以上指标与核酪组相比差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:芍药苷可调节T淋巴细胞活化,减少Th17细胞分化,增加Treg细胞分化,减轻CB大鼠炎症水平及肺损伤。

芍药苷干预硼替佐米相关周围神经病变机制研究

目的基于网络药理学研究芍药苷改善硼替佐米相关周围神经病变的机制,为后续机制研究提供有针对性的指导。方法首先检测伴或不伴有硼替佐米相关周围神经病变骨髓瘤患者外周血血清中白细胞介素6的表达水平,然后获取芍药苷对应靶点。在PC12细胞系中观察芍药苷对硼替佐米毒性的治疗作用,并研究芍药苷是否会影响硼替佐米对骨髓瘤细胞的抑制作用。结果伴有硼替佐米相关周围神经病变骨髓瘤患者白细胞介素6的表达水平显著升高(P<0.01),白细胞介素6的水平与周围神经病变分级及药物毒性量表、疼痛评分量表的积分呈正相关性。网络药理学结果表明芍药苷可以作用于白细胞介素6。硼替佐米可以显著抑制PC12的活性,升高其IL6水平(P<0.01)。而芍药苷可以降低IL6的水平,但在骨髓瘤细胞中芍药苷不影响硼替佐米的药效。结论本研究初步揭示了芍药苷干预硼替佐米相关性周围神经病变的机制,为临床如何减轻化疗毒副作用提供了新的思路。

芍药苷调节丝氨酸/苏氨酸激酶/鼠双微基因2/p53信号通路对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响实验研究

目的:探讨芍药苷(PAE)调节丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)/鼠双微基因2(MDM2)/p53信号通路对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:以OCI-LY3细胞为研究对象,分别设置PAE低浓度组(15μmol/L PAE)、PAE中浓度组(30μmol/L PAE)、PAE高浓度组(60μmol/L PAE)、PAE高浓度+SC79(AKT激活剂)组(60μmol/L PAE+8μg/ml SC79),同时以未经处理的细胞为对照组。48 h后,分析细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期和凋亡变化,检测AKT/MDM2/p53信号通路相关蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,PAE低浓度组、PAE中浓度组、PAE高浓度组细胞凋亡率、p53表达、G_(0)/G_(1)期增加,细胞克隆形成数和细胞增殖率,p-AKT/AKT和p-MDM2/MDM2表达水平,以及G_(2)/M、S期降低(均P<0.05)。与PAE高浓度组比较,PAE高浓度+SC79组细胞凋亡率、p53表达、G_(0)/G_(1)期降低,细胞克隆形成数和细胞增殖率,p-AKT/AKT和p-MDM2/MDM2表达水平,以及G_(2)/M、S期增加(均P<0.05)。结论:PAE通过抑制AKT/MDM2上调p53表达,抑制DLBCL细胞增殖、细胞周期进展,诱导其凋亡。

高效液相色谱法在建昌帮酒制白芍无糖颗粒药用组分芍药苷、氧化芍药苷测定中的应用研究

目的:在高效液相色谱法基础上,研究建昌帮酒制无糖白芍和建昌帮酒制无糖白芍颗粒中芍药苷、氧化芍药苷组分的变化。方法:通过建昌帮炮制法炮制建昌帮酒制无糖白芍饮片及其颗粒,通过高效液相色谱法测定建昌帮炮制法炮制建昌帮酒制无糖白芍饮片及其颗粒中芍药苷和氧化芍药苷组分含量,对比组分含量变化规律。结果:建昌帮酒制无糖白芍芍药苷、氧化芍药苷组分含量分别为22.57mg/g~35.70mg/g、0.186mg/g~0.312mg/g,建昌帮酒制白芍无糖颗粒芍药苷、氧化芍药苷组分含量分别为22.16mg/g~30.54mg/g、0.157mg/g~0.235mg/g,表明建昌帮酒制无糖白芍在进行制粒加工后其药用组分芍药苷、氧化芍药苷含量变化不大。结论:将建昌帮酒制无糖白芍炮制加工为颗粒药剂,其药用组分变化量不大,临床药用受众范围更大,服用方式更高效便捷,此炮制加工工艺可在临床进行深入应用与拓展。

芍药苷通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对盐敏感性高血压大鼠血压和血管内皮功能的影响

目的:探讨芍药苷对盐敏感性高血压(SSH)大鼠血压和血管内皮功能的影响及其相关作用机制。方法:将50只Dahl盐敏感大鼠随机分为正常对照组(Control组)、高盐组(SSH组)、芍药苷组(PF组)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路激活剂组(740Y-P组)、芍药苷+740Y-P组(PF+740Y-P组),每组10只。各组大鼠进行4周给药干预。采用动物无创血压仪测量大鼠尾动脉收缩压、舒张压;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠主动脉病理变化;免疫组织化学染色检测大鼠主动脉组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠主动脉组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达。结果:与Control组比较,SSH组和740Y-P组大鼠主动脉血管内皮不完整,部分血管内皮脱落,且内膜明显增厚、外膜有大量沉积物;PF组大鼠主动脉血管病理损伤较SSH组明显减轻;PF+740Y-P组大鼠主动脉血管病理损伤较740Y-P组明显减轻,但较PF组明显加重。与Control组比较,SSH组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均升高,血清NO水平降低(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平降低,磷酸化(p)-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均升高(P<0.05)。与SSH组比较,PF组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均降低,血清NO水平升高(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均降低(P<0.05)。与PF组比较,PF+740Y-P组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均升高,血清NO水平降低(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平降低,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均升高(P<0.05)。与740Y-P组比较,PF+740Y-P组大鼠收缩压、舒张压、血清ET-1、TXB2水平均降低,血清NO水平升高(P<0.05);主动脉组织中eNOS表达水平升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值均降低(P<0.05)。结论:芍药苷可以有效降低SSH大鼠血压,并改善大鼠血管内皮功能,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活有关。

芍药苷对小鼠放射性肠炎的防治作用

目的 探讨芍药苷腹腔灌注对放射性肠炎的防治作用。方法 选择SPF清洁级C57/B6雌性小鼠60只,称重后随机分为6组各10只。除正常组外,放疗+生理盐水组、放疗+地塞米松组、放疗+芍药苷低剂量组、放疗+芍药苷中剂量组、放疗+芍药苷高剂量组小鼠均予以18 Gy 10 MeV电子线全腹部单次照射构建放射性肠炎模型,且每组在放疗前2 d、放疗当天及放疗后第1~13天连续每天分别腹腔灌注生理盐水、1.25 mg/kg地塞米松、30 mg/kg芍药苷、60 mg/kg芍药苷、90 mg/kg芍药苷,灌注量均为0.1 mL/10 g。放疗后观察小鼠排便、自主活动及毛发情况,每天称重;于放疗后第2天、第4天、第6天、第8天、第14天对小鼠进行剖腹探查,并取肠组织行HE染色观察;统计每组小鼠放疗后14 d内存活情况。结果 放疗+生理盐水组、放疗+地塞米松组、放疗+芍药苷低剂量组小鼠放疗后陆续出现解稀便、行动迟缓及毛发粗糙,体重明显下降,且在放疗后2 d即开始出现肠黏膜损伤;放疗+芍药苷中剂量组、放疗+芍药苷高剂量组小鼠在放疗后排便正常,活动自如,毛发光滑,体重波动小且明显高于其他放疗组(P均<0.05),肠道组织损伤时限延长且损伤程度较轻。正常组、放疗+芍药苷中剂量组、放疗+芍药苷高剂量组小鼠在放疗后14 d内均存活(100%);放疗+生理盐水组存活2只(20%),中位生存时间为5 d;放疗+地塞米松组存活1只(10%),中位生存时间为5.5 d;放疗+芍药苷低剂量组存活4只(40%),中位生存时间为8.5 d。生存曲线差异有统计学意义(P<0.05)。结论 18 Gy 10 MeV电子线全腹部单次照射可成功构建小鼠放射性肠炎模型;芍药苷腹腔灌注可以保护肠黏膜,缓解放疗所致消化道反应和体重下降,提高小鼠生存率,且较高剂量干预效果更优。

芍药苷抗肿瘤作用机制的研究进展

芍药苷是中药赤芍、白芍的主要成分,可用于治疗肿瘤、糖尿病、心脑血管病等疾病。恶性肿瘤是全球重大的健康问题,严重威胁人类健康,并且发病率和死亡率不断上升。芍药的抗肿瘤作用得到了广泛认可,但芍药苷尚未以单体形式应用于临床,其作用机制包括促进凋亡、抗炎、调节线粒体功能、调节自噬、抑制癌细胞增殖及调节免疫等。芍药苷可通过多种方式发挥抗癌作用,在抗肿瘤治疗领域前景广阔。本文对芍药苷抗肿瘤作用机制进行综述,以期为肿瘤的临床治疗提供理论依据。

芍药苷调节RhoA/ROCK信号通路对实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响

目的探讨芍药苷调节Ras同源基因家族蛋白A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)小鼠辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响。方法随机选出10只小鼠作为正常对照组,其余小鼠构建EAU模型,将造模成功小鼠随机平分为模型组、芍药苷组(10 mg·kg^(-1)芍药苷)、RhoA/ROCK信号通路激活剂溶血磷脂酸(LPA)组(25μmol·L^(-1)LPA)、芍药苷+LPA组(10 mg·kg^(-1)芍药苷+25μmol·L^(-1)LPA),每组10只。模型组和正常对照组给予等量生理盐水,给药每天1次,持续14 d。眼前节临床表现评分评估炎症严重程度;HE染色观察眼球组织病理形态;ELISA法检测血清中炎性因子转化生长因子-β(trarsforming growth factor beta,TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素23(IL-23)水平;流式细胞术检测脾脏Th17/Treg细胞水平;Western Blot法检测维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头状转录因子3(Foxp3)以及RhoA/ROCK信号通路蛋白表达。结果正常对照组小鼠无虹膜、结膜血管舒张充血,与正常对照组比,模型组小鼠出现虹膜血管舒张充血,前房、虹膜、睫状体和视网膜内均有大量炎性细胞膨胀,眼前节临床表现评分、IL-17和IL-23含量、Th17细胞水平、Th17/Treg、RORγt、RhoA、ROCK1蛋白水平明显升高(P<0.05),IL-10和TGF-β含量、Treg细胞水平、Foxp3水平明显下降(P<0.05)。与模型组比,芍药苷组小鼠虹膜血管充血症状明显缓解,眼前节临床表现评分、IL-17和IL-23含量、Th17细胞水平、Th17/Treg、RORγt、RhoA、ROCK1蛋白水平明显降低(P<0.05),IL-10和TGF-β含量、Treg细胞水平、Foxp3水平明显升高(P<0.05);而LPA加重了眼部损伤(P<0.05),逆转了芍药苷对EAU小鼠的改善效果(P<0.05)。结论芍药苷可通过下调RhoA/ROCK信号通路调节EAU小鼠Th17/Treg免疫平衡减轻EAU小鼠葡萄膜炎。

Box-Behnken响应面法优选紫斑牡丹中丹皮酚和芍药苷提取工艺

目的优选紫斑牡丹中丹皮酚和芍药苷的提取工艺。方法在单因素试验基础上,以液料比、提取时间和乙醇体积分数为影响因素,以丹皮酚和芍药苷提取率的总权重综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优选最佳提取工艺,并进行验证试验。结果最佳提取工艺为液料比28倍,提取时间150 min,乙醇体积分数52%。此工艺条件下,丹皮酚提取率为0.49%(RSD=1.33%,n=3),芍药苷提取率为5.38%(RSD=1.07%,n=3)。结论该提取工艺稳定、可行,可用于紫斑牡丹中丹皮酚和芍药苷的提取。

芍药苷对乳腺炎小鼠乳腺组织氧化应激损伤的信号通路研究

为探究芍药苷通过何种通路对乳腺炎小鼠氧化应激损伤的保护作用及作用机制,本研究选取产后6 d的BALB/c雌鼠,随机分为阴性对照组、模型组、芍药苷低剂量组(10 mg/kg)、芍药苷中剂量组(20 mg/kg)、芍药苷高剂量组(40 mg/kg)和地塞米松阳性对照组(5 mg/kg),每组10只,除阴性对照组外,其余小鼠均采用乳导管注入脂多糖(LPS)的方法建立乳腺炎模型,分别于造模前14 h、2 h以及造模后6 h对小鼠给药干预。造模结束24 h后剖检各组小鼠,观察乳腺组织形态变化,制备各组小鼠乳腺组织病理切片观察其病理变化。结果显示,与阴性对照组相比,模型组小鼠乳区红肿并伴有出血点,乳腺组织病变观察发现乳腺腺泡细胞内炎性细胞浸润明显,腺泡形态改变,表明乳腺炎小鼠模型可用于后续实验。取各组小鼠乳腺组织,采用荧光探针法测定小鼠乳腺组织中活性氧自由基(ROS)含量,采用免疫荧光组织化学技术测定小鼠乳腺组织中4-羟基壬烯酸(4-HNE)蛋白的表达水平,采用生化试剂盒检测小鼠乳腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,采用荧光定量PCR(RT-qPCR)和western blot分别检测小鼠乳腺组织中Nrf2信号通路关键分子核因子-红细胞2相关因子2(Nrf 2)、血红素氧合酶1(HO-1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶(GCLC)、醌氧化还原酶(NQO1)mRNA的转录及蛋白表达水平。结果显示,与阴性对照组相比,模型组小鼠乳腺组织中ROS、MDA含量及4-HNE蛋白表达水平均极显著升高(P<0.01),GSH-Px和SOD酶活性及含量均极显著降低(P<0.01),Nrf2、HO-1、GCLC和NQO1 mRNA的转录水平均显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01),其蛋白表达水平与mRNA转录水平趋势基本一致;与模型组相比,各给药组小鼠乳腺组织病理损伤明显减轻,小鼠乳腺组织中ROS、MDA含量以及4-HNE蛋白表达水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),GSH-Px、SOD含量极显著或显著升高(P<0.01或P<0.05);Nrf2、HO-1、GCLC和NQO1mRNA的转录水平均显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01),其蛋白表达水平与mRNA转录水平趋势基本一致。综上所述,本研究证实芍药苷能够治疗小鼠乳腺炎及小鼠乳腺组织氧化损伤,且高剂量芍药苷的治疗作用最佳,其具体作用机制与芍药苷显著激活宿主细胞中Nrf2信号通路拮抗氧化应激损伤有关,该结果为芍药苷在动物乳腺炎预防和治疗中的应用提供了科学依据。

川赤芍总苷及其主成分芍药苷对痤疮相关炎症的抑制作用研究

研究了川赤芍总苷及其主成分芍药苷对痤疮相关炎症的抑制作用。通过制备并基于高效液相色谱分析川赤芍总苷主活性成分含量;建立痤疮丙酸杆菌(Cropionibacterium acnes,C.acnes)诱导THP-1细胞炎症模型;采用CCK8法检测细胞相对活力,ELISA法快速检测细胞IL-1β、IL-8的分泌量,并用Western blot法验证。结果表明:在100μg/mL质量浓度下川赤芍根提取物能显著抑制C.acnes刺激引起的炎症因子IL-1β、IL-8(p<0.01)。从川赤芍根提取物中提取的川赤芍总苷,在相同浓度下对炎症因子IL-1β抑制率提高了20%。川赤芍总苷中芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷含量分别为0.64%,26.3%,1.17%。其中芍药苷的含量最高,且对C.acnes刺激引起的炎症因子IL-1β抑制效果显著(p<0.01)。此外,芍药苷还能降低C.acnes刺激引起的活性氧和乳酸脱氢酶。综上所述,川赤芍总苷及其主成分芍药苷对改善C.acnes引起的皮肤炎症具有潜在的治疗价值。

芍药苷抗炎作用机制研究进展

炎性反应是对外界刺激的异常免疫反应,可导致多器官组织功能损伤障碍。中医学运用芍药治疗炎性反应已有近千年历史,芍药苷是从芍药干燥根中提取的主要天然活性成分,具有广泛的抗炎和免疫调节作用,临床应用潜力巨大。本文对芍药苷在抗炎作用机制以及研究现状予以综述,以期为芍药苷抗炎作用机制提供理论依据,也为芍药苷进一步的开发和应用提供参考。

芍药苷针对围绝经期综合征的作用机制研究进展

围绝经期综合征(climacteric syndrome,CMS)是绝经前后女性因其卵巢功能衰退、雌激素水平波动或下降,而出现的烦躁易怒、失眠多梦、潮热汗出等一系列症状。现代医学治疗CMS是以激素替代疗法(hormone replacement thera-py,HRT)为主要手段,存在不良反应大、长期使用危害性大影响疗效等问题。中医以肝郁气滞为CMS的主要病因,而白芍养血柔肝、养阴润燥,具有疏肝解郁的功效,是近代中医临床上治疗CMS的高频用药。芍药苷(paeoniflorin,PF)是中药白芍的主要活性成分,已知具有抗抑郁、保肝、保护神经、镇静催眠等多种药理作用。对国内外相关文献进行梳理归纳,就PF在肝郁气滞所致CMS中情绪障碍、睡眠障碍、认知障碍、骨质疏松症、血管舒缩症状5个方面的药理作用及机制进行综述,发现PF通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴活性,保护海马神经、抑制海马炎症反应,调整肠道中的炎症因子表达发挥抗抑郁作用可改善CMS的情绪障碍;PF可通过调节海马脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)通路等途径来缓解睡眠障碍;PF能通过提高海马神经因子水平、缓解神经元损伤,激活腺苷A受体来起到改善CMS认知障碍的作用;PF可以促进成骨生成、抑制成骨细胞凋亡和破骨细胞的生成,从而改善骨质疏松症。此外,还讨论了PF药物动力学中生物利用度低及PF低毒性的特点。综上,PF的临床应用提供借鉴依据,促进对其进一步深入研究。

芍药苷对烫伤大鼠的治疗作用及基于网络药理学的机制探讨

目的:研究芍药苷对烫伤大鼠的治疗作用,并基于网络药理学和分子对接技术探讨芍药苷治疗烧伤的作用机制。方法:建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型,通过观察芍药苷对大鼠创面外观、计算创面愈合率,创面组织病理学变化;并运用Pubchem、Pahrmmapper、GeneCards等数据库获取芍药苷及烧伤相关靶点,利用STRING数据库和Cytoscape软件,构建并可视化中药(化合物)-靶点-疾病多层次分子网络,通过MCODE分析进行核心基因的筛选,并进行基因本体(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析。最后,利用AutoDock Vina进行分子对接验证。结果:芍药苷能明显促进烫伤大鼠的创面愈合,并促进血管生成及新生上皮形成,减少局部炎症细胞浸润;进一步筛选出芍药苷潜在化学靶点337个,芍药苷与烧伤疾病之间共有靶点138个,主要包括基质金属蛋白酶1(MMP1),肿瘤坏死因子(TNF)等。富集分析结果显示,芍药苷治疗烧伤的核心靶点主要通过PI3K/AKT信号通路、MAPK信号通路等,分子对接计算结果表明,芍药苷与蛋白激酶B1(AKT1)、白蛋白(ALB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、TNF、血管内皮生长因子A(VEGFA)等核心靶点有着较好的结合活性。结论:芍药苷通过抑制炎症反应、调控早期微循环、促进血管生成来达到治疗烧伤的目的。本研究证实了芍药苷对烧伤的治疗作用,并揭示相关分子机制。

壳聚糖-环糊精接枝物的制备及其对芍药苷经皮渗透作用研究

目的:制备壳聚糖-环糊精接枝物并考察其对芍药苷经皮渗透的促进作用。方法:两步法合成壳聚糖-环糊精接枝物,利用核磁共振和傅里叶变换-红外光谱仪进行表征,元素分析法测定氨基取代度,并以离体大鼠腹皮为渗透屏障,采用Franz扩散池法进行体外透皮试验,以芍药苷24 h内单位面积的累计透过量为评价指标,考察不同浓度接枝物的促渗效果。结果:成功制备出氨基取代度为7%的壳聚糖-环糊精接枝物,不同浓度接枝物对芍药苷经皮渗透的促进作用不同。24 h内,在质量浓度为0.5%的壳聚糖-环糊精存在下,芍药苷单位面积的累计透过量为384.68μg·cm-2,促渗倍数为1.5865。结论:壳聚糖-环糊精接枝物可促进芍药苷经皮渗透,质量浓度为0.5%时效果最佳。

芍药苷-6'-O-苯磺酸酯在甲醇中降解杂质结构解析和降解机制研究

目的:探究芍药苷-6’-O-苯磺酸酯在甲醇中的降解杂质,确证其结构,阐明降解机理。方法:将芍药苷-6’-O-苯磺酸酯溶于甲醇中,在加热的条件下生成降解杂质,通过硅胶柱层析和制备液相分离得到2个降解杂质,采用核磁共振、红外、质谱等技术确证杂质的结构,并对其降解机理进行推理。结果:鉴定了2个降解杂质结构,推测出芍药苷-6’-O-苯磺酸酯在甲醇中的降解机理。结论:为芍药苷-6’-O-苯磺酸酯的杂质研究提供了物质基础,同时也为其工艺路线的选择、分析方法开发以及质量研究与控制提供较为科学的依据。

牡丹皮配方颗粒中芍药苷亚硫酸酯定量分析方法的建立及应用

目的:建立牡丹皮配方颗粒中芍药苷亚硫酸酯的定量分析方法,采用该方法对市售16批牡丹皮配方颗粒中芍药苷亚硫酸酯含量进行测定,考察牡丹皮饮片经硫熏后对配方颗粒中芍药苷含量的影响。方法:采用高效液相色谱-三重四级杆质谱联用技术,色谱柱为Aglient Eclipse Plus C18(2.1 mm×150 mm,3µm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,柱温35℃,流速0.4 mL·min-1,质谱采用电喷雾(ESI)离子源、负离子模式、多反应监测(MRM)的扫描方式进行检测。结果:牡丹皮配方颗粒中芍药苷亚硫酸酯检测质量浓度的线性范围为0.050~1.000µg·mL-1(r=0.999),精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD均小于2.5%;平均加样回收率为96.68%(RSD=2.17%,n=9);检出限为3.1µg·g^(-1),定量下限为10.3µg·g^(-1)。16批市售牡丹皮配方颗粒中芍药苷亚硫酸酯含量范围11.9~21.8µg·g^(-1)。结论:所建方法可为评估牡丹皮饮片的硫熏程度对牡丹皮配方颗粒质量的影响提供新参考。

高效液相色谱法测定心脑康胶囊中芍药苷的不确定度评定

建立心脑康胶囊中芍药苷含量的不确定度评定方法,考察《中华人民共和国药典》(2020年版)一部心脑康胶囊中芍药苷含量测定的影响因素。利用建立的数学模型,可知芍药苷含量测定的不确定度来源包括芍药苷对照品的纯度、称取质量、对照品溶液的体积、样品的称取质量、样品溶液体积、平均装量、样品的重复性测定及液相色谱仪测量偏差,评估并量化各不确定度分量,合成得到心脑康胶囊中芍药苷含量的不确定度。结果表明,心脑康胶囊中芍药苷含量为0.68 mg时,扩展不确定度为0.018 mg(k=2)。不确定度来源主要为对照品溶液体积、样品溶液体积、样品重复性测定及液相色谱仪。测量过程中可选择经过校准且精度较高的玻璃量器,控制环境温度接近20℃,并加强液相色谱仪的定期维护保养,以提高测定结果的准确性。

高效液相色谱法测定平喘合剂中芍药苷和黄芩苷

建立高效液相色谱法同时测定平喘合剂中芍药苷、黄芩苷含量。以Agilent ZORBAX-C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,芍药苷、黄芩苷的检测波长分别为232、278 nm。芍药苷、黄芩苷的质量浓度分别在1.180~5.900、9.450~47.250μg/mL范围内与其色谱峰面积线性关系良好,相关系数均大于0.999。样品平均回收率分别为99.83%、102.31%,测定结果的相对标准偏差分别为2.07%、1.29%(n=6)。该方法简便、准确度高、专属性好,可用于平喘合剂的质量控制。

芍药苷通过JNK/NEK7/NLRP3通路缓解脓毒症相关急性肾损伤

目的:基于细胞焦亡和JNK/NEK7/NLRP3通路,研究芍药苷(PF)对小鼠脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)的作用和机制。方法:腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠SA-AKI模型。雄性6~8周龄C57BL/6J小鼠24只,随机数字表法分为4组:对照(control,Con)组(在相同时间腹腔注射等量含DMSO的PBS);LPS组(腹腔注射LPS 15 mg/kg);LPS+PF组(造模前30 min腹腔注射PF 50 mg/kg),LPS+PF+anisomycin组(造模前30 min腹腔注射PF 50 mg/kg和JNK激动剂anisomycin 20 mg/kg)。造模后24 h取材,HE染色观察肾组织病理变化,进行肾损伤Paller评分;ELISA检测肾损伤标志物:血肌酐(Scr)、肾损伤分子1(KIM-1)和炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18水平;Western blot检测磷酸化JNK(p-JNK)、NIMA相关激酶7(NEK7)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、gasdermin D的N端片段(GSDMD-N)蛋白变化。结果:相较于Con组,LPS组HE染色显示肾组织发生充血水肿,肾小管扩张管腔内出现颗粒或细胞样管型,肾间质出现充血水肿,Paller评分升高,Scr、血清KIM-1水平升高(P<0.05),肾组织IL-1β、IL-18水平升高(P<0.05),p-JNK、NEK7、NLRP3、GSDMD-N表达上升(P<0.05)。相较于LPS组,LPS+PF组HE染色及肾损伤Paller评分显示肾组织病理损伤情况减轻,Scr、血清KIM-1水平降低(P<0.05),肾组织IL-1β、IL-18水平降低(P<0.05),p-JNK、NEK7、NLRP3、GSDMD-N蛋白表达下降(P<0.05)。相较于LPS+PF组,LPS+PF+anisomycin组HE染色及肾损伤Paller评分显示肾组织病理损伤加重,Scr、血清KIM-1水平升高(P<0.05),肾组织IL-1β、IL-18水平升高(P<0.05),p-JNK、NEK7、NLRP3、GSDMD-N表达上升(P<0.05)。结论:芍药苷可能通过抑制JNK/NEK7/NLRP3信号通路,减轻细胞焦亡和炎症反应,改善SA-AKI。