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Silencing of peroxiredoxin 2 suppresses proliferation and Wnt/β-catenin pathway,and induces senescence in hepatocellular carcinoma
1
作者 XUEGANG YANG XIANHONG XIANG +3 位作者 GUOHUI XU SHI ZHOU TIANZHI AN ZHI HUANG 《Oncology Research》 SCIE 2024年第1期213-226,共14页
Hepatocellular carcinoma(HCC),a common malignancy worldwide,still lacks effective clinical treatment.The study aimed to investigate the oncogenes that affect the progression of HCC and their possible mechanisms.In our... Hepatocellular carcinoma(HCC),a common malignancy worldwide,still lacks effective clinical treatment.The study aimed to investigate the oncogenes that affect the progression of HCC and their possible mechanisms.In our study,we initially confirmed a higher level of PRDX2 in the bile of HCC patients compared to those with choledocholithiasis by 2-DE,LC-MS,and ELISA.Subsequently,we demonstrated the high expression of peroxiredoxin 2(PRDX2)in HCC based on the TCGA database and clinical sample analysis.Furthermore,PRDX2 overexpression enhanced the viability of HCC cells.And PRDX2 silencing induced senescence of HCC cells.In vivo,knockdown of PRDX2 significantly reduced the weight of xenograft tumors.PRDX2 also was found to activate the Wnt/β-catenin pathway by inducingβ-catenin nuclear translocation.Consequently,we proved that silencing PRDX2 could inhibit proliferation and Wnt/β-catenin pathway while promoting senescence in HCC cells. 展开更多
关键词 peroxiredoxin 2 Hepatocellular carcinoma Wnt/β-catenin pathway SENESCENCE PROLIFERATION
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Peroxiredoxins家族在H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡过程中的表达
2
作者 沈薇 朱燕 罗爱月 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期68-72,共5页
目的探讨Peroxiredoxins(Prdxs)家族在H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡过程中的作用。方法选取在华中科技大学同济医学院附属同济医院接受体外受精-胚胎移植技术(in vitro fertilization embryo transfer technology,IVF-ET)的年轻患者的... 目的探讨Peroxiredoxins(Prdxs)家族在H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡过程中的作用。方法选取在华中科技大学同济医学院附属同济医院接受体外受精-胚胎移植技术(in vitro fertilization embryo transfer technology,IVF-ET)的年轻患者的颗粒细胞,经体外培养并给予H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡,检测Prdx1~6 mRNA表达情况。结果选取患者的激素水平及窦卵泡数(AFC)提示卵巢处于良好状态,体外培养颗粒细胞同时表达卵泡刺激素受体(FSHR)和黄体生成素受体(LHR),符合原代颗粒细胞表型。在H_(2)O_(2)诱导下,细胞核皱缩,发生凋亡。实时定量聚合酶链反应(qPCR)显示,H_(2)O_(2)处理组Prdx1、2、4 mRNA的表达水平显著高于对照组,尤其Prdx4;而Prdx3和Prdx6 mRNA的表达水平低于对照组,差异均具有统计学意义;Prdx5 mRNA的表达水平相对于对照组有升高的趋势,但差异无统计学意义。结论Prdxs可能通过调节颗粒细胞凋亡过程,从而在人卵泡闭锁甚至卵巢衰老过程中发挥重要调节作用。 展开更多
关键词 peroxiredoxinS 颗粒细胞 凋亡 过氧化氢
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Peroxiredoxin Ⅰ和Ⅱ在小鼠输卵管和子宫的分布与表达 被引量:4
3
作者 史河秀 谢美容 +2 位作者 林翠英 王建新 王世鄂 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期345-347,361,共4页
目的:观察PeroxiredoxinⅠ和Ⅱ(PrxⅠ和Ⅱ)在小鼠输卵管和子宫的分布及其周期性变化。方法:免疫组织化学和蛋白免疫印迹技术。结果:在输卵管中,PrxⅠ和Ⅱ免疫阳性反应见于输卵管上皮;而子宫内,PrxⅠ免疫阳性反应分布于内膜上皮、腺体上... 目的:观察PeroxiredoxinⅠ和Ⅱ(PrxⅠ和Ⅱ)在小鼠输卵管和子宫的分布及其周期性变化。方法:免疫组织化学和蛋白免疫印迹技术。结果:在输卵管中,PrxⅠ和Ⅱ免疫阳性反应见于输卵管上皮;而子宫内,PrxⅠ免疫阳性反应分布于内膜上皮、腺体上皮和内膜基质,而PrxⅡ主要见于内膜基质。蛋白免疫印迹技术也显示这两型蛋白在输卵管和子宫均表达,动情期和动情间期这两型蛋白在输卵管和子宫中的表达水平无显著性差异。结论:提示PrxⅠ与Ⅱ在输卵管和子宫中表达稳定,可能为受精和早期胚胎发育提供抗氧化的良好微环境。 展开更多
关键词 peroxiredoxin peroxiredoxin 输卵管 子宫 小鼠
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刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析 被引量:14
4
作者 刘转转 王海龙 +3 位作者 殷国荣 马广源 张建中 凡振伟 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期334-337,共4页
目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PC... 目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE进行鉴定,重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。结果从弓形虫RH株cDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段,并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结论RH株刚地弓形虫peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 peroxiredoxin 克隆 原核表达 免疫原性
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人源噬菌体抗体对Peroxiredoxin Ⅰ高表达肺腺癌细胞增殖的抑制作用 被引量:5
5
作者 罗弋 庞华 +3 位作者 李淑杰 曹辉 李少林 樊春波 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1061-1066,共6页
背景与目的:研究表明过氧化物酶Peroxiredoxin Ⅰ(Prx Ⅰ)与癌症的发展有密切关系。我们已通过噬菌体展示技术构建了肺腺癌相关的人源单链抗体库。本研究对该库进行筛选,得到抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体,并检测其对肺腺癌细胞A549增殖的抑... 背景与目的:研究表明过氧化物酶Peroxiredoxin Ⅰ(Prx Ⅰ)与癌症的发展有密切关系。我们已通过噬菌体展示技术构建了肺腺癌相关的人源单链抗体库。本研究对该库进行筛选,得到抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体,并检测其对肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法:PCR法检测TG1中scFv基因插入率,1%琼脂糖凝胶电泳鉴定Sfi Ⅰ和Not Ⅰ双酶切质粒的结果,以A549细胞及在肺癌中高表达的抗氧化蛋白Prx Ⅰ为靶抗原分别对抗体库进行3轮筛选富集。将阳性克隆用IPTG诱导表达并进行检测。放射性核素计数法测定细胞单链抗体内摄水平,MTT法及流式细胞术检测单链抗体对A549细胞的增殖抑制和凋亡情况,免疫印迹法检测抗体作用A549细胞后Prx Ⅰ的表达水平。结果:scFv基因插入率为77%,双酶切鉴定检测到目的条带。在亲和筛选过程中,肺腺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮为第1轮的180倍。ELISA法检测到在随机选取的10个克隆中,有6个与A549细胞呈阳性反应,阳性率60%。SDS-PAGE及ELISA检测证实得到人源抗PrxI肺腺癌单链抗体。被A549细胞内摄的单链抗体介导了细胞的凋亡以及细胞内Prx Ⅰ蛋白表达水平的下降。结论:从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体。单链抗体与肺腺癌细胞有特异性亲和力,并能有效抑制其增殖。 展开更多
关键词 肺腺癌 噬菌体抗体库 单链抗体 peroxiredoxin I 增殖抑制
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抗氧化蛋白Peroxiredoxin家族研究进展 被引量:41
6
作者 章波 向渝梅 白云 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期352-355,共4页
Peroxiredoxin是新近发现的抗氧化酶系 ,广泛存在于各种生物体内。根据分子所具有保守半胱氨酸数目的不同 ,哺乳动物的 6个Peroxiredoxin分为 2个亚类。Peroxiredoxin除了具有共同的抗氧化功能外 ,它还具有其它的功能如细胞增殖与分化... Peroxiredoxin是新近发现的抗氧化酶系 ,广泛存在于各种生物体内。根据分子所具有保守半胱氨酸数目的不同 ,哺乳动物的 6个Peroxiredoxin分为 2个亚类。Peroxiredoxin除了具有共同的抗氧化功能外 ,它还具有其它的功能如细胞增殖与分化、细胞信号转导及保护其它蛋白的氧化等。对该类蛋白分子结构的深入研究已初步揭示其抗氧化的作用机制。Peroxiredoxin与肿瘤关系密切 ,它可能成为一个肿瘤标记物 ,可为肿瘤的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 抗氧化 蛋白家族
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PeroxiredoxinII在小鼠卵巢中卵泡、GV卵、MII卵和植入前胚的表达和定位 被引量:3
7
作者 王世鄂 黄威权 +2 位作者 付建芳 孙岚 吕葆真 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期647-651,共5页
目的 观察PeroxiredoxinII在小鼠卵巢中卵泡和植入前胚的表达与定位 ,为探讨PeroxiredoxinII在小鼠卵母细胞发育成熟和早期胚发育的作用提供依据。 方法 根据小鼠PeroxiredoxinIImRNA序列 (AccessionNo :BC0 0 2 0 34)设计引物 ,对... 目的 观察PeroxiredoxinII在小鼠卵巢中卵泡和植入前胚的表达与定位 ,为探讨PeroxiredoxinII在小鼠卵母细胞发育成熟和早期胚发育的作用提供依据。 方法 根据小鼠PeroxiredoxinIImRNA序列 (AccessionNo :BC0 0 2 0 34)设计引物 ,对小鼠生发泡完整卵细胞 (GV卵 )中的PeroxiredoxinII可能编码区进行扩增。同时 ,取生后 3d和 2月小鼠的卵巢 ,免疫细胞化学染色显示PeroxiredoxinII蛋白在卵泡中的分布。此外 ,运用RT PCR和免疫细胞化学染色方法观察PeroxiredoxinII在植入前胚的表达。 结果 从GV卵中扩增所得 6 84bp的cDNA序列 ,与小鼠PeroxiredoxinII具有 99%同源性 ;其推导的编码氨基酸序列与小鼠PeroxiredoxinII氨基酸序列完全相同。免疫细胞化学染色显示 :生后 3d小鼠卵巢内未见PeroxiredoxinII阳性反应 ;2月小鼠卵巢内阳性反应见于初级卵泡、次级卵泡和近成熟卵泡中卵母细胞的胞质。卵泡细胞未见PeroxiredoxinII阳性反应。RT PCR结果表明 :PeroxiredoxinIImRNA在GV卵中处高水平 ,从MII卵开始略有下降 ,在 4 细胞胚和早期囊胚期间未检到。免疫细胞化学染色显示 :GV卵、MII卵、1 细胞胚、2 细胞胚、4 细胞胚、8 细胞胚、桑椹胚和早期囊胚均呈PeroxiredoxinII阳性反应。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 卵巢 植入前胚 RT-PCR 免疫细胞化学 小鼠
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PeroxiredoxinⅡ在小鼠早胚发育中的作用及机理 被引量:5
8
作者 王世鄂 黄威权 +1 位作者 孙岚 吕葆真 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期300-302,共3页
目的观察PeroxiredoxinⅡ对小鼠植入前胚发育的影响,并探讨其可能的机制。方法收集昆明种小鼠的1细胞胚,采用微滴培养法连续培养48h,观察不同浓度PeroxiredoxinⅡ抗体对植入前胚发育的影响,以胚胎发育到各期的比例为判断发育效果的标准... 目的观察PeroxiredoxinⅡ对小鼠植入前胚发育的影响,并探讨其可能的机制。方法收集昆明种小鼠的1细胞胚,采用微滴培养法连续培养48h,观察不同浓度PeroxiredoxinⅡ抗体对植入前胚发育的影响,以胚胎发育到各期的比例为判断发育效果的标准。同时,应用共聚焦扫描显微镜术结合特异性荧光探针2′,7′二氯氢化荧光素双乙酸酯,检测小鼠胚中氧自由基水平。结果抗体添加组和未添加组的1细胞胚经24h培养后96%以上发育成2细胞胚,但经48h培养,抗体添加组的胚发育明显受抑,多数停滞于2细胞期。激光共聚焦成像的结果表明,PeroxiredoxinⅡ抗体添加组的2细胞胚内荧光强度明显增强。结论PeroxiredoxinⅡ抗体可引起2细胞胚发育阻滞,这可能与胚内的氧自由基水平升高有关,提示植入前胚内PeroxiredoxinⅡ可减少或消除细胞内氧自由基,促进植入前胚的发育。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 植入前胚 氧自由基 微滴培养法 共聚焦扫描显微镜 小鼠
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电针预处理通过上调Peroxiredoxin 6减轻大鼠脑缺血再灌注损伤 被引量:8
9
作者 高杨 孙思斯 +4 位作者 刘曌宇 李立亚 张治 陈绍洋 王强 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期507-513,共7页
目的:探讨Peroxiredoxin 6(Prx 6)在电针预处理诱导的SD大鼠脑缺血耐受中的作用。方法:健康雄性SD大鼠80只,随机分为4组:假手术组(Sham组,n=16)、单纯电针组(Electro acupuncture组,EA组,n=16)、局灶性脑缺血再灌注组[通过大脑中动脉栓... 目的:探讨Peroxiredoxin 6(Prx 6)在电针预处理诱导的SD大鼠脑缺血耐受中的作用。方法:健康雄性SD大鼠80只,随机分为4组:假手术组(Sham组,n=16)、单纯电针组(Electro acupuncture组,EA组,n=16)、局灶性脑缺血再灌注组[通过大脑中动脉栓塞制作脑缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,MCAO组,n=32],其中2、6、12、24、48 h各4只和电针预处理组(EA+MCAO组,n=16)。通过梗死容积及神经功能评分(Garcia评分)评价脑损伤程度;通过Western Blot检测Prx 6在脑缺血再灌注后的表达水平;通过Western Blot和免疫组织化学染色法检测电针预处理对Prx 6表达的影响。结果:与MCAO组相比,EA+MCAO组梗死容积减少,神经功能评分显著改善(P<0.05);与Sham组相比,Prx 6在MCAO模型后再灌注24 h时表达最高(P<0.05);与Sham组相比,再灌注后24 h时MCAO组Prx 6表达水平升高(P<0.05);与MCAO组相比,再灌注后24 h时EA+MCAO组Prx 6的表达水平进一步升高(P<0.05)。结论:电针预处理通过促进缺血再灌注后Prx 6的表达升高而发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 电针 预处理 peroxiredoxin6 大脑中动脉栓塞 缺血再灌注 大鼠
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人源抗PeroxiredoxinⅠ肺腺癌噬菌体抗体的制备及鉴定 被引量:3
10
作者 罗弋 庞华 +4 位作者 李淑杰 曹辉 李少林 樊春波 王洁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期30-34,共5页
目的构建人源噬菌体抗体库,从中筛选出抗PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)肺腺癌人源单链抗体。方法提取肺癌患者癌旁淋巴结组织,通过RT-PCR扩增出重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),再经剪切-重叠-延伸PCR(SOE-PCR)将VH和VL连接得到单链抗... 目的构建人源噬菌体抗体库,从中筛选出抗PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)肺腺癌人源单链抗体。方法提取肺癌患者癌旁淋巴结组织,通过RT-PCR扩增出重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),再经剪切-重叠-延伸PCR(SOE-PCR)将VH和VL连接得到单链抗体(ScFv);将双酶切后的ScFv基因片段克隆入噬菌体表达载体pCANTAB5E,得到初级噬菌体抗体库。PCR检测TG1中ScFv基因插入率;1%琼脂糖凝胶电泳鉴定SfiI和NotI双酶切质粒的结果;以肺腺癌细胞株D549及在肺癌中高表达的抗氧化蛋白PrxI为靶抗原对抗体库进行筛选富集。将阳性克隆用IPTG诱导表达。用SDS-PAGE及Westernblotting鉴定该抗体;用ELISA法、免疫细胞化学法鉴定该抗体与人肺腺癌细胞的结合特异性。结果成功构建噬菌体单链抗体库。ScFv基因插入率为77%,双酶切鉴定检测到目的条带。在亲和筛选过程中,肺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮为第1轮的180倍。随机选取10个克隆,通过ELISA法检测到其中6个与A549细胞呈阳性反应,阳性率为60%。SDS-PAGE及Westernblotting证实抗体得到可溶表达。ELISA及免疫细胞化学检测表明抗体能相对特异地与肺腺癌细胞结合。结论成功构建肺腺癌人源噬菌体抗体库,并从中筛选得到能相对特异地与高表达PrxI的肺腺癌细胞D549结合的单链抗体。 展开更多
关键词 噬菌体抗体库 单链抗体 peroxiredoxin 肺腺癌
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Peroxiredoxin 1基因沉默对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721放射增敏的研究 被引量:3
11
作者 高麦仓 张龙 +1 位作者 张殿增 张军 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期569-575,共7页
目的探讨Peroxiredoxin(Prx)1基因的小分子干扰RNA(si RNA)对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的放射增敏作用及机制。方法通过逆转录PCR方法研究Prx家族(Prx1~6)在人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中的mRNA表达谱;使用si RNA敲低HepG2和S... 目的探讨Peroxiredoxin(Prx)1基因的小分子干扰RNA(si RNA)对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的放射增敏作用及机制。方法通过逆转录PCR方法研究Prx家族(Prx1~6)在人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中的mRNA表达谱;使用si RNA敲低HepG2和SMMC-7721细胞高表达的Prx1亚型为Prx1 si RNA转染组,另设空白对照组、阴性对照组(Prx1si Neg),分别经不同剂量X射线照射后,克隆形成法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞内活性氧水平、细胞周期及凋亡情况。结果 HepG2和SMMC-7721细胞均高表达Prx1、Prx3和Prx5。与对照组相比,两种细胞Prx1 si RNA转染组在8 Gy X线照射后其剂量生存曲线明显左移,照射12 h后细胞周期出现G2-M阻滞,24 h后细胞凋亡率及1 h后细胞内ROS水平明显升高(P〈0.05)。Prx1 si RNA转染组放射增敏比在1.38~1.45之间。结论小分子干扰RNA对人肝癌HepG2和SMMC-7721细胞有明显的放射增敏作用,其机制可能与细胞周期阻滞及细胞内活性氧水平升高有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 放射敏感性 peroxiredoxin 1 RNA干扰 细胞内活性氧 细胞周期阻滞 放射增敏
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沉默PeroxiredoxinⅠ基因对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响 被引量:7
12
作者 郭启帅 黄曦 李少林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1119-1123,共5页
目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-... 目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-PrxⅠ组、pGPU6-HK+照射(ionizing radiation,IR)组、pGPU6-PrxⅠ+IR组。用6MVX线照射裸鼠瘤组织,测量肿瘤体积,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;免疫组化检测肿瘤组织中PrxⅠ和Caspase3蛋白表达;电镜观察肿瘤细胞超微结构,Western blot测定肿瘤组织中γ-H2AX和Rad51蛋白表达。结果成功构建了裸鼠移植瘤模型,pGPU6-PrxⅠ+IR组裸鼠移植瘤生长肿瘤明显迟缓,体积较小,抑瘤率为79.76%,与pGPU6-PrxⅠ(34.92%)和pGPU6-HK+IR(56.94%)比较差异具有显著性(P<0.05);给予pGPU6-PrxⅠ及IR处理后,肿瘤细胞凋亡和坏死增多,PrxⅠ和Rad51蛋白表达减少,而Caspase3和γ-H2AX蛋白表达增加,以pGPU6-PrxⅠ+IR组更为显著,其Rad51蛋白下降了84.8%,γ-H2AX蛋白表达升高5.6倍(P<0.05)。结论沉默PrxⅠ表达可提高乳腺癌移植瘤的放射敏感性,其作用机制与DNA双链断裂增加、DNA损伤后修复能力降低有关。PrxⅠ可能是一个理想的乳腺癌放射增敏分子靶点。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 放射敏感性 DNA双链断裂 DNA损伤修复 乳腺癌
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过氧化物酶2-Cys Peroxiredoxins的研究进展 被引量:2
13
作者 张悦丽 李新国 +2 位作者 李玲 万书波 王涛 《生命科学研究》 CAS CSCD 2010年第6期555-559,共5页
Peroxiredoxins是最近发现的一类过氧化物酶家族,其中的一个亚类2-Cys Peroxiredoxins具有Peroxiredoxins的典型特征,在生物体内分布广泛且含量较多,可占哺乳动物细胞可溶性蛋白的1%,且具有独特的催化活性;此外2-Cys Peroxiredoxins具... Peroxiredoxins是最近发现的一类过氧化物酶家族,其中的一个亚类2-Cys Peroxiredoxins具有Peroxiredoxins的典型特征,在生物体内分布广泛且含量较多,可占哺乳动物细胞可溶性蛋白的1%,且具有独特的催化活性;此外2-Cys Peroxiredoxins具有抗氧化(清除活性氧)、信号传导和分子伴侣的功能,对生物体正常的生命活动起重要作用. 展开更多
关键词 2-Cys peroxiredoxinS 抗氧化 信号传导 分子伴侣 催化机制
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靶向PeroxiredoxinⅠ基因的shRNA真核表达载体的构建及生物学功能鉴定 被引量:5
14
作者 郭启帅 黄曦 +1 位作者 张俊 李少林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期132-136,共5页
目的构建针对PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,观察下调PrxⅠ基因表达后对乳腺癌MCF-7细胞生物学功能的影响。方法构建针对PrxⅠ基因的shRNA真核表达载体,经酶切和测序鉴定正确后,转染入... 目的构建针对PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,观察下调PrxⅠ基因表达后对乳腺癌MCF-7细胞生物学功能的影响。方法构建针对PrxⅠ基因的shRNA真核表达载体,经酶切和测序鉴定正确后,转染入乳腺癌MCF-7细胞。流式细胞术检测细胞转染效率,RT-PCR及Western blot分别检测干扰前后PrxⅠmRNA和蛋白表达,MTT法及流式细胞术检测干扰前后乳腺癌MCF-7细胞体外的增殖情况及细胞周期和细胞凋亡。结果成功构建真核表达载体pGPU6-HK、pGPU6-Prx1、pGPU6-Prx2、pGPU6-Prx3、pGPU6-Prx4,并转染入乳腺癌MCF-7细胞中,转染率为80%左右,RT-PCR及Westernblot分析表明转染pGPU6-Prx1、pGPU6-Prx2、pGPU6-Prx3、pG-PU6-Prx4后的细胞EGFR mRNA和蛋白表达均不同程度地受抑,以pGPU6-Prx3为甚,其mRNA和蛋白表达抑制率分别为82.6%和80.5%。与未转染组和pGPU6-HK组相比,pGPU6-Prx3组的细胞生长明显延迟(P<0.05),细胞凋亡率显著增加,G1期细胞明显增多,而S期细胞减少(P<0.05)。结论靶向PrxⅠ基因的shRNA真核表达载体构建成功,能够特异性下调乳腺癌MCF-7细胞的PrxⅠ基因的表达,并明显抑制乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,调控细胞周期再分布。 展开更多
关键词 RNA干扰 peroxiredoxin 乳腺癌
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Peroxiredoxin Ⅲ在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化 被引量:2
15
作者 王切 米立国 +3 位作者 王素玲 孟宪敏 王来元 张琳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期322-325,共4页
目的:探讨Peroxiredoxin Ⅲ(PrxⅢ)在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组,模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术,制备压力超负荷心肌肥厚模型。分别于术后24h,2、4、6周,测定血液动力... 目的:探讨Peroxiredoxin Ⅲ(PrxⅢ)在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组,模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术,制备压力超负荷心肌肥厚模型。分别于术后24h,2、4、6周,测定血液动力学变化;称量心体质量;光镜和电子显微镜观察左心室的组织变化;提取左心室RNA,RT-PCR分析PrxⅢ的表达变化。结果:术后24h两组大鼠的血液动力学和心肌形态无明显变化。术后2、4、6周时,模型组大鼠的SBP、DBP、LVSP、LVED及左心室体质量指数逐渐增加,心肌纤维逐渐增粗,线粒体逐渐增多,肌节增长。术后24h PrxⅢ的表达稍有降低,但无统计学意义,2周时则明显降低,4周有所上升但仍低于对照,6周时明显上升且高于对照组。结论:PrxⅢ mRNA表达呈现先降低后增高的趋势,即在心肌肥厚中早期表达降低,而在心肌肥厚形成后表达明显升高,表明PrxⅢ参与了超负荷心肌肥厚的发生。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 心肌肥厚模型 活性氧族 氧化应激
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^(131)I标记抗Peroxiredoxin I肺腺癌噬菌体抗体在荷瘤裸鼠体内的分布及其对肿瘤生长的抑制作用 被引量:2
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作者 李淑杰 罗弋 +1 位作者 庞华 李少林 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期790-793,共4页
目的研究抗Peroxiredoxin I(PrxI)肺腺癌相关单链抗体体外对肺腺癌细胞的增殖抑制;观察131I标记抗体在肺腺癌裸鼠模型体内分布、靶向显像及体内抑瘤作用。方法放射性核素计数法测定单链抗体细胞内摄水平;MTT法及流式细胞仪检测单链抗体... 目的研究抗Peroxiredoxin I(PrxI)肺腺癌相关单链抗体体外对肺腺癌细胞的增殖抑制;观察131I标记抗体在肺腺癌裸鼠模型体内分布、靶向显像及体内抑瘤作用。方法放射性核素计数法测定单链抗体细胞内摄水平;MTT法及流式细胞仪检测单链抗体抑制肺腺癌A549细胞生长情况;免疫印迹法检测单链抗体作用于A549细胞后对细胞内PrxI表达水平的影响。放射性核素131I标记纯化抗体,进行荷瘤裸鼠体内分布、SPECT放免显像及病理切片观察抑瘤作用。结果单链抗体干预后细胞PrxI蛋白表达水平较对照组下降(P<0.05)。体内分布研究表明单链抗体与肺腺癌组织有效结合。荷瘤裸鼠尾静脉注射131I标记抗体48h后,瘤/血和瘤/肌肉放射性比值均达到最大值4.06±0.13和5.17±0.97。SPECT示抗体注射后48hT/NT值明显高于12h、24h和72h(F均>86,P均<0.01)。治疗4周后,131I标记抗体治疗组肿瘤体积为(0.68±0.17)cm3,质量为(1.58±0.21)g,抑瘤率56.8%,与对照组比较有统计学差异。结论抗PrxI肺腺癌单链抗体能有效抑制肺腺癌细胞生长,131I标记单链抗体在体内能抑制肿瘤生长。 展开更多
关键词 肺腺癌 噬茵体抗体库 单链抗体 peroxiredoxin I 放免显像 放免治疗
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Peroxiredoxin在H_2O_2介导的信号通路中的作用 被引量:7
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作者 杨柳 米粲 霍艳英 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2006年第5期417-419,共3页
Peroxiredoxins(Prxs)家族广泛存在于生物体的各种细胞中,这种抗氧化蛋白在过氧化氢(H2O2)介导的信号通路调节中具有重要作用。在哺乳动物细胞中,Prxs家族成员能催化细胞内的H2O2还原,将其烷化为H2O和乙醇而清除。H2O2行使细胞内的信号... Peroxiredoxins(Prxs)家族广泛存在于生物体的各种细胞中,这种抗氧化蛋白在过氧化氢(H2O2)介导的信号通路调节中具有重要作用。在哺乳动物细胞中,Prxs家族成员能催化细胞内的H2O2还原,将其烷化为H2O和乙醇而清除。H2O2行使细胞内的信号分子的作用,需要保证其浓度在细胞内可以迅速上升至一定阈值以上,因此要避免H2O2被Prxs破坏。H2O2超氧化会使Prxs活性位点上的Cys-SH生成Cys-SO2H而失活,随后Prxs在Su lfiredoxin(Srx)催化下又可恢复活性。Prxs的可逆性失活能调节H2O2在细胞内积聚的浓度使其行使信使功能,作用于多种特殊蛋白质。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 过氧化氢 信号转导 Sultiredoxin
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新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1对大鼠肺成纤维细胞增殖和JNK通路的影响 被引量:5
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作者 孙影 魏中秋 +4 位作者 胡亚萍 郑素琴 刘宝欣 贾艳春 杨方 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1483-1486,共4页
目的探讨新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对大鼠肺成纤维细胞(FB)增殖和JNK通路的影响。方法体外培养FB,随机分为:对照组、TGF-β1组、空转染组、Prx-1转染组。对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液;TGF-β1组:0.4%血清培养条... 目的探讨新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对大鼠肺成纤维细胞(FB)增殖和JNK通路的影响。方法体外培养FB,随机分为:对照组、TGF-β1组、空转染组、Prx-1转染组。对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液;TGF-β1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;空转染组:利用脂质体Lipo2000将空载体转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;Prx-1转染组:Prx-1真核表达质粒转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞。质粒转染采用脂质体转染法;免疫荧光检测质粒转染和8-OhdG(DNA氧化产物)的水平;MTT法检测FB增殖;Western blot检测JNK和Prx-1的表达情况。结果质粒成功转染入FB,转染Prx-1真核表达质粒使Prx-1在FB内蛋白表达水平增高。与对照组比较,TGF-β1组的FB增殖、8-OhdG及磷酸化的JNK表达均明显增加。与TGF-β1组比较,空转染组中的上述观察指标无明显变化,但在Prx-1转染组,这些指标均明显下降。结论 TGF-β1能够诱导FB生成反应性氧物质(ROS),并由此促进JNK的激活和FB增殖,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β1诱导的FB增殖。 展开更多
关键词 peroxiredoxin-1 反应性氧物质 C-JUN氨基末端激酶 转化生长因子-Β1 增殖
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Peroxiredoxin Ⅱ在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 李秀琴 任波 张淑兰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第22期2773-2776,共4页
目的探讨Peroxiredoxin Ⅱ在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法用蛋白免疫印迹(westernblot)的方法检测71例新鲜卵巢组织及卵巢上皮肿瘤组织的Peroxiredoxin Ⅱ的表达情况,其中正常卵巢组织16例,良性卵巢肿瘤16例,卵巢癌39例... 目的探讨Peroxiredoxin Ⅱ在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法用蛋白免疫印迹(westernblot)的方法检测71例新鲜卵巢组织及卵巢上皮肿瘤组织的Peroxiredoxin Ⅱ的表达情况,其中正常卵巢组织16例,良性卵巢肿瘤16例,卵巢癌39例。结果Peroxiredoxin Ⅱ在正常卵巢组织表达为(1.00±0.44),在良性卵巢上皮性肿瘤组织中表达为(0.83±0.50),在卵巢癌组织中表达为(0.60±0.23),卵巢癌与正常卵巢组织的表达差异有显著性(P<0.01);良性卵巢上皮性肿瘤组织与正常卵巢组织、癌组织比较差异均无统计学意义;且Peroxiredoxin Ⅱ在卵巢癌组织表达降低与其临床分期、病理类型、细胞分化及绝经等参数无关。结论Peroxiredoxin Ⅱ可能在卵巢上皮癌的发生中起抑制因子作用,而在其发展中无明显作用。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 良性卵巢上皮肿瘤 卵巢上皮性癌
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Peroxiredoxin6在糖尿病大鼠视网膜中的表达 被引量:1
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作者 戚卉 吴雅臻 +2 位作者 金燕 韩宁 范斌 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期332-335,共4页
背景研究表明氧化损伤在糖尿病并发症的发生发展中发挥着重要的作用,Peroxiredoxin6(Prx6)是双功能的蛋白质,其清除磷脂氢过氧化物的活性非常重要,因为细胞质中普遍存在的谷胱甘肽过氧化物酶(GPxl)无此功能。目的观察Prx6在实验... 背景研究表明氧化损伤在糖尿病并发症的发生发展中发挥着重要的作用,Peroxiredoxin6(Prx6)是双功能的蛋白质,其清除磷脂氢过氧化物的活性非常重要,因为细胞质中普遍存在的谷胱甘肽过氧化物酶(GPxl)无此功能。目的观察Prx6在实验性糖尿病大鼠视网膜中的表达,分析随着糖尿病病程的延长其在视网膜的表达情况。方法Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组12只和糖尿病组48只。糖尿病组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)65mg/kg诱发糖尿病,将造模成功的大鼠随机分为糖尿病1、2、3个月组,每组16只。于各时间点处死大鼠,采用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)和免疫组织化学法分析Prx6在不同时间点糖尿病组大鼠视网膜中的表达,应用Image—ProPlus6.0图像分析软件测定阳性反应强度,即平均吸光度(A)值。结果免疫组织化学染色结果显示,正常对照组大鼠视网膜内外颗粒层及视网膜、脉络膜血管均有Prx6蛋白的表达,视网膜神经节细胞(RGCs)层有少量Prx6蛋白的表达,表达于细胞质;糖尿病1个月组大鼠视网膜内外颗粒层棕黄色阳性染色细胞增多;2个月组、3个月组大鼠视网膜各层Prx6蛋白的表达均为阴性,各组问总体比较差异均有统计学意义(F=22967.63,P〈0.05)。RT—PCR结果显示,正常对照组大鼠视网膜有Prx6mRNA的表达;糖尿病1个月组视网膜Prx6mRNA表达增高;2个月组Prx6mRNA表达量明显降低,仅有少量表达;3个月组表达阴性,各组问总体比较差异均有统计学意义(F=942.84,P〈0.05)。结论Prx6作为一种抗氧化蛋白存在于视网膜中,可保护组织细胞免受活性氧簇、氧自由基等的损害,随着糖尿病病程的延长,Prx6在视网膜组织和细胞中的表达量逐渐降低,直至消失。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 6 糖尿病视网膜病变 免疫组织化学 氧化损伤
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