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小龙虾prx6基因在对抗金黄色葡萄球菌感染中的分子作用机制研究
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作者 金博阳 秦仕宇 +4 位作者 张明达 李倩倩 文静 沈秀丽 杜志强 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期314-322,共9页
【目的】旨在研究prx 6基因在小龙虾先天免疫中的调控作用机制,探索小龙虾prx 6基因在金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染后发挥免疫调控作用的可能分子机制。【方法】选取prx 6基因作为研究对象,提取正常小龙虾各组织的总RNA,... 【目的】旨在研究prx 6基因在小龙虾先天免疫中的调控作用机制,探索小龙虾prx 6基因在金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染后发挥免疫调控作用的可能分子机制。【方法】选取prx 6基因作为研究对象,提取正常小龙虾各组织的总RNA,利用RT-qPCR分析目的基因在小龙虾各组织中的分布,并检测S.aureus免疫刺激后,prx 6基因在小龙虾相关组织中的表达模式。通过RNA干扰技术(RNAi)敲低prx 6基因表达量,在感染S.aureus后,测定小龙虾肝胰腺中Pc-crustin 3、Pc-crustin 4、Pc-ALF 9和Pc-lectin 1免疫效应基因的相对表达量。同时,进一步对小龙虾血淋巴中的细菌载量进行统计分析。【结果】通过对prx 6基因在小龙虾各组织的表达水平分析,观察到该基因在肝胰腺的表达量显著高于其他组织。在S.aureus感染后,小龙虾肝胰腺、血细胞和肠组织中prx 6基因的表达量显著上调,在鳃组织仅有早期表达量有所增加。小龙虾存活率的检测结果表明RNAi下调prx 6基因表达量之后,其生存率显著低于dsGFP+S.aureus对照组。为了进一步探索死亡率升高的原因,研究了抗菌肽基因在抗细菌防御中的表达水平。RNAi实验结果显示,在prx 6基因表达量降低的情况下,小龙虾肝胰腺Pc-crustin 3、Pc-crustin 4、Pc-ALF 9以及Pc-lectin 1基因表达水平都出现了显著下降。此外,小龙虾血淋巴中的细菌载量检测结果显示,prx 6基因RNAi组的细菌载量显著高于dsGFP+S.aureus对照组。【结论】小龙虾prx 6基因通过影响抗菌肽基因的表达,以及血淋巴细菌清除能力来参与抗细菌先天免疫应答。 展开更多
关键词 先天免疫 过氧化物还原酶6 RNA干扰 抗菌肽 金黄色葡萄球菌
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沉默PrxⅡ基因促进巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用
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作者 冯琳 孙率洋 +2 位作者 姜鹏 吕树旗 韩英浩 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第2期77-83,共7页
为探究PrxⅡ对RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞系)细胞杀伤HepG2(人肝癌细胞系)细胞的影响,阐明PrxⅡ基因调控RAW264.7细胞分泌细胞因子杀伤HepG2细胞的作用,利用慢病毒干扰技术制备PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞系、MTT assay测定HepG2细胞... 为探究PrxⅡ对RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞系)细胞杀伤HepG2(人肝癌细胞系)细胞的影响,阐明PrxⅡ基因调控RAW264.7细胞分泌细胞因子杀伤HepG2细胞的作用,利用慢病毒干扰技术制备PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞系、MTT assay测定HepG2细胞存活情况、ELISA法测定RAW264.7细胞分泌炎性因子情况、蛋白质免疫印迹法检测NF-κB信号通路相关蛋白质表达水平。结果表明:已成功制备PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞系;MTT检测发现RAW264.7细胞上清液处理HepG2细胞后,shPrxⅡ组HepG2细胞存活率明显低于mock组,且呈时间依赖性;ELISA结果表明shPrxⅡ组RAW264.7细胞分泌的TNF-α含量明显高于mock组,IL-6和IL-1β含量明显低于mock组;蛋白质免疫印迹结果与mock组相比,PrxⅡ基因沉默的RAW264.7细胞中NF-κB信号通路明显被激活。由此得出结论,PrxⅡ基因能调控RAW264.7细胞分泌细胞因子,杀伤HepG2细胞,导致HepG2细胞死亡水平上升,研究结果可为以巨噬细胞为靶点的免疫疗法提供理论基础,为肝癌患者的免疫治疗提供新思路。 展开更多
关键词 RAW264.7细胞系 HEPG2细胞系 prx NF-ΚB 炎性因子
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Silencing of peroxiredoxin 2 suppresses proliferation and Wnt/β-catenin pathway,and induces senescence in hepatocellular carcinoma
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作者 XUEGANG YANG XIANHONG XIANG +3 位作者 GUOHUI XU SHI ZHOU TIANZHI AN ZHI HUANG 《Oncology Research》 SCIE 2024年第1期213-226,共14页
Hepatocellular carcinoma(HCC),a common malignancy worldwide,still lacks effective clinical treatment.The study aimed to investigate the oncogenes that affect the progression of HCC and their possible mechanisms.In our... Hepatocellular carcinoma(HCC),a common malignancy worldwide,still lacks effective clinical treatment.The study aimed to investigate the oncogenes that affect the progression of HCC and their possible mechanisms.In our study,we initially confirmed a higher level of PRDX2 in the bile of HCC patients compared to those with choledocholithiasis by 2-DE,LC-MS,and ELISA.Subsequently,we demonstrated the high expression of peroxiredoxin 2(PRDX2)in HCC based on the TCGA database and clinical sample analysis.Furthermore,PRDX2 overexpression enhanced the viability of HCC cells.And PRDX2 silencing induced senescence of HCC cells.In vivo,knockdown of PRDX2 significantly reduced the weight of xenograft tumors.PRDX2 also was found to activate the Wnt/β-catenin pathway by inducingβ-catenin nuclear translocation.Consequently,we proved that silencing PRDX2 could inhibit proliferation and Wnt/β-catenin pathway while promoting senescence in HCC cells. 展开更多
关键词 peroxiredoxin 2 Hepatocellular carcinoma Wnt/β-catenin pathway SENESCENCE PROLIFERATION
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PRX和PQX助力印刷企业工作流程标准化
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作者 Michael Sisco 赵嵩(译) 《印刷杂志》 2024年第2期18-21,共4页
译者注:对于品牌商和印刷厂来说,有关生产需求和产品质量的沟通在生产流程中依旧是个重大挑战。设计公司、制版公司和不同的印刷工艺以及不同的品牌商对应多家供应商的实际情况,会让这种沟通变得极为困难。这是全世界品牌商和供应商都... 译者注:对于品牌商和印刷厂来说,有关生产需求和产品质量的沟通在生产流程中依旧是个重大挑战。设计公司、制版公司和不同的印刷工艺以及不同的品牌商对应多家供应商的实际情况,会让这种沟通变得极为困难。这是全世界品牌商和供应商都要面对的问题。 展开更多
关键词 prx PQX 工作流程 标准化 色彩管理
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结球甘蓝PRX基因家族全基因组鉴定与逆境条件下的表达分析 被引量:1
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作者 葛雯冬 王腾辉 +2 位作者 马天意 范震宇 王玉书 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期252-260,共9页
Ⅲ类过氧化物酶(class Ⅲ peroxidases, PRX)在植物生长发育和胁迫响应中发挥重要的作用,本研究利用生物信息学方法对结球甘蓝PRX基因家族进行鉴定,预测其结构和功能,并分析PRX基因在逆境条件下的表达模式,旨在明确甘蓝PRX基因家族的进... Ⅲ类过氧化物酶(class Ⅲ peroxidases, PRX)在植物生长发育和胁迫响应中发挥重要的作用,本研究利用生物信息学方法对结球甘蓝PRX基因家族进行鉴定,预测其结构和功能,并分析PRX基因在逆境条件下的表达模式,旨在明确甘蓝PRX基因家族的进化关系和功能。结果表明,结球甘蓝基因组中共鉴定出125个BoPRX基因家族成员,不均匀的分布在9条染色体上;编码氨基酸173-488 aa,大部分为亲水蛋白;亚细胞定位预测BoPRX基因大部分定位在叶绿体上。系统进化分析将甘蓝PRX蛋白分为5个亚族,每个亚族的成员都含有相似的外显子/内含子结构和蛋白质保守基序;启动子区域分析发现,BoPRX启动子序列中含有多种与激素和逆境等胁迫响应相关的顺式调控元件;基于转录组数据的热图分析显示,BoPRXs表达在叶绿体中最多。荧光定量PCR分析显示,6个BoPRX基因均受NaCl和PEG诱导上调;在ABA处理下,除BoPRX100外其余基因的表达在大部分时间被抑制,这些基因均受到ABA的差异调控,说明这些BoPRX基因都参与了ABA信号通路。综上所述,本研究揭示了PRX的复杂调控依赖于PRX的类型和信号分子,为进一步分析甘蓝PRX家族关键成员的功能提供了有价值的信息。 展开更多
关键词 甘蓝 prx基因 逆境胁迫 表达分析
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Peroxiredoxins家族在H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡过程中的表达
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作者 沈薇 朱燕 罗爱月 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期68-72,共5页
目的探讨Peroxiredoxins(Prdxs)家族在H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡过程中的作用。方法选取在华中科技大学同济医学院附属同济医院接受体外受精-胚胎移植技术(in vitro fertilization embryo transfer technology,IVF-ET)的年轻患者的... 目的探讨Peroxiredoxins(Prdxs)家族在H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡过程中的作用。方法选取在华中科技大学同济医学院附属同济医院接受体外受精-胚胎移植技术(in vitro fertilization embryo transfer technology,IVF-ET)的年轻患者的颗粒细胞,经体外培养并给予H_(2)O_(2)诱导人颗粒细胞凋亡,检测Prdx1~6 mRNA表达情况。结果选取患者的激素水平及窦卵泡数(AFC)提示卵巢处于良好状态,体外培养颗粒细胞同时表达卵泡刺激素受体(FSHR)和黄体生成素受体(LHR),符合原代颗粒细胞表型。在H_(2)O_(2)诱导下,细胞核皱缩,发生凋亡。实时定量聚合酶链反应(qPCR)显示,H_(2)O_(2)处理组Prdx1、2、4 mRNA的表达水平显著高于对照组,尤其Prdx4;而Prdx3和Prdx6 mRNA的表达水平低于对照组,差异均具有统计学意义;Prdx5 mRNA的表达水平相对于对照组有升高的趋势,但差异无统计学意义。结论Prdxs可能通过调节颗粒细胞凋亡过程,从而在人卵泡闭锁甚至卵巢衰老过程中发挥重要调节作用。 展开更多
关键词 peroxiredoxinS 颗粒细胞 凋亡 过氧化氢
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红米稻过氧化物还原酶OsPrx3增强秀丽隐杆线虫抗氧化功能 被引量:2
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作者 汪海洋 王喆皓 +6 位作者 黄卉 沈焕然 宋小雨 王智勇 卢延克 周志 方庆 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第6期197-204,共8页
目的:红米稻中OsPrx3基因预编码一个过氧化物还原酶,探究该基因原核细胞表达产物能否增强动物抗氧化的功能。方法:分子克隆OsPrx3基因,采用大肠杆菌表达目的蛋白,对摄入目的蛋白的模式动物-秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),鉴别... 目的:红米稻中OsPrx3基因预编码一个过氧化物还原酶,探究该基因原核细胞表达产物能否增强动物抗氧化的功能。方法:分子克隆OsPrx3基因,采用大肠杆菌表达目的蛋白,对摄入目的蛋白的模式动物-秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),鉴别运动能力、体长、抗氧化应激能力、体内活性氧与脂肪含量以及与氧化相关的基因表达水平等。结果:借助大肠杆菌细胞成功表达红米稻过氧化物还原酶基因OsPrx3,分离目的蛋白,体外实验显示该蛋白具有较高酶活性,5 min内1μg/mL OsPrx3对H_(2)O_(2)相对清除率可达40%以上;与对照相比,摄入目的蛋白的秀丽隐杆线虫,运动能力和体长虽无明显变化,但抵抗外部氧化应激的能力却在氧化处理的15 min内明显增强,而且体内活性氧、细胞脂肪含量显著降低;另外,部分调节氧化的关键基因表达明显上调。结论:基因工程策略成功表达红米稻过氧化物还原酶OsPrx3基因,其产物OsPrx3体外具有较高抗氧化活性,秀丽隐杆线虫摄入该蛋白能显著增强抗氧化能力。 展开更多
关键词 过氧化物还原酶 红米稻 秀丽隐杆线虫 抗氧化
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细菌刺激下克氏原螯虾prx4基因的免疫响应和抗氧化功能研究
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作者 张明达 李倩倩 +3 位作者 张文硕 秦仕宇 沈秀丽 杜志强 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1185-1194,共10页
【目的】克隆克氏原螯虾(Procambarus clarkii)过氧化物还原酶4基因(Pc-prx4),分析Pc-prx4基因的正常组织表达以及细菌刺激后的相对表达情况,分析其抗氧化功能,为Pc-prx4在病原刺激后的先天免疫机制以及抗氧化功能研究提供参考依据。【... 【目的】克隆克氏原螯虾(Procambarus clarkii)过氧化物还原酶4基因(Pc-prx4),分析Pc-prx4基因的正常组织表达以及细菌刺激后的相对表达情况,分析其抗氧化功能,为Pc-prx4在病原刺激后的先天免疫机制以及抗氧化功能研究提供参考依据。【方法】以Pc-prx4为目的基因,通过相关网站和软件(Expasy、Translate tool、SMART、Expasy ProtParam tool、BLASTx、MEGA-X)进行生物信息学分析。通过qRT-PCR检测Pc-prx4在正常组织中的表达量以及金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、鲶爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)刺激下的表达量;通过构建表达菌株、诱导纯化r Pc-PRX4蛋白,对重组蛋白进行抗氧化功能研究。【结果】Pc-prx4开放阅读框744 bp,编码247个氨基酸,含有烷基氢过氧化物还原酶(AhpC)结构域、巯基特异性抗氧化结构域和1-Cys prx过氧铁氧酶的C末端结构域;Pc-PRX4蛋白分子式为C_(1249)H_(1934)N_(330)O_(357)S_(10),分子量为27.61 kDa,理论等电点(pI)为5.88,N端存在信号肽区域,C端存在1-Cys过氧化物还原蛋白结构域。Pc-prx4基因在各组织中均有所表达,其中血淋巴的表达量最高;在金黄色葡萄球菌和鲶爱德华氏菌刺激下,Pc-prx4基因在血细胞、肝胰腺、鳃、肠组织中表达均呈现整体升高的趋势。在保护质粒DNA抗氧化缺刻试验中,rPc-PRX4表现出抗氧化性,并随着重组蛋白浓度的升高,抗氧化效果越明显。【结论】Pc-prx4基因属于1-Cys prx,在血细胞中高表达,参与调节金黄色葡萄球菌、鲶爱德华氏菌刺激下的机体免疫应答过程,r Pc-PRX4蛋白还具有与浓度大小相关的抗氧化功能,该基因参与免疫过程的调节和保护机体进行抗氧化的功能。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 过氧化物还原酶4 金黄色葡萄球菌 鲶爱德华氏菌 表达模式 抗氧化
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转2-CysPrx基因烟草抗氧化酶和PSII电子传递对盐和光胁迫的响应 被引量:28
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作者 张会慧 田褀 +5 位作者 刘关君 胡彦波 吴翔宇 田野 李鑫 孙广玉 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2023-2029,共7页
以转2-Cys Peroxiredoxins(2-Cys Prx)基因的烟草(Nicotiana tabacum)为材料,非转基因烟草为对照,调查盐和光胁迫对转基因烟草幼苗叶片抗氧化酶和叶绿素荧光特性的影响,揭示2-Cys Prx基因在植物抗逆方面的功能。结果表明,弱光(200μmol ... 以转2-Cys Peroxiredoxins(2-Cys Prx)基因的烟草(Nicotiana tabacum)为材料,非转基因烟草为对照,调查盐和光胁迫对转基因烟草幼苗叶片抗氧化酶和叶绿素荧光特性的影响,揭示2-Cys Prx基因在植物抗逆方面的功能。结果表明,弱光(200μmol m 2s 1)下,随着盐浓度增大,转基因烟草和对照的SOD活性皆增加,APX活性变化不大,H2O2含量稍有升高;强光(1000μmol m 2s 1)下,随着盐浓度增大,转基因烟草SOD活性增强,APX活性下降,H2O2含量增加缓慢,而对照的H2O2含量迅速升高,转基因烟草叶片的PSII电子传递速率(ETR)、最大光化学效率(Fv/Fm)和实际光化学效率(PSII)均高于对照,而且PSII电子受体侧的受抑制程度明显低于对照。结果暗示在强光和盐胁迫使APX活性降低的情况下,2-Cys Prx可有效清除细胞中过量H2O2,增强光合电子传递链的稳定性,特别是PSII电子受体侧的电子传递,有效减轻盐和高光胁迫引起的PSII光抑制。 展开更多
关键词 转2-Cys prx基因烟草 盐和光胁迫 抗氧化酶 PSII电子传递
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刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析 被引量:14
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作者 刘转转 王海龙 +3 位作者 殷国荣 马广源 张建中 凡振伟 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期334-337,共4页
目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PC... 目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE进行鉴定,重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。结果从弓形虫RH株cDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段,并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结论RH株刚地弓形虫peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 peroxiredoxin 克隆 原核表达 免疫原性
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Peroxiredoxin Ⅰ和Ⅱ在小鼠输卵管和子宫的分布与表达 被引量:4
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作者 史河秀 谢美容 +2 位作者 林翠英 王建新 王世鄂 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期345-347,361,共4页
目的:观察PeroxiredoxinⅠ和Ⅱ(PrxⅠ和Ⅱ)在小鼠输卵管和子宫的分布及其周期性变化。方法:免疫组织化学和蛋白免疫印迹技术。结果:在输卵管中,PrxⅠ和Ⅱ免疫阳性反应见于输卵管上皮;而子宫内,PrxⅠ免疫阳性反应分布于内膜上皮、腺体上... 目的:观察PeroxiredoxinⅠ和Ⅱ(PrxⅠ和Ⅱ)在小鼠输卵管和子宫的分布及其周期性变化。方法:免疫组织化学和蛋白免疫印迹技术。结果:在输卵管中,PrxⅠ和Ⅱ免疫阳性反应见于输卵管上皮;而子宫内,PrxⅠ免疫阳性反应分布于内膜上皮、腺体上皮和内膜基质,而PrxⅡ主要见于内膜基质。蛋白免疫印迹技术也显示这两型蛋白在输卵管和子宫均表达,动情期和动情间期这两型蛋白在输卵管和子宫中的表达水平无显著性差异。结论:提示PrxⅠ与Ⅱ在输卵管和子宫中表达稳定,可能为受精和早期胚胎发育提供抗氧化的良好微环境。 展开更多
关键词 peroxiredoxin peroxiredoxin 输卵管 子宫 小鼠
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人源噬菌体抗体对Peroxiredoxin Ⅰ高表达肺腺癌细胞增殖的抑制作用 被引量:5
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作者 罗弋 庞华 +3 位作者 李淑杰 曹辉 李少林 樊春波 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1061-1066,共6页
背景与目的:研究表明过氧化物酶Peroxiredoxin Ⅰ(Prx Ⅰ)与癌症的发展有密切关系。我们已通过噬菌体展示技术构建了肺腺癌相关的人源单链抗体库。本研究对该库进行筛选,得到抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体,并检测其对肺腺癌细胞A549增殖的抑... 背景与目的:研究表明过氧化物酶Peroxiredoxin Ⅰ(Prx Ⅰ)与癌症的发展有密切关系。我们已通过噬菌体展示技术构建了肺腺癌相关的人源单链抗体库。本研究对该库进行筛选,得到抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体,并检测其对肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法:PCR法检测TG1中scFv基因插入率,1%琼脂糖凝胶电泳鉴定Sfi Ⅰ和Not Ⅰ双酶切质粒的结果,以A549细胞及在肺癌中高表达的抗氧化蛋白Prx Ⅰ为靶抗原分别对抗体库进行3轮筛选富集。将阳性克隆用IPTG诱导表达并进行检测。放射性核素计数法测定细胞单链抗体内摄水平,MTT法及流式细胞术检测单链抗体对A549细胞的增殖抑制和凋亡情况,免疫印迹法检测抗体作用A549细胞后Prx Ⅰ的表达水平。结果:scFv基因插入率为77%,双酶切鉴定检测到目的条带。在亲和筛选过程中,肺腺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮为第1轮的180倍。ELISA法检测到在随机选取的10个克隆中,有6个与A549细胞呈阳性反应,阳性率60%。SDS-PAGE及ELISA检测证实得到人源抗PrxI肺腺癌单链抗体。被A549细胞内摄的单链抗体介导了细胞的凋亡以及细胞内Prx Ⅰ蛋白表达水平的下降。结论:从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体。单链抗体与肺腺癌细胞有特异性亲和力,并能有效抑制其增殖。 展开更多
关键词 肺腺癌 噬菌体抗体库 单链抗体 peroxiredoxin I 增殖抑制
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PeroxiredoxinII在小鼠卵巢中卵泡、GV卵、MII卵和植入前胚的表达和定位 被引量:3
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作者 王世鄂 黄威权 +2 位作者 付建芳 孙岚 吕葆真 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期647-651,共5页
目的 观察PeroxiredoxinII在小鼠卵巢中卵泡和植入前胚的表达与定位 ,为探讨PeroxiredoxinII在小鼠卵母细胞发育成熟和早期胚发育的作用提供依据。 方法 根据小鼠PeroxiredoxinIImRNA序列 (AccessionNo :BC0 0 2 0 34)设计引物 ,对... 目的 观察PeroxiredoxinII在小鼠卵巢中卵泡和植入前胚的表达与定位 ,为探讨PeroxiredoxinII在小鼠卵母细胞发育成熟和早期胚发育的作用提供依据。 方法 根据小鼠PeroxiredoxinIImRNA序列 (AccessionNo :BC0 0 2 0 34)设计引物 ,对小鼠生发泡完整卵细胞 (GV卵 )中的PeroxiredoxinII可能编码区进行扩增。同时 ,取生后 3d和 2月小鼠的卵巢 ,免疫细胞化学染色显示PeroxiredoxinII蛋白在卵泡中的分布。此外 ,运用RT PCR和免疫细胞化学染色方法观察PeroxiredoxinII在植入前胚的表达。 结果 从GV卵中扩增所得 6 84bp的cDNA序列 ,与小鼠PeroxiredoxinII具有 99%同源性 ;其推导的编码氨基酸序列与小鼠PeroxiredoxinII氨基酸序列完全相同。免疫细胞化学染色显示 :生后 3d小鼠卵巢内未见PeroxiredoxinII阳性反应 ;2月小鼠卵巢内阳性反应见于初级卵泡、次级卵泡和近成熟卵泡中卵母细胞的胞质。卵泡细胞未见PeroxiredoxinII阳性反应。RT PCR结果表明 :PeroxiredoxinIImRNA在GV卵中处高水平 ,从MII卵开始略有下降 ,在 4 细胞胚和早期囊胚期间未检到。免疫细胞化学染色显示 :GV卵、MII卵、1 细胞胚、2 细胞胚、4 细胞胚、8 细胞胚、桑椹胚和早期囊胚均呈PeroxiredoxinII阳性反应。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 卵巢 植入前胚 RT-PCR 免疫细胞化学 小鼠
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抗氧化蛋白Peroxiredoxin家族研究进展 被引量:41
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作者 章波 向渝梅 白云 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期352-355,共4页
Peroxiredoxin是新近发现的抗氧化酶系 ,广泛存在于各种生物体内。根据分子所具有保守半胱氨酸数目的不同 ,哺乳动物的 6个Peroxiredoxin分为 2个亚类。Peroxiredoxin除了具有共同的抗氧化功能外 ,它还具有其它的功能如细胞增殖与分化... Peroxiredoxin是新近发现的抗氧化酶系 ,广泛存在于各种生物体内。根据分子所具有保守半胱氨酸数目的不同 ,哺乳动物的 6个Peroxiredoxin分为 2个亚类。Peroxiredoxin除了具有共同的抗氧化功能外 ,它还具有其它的功能如细胞增殖与分化、细胞信号转导及保护其它蛋白的氧化等。对该类蛋白分子结构的深入研究已初步揭示其抗氧化的作用机制。Peroxiredoxin与肿瘤关系密切 ,它可能成为一个肿瘤标记物 ,可为肿瘤的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 抗氧化 蛋白家族
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PeroxiredoxinⅡ在小鼠早胚发育中的作用及机理 被引量:5
15
作者 王世鄂 黄威权 +1 位作者 孙岚 吕葆真 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期300-302,共3页
目的观察PeroxiredoxinⅡ对小鼠植入前胚发育的影响,并探讨其可能的机制。方法收集昆明种小鼠的1细胞胚,采用微滴培养法连续培养48h,观察不同浓度PeroxiredoxinⅡ抗体对植入前胚发育的影响,以胚胎发育到各期的比例为判断发育效果的标准... 目的观察PeroxiredoxinⅡ对小鼠植入前胚发育的影响,并探讨其可能的机制。方法收集昆明种小鼠的1细胞胚,采用微滴培养法连续培养48h,观察不同浓度PeroxiredoxinⅡ抗体对植入前胚发育的影响,以胚胎发育到各期的比例为判断发育效果的标准。同时,应用共聚焦扫描显微镜术结合特异性荧光探针2′,7′二氯氢化荧光素双乙酸酯,检测小鼠胚中氧自由基水平。结果抗体添加组和未添加组的1细胞胚经24h培养后96%以上发育成2细胞胚,但经48h培养,抗体添加组的胚发育明显受抑,多数停滞于2细胞期。激光共聚焦成像的结果表明,PeroxiredoxinⅡ抗体添加组的2细胞胚内荧光强度明显增强。结论PeroxiredoxinⅡ抗体可引起2细胞胚发育阻滞,这可能与胚内的氧自由基水平升高有关,提示植入前胚内PeroxiredoxinⅡ可减少或消除细胞内氧自由基,促进植入前胚的发育。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 植入前胚 氧自由基 微滴培养法 共聚焦扫描显微镜 小鼠
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人源抗PeroxiredoxinⅠ肺腺癌噬菌体抗体的制备及鉴定 被引量:3
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作者 罗弋 庞华 +4 位作者 李淑杰 曹辉 李少林 樊春波 王洁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期30-34,共5页
目的构建人源噬菌体抗体库,从中筛选出抗PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)肺腺癌人源单链抗体。方法提取肺癌患者癌旁淋巴结组织,通过RT-PCR扩增出重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),再经剪切-重叠-延伸PCR(SOE-PCR)将VH和VL连接得到单链抗... 目的构建人源噬菌体抗体库,从中筛选出抗PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)肺腺癌人源单链抗体。方法提取肺癌患者癌旁淋巴结组织,通过RT-PCR扩增出重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),再经剪切-重叠-延伸PCR(SOE-PCR)将VH和VL连接得到单链抗体(ScFv);将双酶切后的ScFv基因片段克隆入噬菌体表达载体pCANTAB5E,得到初级噬菌体抗体库。PCR检测TG1中ScFv基因插入率;1%琼脂糖凝胶电泳鉴定SfiI和NotI双酶切质粒的结果;以肺腺癌细胞株D549及在肺癌中高表达的抗氧化蛋白PrxI为靶抗原对抗体库进行筛选富集。将阳性克隆用IPTG诱导表达。用SDS-PAGE及Westernblotting鉴定该抗体;用ELISA法、免疫细胞化学法鉴定该抗体与人肺腺癌细胞的结合特异性。结果成功构建噬菌体单链抗体库。ScFv基因插入率为77%,双酶切鉴定检测到目的条带。在亲和筛选过程中,肺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮为第1轮的180倍。随机选取10个克隆,通过ELISA法检测到其中6个与A549细胞呈阳性反应,阳性率为60%。SDS-PAGE及Westernblotting证实抗体得到可溶表达。ELISA及免疫细胞化学检测表明抗体能相对特异地与肺腺癌细胞结合。结论成功构建肺腺癌人源噬菌体抗体库,并从中筛选得到能相对特异地与高表达PrxI的肺腺癌细胞D549结合的单链抗体。 展开更多
关键词 噬菌体抗体库 单链抗体 peroxiredoxin 肺腺癌
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过氧化物酶2-Cys Peroxiredoxins的研究进展 被引量:2
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作者 张悦丽 李新国 +2 位作者 李玲 万书波 王涛 《生命科学研究》 CAS CSCD 2010年第6期555-559,共5页
Peroxiredoxins是最近发现的一类过氧化物酶家族,其中的一个亚类2-Cys Peroxiredoxins具有Peroxiredoxins的典型特征,在生物体内分布广泛且含量较多,可占哺乳动物细胞可溶性蛋白的1%,且具有独特的催化活性;此外2-Cys Peroxiredoxins具... Peroxiredoxins是最近发现的一类过氧化物酶家族,其中的一个亚类2-Cys Peroxiredoxins具有Peroxiredoxins的典型特征,在生物体内分布广泛且含量较多,可占哺乳动物细胞可溶性蛋白的1%,且具有独特的催化活性;此外2-Cys Peroxiredoxins具有抗氧化(清除活性氧)、信号传导和分子伴侣的功能,对生物体正常的生命活动起重要作用. 展开更多
关键词 2-Cys peroxiredoxinS 抗氧化 信号传导 分子伴侣 催化机制
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Peroxiredoxin Ⅲ在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化 被引量:2
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作者 王切 米立国 +3 位作者 王素玲 孟宪敏 王来元 张琳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期322-325,共4页
目的:探讨Peroxiredoxin Ⅲ(PrxⅢ)在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组,模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术,制备压力超负荷心肌肥厚模型。分别于术后24h,2、4、6周,测定血液动力... 目的:探讨Peroxiredoxin Ⅲ(PrxⅢ)在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组,模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术,制备压力超负荷心肌肥厚模型。分别于术后24h,2、4、6周,测定血液动力学变化;称量心体质量;光镜和电子显微镜观察左心室的组织变化;提取左心室RNA,RT-PCR分析PrxⅢ的表达变化。结果:术后24h两组大鼠的血液动力学和心肌形态无明显变化。术后2、4、6周时,模型组大鼠的SBP、DBP、LVSP、LVED及左心室体质量指数逐渐增加,心肌纤维逐渐增粗,线粒体逐渐增多,肌节增长。术后24h PrxⅢ的表达稍有降低,但无统计学意义,2周时则明显降低,4周有所上升但仍低于对照,6周时明显上升且高于对照组。结论:PrxⅢ mRNA表达呈现先降低后增高的趋势,即在心肌肥厚中早期表达降低,而在心肌肥厚形成后表达明显升高,表明PrxⅢ参与了超负荷心肌肥厚的发生。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 心肌肥厚模型 活性氧族 氧化应激
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Peroxiredoxin 1基因沉默对肝癌细胞HepG2和SMMC-7721放射增敏的研究 被引量:3
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作者 高麦仓 张龙 +1 位作者 张殿增 张军 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期569-575,共7页
目的探讨Peroxiredoxin(Prx)1基因的小分子干扰RNA(si RNA)对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的放射增敏作用及机制。方法通过逆转录PCR方法研究Prx家族(Prx1~6)在人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中的mRNA表达谱;使用si RNA敲低HepG2和S... 目的探讨Peroxiredoxin(Prx)1基因的小分子干扰RNA(si RNA)对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的放射增敏作用及机制。方法通过逆转录PCR方法研究Prx家族(Prx1~6)在人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中的mRNA表达谱;使用si RNA敲低HepG2和SMMC-7721细胞高表达的Prx1亚型为Prx1 si RNA转染组,另设空白对照组、阴性对照组(Prx1si Neg),分别经不同剂量X射线照射后,克隆形成法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞内活性氧水平、细胞周期及凋亡情况。结果 HepG2和SMMC-7721细胞均高表达Prx1、Prx3和Prx5。与对照组相比,两种细胞Prx1 si RNA转染组在8 Gy X线照射后其剂量生存曲线明显左移,照射12 h后细胞周期出现G2-M阻滞,24 h后细胞凋亡率及1 h后细胞内ROS水平明显升高(P〈0.05)。Prx1 si RNA转染组放射增敏比在1.38~1.45之间。结论小分子干扰RNA对人肝癌HepG2和SMMC-7721细胞有明显的放射增敏作用,其机制可能与细胞周期阻滞及细胞内活性氧水平升高有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 放射敏感性 peroxiredoxin 1 RNA干扰 细胞内活性氧 细胞周期阻滞 放射增敏
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Peroxiredoxin在H_2O_2介导的信号通路中的作用 被引量:7
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作者 杨柳 米粲 霍艳英 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2006年第5期417-419,共3页
Peroxiredoxins(Prxs)家族广泛存在于生物体的各种细胞中,这种抗氧化蛋白在过氧化氢(H2O2)介导的信号通路调节中具有重要作用。在哺乳动物细胞中,Prxs家族成员能催化细胞内的H2O2还原,将其烷化为H2O和乙醇而清除。H2O2行使细胞内的信号... Peroxiredoxins(Prxs)家族广泛存在于生物体的各种细胞中,这种抗氧化蛋白在过氧化氢(H2O2)介导的信号通路调节中具有重要作用。在哺乳动物细胞中,Prxs家族成员能催化细胞内的H2O2还原,将其烷化为H2O和乙醇而清除。H2O2行使细胞内的信号分子的作用,需要保证其浓度在细胞内可以迅速上升至一定阈值以上,因此要避免H2O2被Prxs破坏。H2O2超氧化会使Prxs活性位点上的Cys-SH生成Cys-SO2H而失活,随后Prxs在Su lfiredoxin(Srx)催化下又可恢复活性。Prxs的可逆性失活能调节H2O2在细胞内积聚的浓度使其行使信使功能,作用于多种特殊蛋白质。 展开更多
关键词 peroxiredoxin 过氧化氢 信号转导 Sultiredoxin
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