过氧化物酶体增殖物活化受体γ激动剂对肾病大鼠肾组织nephrin表达的调控

目的探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)对nephrin表达的调控作用。方法建立大鼠氨基核苷嘌呤霉素(PAN)肾病模型,应用实时定量PCR和免疫印迹法检测肾病大鼠不同时间点肾组织中PPARγ和nephrin mRNA和蛋白表达,并观察PPAR-γ激动剂罗格列酮大鼠肾组织中nephrin表达的影响。体外培养HEK293细胞,转染含荧光素酶报告基因的nephrin启动子区,观察罗格列酮对nephrin基因转录活性的影响。结果PAN肾病模型d1 PPARγ、nephrin mRNA和蛋白即出现下降,d3出现明显下降,d7下降到最低点,PPARγ与nephrin表达呈显著正相关,而PPARγ和nephrin蛋白表达与24 h尿蛋白排泄呈负相关;罗格列酮治疗后大鼠尿蛋白排泄明显下降,肾组织中nephrin表达回升;罗格列酮呈时间依赖性诱导nephrin基因的转录活性,3 h达高峰,其后荧光素酶活性有所下降,但刺激24 h仍显著高于对照组。结论nephrin表达受PPARγ调控,PPARγ激动剂通过诱导nephrin表达而减轻蛋白尿。

罗格列酮对兔二次打击多器官功能障碍综合征的保护作用

【目的】探讨在兔二次打击多器官功能障碍综合征（MODS）动物模型中PPAR7、NF-κB、TNF—α、IL-10的表达，血气及生化指标的变化以及罗格列酮及GW9662对其的影响。【方法】在失血性损伤的基础上以脂多糖（LPS）腹腔注射作为二次打击制备兔MODS模型，使用PPAR-γ的激动剂罗格列酮和拮抗剂GW9662进行干预，测定24h后PPAR-γ、NF-κB、TNF-α、IL-10在肝脏中的表达以及血气及生化指标的变化。【结果】T—H组与D-H—S组较之sham组中PPAR-γmRNA的表达下降，具有显著差异性（P〈0．05）。在pH组中，罗格列酮亚组较空白组明显升高，具有显著差异性（P〈0．05）。GW9662亚组较之罗格列酮亚组明显下降，具有显著差异性（P〈0．05）。在T—H组较之于sham组，NF-κB、TNF-α的含量增加且具有显著性（P〈0．05），IL-10与sham组没有显著性差异（P〉0．05）。在D-H—S组中NF-KB、TNF—α的含量较T-H组明显增加（P〈0．05），IL-10较sham组明显升高（P〈0．05），与T—H组相比没有明显差异（P〉0．05）。在D-H—R组，NF-κB、TNF-α的含量较D-H—S组明显减少（P〈0．05），IL-10的含量较D-H—S组明显增加（P〈0．05）。在D-H—G组NF-κB、TNF-α的含量较DH—R组明显增加（P〈0．05），IL-10的含量较D-H—R组明显减少（P〈0．05）。在未使用PPAR-7激动剂或拮抗剂的情况下，T—H组中血气及生化指标较之sham组均没有明显改变，在DIH组中血气及生化指标较之sham组及T—H组均明显升高（P〈0．05）。在pH组中罗格列酮组较空白组血气及生化指标明显下降（P〈0．05），GW9662组较罗格列酮组血气及生化指标明显升高（P〈0．05）。[结论]PPAR-γ的激动剂罗格列酮能够改善兔二次打击MODS模型的器官功能。

刺五加苷B/E对高糖环境下HBZY-1细胞增殖及TGF-β1和PPARγ表达的影响

目的:探讨刺五加苷B/E(ETS-B/E)对高糖环境大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1增殖的影响及机制。方法:进行HBZY-1细胞传代、无菌培养,选生长良好的第4代HBZY-1细胞,测定高糖(25 mmol/L)环境下符合生长规律曲线图的细胞密度。然后接种6组,分成低糖组(LG)、高糖组(HG)、高糖ETS-B/E(低剂量、中剂量、高剂量)组和高糖洛沙坦组(LTG)。予以相应药物干预后,测定在24 h、48 h和72 h时,其对HBZY-1细胞生长的抑制作用和抑制率,并用免疫细胞化学和Western blotting检测各组增殖过程中TGF-β1和PPARγ的表达情况。结果:HBZY-1细胞的接种浓度为每孔2 000个时,符合细胞生长基本规律,高糖显著促进HBZY-1细胞的增殖。ETSB/E作用下,在各时点,对HBZY-1细胞的抑制作用和抑制率与HG有显著差异(P<0.05);免疫细胞化学和Western blotting分析均显示,ETS-B/E能显著抑制TGF-β1表达和促进PPARγ表达(P<0.05),且ETS-E显著强于ETSB(P<0.05),呈浓度和时间依赖性趋势。结论:ETS-B/E对高糖环境下HBZY-1细胞的增殖具有显著抑制作用,其作用机制与阻止TGF-β1的表达和促进PPARγ的表达相关。

PPARγ基因多态性与冠心病及其危险因素相关性研究概况

过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)属于核激素受体家族。PPARs包括3个亚型即α亚型δ亚型和γ亚型,PPARγ2亚型有两个常见多态:C1431T和Pro12Ala。研究证实在人类PPARγ基因多态性与动脉粥样硬化的发生发展密切相关,可导致冠心病的发生发展,并与冠状动脉粥样硬化性心脏病多个危险因素,如2型糖尿病、高血压、肥胖、血脂异常、代谢综合征有关。因此PPARγ基因多态性不仅直接参与了冠心病发生发展的多个环节,并可通过增加冠心病的危险因素来进一步促进冠心病的发生与发展。临床通过测定PPARγ基因多态性有可能分析出发生2型糖尿病、高血压、代谢综合征、血脂异常、肥胖和冠心病发病的可能性和风险,发现与诊断冠心病的高危人群。

二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的 探讨二膦酸盐对糖皮质激素诱导的骨质疏松过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的影响.方法 ①22例系统性红斑狼疮（SLE）患者,治疗组9例（标准剂量激素＋阿仑膦酸钠）,对照组13例（标准剂量激素）,24周后行骨髓穿刺术,检测免疫组织化学PPARγ平均积分吸光度.②采用原代人骨髓基质干细胞（hMSCs）培养,模拟髓内骨髓基质干细胞分化为脂肪细胞的过程,在相同条件下,分为成脂诱导组、成脂诱导＋10-5mol/L二膦酸盐组（高剂量组）、成脂诱导＋10-7mol/L二膦酸盐组（中剂量组）、成脂诱导＋10-9mol/L二膦酸盐组（低剂量组）干预诱导成脂过程,6～9 d后进行油红0染色、异丙醇萃取油红染料,515 nm测定各组吸光度（A）来反映成脂程度,定量聚合酶链反应（PCR）测定各组PPARγmRNA的表达水平.采用t检验和单因素方差分析法进行数据分析.结果 二膦酸盐治疗组免疫组织化学PPARγ平均积分吸光度较对照组减少（P＜0.05）;在诱导培养7 d后,成脂诱导组的A与低剂量组差异无统计学意义（P值0.167）,高剂量组、中剂量组A与成脂诱导组之间差异有统计学意义（P值分别为0、0.041）.定量PCR结果显示：高剂量组、中剂量组PPARγ mRNA的表达低于成脂诱导组（P值分别为0、0.01）,低剂量组与成脂诱导组之间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 有效浓度的二膦酸盐可以抑制PPARγ的表达,从而抑制hMSCs向脂肪细胞分化,抑制糖皮质激素诱导的骨质疏松症.