PPARγ在非小细胞肺癌中的表达及临床相关性研究

目的：观察过氧化物酶增殖活化受体（PPARγ）在非小细胞肺癌中的表达和定位。分析PPARγ阳性表达与临床各指标间的关系，探讨PPART在非小细胞肺癌中的意义。方法：随机取60例2000-2003年肺癌石蜡切块，所有病历术前均未行化疗及放疗。并取21例手术患者的病灶旁正常肺组织作对照。采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法加高压修复的免疫组化法进行检测。将两组资料相比较，同时分析PPARγ表达情况与肺癌的临床分期、分化程度、有无淋巴结转移、病理类型之间的关系。结果：肺癌、正常肺组织的PPARγ阳性表达率分别为45．00％、4．76％，两者间有显著性差异（P〈0．01）。低分化、中分化、高分化肺癌的PPARγ阳性表达率呈递减趋势，分别为66．67%、61．50％、13．60％，差异有显著性（P〈0．01）。结论：PPARγ蛋白高水平表达是非小细胞肺癌区别于正常肺组织的标志之一，可能参与了肺癌演变的生物学机制，PPAR7染色阳性随分化程度降低和伴淋巴结转移呈上升趋势，且前者有显著性差异，由此可推测PPARγ可能与肿瘤恶性程度有关，可作为判定肺癌预后的指标之一。同时也为将PPARγ特异性配体用于治疗肺癌提供了重要的理论依据。

新化合物O325H的抗糖尿病作用

目的研究新化合物O325H对2型糖尿病的作用。方法灌胃给药,观察O325H对正常小鼠的糖耐量以及对两种2型糖尿病小鼠的降糖降脂作用。采用RT PCR方法,研究O325H的作用机制。结果O325H对正常小鼠的糖耐量没有明显影响,对2型糖尿病小鼠有明显的降糖降脂作用,同时能够增加不同组织中脂蛋白脂酶(LPL)、脂肪酸转运蛋白(aP2)和葡萄糖转运体4(GluT4)mRNA的表达。结论O325H具有良好的降糖降脂作用,其作用机制符合PPARα/γ双重激动剂的特点,具有成为预防和治疗2型糖尿病药物的潜力。

辛伐他汀对帕金森病大鼠神经功能的影响

目的 探究辛伐他汀介导腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(AMPK/PGC-1α)通路对帕金森病大鼠模型神经功能的影响。方法 SD大鼠建立帕金森病大鼠模型,建模成功后分为模型组、阳性药物组(1.67 mg·kg^(-1)多巴丝肼)、低剂量实验组(10 mg·kg^(-1)辛伐他汀)、高剂量实验组(20 mg·kg^(-1)辛伐他汀)、抑制药组(20 mg·kg^(-1)辛伐他汀+0.25 mg·kg^(-1)的AMPK抑制药BML-275),并选择10只正常大鼠作为对照组。用酶联免疫吸附(ELISA)法检测多巴胺(DA)、3,4二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、5羟色胺(5-HT)水平,用蛋白质印迹法检测酪氨酸羟化酶(TH)、AMPK/PGC-1α通路相关蛋白表达水平,用免疫组化法检测TH表达水平,用试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果 对照组、模型组、高剂量实验组、抑制药组DA分别为(495.63±34.30)、(207.53±24.10)、(429.39±44.89)和(285.55±20.79) pg·mL^(-1),DOPAC分别为(33.38±2.48)、(17.70±1.31)、(29.12±1.72)和(20.67±1.45)ng·mL^(-1),HVA分别为(58.75±6.25)、(25.27±2.00)、(46.16±2.83)和(30.58±1.91)ng·mL^(-1),5-HT分别为(5.62±0.45)、(2.37±0.13)、(4.42±0.26)和(3.23±0.29)ng·mL^(-1),5-HIAA分别为(11.11±1.08)、(3.88±0.30)、(7.99±0.63)和(6.04±0.51)ng·mL^(-1),p-AMPK蛋白表达水平分别为0.98±0.06、0.35±0.04、0.80±0.05和0.21±0.02,PGC-1α蛋白表达水平分别为1.12±0.11、0.40±0.04、0.90±0.08和0.58±0.05。对照组上述指标与模型组比较、模型组上述指标与高剂量实验组、抑制药组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 辛伐他汀可通过调节AMPK/PGC-1α通路改善帕金森病大鼠模型神经功能。

瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的线粒体功能障碍和AMPK/PGC-1α信号通路的影响

目的:观察瓜蒌薤白半夏汤对缺血性心肌损伤大鼠的线粒体功能障碍及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子^(-1)α(PGC^(-1)α)信号通路的影响。方法:70只雄性SD大鼠,随机选取6只作为正常组(CON),其余给予高脂饲料结合注射异丙肾上腺素(5 mg·kg^(-1)·d^(-1),7 d),建立以高血脂为基础的缺血性心脏病模型。将造模成功者随机分为模型组(MOD)、瓜蒌薤白半夏汤高剂量(GXBD-H)组、瓜蒌薤白半夏汤中剂量(GXBD-M)组、瓜蒌薤白半夏汤低剂量(GXBD-L)组和美托洛尔(MET)组。其中,GXBD-H组、GXBD-M组和GXBD-L组大鼠分别给予11.2、5.6、2.8 g·kg^(-1)·d^(-1)的瓜蒌薤白半夏汤水煎液,MET组给予美托洛尔2.6 mg·kg^(-1)·d^(-1),CON组和MOD组给予等体积纯净水,连续28 d。心导管法测量大鼠血流动力学;透射电镜分析心肌组织线粒体变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清脑钠肽(BNP)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平;线粒体膜电位检测试剂盒(JC^(-1)法)检测线粒体膜电位;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测线粒体DNA拷贝数的变化;分光光度计法检测心肌组织三磷酸腺苷(ATP)含量。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK、PGC^(-1)α、核呼吸因子1(NRF1)和线粒体转录因子A(TFAM)的表达水平。结果:与CON组比较,MOD组的左室收缩末期压(LVESP)和左室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P<0.05,P<0.01),以及心室收缩时室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左室舒张时室内压最大下降速率(-dp/dtmax)显著降低(P<0.01);心指数和心肌间质纤维化面积均显著升高(P<0.01)及线粒体破坏损伤;血清BNP、cTnT和丙二醛(MDA)显著升高(P<0.01),以及血清超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低(P<0.01);心肌线粒体膜电位、DNA拷贝数和ATP水平均显著降低(P<0.01);心肌组织的p-AMPK/AMPK、PGC^(-1)α、NRF1和TFAM蛋白水平显著减少(P<0.01)。与MOD组比较,GXBD-H和GXBD-M组的LVESP、LVEDP、+dp/dt_(max)和-dp/dt_(max)明显改善(P<0.05,P<0.01);心指数和心肌间质纤维化面积均明显降低(P<0.05,P<0.01)及线粒体损伤减轻;血清BNP、cTnT和MDA明显降低(P<0.05,P<0.01),及血清SOD水平显著升高(P<0.01);心肌线粒体膜电位、DNA拷贝数和ATP水平均明显增加(P<0.05,P<0.01);心肌组织的p-AMPK/AMPK、PGC^(-1)α、NRF1和TFAM蛋白水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:瓜蒌薤白半夏汤可以降低心肌损伤模型大鼠的心功能和心肌病理形态变化,抑制线粒体功能障碍,并上调心肌组织p-AMPK/AMPK、PGC^(-1)α、NRF1和TFAM蛋白表达变化。该研究为深入探索经典复方防治心肌损伤的效应机制,提供了新的实验室证据。