鼠疫菌素的克隆表达与活性分析

为了研究鼠疫菌素的抑菌作用,PCR扩增并克隆鼠疫菌素(pst)基因,构建鼠疫菌素原核重组表达质粒pET28a-pst,在大肠杆菌BL21中表达。经His标签蛋白纯化柱纯化获得重组鼠疫菌素蛋白,并检测表达蛋白的抑菌活性。结果表明,鼠疫菌素基因长1 074 bp,重组鼠疫菌素为44 kD,以包涵体形式表达。纯化的鼠疫菌素对金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠杆菌078具有一定的抑菌作用。研究结果将为进一步研究鼠疫菌素的应用奠定基础。

鼠疫菌素抗体检测方法的应用研究

目的检测宿主动物血清中鼠疫菌素(Pesticin,Pst)抗体,探究Pst作为鼠疫抗体检测诊断试剂的可能性。方法采用重组Pst和鼠疫F1抗体间接ELISA法,对351份不同来源的鼠疫宿主动物血清样本进行检测。结果在鼠疫感染的宿主动物体内可以检测到Pst抗体,Pst抗体水平随着F1抗体水平的升高而明显升高,鼠疫患者血清中20个月时ELISA检测A值为0.438,Pst抗体维持在可检出水平。结论 Pst抗体检测方法可以与传统鼠疫F1抗体检测相结合,使鼠疫抗体检测方法更具可靠性。