肺炎克雷伯菌噬菌体裂解酶的研究进展

随着耐药性肺炎克雷伯菌的增多,噬菌体的潜力逐步被发掘。裂解酶在噬菌体裂解宿主菌时起到了重要作用,作为外源纯化蛋白使用时,防控效果更为显著。现有研究中,针对革兰阳性菌噬菌体裂解酶的表达更多,因其不具有革兰阴性菌细胞壁外层的肽聚糖层,而对肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌等革兰阴性菌的噬菌体裂解酶研究仍较为罕见。但已有研究表明,多种策略可以克服其肽聚糖层带来的阻碍。本文主要综述了近年来用于防控肺炎克雷伯菌的噬菌体裂解酶及其作用机制和防控优势,旨对其后续研究提供思路。

临床试验框架下噬菌体治疗多重耐药菌感染患者护理专家共识

目的 制订《临床试验框架下噬菌体治疗多重耐药菌感染患者护理专家共识》(以下简称《共识》),规范临床试验框架下噬菌体治疗多重耐药菌感染患者的护理实践流程。方法 成立《共识》构建小组,通过查阅文献和开展利益相关者访谈,形成《共识》初稿;通过2轮德尔菲专家咨询和4轮小组会议形成《共识》终稿。结果 《共识》围绕多重耐药菌感染患者治疗开始前、治疗期间、治疗结束后3个阶段展开,包括临床研究护士职责与资质、患者评估与入组、治疗环境准备、噬菌体制剂准备、依据治疗方案执行给药、感控措施执行与督查、观察监测、追踪随访、数据记录与管理等。结论 《共识》综合了文献报道、临床经验和专家建议,具有一定的科学性和实用性,可为在临床试验框架下护理噬菌体治疗多重耐药菌感染患者方面提供指导。

污水中肺炎克雷伯氏菌噬菌体的分离及其生物学特征、基因组分析

为探究噬菌体作为治疗肺炎克雷伯菌感染的新型潜在疗法的可能性,本研究采用双层平板法将医院周边污水中3株肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体进行分离纯化,透射电镜观察噬菌体形态结构,并进一步分析噬菌体裂解谱、最佳感染复数、生长曲线和酸碱耐受性等生物学特征,同时通过测序技术获得噬菌体全基因组信息并注释分析.实验结果表明,KP-ZS3为肌尾科噬菌体,KP-ZS4为短尾科噬菌体,KP-ZS6为长尾科噬菌体,且KP-ZS4的感染潜伏期稍长,KP-ZS3耐酸碱能力较强,KP-ZS6的裂解能力为3株噬菌体中最强、裂解谱较宽.3株噬菌体的外壳蛋白组分大小均在33~55 kD之间.此外全基因组分析发现KP-ZS3、KP-ZS62株噬菌体的基因组大小均在100 kb以上,噬菌体KP-ZS4的基因组相对较小(40608 bp).共线性分析显示噬菌体KP-ZS3与phiEap-3、Kp15高度相似;KP-ZS6与0507KN21、vB_EcoM_KWBSE43-6高度相似.KP-ZS4与Tyrion、TL-2011b相似度相对较低,序列一致性为76.77%、76.89%.以上结果表明,这3株噬菌体具有独特的生物学特性和基因组特征,它们在肺炎克雷伯菌感染治疗方面展现出不同的潜力和优势,特别是KP-ZS6因其裂解能力强和广泛的裂解谱,以及KPZS3因其强耐酸碱性,可能成为未来抗菌治疗的备用资源,这些发现为开发新型抗菌策略和治疗肺炎克雷伯菌感染提供了新的信息基础.

噬菌体在奶牛生产中的应用研究

奶牛乳房炎的有效控制及其瘤胃菌群的平衡调节,是维持其泌乳性能稳定、确保生产价值最大化的关键环节。在奶牛养殖过程中,乳房炎往往由多种细菌感染引发,不仅严重影响奶牛的泌乳性能,还直接导致奶品质量下降。为应对乳房炎,大量使用抗生素类药物成为常见做法,然而,这一策略虽能暂时缓解症状,却带来了细菌耐药性增强的挑战,使得后续治疗效果大打折扣。更为严重的是,广谱抗生素的使用还可能误杀机体内的有益菌群,特别是瘤胃内的益生菌群,影响奶牛的整体健康与营养吸收。噬菌体是特异性识别并杀死细菌的病毒,具有灭杀效率高、特异性强、无药物残留等绿色、高效特点。本文综合概述噬菌体概念、与细菌作用机制、对奶牛泌乳性能影响和噬菌体治疗方式优缺点等,为噬菌体在奶牛生产上的应用提供理论基础。

噬菌体裂解酶抑菌功能与应用研究进展

近年来,食品工业微生物污染和医疗领域耐药菌问题的频频出现,使得新型高效的天然防腐剂及抗菌药物的开发成为研究热点。噬菌体裂解酶是一类细菌细胞壁水解酶,可通过水解细菌细胞壁使细菌裂解进而抑制细菌生长,具有高效裂解性和高度特异性。研究发现,噬菌体裂解酶能够抑制食品中革兰氏阳性菌的生长,但不破坏食品中其他微生物群落,以及食品的结构和感官;同时研究表明,噬菌体裂解酶可裂解部分对抗生素已产生耐药性的细菌,具有作为新型食品安全制剂的潜力。主要对噬菌体裂解酶的抑菌功能及应用进行综述,以期为噬菌体裂解酶在食品工业及医疗领域中的研究和应用提供参考。

噬菌体保鲜技术在预制菜中的应用研究进展

目的综述噬菌体保鲜技术在预制菜中的应用研究,为预制菜的食品安全保障和噬菌体的应用研究提供依据。方法本文以预制菜的食品安全为出发点,就预制菜进行分类,重点对动植物源食材的噬菌体生物防控的应用研究进行讨论。结果分析表明,噬菌体在预制菜中的应用具有广泛的应用前景和价值。噬菌体可以有效地控制预制菜中的食源性细菌污染、保持食品品质并延长货架期。为提高噬菌体的抗菌效果,可以从噬菌体的浓度、稳定性及其与物理保鲜方法或生物、化学保鲜剂结合等方面考虑。结论为实现噬菌体在预制菜中的广泛应用,还需提高噬菌体的筛选效率和稳定性,并制定相应的标准和规范,以提高消费者的可接受程度,促进噬菌体在国内市场的推广和应用。因此,使用噬菌体保鲜技术不仅能够延长预制菜的货架期、提高食品安全性,还能为食品行业带来更多的发展机遇。

裂解性噬菌体内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展

随着细菌耐药情况的日益严重,人们开始寻找抗生素的代替物,噬菌体内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)受到了关注。其中内溶酶展现了良好的抑菌潜力,与抗生素和噬菌体制剂相比有着一定的优点。而内溶酶的作用特点决定了其在抑制革兰阴性菌时需要穿孔素的协同,因此有研究利用基因工程把内溶酶和穿孔素进行重组来解决这一问题。此外,在噬菌体-细菌相互作用的研究中,已有研究表明噬菌体基因参与调控细菌间的通讯系统,内溶酶和穿孔素正是其中重要的调控因素。本文通过对噬菌体与噬菌体制剂的研究进展、内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展及其应用进行了综述,以期为未来有关噬菌体裂解酶的研究提供思路。

噬菌体对三大耐药菌的防控作用研究进展

噬菌体发现之初,便被前苏联和东欧医学界用来治疗细菌感染。但是,随着抗生素时代的到来,人们慢慢忽略了对噬菌体的深入研究。近年来,由于全球耐药菌感染率不断攀升,用抗生素治疗细菌感染面临前所未有的挑战,一系列耐药病原菌的出现,如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)、结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis),尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)的出现,使得一些科学家和临床工作者开始把注意力重新集中到噬菌体研究上来,并在这个领域取得了较大进展。大量的实验证明:噬菌体可以有效地提高细菌感染的实验动物的存活率。本文就近几年国内外科研工作者在噬菌体治疗金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌三大耐药菌领域所取得的进展做一综述。

医用防护服与防护口罩阻隔性能研究

采用物理和微生物试验方法,对疾病预防与医疗机构使用的7类防护服与4种防护口罩进行了结构特点、过滤效率以及液体与微生物阻隔性能研究.结果,棉布与尼龙面料的防护服过滤效率只有6%～14%,完全不能阻挡水、人工血的渗透,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体悬液渗透也无阻挡作用.融喷非织造布与热粘非织造布的防护服过滤效率为16%～33%,不能阻挡人工血渗透,但在不加压条件下能阻挡金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体悬液的渗透;复合非织造布与Tyvek非织造布的防护服过滤效率为43%～93%,在不加压条件下能阻挡人工血、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体渗透.涂层面料的防护服过滤效率达99%以上,并能阻挡人工血、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体渗透,但其透气性为零.12层纱布口罩的过滤效率只有11%～15%,完全不能阻挡人工血、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体渗透.活性炭过滤口罩的过滤效率为11%～17%,不能阻挡人工血渗透,但能阻挡金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体渗透.一次性非织造布口罩的过滤效率为46%～48%,在不加压条件下能阻挡人工血、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体渗透.一次性N95防护口罩的过滤效率达到95%,其中医用口罩能阻挡人工血、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌F2噬菌体渗透.

噬菌体对人肠道正常菌群生态平衡及耐药性的影响

肠道微生态是指寄生在宿主肠道内的微生物总称。随着人类微生物计划的开展,肠道微生态代表着人体内最复杂和种群数量最多的共生微生物生态系统,作为一个"微生物器官"被广泛研究。早期对肠道微生态的研究多集中在肠道细菌群落的结构和动态变化,往往忽略了噬菌体的存在。但是近年来因为抗生素的滥用,噬菌体在肠道中的作用日益得到重视。本文拟对肠道细菌、噬菌体、抗生素三者间的关系进行综述,阐述肠道微生物间协同进化的机理,为治疗肠道相关的疾病提供新思路。

噬菌体与宿主细菌的攻防机制

噬菌体是侵袭细菌的病毒,也是病毒中最普遍、分布最广的类群。为了防止噬菌体侵染,细菌进化出多种多样的防御机制;而为了突破这些防御机制,噬菌体也进化得到了相对应的反制策略。本文即综述了这一领域的研究进展,有助于理解噬菌体与宿主细菌的共存共进化机制,合理利用噬菌体。

一种聚维酮碘消毒液对微生物杀灭效果的实验研究

目的了解一种聚维酮碘消毒液杀灭不同微生物效果。方法采用悬液定量杀菌试验进行实验室观察。结果以含有效碘100 mg/L该消毒液对金黄色葡萄球菌作用5 min,对铜绿假单胞菌作用7 min,杀灭对数值均>7.00;以50 mg/L有效碘对白色念珠菌作用1 min,杀灭对数值>6.00。以含有效碘500 mg/L该消毒液对脊髓灰质炎病毒作用60 min,灭活对数值>4.00。以含有效碘4640 mg/L该消毒液对大肠杆菌F2噬菌体作用4 h,杀灭对数值为3.11。结论碘伏消毒液对细菌繁殖体和真菌具有良好的杀灭作用;对脊髓灰质炎病毒和大肠杆菌F2噬菌体灭活效果明显不如对细菌杀灭效果好。

噬菌体疗法在土壤环境系统中靶向灭活致病细菌的研究进展

由致病细菌导致的新型生物污染土壤问题,已给人体健康和生态环境造成了较严重的安全隐患,开展针对性的风险管控和修复技术研究十分必要。噬菌体疗法作为一种可以高效靶向追踪灭活土壤体系中致病细菌的有效手段,越来越受到关注。本文将从噬菌体疗法定义的内涵及外延、噬菌体疗法在土壤系统中灭活致病细菌的应用及对土壤生态功能影响的角度,综述近年来国内外关于噬菌体疗法在土壤环境系统中靶向灭活致病细菌的研究进展,并提出现有研究不足及未来发展趋势,以期为噬菌体疗法在我国致病细菌污染土壤的治理应用提供科学参考和理论依据。

Selection of phages and conditions for the safe phage therapy against Pseudomonas aeruginosa infections

The emergence of multidrug-resistant bacterial pathogens forced us to consider the phage therapy as one of the possible alternative approaches to treatment. The purpose of this paper is to consider the conditions for the safe, long-term use of phage therapy against various infections caused by Pseudomonas aeruginosa. We describe the selection of the most suitable phages, their most effective combinations and some approaches for the rapid recognition of phages unsuitable for use in therapy. The benefi ts and disadvantages of the various different approaches to the preparation of phage mixtures are considered, together with the specifi c conditions that are required for the safe application of phage therapy in general hospitals and the possibilities for the development of personalized phage therapy.

两种菌落聚合酶链反应在抗体库筛选中的应用比较

目的 :探讨两种菌落PCR方法在抗体库筛选中的应用价值。 方法 :分别以 5个阳性克隆细菌菌落直接悬浮于去离子水中及悬浮于含 0 .1%的TritonX 10 0后经水浴煮沸作为模板 ,进行PCR反应。同时提取质粒DNA ,进行双酶切鉴定。 结果 :5个克隆的菌落PCR及酶切鉴定均检测到目的基因。 结论 :菌落PCR可用于筛选阳性重组克隆。

一种新的沙门氏菌增菌方法(PNT)的建立和应用

本文将裂解非沙门氏菌的肠杆菌科噬菌体和新生霉素加入到四硫磺酸钠煌绿肉汤中,建立了一种新的高选择性沙门氏菌增菌液(简称 PNT),该法可裂解和抑制肠肝菌科中绝大部分细菌而对沙门氏菌无影响。样品 TTB 增菌液经 PNT 微量复增菌6h 后,所分离的平板杂菌菌落数大大减少,绝大部分阳性标本沙门氏菌菌落占优势或呈纯培养状态。检测各类食品398份,并以同样条件作对比,PNT 法检出阳性131份,而 TTB 法仅检出阳性61份;PNT 法比原方法提高阳性检出率114.75％。本法简便、经济、效果明显,易于在实际工作中推广使用。

一类噬菌体死亡率受到噪声干扰的随机噬菌体-细菌模型研究

考虑了一类噬菌体死亡率受到白噪声干扰的随机噬菌体-细菌模型.主要研究了边界平衡点的随机渐近稳定性和随机模型的解围绕相应确定性模型正平衡点的振荡行为,并通过数值仿真验证了所得理论结果的正确性.

同时检测沙门氏菌和炭疽杆菌磁致伸缩生物传感器制备与应用

为探索2个磁弹性生物传感器进行串联是否会存在耦合干扰,继而影响各自的检测精度,该文以磁致伸缩带材（2 826 MB Metglas TM）为传感器膜片,不同种类噬菌体为生物识别元件,制备了可同时检测沙门氏菌和炭疽杆菌2种病菌的磁致伸缩生物传感器系统。采用物理吸附法在部分磁致伸缩传感器表面固定了对沙门氏菌具有检测专一性的E2噬菌体,用于检测沙门氏菌;部分磁致伸缩传感器表面固定了对炭疽杆菌具有检测专一性的JRB7噬菌体,用于检测炭疽杆菌。在磁致伸缩传感器表面固定噬菌体后,采用牛血清蛋白作为阻滞剂覆盖没有固定噬菌体的局部区域,防止检测中非专一性细菌吸附导致的检测误差。同时,制备了一种没有固定任何噬菌体只覆盖牛血清蛋白阻滞剂的参考传感器,目的是探索牛血清蛋对被检病菌吸附到传感器表面的阻滞效果。在检测过程中,传感器由磁场定位,将传感器浸入到病原体溶液中,吸附细菌后传感器质量增加,导致其共振频率降低。研究发现：所研制的生物传感器系统不存在相互耦合干扰,每种生物传感器能专一性地吸附与表面噬菌体对应的被测病菌。对浓度范围为5×10^5×108 CFU/m L菌液检测还发现,该系统具有良好的检测灵敏度,本研究所采用尺寸规格的传感器灵敏度同单个传感器检测灵敏度一样,为103 CFU/m L。同时,参考传感器浸入到病原体溶液中频率无变化证明了牛血清蛋白阻滞剂可有效消除没有固定噬菌体的局部表面对细菌的非专一性结合。扫描电镜对传感器样品表面进行观察,直观地证明了生物传感器与其目标被测物之间的吸附情况,观察结果为生物传感器对细菌的检测提供了可靠的参考证据。

谷氨酸发酵噬菌体研究初报

噬菌体污染,常给谷氨酸发酵造成严重危害,所以查明系外源噬菌体的污染或溶原菌诱导出的噬菌体污染,就成了人们关注的首要问题。我们从谷氨酸生产菌北京棒状杆菌突变株——FM820-7紫外线、丝裂霉素C诱导分离到二株噬菌体526,528,从FM820-7菌株生产环境样品中分离到一株噬菌体530,对分离的噬菌体形态及生物学特性进行了初步研究。并就溶原菌株诱导方式、噬菌体的检测实验条件进行了探讨,为迅速澄清污染源,提供了直接有效的手段。

切割果蔬中微生物的生物控制研究进展

综述了目前切割果蔬中微生物的生物控制,包括采用微生物竞生菌株、噬菌体以及微生物代谢产物等进行微生物的生长控制。