化纤方对人胚肺二倍体纤维母细胞的增殖抑制作用

目的:探讨中药化纤方对人胚肺二倍体纤维母细胞(2BS)增殖的抑制作用及其机理,为中医药介入肺纤维化防治提供实验和理论支持。方法:采用中药血清药理学实验方法,观察化纤方含药血清对2BS细胞的细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:经化纤方含药血清作用后,2BS细胞增殖受到显著抑制,并出现明显的细胞凋亡现象;化纤方各组S期细胞数显著增加,而G2/M期细胞数则明显下降,提示该方药可阻抑S期细胞向G2/M期的移行,从而抑制其分裂增殖。结论:化纤方有明显的抗肺纤维化作用,其作用机制可能是阻抑细胞增殖周期并诱导其发生细胞凋亡。

消岩汤药物血清对A549/DDP多药耐药逆转作用的研究

[目的]探讨消岩汤药物血清对接种S180昆明小鼠肿瘤的抑制作用,及对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/耐顺铂(DDP)的耐药逆转作用。[方法]通过建立小鼠肿瘤模型,观察消岩汤对小鼠S180移植肿瘤生长的影响;以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/DDP为研究对象,采用细胞毒实验(MTT)方法,探讨消岩汤对肺癌耐药细胞的多药耐药逆转作用。[结果]消岩汤高、低剂量组的抑瘤率分别是48.36%和27.87%;消岩汤荷瘤动物含药血清高、低剂量组分别与DDP合用时,对耐药细胞A549/DDP的杀伤作用分别是DDP组的1.78倍和1.57倍。[结论]消岩汤可改善小鼠生活质量,拮抗恶病质,并能够抑制肿瘤生长;消岩汤含药血清对A549及A549/DDP均有生长抑制作用,且能增强DDP对肺癌敏感细胞和耐药细胞的杀伤作用,具有耐药逆转作用。

血清药理学方法对药理、药效学和新药研发的贡献

背景:对于复杂成分药物,尤其是复方中药,国内外诸多学者采用血清药理学方法进行药效评价及相关作用机制的研究,推动了药理药效学研究进展以及血清药理学技术方法本身的不断规范与完善。目的:对最近几年来中药血清药理学方法在各领域研究中的广泛应用作以综述,并对血清药理学方法的优势和不足进行评价。方法:应用计算机检索Pub Med数据库、中国知网数据库2012年1月至2017年6月发表的与血清药理学方法学相关,或采研究方法中应用了含药血清的研究,检索词为"血清药理学,含药血清,serum pharmacology,medicated serum,drug-containing serum"。依据纳入排除标准筛选检索到的2 977篇文献,共纳入58篇并分析。结果与结论:血清药理学方法可以较好地反映药物的药效及其作用环境,有助于研究中药药效物质及其在体内的过程,因此已被众多学者和专家所采用。近年来对血清供体、给药剂量、频次方案、血清采集、处理保存、加药比例等研究方案的探索优化中取得了显著进展,并已在心血管系统、呼吸系统、消化系统、神经系统、骨骼系统、泌尿系统、生殖系统、免疫系统、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等方向广泛应用,推动了药理学、药效学和新药研发等研究的发展进步。

中药复方更年春含药血清及其主要单体对β淀粉样蛋白所致细胞损伤的保护作用

目的:观察中药复方更年春含药血清及其主要单体成分对β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)所致肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞损伤的保护作用。方法:采用Aβ25-35作用PC12细胞构建阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)细胞模型,相差显微镜观察细胞形态改变。运用中药血清药理学方法制备大鼠更年春含药血清,以四甲基偶氮唑盐法观察更年春含药血清及其主要单体芍药苷、黄连素、知母皂苷A-Ⅲ、淫羊藿苷对体外培养的PC12细胞活力的影响及其拮抗Aβ损伤的作用,采用流式细胞仪观察更年春复方含药血清及复方主要单体对Aβ诱导的PC12细胞凋亡的影响。结果:PC12细胞在Aβ25-35作用后,有活力细胞数目减少,细胞间连接较松,胞浆较暗淡,细胞碎片较多,贴壁细胞欠透明,部分发生皱缩,胞浆中有较多颗粒。Aβ25-35剂量、时间依赖性地抑制PC12细胞的活力。更年春含药血清可以增强PC12细胞活力,不同浓度更年春含药血清培养细胞24、48、72h后,其增强PC12细胞活力均在20%浓度作用最强。更年春复方含药血清及复方主要单体之一的黄连素及主要单体混合液(包括芍药苷、黄连素、知母皂苷A-Ⅲ、淫羊藿苷)均有拮抗Aβ对PC12细胞损伤的作用,且均能抑制Aβ诱导的PC12细胞早期凋亡,其中更年春含药血清作用最强,中药单体混合液作用其次,而单体黄连素作用最弱。结论:更年春对AD细胞模型有保护作用,其含药血清作用强于主要中药单体及主要单体的混合液。

喂饲补肾中药大鼠的血清对成骨细胞的生物学作用

目的探讨喂饲补肾中药大鼠的血清对体外培养的成骨细胞的生物学作用。方法在新生SD大鼠头颅骨第2代成骨细胞培养液中加入不同浓度(低、中、高)的中药血清,并与空白组对照,分别观察成骨细胞的增殖、分化和矿化功能。结果补肾中药血清具有刺激成骨细胞增殖的作用,可提高碱性磷酸酶活性并增加矿化结节形成的数量。结论补肾中药血清具有刺激体外培养的成骨细胞增殖及分化成熟的功能。

糖肾安对糖基化抑制作用的体外研究

目的 :研究中草药复方糖肾安对体外糖基化的抑制作用。方法 :正常大鼠被随机分为对照组、糖肾安组和氨基胍组 ,分别灌服饮用水、糖肾安 ( 6g· kg-1 )和氨基胍 ( 2 5 mg· kg-1 ) ,4d后收集各组动物血清 ,观察这些含药血清对体外糖基化的抑制作用。结果 :与阳性药氨基胍相比 ,灌服糖肾安的大鼠血清对体外糖基化反应有明显的抑制作用 ,相对抑制率为 1 0 2 .2 %。结论

中药血清药化学与中药血清药理学协同研究方法初探

采用ＨＰＬＣ二级管阵列检测法建立川芎不同提取物的血清指纹图谱，用１４Ｃ５ＨＴ释放法和４５Ｃａ掺入法测定相应含药血清的抗血小板释放５ＨＴ作用和阻滞血管内皮细胞钙通道作用，分析比较两者之间的关系，探索开展中药血清药化学与中药血清药理学协同研究的方法。

细辛配伍附子含药血清对大鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

【目的】观察细辛和细辛配伍附子含药血清对大鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨其抗心律失常的作用机制。【方法】连续给药7 d后制备大鼠含药血清,采用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞L型钙通道电流。【结果】细辛和细辛配伍附子含药血清均能增加大鼠心室肌L型钙通道电流,在0 m V钳制电压下,细辛含药血清使电流增加约(28.36±0.37)%,细辛配伍附子含药血清使电流增加(75.07±0.28)%。细辛含药血清使激活曲线、失活曲线左移,对恢复曲线无明显作用;细辛配伍附子含药血清使激活曲线、失活曲线左移,使失活后恢复时间延长。【结论】细辛配伍附子较单味细辛含药血清对心肌细胞L型钙通道的激活作用更强,表明药物配伍可增加疗效。

中药药理学体外实验方法研究进展

体外实验是中药药理学研究不可或缺的方法,但由于中药来源广泛、成分多样、理化性质不稳定等因素阻碍了其体外实验的开展。因此,寻找更为科学、合理的体外药理学研究方法已成为亟待解决的问题。目前中药药理学体外实验常用的方法有直接给药法和间接给药法,间接给药法又包括含药血清/浆法、含药肠吸收液法、含药肝孵育液法等。随着计算机技术和系统生物学的发展,将高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)、组学、网络药理学、计算机/人工智能辅助药物设计等技术与中药体外实验方法相结合,不仅大大降低了科研实验成本,还明显提高了中药药理作用探索、有效成分筛选及药物研发的效率,已逐渐被认可并广泛应用。该文就目前常用的中药药理学体外实验方法及其进展做一梳理,以期为选择合理的研究方法提供帮助。

中药复方体外药理研究方法思考

中药复方的体外药理机制研究是明确中药复方效应靶点和清晰阐释中医药内涵的关键,然而中药复方不同于单一成分或化学药物,其物质基础不明、效应成分不清和复杂的成分组成等特点使中药复方的体外药理研究方法争议颇多。就细胞实验而言,直接干预方法多采用水煎液或醇提物直接加入细胞培养体系,间接干预方法主要为制备含药血清、含药肠吸收液、含药肝孵育液或含药脑脊液等加入细胞培养体系,亦或是筛选有效活性成分直接进行药理机制研究。然而,每种方法均存在一定的缺点,不能完全清晰地实现中药复方的体外机制研究,因此,针对不同研究需求,选择合适的中药复方体外药理研究方法,通过研究设计规避其缺点,优化出具备较高科学性和可重复性的研究方案是中药复方体外药理研究亟待解决的关键技术问题。

最佳中药含药血清浓度的筛选方法研究现状

基于血清药理学为理论基础的体外细胞实验是研究中药药效机制的一种常见的研究方式,实验过程中筛选中药含药血清最佳干预浓度是整个实验的关键步骤。中药含药血清若稀释太过,或浓度太大,均可能导致出现假阴性或假阳性结果,最佳中药含药血清体积分数也可以减少后续实验分组数量,减少操作失误,因此筛选最佳干预血清体积分数对于研究中药药效机制的体外细胞实验具有重要意义。但筛选方法目前尚无统一的标准,查阅近20年国内外文献,从中药灌胃剂量、采血时间、血清稀释程度3个方面进行整理及分析,进而总结出最佳含药血清体积分数的筛选方法,为中药药效机理研究提供指导方向。筛选方法主要有“同剂量灌胃,同采血时间,不同体积分数”“不同剂量灌胃,同采血时间,同体积分数”“同剂量灌胃,不同采血时间,同体积分数”“不同剂量灌胃,不同采血时间,不同体积分数”“血清冻干粉干预法”“血清模拟西药体积分数梯度法”“纯血清干预法”。前2种筛选方法是目前相关实验研究较为常用的方式,以上筛选方法各有利弊,研究者应该根据实验的具体需求及实际情况进行合理选择。

复方瑞康欣对吗啡依赖人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞[Ca^(2+)]_i的影响

目的观察复方瑞康欣对吗啡依赖人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞[Ca2+]i的影响并探讨其机制。方法SK-N-SH细胞周期同步化后,用10μmol/L的吗啡作用48 h,建立吗啡依赖细胞模型;再用复方瑞康欣含药血清干预12 h,纳洛酮戒断,Fluo 3-AM标记后,流式细胞仪检测SK-N-SH细胞内游离Ca2+荧光强度。结果复方瑞康欣含药血清中、高剂量组细胞内游离Ca2+荧光强度均降低,与空白血清戒断组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论复方瑞康欣的戒毒作用可能与其下调细胞Ca2+水平有关。