温度对黄皮果实PAL、POD和PPO活性的影响

为探明贮藏过程中温度对黄皮果实采后保鲜的效果,研究了2～4℃、6～8℃和10～12℃等不同贮藏温度对黄皮果实几种酶活性的影响。结果表明,贮藏温度在2～12℃时,贮藏温度越低,保鲜效果越好,适宜的贮藏温度为2～4℃。2～4℃贮藏的黄皮果实苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性高于6～8℃和10～12℃贮藏的果实,而过氧化物酶(POD)和多酚化物酶(PPO)活性低于6～8℃和10～12℃贮藏的果实。2～4℃贮藏能增强黄皮果实的防伤害能力,明显抑制黄皮的酶促反应,有利于贮藏期限的延长。

L-苯丙氨酸生产中PAL酶活及产酸因素的研究

研究了诱导剂、表面活性剂及酶稳定剂对L 苯丙氨酸解氨酶 (PAL酶 )酶活的影响 ,考察了细胞量及反式肉桂酸的流加对产酸的影响。结果表明 :以 0 0 5 %L 苯丙氨酸为诱导剂可提高酶活 18 2 %,以 0 0 0 5 %溴化十六烷基吡啶为表面活性剂可提高酶活 12 4 %,PAL酶的稳定剂 2mol/L山梨醇与 0 1%戊二醛的组合可使酶活提高 94 5 %。细胞量 /肉桂酸比率α为 3 6对产酸最有利 ,在第 3,2 5 ,40h流加反式肉桂酸至浓度为 0 1mol/L ,可提高产酸浓度9 6 %。实验发现野生菌株的产酸能力可达 10 0 3g/L ,肉桂酸的转化率可达 6 0 %。

用富集培养技术分离具有PAL活性的酵母菌

为获取具有PAL活性的菌株，设计了从天然源分离酵母菌的富集培养技术，并从中国西南地区采集20个样品中得到菌株140余株，结果表明本富集培养技术用于从天然源分离具有苯丙氨酸解氨酶活性的菌株是有效、可行的。

不同降温方式下晚采鸭梨PAL基因相对表达与果心褐变的关系

为了研究缓慢降温与急速降温处理下苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonian-lyase,PAL)基因相对表达与晚采鸭梨果心褐变的关系,以晚采鸭梨为试材,测定了贮藏期间晚采鸭梨的褐变指数、质量损失率、硬度、呼吸强度、乙烯释放量、PAL活力等生理指标以及PAL基因相对表达量的变化。结果表明:缓慢降温处理的鸭梨果心褐变指数明显高于急速降温果实,且褐变情况更加严重;缓慢降温果实的PAL活力和PAL基因相对表达量在贮藏60 d以后高于急速降温果实;PAL基因相对表达量与PAL活力及果心褐变指数显著相关,说明PAL基因的相对表达越强,PAL活力越高,果心褐变越严重。结论:缓慢降温处理加速了鸭梨果心的褐变,急速降温能抑制PAL基因的相对表达,降低PAL活力,保持晚采鸭梨果实的较高品质。

红叶芥低温胁迫下苯丙氨酸解氨酶活性及其基因的克隆表达

用8℃低温处理红叶芥四叶期植株,在低温处理的52 h内分别取样6次,取样后分别提取叶片总RNA,再利用RT-PCR克隆得到红叶芥PAL基因开放阅读框内1 908 bp片段,核苷酸序列分析显示,红叶芥PAL基因与芜青PAL基因的同源性达到99%.半定量RT-PCR结果显示,在8℃低温胁迫下,红叶芥PAL基因表达量呈现先降低后升高的趋势,在处理18 h后达到最低点,随后迅速升高,这与PAL活性变化一致.

干旱胁迫下外源一氧化氮促进银杏可溶性糖、脯氨酸和次生代谢产物合成

以硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)为一氧化氮(NO)供体,研究其在干旱胁迫下对银杏叶片物质代谢的影响。结果表明,在土壤相对含水量为35%的干旱胁迫下,250μmol/L SNP显著提高可溶性糖含量、脯氨酸含量、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)活性、黄酮类化合物和银杏内酯含量。NO清除剂血红蛋白(hemoglobin)抑制了SNP对银杏叶片可溶性糖、脯氨酸、PAL酶活性、黄酮和银杏内酯合成的促进作用,说明SNP是通过其分解产物NO影响这些物质的合成。推测在干旱胁迫下次生代谢产物黄酮类物质和银杏内酯的作用类似脯氨酸和可溶性糖,NO通过促进这些物质的合成,来缓解干旱胁迫的不良影响。

荔枝果皮中4种酚类代谢酶活性的测定方法

为了改进酚类物质生物合成途径中关键酶酶活性的测定方法,以南方重要常绿果树荔枝Litchi chinensis果皮为材料,采用两点法和酶动力法2种酶活性研究方法,结合分光光度法和高效液相色谱法检测产物浓度变化,优化了4种酚类代谢常见酶[包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查儿酮异构酶(CHI)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)和类黄酮糖基转移酶(UFGT)]的测定方法,指出了酶液的纯化、酶活性的保护以及反应底物的溶解方法等对试验结果的稳定性和可靠性的影响,介绍了试验过程中常遇到的问题和具体的解决方法以及试验过程中的注意事项.应用改进后的方法测定荔枝发育过程中果皮PAL、CHI、DFR和UFGT的酶活性,结果发现活性变化趋势与前人的报道基本一致.改进的PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性的测定方法可靠,可为相关的研究提供重要的参考.