‘皇家嘎啦’与‘GL-3’苹果果实的品质分析

为科学评价‘皇家嘎啦’与‘GL-3’苹果果实品质表现,本研究以‘皇家嘎啦’和‘GL-3’苹果为试验材料,对盛花后30、60、90和120 d的果实进行了品质检测。依据水果品质测定标准检测‘皇家嘎啦’和‘GL-3’果实的单果重、纵横径、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、固酸比、可溶性糖含量、淀粉含量、有机酸含量、植物总酚含量以及香气等指标,并通过方差分析、相关性分析、主成分分析综合对比苹果综合品质。结果表明,‘皇家嘎啦’的硬度、可溶性糖含量、果糖含量、蔗糖含量、葡萄糖含量以及可溶性固形物含量显著高于‘GL-3’苹果,‘皇家嘎啦’和‘GL-3’苹果的苹果酸含量、柠檬酸含量以及可滴定酸含量无显著差异。

产GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达

为了实现GL 7 ACA酰化酶在大肠杆菌中的成功表达 ,将GL 7 ACA酰化酶基因用PCR的方法去除其信号肽序列 ,并将其连接到质粒pET 2 8a ,通过筛选得到了表达GL 7 ACA酰化酶的重组菌BL2 1 (DE3) /pET ACY。分别考察了诱导温度、菌浓 (OD60 0 )、诱导剂IPTG的用量等因素对重组菌表达GL 7 ACA酰化酶的影响。在优化条件下 ,GL 7 ACA酰化酶酶活可达 2 66U/L。GL 7 ACA酰化酶经一步DEAE Sepharose纯化即可达到 80 %的纯度 ,酶活收率为 5 0 %。

金属螯合载体一步纯化与固定化GL-7ACA酰化酶

采用金属鳌合亲和层析技术,以EIP-ARG-IDA-Co^2＋为载体,从可溶性总蛋白中一步分离纯化具有His-tag标签的GL-7ACA酰化酶.在此基础上进行了固定化方面的研究,其固定化最适条件是150-200U/g给酶量与载体比,固定化时间16 h,固定化介质pH=7.0.固定化酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为8.0.同时还考察了固定化酶的热稳定性、重复利用性及载体的重复使用等特性.

胃癌单克隆抗体GL-013对应抗原的免疫电镜分布观察

运用酶标免疫电镜技术,对16例不同类型胃癌进行了胃癌单克隆抗体GL-013对应之抗原的超微结构水平分布观察。证实了GL-013抗原在胃癌细胞及癌旁“正常”粘膜分布的差异,首次提出该抗原可能是一种可溶性胃癌相关抗原,可做为胃癌研究及血清学诊断的免疫指标之一。

尿激酶原测定方法的改进及对GL-11G工程细胞表达尿激酶原水平稳定性观察

该文对原来的纤溶板法进行了改进，使测定结果更可靠，精确，并节省成本。用该法对ＣＬ－１１Ｇ工程细胞表达尿激酶原水平的稳定性观察表明，经１０４代连续传代，其表达量终始保持在５５９．６±９６．３１ＩＵ／１０６细胞／天左右，符合生产细胞的要求。

酵母基因突变型GL-7生物转化24-亚甲基胆固醇和谷甾醇的研究

24-亚甲基胆固醇和谷甾醇用酵母基因突变型GL－7进行生物转化，在酵母22-位脱氢酶的作用下形成其相应的22-位去饱和的产物。用色谱、光谱以及与标准品对照等方法鉴定代谢产物的结构分别为菜子甾醇和豆甾醇。

国产固定化GL-7-ACA酰化酶制备7-ACA的工艺优化

通过对国产固定化GL-7-ACA酰化酶和游离酶的表观米氏常数(Km)及最大反应速度(Vm)的测定.结果表明:固定化GL-7-ACA酰化酶的Km和Vm值分别为8.69 mm o l.L-1和76μm o l.g-1m i-n 1,均较游离酶高;在对酶促反应的关键参数底物质量浓度、转化温度、转化pH进行优化后,用固定化GL-7-ACA酰化酶在底物GL-7-ACA质量浓度30 g.L-1、转化温度25℃、转化pH 8.0的条件下转化GL-7-ACA制备7-ACA可连续操作150批以上,转化率和收率均达95%以上.

烟草赤星病菌GL-6产毒条件研究初报

为确定烟草赤星病菌GL-6最佳产毒培养条件,作者就菌株的培养方式、培养液类型与产毒时期进行了研究,通过多因素试验方差分析,结果表明GL-6的最佳产毒培养条件为PD培养液静止培养或振荡培养14d.

GL-统计量的中偏差及大偏差

本文讨论GL-统计量的中偏差。Cramer型大偏差及 Chernoff型大偏差。其中关于GL-统计量的中偏差及Cramer 型大偏差结果推广了Vandemaele et al有关L-统计量,U-统计量的结果。这里,首次给出关于 U-统计量的 Chernoff型大偏差。应用它得到 GL-统计量的 Chernoff型的大偏差。所采用的方法为 Gateux微分逼近和 Bahadur 分位数表示法。

1GL-80型自驱型园艺作业机的研究设计

介绍了1GL-80型自驱型园艺作业机的总体结构、主要技术参数、主要工作部件的工作原理及结构设计;该机以旋耕为主,可挂接多种农机具进行田间作业,具有结构简单、转弯灵活、适应性好等特点。

假单胞菌sp.130 GL-7-ACA酰化酶的核苷酸和蛋白质序列分析

对来源于假单胞菌sp .130的戊二酰 7 氨基头孢烷酸 (GL 7 ACA)酰化酶结构基因的全序列及所编码蛋白质的α,β亚基的N末端和C末端的氨基酸序列进行了测定。将蛋白质序列与其他同类的GL 7 ACA酰化酶进行了同源性比较 ,结果显示该酶与来源于假单孢菌GK16和C42 7的酰化酶的序列有较高同源性 ,而与其它同类酰化酶的同源性较低。这些酶的α亚基N 末端差别较大 ,但是 β 亚基的N

GL-7ACA酰化酶基因工程菌(E.coliBL21(DE3)pYW-GA)发酵工艺的优化

探索了组成型重组大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pYW-GA高效表达GL-7ACA酰化酶(EC.3.1.5.11)的发酵工艺.在摇瓶培养获得GL-7ACA酰化酶工程菌的最佳发酵条件的基础上,用5L自控发酵罐进行分批补料培养,为减少细菌代谢过程中有害的物质(主要是乙酸)的产生及酶的高效表达,发酵过程中采用不同的流加方式进行补料,同时对转速和溶氧等进行控制.考察了恒速流加、pH反馈流加和指数流加几种补料模式,比较得出菌浓最高的是pH8.0反馈流加这一模式,OD600可达35,而酶活最高的模式是pH7.0反馈流加,最高酶活可达3 463.8 U/L.大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pYW-GA高效表达GL-7ACA酰化酶的发酵工艺的建立为工业化生产GL-7ACA酰化酶和头孢类抗生素提供了基础.

GL-88级高铝料的发展状况

简述了GL-88级高铝料的煅烧方法、质量波动和价格变化等。能源结构的变化和降本增效的需要,加之燃气竖窑生产技术的日趋成熟,促使GL-88级高铝料煅烧方式向节能燃气竖窑方向快速发展。铝工业高速发展导致铝矾土生料供不应求,致使十年来GL-88级高铝料价格的快速上涨和质量的波动。

4GL-120型自走收割机的研究和应用

对我省我针对性地解决水稻收割机械化的问题，开发研制了４ＧＬ－１２０型自走收割机，该机既能减轻劳动强度，又可抢农时，有利于增产增收，可为将来推广联合收割机提供暂时的过渡机型。

GL-7-ACA酰化酶的分离纯化及性质研究

CU334是高表达GL-7-ACA酰化酶工程菌,其菌悬液用超声波处理后,经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析、DEAE—纤维素DE-52柱层析、Sephadex G-200凝胶过滤及羟基磷灰石吸附柱层析等步骤,得到了凝胶电泳均一的GL-7-ACA酰化酶蛋白,纯化了22倍,得率4.0％,比活力为13.8U/mg。用浓度梯度PAGE测得GL-7-ACA酰化酶的分子量为134kD,用SDS-PAGE测得两个亚基分子量分别为15.5kD和58.4kD。用PI法测得等电点为3.5。GL-7-ACA酰化酶反应最适pH为7.0。反应最适温度为37℃,GL-7-ACA酰化酶对底物GL-7-ACA的K_m值为0.50mmol/L,V_(max)为13.10U·mg^(-1)。Ca^(2+)、EDTA和巯基乙醇对该酶有激活作用,Cu^(2+)、Fe^(2+)和Mg^(2+)等有一定程度的抑制作用。产物7-ACA、戊二酸均为GL-7-ACA酰化酶的反竞争性抑制剂,其K_1值分别为16.58mmol·L^(-1)和9.88mmol·L^(-1)。

GL-7ACA酰化酶基因工程菌(Escherichia coli MMR204/pZC1)批式补糖发酵条件优化

戊二酰 7 氨基头孢烷酸 (GL 7 ACA)酰化酶 (3 1 5 11)可有效催化GL 7ACA分子中戊二酰基侧链水解 ,形成 7 氨基头孢烷酸 (7 ACA)而成为两步酶法生产 7 ACA的重要工业用酶之一。在已构建的GL 7ACA酰化酶基因(acy)重组质粒pZC1基础上 ,进一步对酰化酶基因工程菌EscherichiacoliMMR2 0 4 pZC1的产酶发酵条件进行了考察。研究表明 ,工程菌的最佳发酵温度为 33℃ ,pH7 5～ 8 5的微碱条件有利于酶的生成。LB培养基补加适量葡萄糖 (1～ 5g L) ,可提高发酵生物量和产酶水平 ,但葡萄糖的过量补加 (6g L以上 ) ,则导致发酵液偏酸 (低至pH4 0 )而完全抑制酰化酶生成 ,并证明工程菌生长和产酶对乙酸的抑制效应较为敏感。同时通过 5L自控发酵罐的批式补糖试验 ,对恒速流加、pH反馈控制和指数流加等三种补糖模式的发酵产酶进程进行了比较。结果发现 ,三种方式的补糖条件下 ,acy基因在tac启动子控制下 ,呈组成型表达 ,细胞生长与产酶同步 ,无需诱导 ;其中 ,以指数流加方式得到的生物量和产酶水平最高。而从acy基因的表达效率 ,即比酶活看 。

赤灵芝 GL-2 菌株深层培养复因子筛选

为筛选赤灵芝ＧＬ－２菌株深层培养的高产组合，以多糖产量为目标，进行了五因素四水平及四因素三水平的正交设计试验．结果表明，赤灵芝ＧＬ－２深层培养中，Ｃ源种类和含量是影响灵芝多糖产量的主要因素，其适用Ｃ源为麦芽糖与葡萄糖（３．５％∶０．５％），适用Ｎ源为蛋白胨与酵母膏（０．５％∶０．５％）．

GL-7ACA酰化酶表达检测系统的建立

戊二酰 7 氨基头孢烷酸 (GL 7ACA)酰化酶能够催化GL 7ACA分解生成 7 ACA ,后者是工业半合成生产头孢类抗菌素所需的重要前体。为了准确地检测GL 7ACA酰化酶及其突变体的表达 ,本研究通过构建一系列质粒载体 ,建立了两个简便有效地测定GL 7ACA酰化酶基因acy表达量的系统 ,从而可对酶的比活力进行定量。我们将两个报告基因 ,即儿茶酚双加氧酶基因 (xylE)和 β 半乳糖苷酶基因 (lacZ)分别置于acy基因的下游 ,使之与acy基因共用一个启动子 ,进行串联表达 ,各自构成一个多顺反子系统。实验证明 ,基因融合后的儿茶酚双加氧酶或 β 半乳糖苷酶的活力可以间接反映acy的表达量。

别克GL-8汽车后刮水器刮刷角度设计改进

别克商务车GL-8后刮水器在实际使用中存在刮刷角度增大、超出设计值,导致刮水片和玻璃边框撞击的现象。在分析刮水器刮刷工况、零部件尺寸等影响刮刷角度的因素基础上,找出影响刮刷角度变化的关键因素,并对后刮水器刮刷角度设计提出改进建议。

GL-S60、GL-CS60与3ESPC三种宽频带地震计工作性能对比

通过对GL-S60、GL-CS60与3ESPC三种宽频带地震计进行对比观测,分析3套观测设备的相关性、地震计自噪声、短周期噪声、长周期噪声等性能,并对3套系统产生的差异进行探讨,希望对以后地震计的研究提供一定参考。