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共表达磷脂酶C促进葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的胞外表达
被引量:
2
1
作者
姜琪
宿玲恰
+1 位作者
吴敬
陈晟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期236-242,共7页
磷脂酶C(PLC)能够水解细胞膜主要成分磷脂,使细胞膜通透性增强,从而能够释放出胞内物质。作者构建了PLC与天然胞内定位蛋白葡萄糖异构酶(GI)共表达的重组大肠杆菌,摇瓶发酵胞外上清液中GIC酶活达到3.4 U/m L,占胞外和胞内总酶活的93%,表...
磷脂酶C(PLC)能够水解细胞膜主要成分磷脂,使细胞膜通透性增强,从而能够释放出胞内物质。作者构建了PLC与天然胞内定位蛋白葡萄糖异构酶(GI)共表达的重组大肠杆菌,摇瓶发酵胞外上清液中GIC酶活达到3.4 U/m L,占胞外和胞内总酶活的93%,表明GIC成功实现了胞外表达。将胞外上清液中的GIC进行分离纯化和酶学定性,发现其比活为12.1 U/mg,最适反应温度为80℃,最适pH为10,均与对照菌单独表达的GIO性质基本一致。在此基础上,对上述重组菌进行3 L发酵罐培养,发酵周期为24 h,酶活达到17.7 U/m L,表明其良好的工业化放大生产前景。
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关键词
磷脂酶
c
葡萄糖异构酶
共表达
胞外表达
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职称材料
题名
共表达磷脂酶C促进葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的胞外表达
被引量:
2
1
作者
姜琪
宿玲恰
吴敬
陈晟
机构
食品科学与技术国家重点实验室江南大学
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期236-242,共7页
基金
国家杰出青年基金项目(31425020)
江苏省自然科学基金项目(BK20140132)
文摘
磷脂酶C(PLC)能够水解细胞膜主要成分磷脂,使细胞膜通透性增强,从而能够释放出胞内物质。作者构建了PLC与天然胞内定位蛋白葡萄糖异构酶(GI)共表达的重组大肠杆菌,摇瓶发酵胞外上清液中GIC酶活达到3.4 U/m L,占胞外和胞内总酶活的93%,表明GIC成功实现了胞外表达。将胞外上清液中的GIC进行分离纯化和酶学定性,发现其比活为12.1 U/mg,最适反应温度为80℃,最适pH为10,均与对照菌单独表达的GIO性质基本一致。在此基础上,对上述重组菌进行3 L发酵罐培养,发酵周期为24 h,酶活达到17.7 U/m L,表明其良好的工业化放大生产前景。
关键词
磷脂酶
c
葡萄糖异构酶
共表达
胞外表达
Keywords
phospholipase c
,
glucose isomerase
,
co-expression
,
released into culture medium
分类号
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
共表达磷脂酶C促进葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的胞外表达
姜琪
宿玲恰
吴敬
陈晟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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