单甲氧基聚乙二醇修饰蚓激酶的制备及性质研究

采用以三聚氯氰活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000),对从赤子爱胜蚓体内提取的抗血栓酶——蚓激酶进行了化学修饰,以期降低其抗原性及增加它的稳定性。实验表明,在37℃下,15.0mL,pH9.2,0.1mol?L?1的硼酸缓冲液中,按每1.0mg的蚓激酶加入25.5mg活化的mPEG,水浴保温1h,经透析、超滤浓缩、冻干得mPEG修饰酶,测得蚓激酶的修饰率为63.2%,酶活回收率为56.6%。在此基础上,对修饰蚓激酶的性质进行了研究。结果显示,修饰后的蚓激酶对底物的亲和力有所增加(天然酶表观米氏常数Km值为0.267mg.mL?1,修饰酶Km'值为0.115mg.mL?1);修饰蚓激酶的抗胰蛋白酶水解能力、热稳定性均优于天然酶;同时修饰酶的抗原性有了较大程度的降低,与抗血清的结合能力大约是天然酶的25.0%左右。

四水硝酸钙结晶动力学研究

实验考察了四水硝酸钙在实际体系即硝酸酸解磷矿后所得的酸解液中,在混合悬浮混合排出(MSMPR)结晶器里,在19℃条件下,不同停留时间对其结晶动力学参数的影响,得到其成核速率与悬浮密度、生长速率的关系式:B0=5.209 8×104MT1.056 3G1.109 4。此外,还考察了在实际体系中,在19℃、45 min停留时间条件下,不同搅拌速率对四水硝酸钙结晶动力学参数的影响,得到关联式:B0=1.732 5×103MT1.037 1G1.021 3np0.606 6。将实际体系下得到的两式与文献中Ca(NO3)2-H2O和Ca(NO3)2-H3PO4-HNO3-H2O体系下的两式进行比较,比较结果对实际工业生产具有重要的指导意义。