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Proteome changes during bone mesenchymal stem cell differentiation into photoreceptor-like cells in vitro 被引量:2
1
作者 Yu Hong Guo-Xing Xu 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2011年第5期466-473,共8页
Human bone marrow stem cell (BMSC) may be directed to differentiate into multiple cell types, including adipocyte, chondrocyte, osteocyte and photoreceptor, among others. At present, little is known about the features... Human bone marrow stem cell (BMSC) may be directed to differentiate into multiple cell types, including adipocyte, chondrocyte, osteocyte and photoreceptor, among others. At present, little is known about the features of the BMSC and the protein control mechanism underlying their differentiation into photoreceptor-like cells. In the present study, BMSCs are induced to differentiate into photoreceptor-like cells in an in vitro model simulating the in vivo microenvironment. Up to 32 proteins are identified and differentially expressed through two-dimensional difference gel electrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry to establish a differential protein database for photoreceptor-like cells from BMSC-induced differentiation. Western blot analysis further confirms the expression of some of the identified proteins. The present study proposes the total protein expression and possible molecular mechanism during the differentiation of BMSCs into photoreceptor cells. 展开更多
关键词 bone marrow stem cell induced to differentiate photoreceptor-like cells
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骨髓间充质干细胞向光感受器样细胞和视网膜神经样细胞的分化 被引量:4
2
作者 徐志刚 穆敬中 +2 位作者 吕淑慧 李宏 刘远光 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第2期126-129,134,共5页
目的探讨与新生鼠视网膜神经细胞共培养诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)的分化情况。方法体外贴壁培养法分离培养Lewis大鼠BMSC,记录BMSC的增殖情况并进行鉴定;制备细胞爬片并在双层培养板内与新生鼠视网膜神经... 目的探讨与新生鼠视网膜神经细胞共培养诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)的分化情况。方法体外贴壁培养法分离培养Lewis大鼠BMSC,记录BMSC的增殖情况并进行鉴定;制备细胞爬片并在双层培养板内与新生鼠视网膜神经细胞共培养,观察BMSC的神经存活和分化情况,并行免疫荧光染色鉴定。结果早期的BMSC分裂较缓慢,第2天进入快速增殖期,细胞生长活跃,大约持续至第5天,细胞分裂进入平台期,增殖缓慢或轻微下降。流式细胞仪显示,90.27%的3代BMSC处于G0-G1期,其余9.73%的细胞处于G2期、S期和M期;93.28%的4代BMSC处于G0-G1期,其余6.72%的细胞处于G2期、S期和M期。流式细胞仪检测示3代和4代BMSC抗原CD90+/CD45-分别为92%、90%,体外获得了较高纯度的BMSC。MTT法检测共培养后3d、5d、7d的细胞存活率分别为(65.48±9.95)%、(73.56±8.68)%、(76.84±8.65)%,与对照组[(66.14±10.45)%、(70.11±9.60)%、(73.21±6.98)%]比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。免疫荧光染色显示,共培养组诱导后部分BMSC视蛋白、巢蛋白于3d后、微管蛋白于5d后出现阳性反应,对照组均为阴性。结论 BMSC具有向光感受器样细胞和视网膜神经样细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 共培养 视网膜神经样细胞 光感受器样细胞
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骨髓间充质干细胞分化为光感受器样细胞的体外诱导和微环境研究 被引量:4
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作者 洪玉 徐国兴 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期659-663,共5页
背景近年来间充质干细胞(MSCs)在眼科方面已成功诱导分化为角膜细胞、视网膜神经节细胞(RGCs)、视网膜神经样细胞等,但诱导成为光感受器细胞及其微环境的研究尚少。目的研究骨髓MSCs(BMSCs)在体外定向分化为光感受器样细胞的可... 背景近年来间充质干细胞(MSCs)在眼科方面已成功诱导分化为角膜细胞、视网膜神经节细胞(RGCs)、视网膜神经样细胞等,但诱导成为光感受器细胞及其微环境的研究尚少。目的研究骨髓MSCs(BMSCs)在体外定向分化为光感受器样细胞的可能性及其所需的微环境。方法分别将第2代BMSCs细胞株和视网膜色素上皮(RPE)细胞株进行常规培养和传代,取第4代人BMSCs细胞株及第3代RPE细胞株用于实验。将BMSCs分为诱导组和对照组,诱导组的BMSCs与含有20μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20μg/L表皮生长因子(EGF)及20μg/L脑源性神经营养因子(BDNF)的骨髓干细胞培养基(MSCM)及RPE细胞的条件培养液共培养进行BMSCs的诱导分化,而对照组的BMSCs仅用MSCM培养基进行培养,倒置显微镜下观察分化细胞的形态学变化。采用免疫细胞化学法检测RPE细胞诱导BMSCs3、5、7d时细胞中视紫红质蛋白的阳性表达率,以鉴定分化细胞的表型。采用逆转录PCR(RT—PCR)法检测RPE细胞诱导BMSCs5d、7d时细胞中视紫红质和恢复蛋白mRNA的表达情况。结果培养的BMSCs形态均一,呈纺锤形或梭形,RPE细胞形态均一,呈多边形或六边形,细胞内充满色素颗粒,生长良好。诱导后的部分BMSCs呈神经样细胞形态,细胞变圆,突起增长,突起末端可见一级、二级分支,相互间连接呈网状。免疫细胞化学法检测表明,诱导组细胞诱导后第3、5、7天细胞中可见视紫红质的表达,表达率分别为(5.83±0.29)%、(20.36±0.32)%和(29.80±2.30)%,明显高于对照组的(0.71±0.35)%、(2.56±0.24)%和(2.32±0.42)%,差异均有统计学意义(t3d=41.510,t5d=107.290,t7d=30.036,P〈0.01)。RT—PCR法检测显示,诱导后5d、7d诱导组细胞中视紫红质和恢复蛋白mRNA表达的灰度值均明显高于对照组,差异均有统计学意义(视紫红质mRNA:t5d=103.506,t7d=122.584,P〈0.01;恢复蛋白mRNA:t5d=106.674,t7d=189.992,P〈0.01)。结论采用含bFGF。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 诱导分化 光感受器样细胞 微环境 条件培养液 视紫红质 恢复蛋白
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骨髓间充质干细胞在视网膜移植领域的研究进展 被引量:1
4
作者 徐志刚 吕淑慧 +3 位作者 穆敬中 张雪岩 齐艳秀 朱金玲 《国际眼科杂志》 CAS 2013年第1期79-81,共3页
临床上对于视网膜退行性疾病的治疗仍然只停留在改善循环、营养神经等支持治疗阶段,缺少特效的治疗方法,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是具有较强自我复制功能和多向分化潜能的一类细胞,人们开始通过尝试不同的... 临床上对于视网膜退行性疾病的治疗仍然只停留在改善循环、营养神经等支持治疗阶段,缺少特效的治疗方法,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是具有较强自我复制功能和多向分化潜能的一类细胞,人们开始通过尝试不同的分离、诱导、移植等手段,以实现其向视网膜细胞的转化,并最终实现体内的替代治疗。我们就BMSCs在视网膜移植领域的研究进展进行综述,以期为进一步的研究提供参考。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 视网膜神经样细胞 光感受器样细胞
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黄鳝脑部松果腺复合体的结构研究(英文) 被引量:1
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作者 石琼 孙儒泳 +1 位作者 Pak-LaiTang 林浩然 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期106-113,共8页
应用松果腺细胞改良染色法(Achucarro-HortegaStaining),证实了黄鳝脑部存在松果腺复合体.光镜(HE染色)及电镜切片的研究结果表明,黄鳝松果腺复合体由终囊、松果体柄和背囊三部分组成;每部分均包含... 应用松果腺细胞改良染色法(Achucarro-HortegaStaining),证实了黄鳝脑部存在松果腺复合体.光镜(HE染色)及电镜切片的研究结果表明,黄鳝松果腺复合体由终囊、松果体柄和背囊三部分组成;每部分均包含有类光感细胞、支持细胞及神经节细胞等细胞类型.类光感细胞包括外节、内节、胞体和基突4个组成部分,其形态结构与脊椎动物眼中的光感细胞极其相似.由于类光感细胞中分布有大量的分泌样颗粒,故而推测黄鳝脑部松果腺复合体具有感光与分泌的双重功能. 展开更多
关键词 黄鳝 松果腺复合体 类光感细胞 脑部
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黄鳝松果腺复合体的超显微结构研究
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作者 石琼 林颖华 +1 位作者 林浩然 Pak-LaiTang 《中山大学研究生学刊(自然科学与医学版)》 1996年第4期8-15,共8页
本论文应用松果腺细胞改良染色法,首次证实黄鳝脑中松果腺复合体的存在。光镜(HE染色)及电镜切片的研究结果表明,黄鳝松果腺复合体由终囊、松果体柄和背囊三部分组成;每部分均包含有类光感细胞、支持细胞以及神经节细胞等细胞成分。类... 本论文应用松果腺细胞改良染色法,首次证实黄鳝脑中松果腺复合体的存在。光镜(HE染色)及电镜切片的研究结果表明,黄鳝松果腺复合体由终囊、松果体柄和背囊三部分组成;每部分均包含有类光感细胞、支持细胞以及神经节细胞等细胞成分。类光感细胞中有分泌样颗粒,由此推测黄鳝松果腺复合体具有感光与分泌功能。 展开更多
关键词 黄鳝 松果腺复合体 显微结构 超微结构 类光感细胞
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黄鳝松果腺复合体的超显微结构研究 被引量:6
7
作者 Shi Qiong Lin Haoran Deng Baili1)(School of Life Sciences, Zhongshan University,Guangzhou 510275) (Department of Applied Biology and Chemical Technology, The Hong Kong Polytechnic University,Kowloon) 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期83-84,共2页
关键词 黄鳝 松果腺复合体 类光感细胞
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TLR-4/MyD88通路激活和小胶质细胞极化在氧化低密度脂蛋白导致的小鼠视网膜损伤中的作用 被引量:1
8
作者 李雷 杨名珠 +2 位作者 周庆儒 邱瑞琪 雷博 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第8期597-602,共6页
目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)导致的视网膜损伤是否与Toll样受体-4(TLR-4)/MyD88通路激活和活化小胶质细胞使其极化为M1表型相关。方法雄性C57BL/6小鼠分为两组,实验组小鼠视网膜下注射1μL ox-LDL,对照组小鼠注射等体积的磷酸盐... 目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)导致的视网膜损伤是否与Toll样受体-4(TLR-4)/MyD88通路激活和活化小胶质细胞使其极化为M1表型相关。方法雄性C57BL/6小鼠分为两组,实验组小鼠视网膜下注射1μL ox-LDL,对照组小鼠注射等体积的磷酸盐缓冲液(PBS);2周后,采用免疫荧光染色检测视网膜小胶质细胞的离子钙结合适配器分子1(Iba-1)、iNOS的表达,TUNEL染色检测光感受器细胞凋亡,OCT检测视网膜外核层(ONL)和内核层(INL)厚度,ERG检测视网膜功能,qPCR检测视网膜Iba-1、TLR-4和MyD88的mRNA和蛋白表达。体外实验使用ARPE-19细胞,ox-LDL组细胞用100 mg·L^(-1) ox-LDL处理24 h,PBS组细胞使用等体积的PBS处理24 h;TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot和qPCR检测细胞TLR-4和MyD88的mRNA和蛋白表达。结果qPCR和Western blot检测结果均显示,与对照组相比,实验组小鼠视网膜中TLR-4、MyD88、Iba-1的mRNA和蛋白表达水平均升高(均为P<0.05);与PBS组相比,ox-LDL组ARPE-19细胞中TLR-4、MyD88的mRNA和蛋白表达水平均升高(均为P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,与对照组相比,实验组小鼠视网膜中的Iba-1、iNOS阳性细胞数均显著增加。TUNEL染色结果显示,与对照组相比,实验组小鼠视网膜中TUNEL染色阳性细胞数增加;与PBS组相比,ox-LDL组ARPE-19细胞中TUNEL染色阳性细胞数增加。ERG检测结果显示,实验组小鼠视网膜的a波和b波振幅均较对照组降低(均为P<0.001)。OCT检测结果显示,与对照组相比,实验组小鼠视网膜的ONL/INL比值下降(P<0.01)。结论ox-LDL会引起视网膜损伤,其机制可能与激活TLR-4/MyD88通路,并且使小胶质细胞活化并极化为M1表型有关。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮 光感受器 细胞凋亡 氧化低密度脂蛋白 TOLL样受体-4 小胶质细胞
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