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EFFECTS OF PHYCOCYANIN ON EXPRESSION OF CytC mRNA AND CASPASE-3 mRNA AFTER FOCAL CEREBRAL ISCHEMIA/REPERFUSION IN RATS 被引量:4
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作者 陈红兵 孙圣刚 +2 位作者 童萼塘 郭云良 金丽英 《Journal of Shanghai Second Medical University(Foreign Language Edition)》 2005年第1期26-32,共7页
Objective To study the effects of phycocyanin on the expression of Cytochrome C (CytC)genes and Caspase-3 genes after focal cerebral ischemia/reperfusion in rats. Methods A rat middle cerebral ar-tery occlusion (MCAO)... Objective To study the effects of phycocyanin on the expression of Cytochrome C (CytC)genes and Caspase-3 genes after focal cerebral ischemia/reperfusion in rats. Methods A rat middle cerebral ar-tery occlusion (MCAO)/reperfusion model was produced using the intraluminal filament method. The rats were di-vided into three groups: sham operation group, model control group and phycocyanin group. After MCAO, the neu-robehavioral testing of all rats was made. The infarction area was evaluated with the method of 2,3,7-triphenyltet-razolium chloride (TTC) staining. The expression of CytC mRNA and Caspase-3 mRNA were determined by in situhybridization. Results In the sham operation group and the model control group, there was only a few CytC-positive cells were seen in the normal cerebral tissue. In the model control group, the upregulation of CytC mRNAbegan 6h after ischemia, reached a maximum at 12h (cortex) -24h (striatum) , then subsided gradually, but stillin high level. In the phycocyanin group, CytC-positive cells were also mainly in cortex and striatum, but the numberof the cells was significantly lower than the number of the model control group. The time-phase pattern of CytCmRNA in the phycocyanin group was similar to the pattern of the model control group. In the sham operation groupand the model control group, there was only a few Caspase-3-positive cells were seen in the normal cerebral tissue.In the model control group, the upregulation of Caspase-3 mRNA began 6h after ischemia, reached a maximum at24h and subsided at 48h, but still in high level. In the phycocyanin group, Caspase-3-positive cells were also mainlyin the penumbral area, but the number of the cells were significantly lower than the number of the model controlgroup. The time-phase pattern of Caspase-3 mRNA in the phycocyanin group was similar to the pattern of the modelcontrol group. Conclusion The over-expression of CytC mRNA and Caspase-3 mRNA might play a key role inischemic cerebral injury after MCAO. Phycocyanin could inhibit the over-expression of CytC mRNA and Caspase-3mRNA in the cerebral cortex, and might play an important role in the protection of ischemic neurons. 展开更多
关键词 phycocyanin cerebral ischemia reperfusion injury gene expressionCytC mRNA Caspase-3 mRNA
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层理鞭枝藻藻蓝蛋白E和F基因的克隆及序列分析 被引量:4
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作者 朱菁萍 武栋 +2 位作者 周明 周宜开 赵开弘 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 2002年第4期245-250,共6页
克隆并测定了层理鞭枝藻藻蓝蛋白 E和 F基因全序列 ,通过将其氨基酸序列与其他蓝藻的相应序列进行比较 ,表明层理鞭枝藻中 cpc E、cpc F所编码的蛋白质是层理鞭枝藻中 α-
关键词 层理鞭枝藻 藻蓝蛋白E 序列分析 藻蓝蛋白F cpcE cpcF 基因克隆
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极大螺旋藻(Spirulina maxima)藻蓝蛋白基因的克隆及其同源性分析 被引量:5
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作者 于平 岑沛霖 +1 位作者 励建荣 秦松 《科技通报》 北大核心 2003年第6期457-460,共4页
藻蓝蛋白是红藻和蓝绿藻中一种重要的捕光色素蛋白.克隆了编码极大螺旋藻藻蓝蛋白α和β两个亚基的基因,序列分析表明该基因全长为1119bp.β亚基基因位于α亚基基因上游,两个亚基基因序列长度分别为519bp和489bp,中间被111bp的基因片段... 藻蓝蛋白是红藻和蓝绿藻中一种重要的捕光色素蛋白.克隆了编码极大螺旋藻藻蓝蛋白α和β两个亚基的基因,序列分析表明该基因全长为1119bp.β亚基基因位于α亚基基因上游,两个亚基基因序列长度分别为519bp和489bp,中间被111bp的基因片段间隔.除编码α和β两个亚基的开放阅读密码框外,还存在两个潜在的开放阅读密码框,但这两个密码框的意义还不清楚.比较了该藻蓝蛋白氨基酸序列和来自于其他藻类的藻蓝蛋白氨基酸序列的同源性以及藻蓝蛋白α和β两个亚基之间氨基酸序列的同源性,总的来说其同源性在45.9%~99%之间,α和β两个亚基氨基酸序列同源性为27.1%.藻蓝蛋白包含许多疏水性氨基酸,这些疏水性氨基酸在藻胆蛋白的聚集过程中起着极为重要的作用.分析表明编码藻蓝蛋白α和β两个亚基基因的密码子显示出非对称性. 展开更多
关键词 生物工程 藻蓝蛋白基因 极大螺旋藻 同源性分析
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极大螺旋藻藻蓝蛋白基因在巴斯德毕赤酵母X-33中表达的研究 被引量:3
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作者 于平 岑沛霖 +2 位作者 励建荣 张燕萍 秦松 《科技通报》 北大核心 2004年第1期21-23,27,共4页
通过PCR技术克隆了极大螺旋藻藻蓝蛋白基因,构建了克隆载体和表达载体,并将该基因导入巴斯德毕赤酵母X 33基因组,筛选了能够有效表达藻蓝蛋白基因的毕赤酵母工程菌株PC8,从而为发酵法生产藻蓝蛋白奠定了基础.
关键词 基因工程 甲基营养型毕赤酵母 极大螺旋藻 藻蓝蛋白基因 基因表达 PCR技术 X-33基因
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藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对Caspase-3 mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 陈红兵 郭云良 +2 位作者 段德麟 孙圣刚 童萼塘 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2006年第4期6-10,共5页
目的 探讨藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对Caspase-3mRNA表达的影响。方法 应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAC)/R)模型,随机分为假手术组4只、对照组40只和治疗组40只,应用藻蓝蛋白进行干预治疗,通过Be... 目的 探讨藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对Caspase-3mRNA表达的影响。方法 应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAC)/R)模型,随机分为假手术组4只、对照组40只和治疗组40只,应用藻蓝蛋白进行干预治疗,通过Bederson法评价大鼠的神经功能缺失症状.氯化三苯基四氮唑染色测量脑梗塞体积.原位杂交技术检测脑缺血再灌注后不同时段Caspase-3mRNA的表达。结果 脑缺血再灌注24~48h.治疗组神经功能缺损评分和脑梗死体积明显低于对照组。脑缺血再灌注6h,对照组Caspase-3mRNA阳性细胞数开始增加,至再灌注24h达高峰.2d后逐渐减少,至14d仍有表达。治疗组Caspase-3mRNA阳性细胞的数量相对较少,其变化规律与对照组相似,同一时间点相比较均显著低于对照组。结论 藻蓝蛋白可下调Caspase-3mRNA的表达,对脑缺血再灌注损伤有显著保护作用。 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 脑缺血 再灌注损伤 基因表达 半胱天冬酶-3
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西流湖水体藻类污染现状和产毒蓝藻的全细胞PCR检测 被引量:12
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作者 班海群 庄东刚 +4 位作者 朱静媛 巴月 程学敏 张慧珍 崔留欣 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期165-167,共3页
目的了解西流湖水体浮游藻类尤其是产毒蓝藻的污染现状,并建立全细胞PCR检测产毒蓝藻的方法.方法从2004年3月开始,采集西流湖水体表层水样,用血细胞计数板法计数藻细胞;设计特异引物,采用全细胞PCR方法检测水样中藻青蛋白基因中间序列(... 目的了解西流湖水体浮游藻类尤其是产毒蓝藻的污染现状,并建立全细胞PCR检测产毒蓝藻的方法.方法从2004年3月开始,采集西流湖水体表层水样,用血细胞计数板法计数藻细胞;设计特异引物,采用全细胞PCR方法检测水样中藻青蛋白基因中间序列(PC-IGS)和微囊藻毒素多肽合成酶基因mcyB,并对mcyB扩增产物克隆测序.结果西流湖水体藻类主要是蓝藻、绿藻、硅藻和裸藻,夏秋季蓝藻为优势藻门;2004年7月7日~9月27日水样PC-IGS序列PCR检测阳性,7月29日~9月27日水样mcyB基因PCR检测阳性,扩增片断mcyB测序结果与Genbank报道的铜绿微囊藻mcyB同源性大于97%,氨基酸序列同源性大于94%.结论西流湖夏秋季有产毒蓝藻出现,全细胞PCR法可以检测水体中产毒蓝藻. 展开更多
关键词 蓝藻 全细胞PCR 藻青蛋白基因中间序列 微囊藻毒素多肽合成酶基因B
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层理鞭枝藻藻蓝蛋白β亚基的体内重组 被引量:1
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作者 赵金梅 朱菁萍 +2 位作者 王锋 周明 赵开弘 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期481-486,共6页
为研究藻蓝蛋白β亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pET-cpcB(C155I)、pCDFDu-et-cpeS和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因cpeS、血红素氧化酶基因ho1、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和藻蓝蛋白β脱辅基蛋白基因cpcB(C155I)共同转... 为研究藻蓝蛋白β亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pET-cpcB(C155I)、pCDFDu-et-cpeS和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因cpeS、血红素氧化酶基因ho1、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和藻蓝蛋白β脱辅基蛋白基因cpcB(C155I)共同转入大肠杆菌.通过色素蛋白锌电泳和光谱检测,结果表明产生了有生物活性的CpcB(C155I)-PCB.而在裂合酶基因cpeS不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有7.6%的CpcB(C155I)-PCB产生.实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白β亚基84位半胱氨酸残基与PCB连接,为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础. 展开更多
关键词 C-藻蓝蛋白 藻蓝蛋白β脱辅基蛋白 裂合酶基因cpeS 体内重组
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发菜藻蓝蛋白基因克隆及原核表达 被引量:1
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作者 焦广飞 梁文裕 +3 位作者 陈伟 庄惠其 翁兆霞 许鸿川 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期331-339,共9页
发菜(Nostoc flagelliforme)是一种陆生固氮蓝藻,具有重要的经济和生态价值。运用双向电泳技术、MALDI-TOF-TOF/MS鉴定和数据库检索,获得藻蓝蛋白部分氨基酸序列并设计简并性引物,克隆藻蓝蛋白基因并研究其表达。结果表明,发菜藻蓝蛋白... 发菜(Nostoc flagelliforme)是一种陆生固氮蓝藻,具有重要的经济和生态价值。运用双向电泳技术、MALDI-TOF-TOF/MS鉴定和数据库检索,获得藻蓝蛋白部分氨基酸序列并设计简并性引物,克隆藻蓝蛋白基因并研究其表达。结果表明,发菜藻蓝蛋白α和β亚基两个基因的编码序列及两者之间的间隔序列全长为1097bp,编码β亚基和α亚基的基因序列全长分别为519bp和489bp,β亚基基因序列位于α亚基基因序列上游,两者之间通过89bp的基因片段连接,GenBank登录号为GU549478,并对推译的α和β亚基三维结构进行了预测。将藻蓝蛋白的α和β亚基基因在大肠杆菌中表达,获得了符合预期的外源重组蛋白。研究结果为进一步研究发菜藻蓝蛋白的分子结构及生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 发菜 亚基基因 藻蓝蛋白 双向电泳 克隆 原核表达
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具荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中的重组表达 被引量:4
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作者 衣俊杰 臧晓南 +3 位作者 张学成 袁定阳 赵炳然 唐俐 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期59-62,70,共5页
为探索节旋藻藻蓝蛋白的生物合成机理,以钝顶节旋藻(Arthrospira platensisFACHB314)基因组DNA为模板克隆了藻蓝蛋白α亚基基因cpcA、催化脱辅基蛋白与色基结合的裂合酶基因cpcE和cpcF,以及催化色基合成的铁氧蛋白氧化还原酶基因pcyA;以... 为探索节旋藻藻蓝蛋白的生物合成机理,以钝顶节旋藻(Arthrospira platensisFACHB314)基因组DNA为模板克隆了藻蓝蛋白α亚基基因cpcA、催化脱辅基蛋白与色基结合的裂合酶基因cpcE和cpcF,以及催化色基合成的铁氧蛋白氧化还原酶基因pcyA;以Synechocystissp.PCC6803基因组DNA为模板克隆了亚铁血红素氧化酶基因hox1。然后分别将cpcA、cpcE和cpcF基因构建到质粒pACYCDuet-1中,将hox1和pcyA基因构建到质粒pET-24a(+)中,用电击法将二者共同转化E.coliBL21(DE3),经诱导表达得到具有荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基。在590 nm激发波长下,荧光发射峰为637.8 nm,证实了节旋藻自身的裂合酶CpcE和CpcF能够催化色基PCB与藻蓝蛋白脱辅基结合产生有荧光活性的藻蓝蛋白α亚基,为表达有荧光活性的藻蓝蛋白提供理论和实验基础。 展开更多
关键词 节旋藻 藻蓝蛋白α亚基基因 裂合酶基因 重组 大肠杆菌
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念珠藻葛仙米藻蓝蛋白α与β亚基基因克隆、表达及其单体结构模拟 被引量:1
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作者 汪琼 王静 +6 位作者 陈嘉蕙 李俐 程超 李伟 梅邢 田国政 方庆 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期2154-2160,共7页
天然抗氧化剂对于清除人体内自由基、保障健康具有重要作用。藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)是蓝藻等藻类细胞内的一类特殊色素蛋白,具捕获光能的功能。体外研究发现,藻蓝蛋白具有较显著的抗氧化、抑癌细胞增殖等生物活性。试验利用食源性的... 天然抗氧化剂对于清除人体内自由基、保障健康具有重要作用。藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)是蓝藻等藻类细胞内的一类特殊色素蛋白,具捕获光能的功能。体外研究发现,藻蓝蛋白具有较显著的抗氧化、抑癌细胞增殖等生物活性。试验利用食源性的拟球状念珠藻葛仙米(Nostoc sphaeroides)的基因组DNA为材料,借助PCR扩增克隆葛仙米藻蓝蛋白两个重要亚基α与β基因,Ns-PC-α和Ns-PC-β。结果表明,葛仙米基因组中,Ns-PC-α和Ns-PC-β基因编码框长度分别为492 bp和522 bp;Ns-PC-α和Ns-PC-β基因以双顺反子形式存在,Ns-PC-α位于Ns-PC-β下游。Ns-PC-α和Ns-PC-β分别编码由163与173个氨基酸组成的蛋白。Ns-PC-α和Ns-PC-β亚基蛋白多肽链中共含有3个半胱氨酸残基(Ns-PC-α的第85位与Ns-PC-β中的第83位氨基酸残基和第154位氨基酸残基),很可能是藻蓝胆素的结合位点。原核表达显示Ns-PC-α和Ns-PC-β分子量为近18 kD,Ns-PC-α比Ns-PC-β略小,与预测结果一致。模拟其高级结构,发现Ns-PC-α和Ns-PC-β单亚基均含有7个α-螺旋,除N端α-螺旋外,其它几个α-螺旋进一步折叠形成疏水核心区;并且,Ns-PC-α和Ns-PC-β结构上能够较好吻合,形成一稳定而封闭的单体,弧度近2π/3。Ns-PC-α和Ns-PC-β组成的这种单体结构是其进一步建构圆盘状三聚体Ns-PC-(α/β)3的重要基础。本研究结果为食源性念珠藻葛仙米藻蓝蛋白抗氧化功能的进一步应用提供了重要依据。 展开更多
关键词 抗氧化剂 葛仙米 藻蓝蛋白 基因 单体
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