UPLC-MS/MS法测定苦蘵宿萼中physalin H和physalin D的含量

建立了同时测定苦蘵中2种酸浆苦味素类化合物含量的方法.应用超高效液相色谱(UPLC)与Qtrap质谱(MS)联用同时测定苦蘵中酸浆苦味素H(physalin H)和酸浆苦味素D(physalin D)2个成分的含量.采用Waters Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以水(0.1%甲酸)-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 mL·min^(-1),使用ESI+离子源,多反应监测(MRM)模式扫描,对physalin H和physalin D进行定量.结果表明physalin H和physalin D在5~10000 ng·mL^(-1)范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)分别为0.9997和0.9995;平均加样回收率(n=5)分别为71.1%和71.0%,RSD值分别为1.36%和1.47%.该方法准确可靠,可用于苦蘵药材中physalin H和physalin D的含量测定,为有效控制苦蘵药材的质量奠定了基础.

Extraction and Crystal Structure of Physalin B

The title compound of physalin B（C28H32O9）, a main active physalin of Physalis angulata L, was isolated from the whole plant of Physalis angulata L, and characterized by X-ray diffraction analysis. It crystallizes in the monoclinic system, space group P21 with C28H32O9, a = 12.4996（2）, b = 14.35620（10）, c = 14.75190（10）, V = 2607.97（5） 3, Z = 4, Dc = 1.382 mg/cm3, Mr = 542.56, F（000） = 1152, and μ = 0.870 mm-1. The final R = 0.0389 and wR = 0.1037 for 47670 observed reflections（I 〉 2σ（I））. The rigid molecule consists of eight fused rings involving two lactones. There are two C28H32O9 molecules in an symmetric unit, and the title compound is stacked into a 3D layer structure through hydrogen bonds. In the 5~20 μmol/L range, physalin B can significantly inhibit the secretion of inflammatory cytokines TNF-α and IL-6 on RAW264.7 cells. The results suggest that physalin B has anti-inflammatory activity in vitro.

RP-HPLC测定酸浆药材中3种有效成分的含量

目的:采用 RP-HPLC 建立同时测定酸浆药材中酸浆苦味素 A、酸浆苦味素 D 及木犀草素含量的方法。方法:分析柱采用 Diamonsil C_(18)(200 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.2%醋酸(45:55,v/v);流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长:220 nm。结果:酸浆苦味素 A、酸浆苦味素 D 及木犀草素浓度分别在0.15～1.20 mg·mL^(-1)(r=0.9995),0.10～0.81 mg·mL^(-1)(r=0.9996),0.12～0.96 mg·mL^(-1)(r=0.9997)范围内与峰面积呈良好的线性关系,酸浆苦味素 A 平均回收率分别为95.9%,97.1%,103%;RSD 分别为2.0%,0.7%,1.4%。酸浆苦味素 D 的平均回收率分别为97.3%,101%,97.1%;RSD 分别为1.0%,1.9%,1.3%。木犀草素的平均回收率分别为97.8%,97.8%,97.7%;RSD 分别为0.4%,2.9%,0.5%。结论:采用 RP-HPLC 同时测定酸浆药材中酸浆苦味素 A、酸浆苦味素 D 及木犀草素3种成分的含量,该法简单、可靠,可作为控制酸浆药材质量的参考标准。

HPLC法测定苦蘵中酸浆苦味素D的含量

建立了一种测定苦蘵中酸浆苦味素D含量的高效液相色谱法.采用Waters Symmetry C_(18)(4.6×250mm,5μm)色谱柱,以流动相为乙腈-水(25∶75);检测波长为227nm;柱温为25℃.结果表明:酸浆苦味素D浓度在10~100μg·mL^(-1)浓度范围呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率(n=3)为98.7%,RSD为1.8%.说明本方法简便、准确、重复性好,可用于苦蘵药材的质量控制.

酸浆宿萼中酸浆苦素的提取工艺及降糖活性

该试验采用低共熔溶剂-超声波辅助提取法对酸浆宿萼中的酸浆苦素进行提取并进行降糖活性研究。该试验合成5种不同的低共熔溶剂,在单因素试验的基础上,采用四因素三水平的响应面法优化酸浆宿萼中的酸浆苦素的提取工艺条件,通过对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶抑制能力测定评价酸浆苦素体外降糖活性。结果表明:氯化胆碱∶葡萄糖=2∶1(摩尔比)合成的低共熔溶剂酸浆苦素提取量最高,且明显高于75%乙醇组;最佳提取工艺为料液比1∶10(g/mL)、超声功率320 W、超声时间30 min、含水量15%,在该条件下,酸浆苦素提取量为(8.96±0.15)mg/g,酸浆苦素有降糖活性。

苦蘵化学成分及抗炎活性研究

研究苦蘵的化学成分及抗炎活性。采用硅胶、Sephadex LH-20和ODS等柱色谱分离技术对苦蘵乙酸乙酯部位进行分离纯化,通过波谱学技术鉴定化合物结构,并采用LPS诱导的RAW264.7释放NO的细胞模型,评价化合物的体外抗炎活性。从苦蘵中分得13个化合物:5,4′-二羟基-3,3′,7-三甲氧基-黄酮(1)、3β-hydroxy-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-diene(2)、(22R)-5β,6β∶14α,17∶14β,26-triepoxy-2α-ethoxy-13,20,22-trihydroxy-1,15-dioxo-16α,24-cyclo-13,14-secoergosta-18,27-dioic acid 18→20,27→22-dilactone(3)、alkesterol B(4)、withaminilide F(5)、酸浆苦素B(6)、酸浆苦素D(7)、酸浆苦素U(8)、withaphysalin R(9)、rel-(18R,22R)-5β,6β∶18β,20-diepoxy-3β,18α-dimethoxy-4β-hydroxy-1-oxowith-24-enolide(10)、withaphysalin P(11)、β-谷甾醇(12)、棕榈酸(13)。化合物1和2首次从酸浆属中分离得到,化合物3~5、10、11首次从该植物中得到。体外抗炎结果表明,化合物5、6、10、11抗炎效果显著。

贮藏条件对锦灯笼药材的质量影响

目的:测定不同贮藏条件下锦灯笼药材有效成分的含量变化,研究贮存条件对锦灯笼药材的质量影响。方法:采用HPLC法测定锦灯笼药材在室温、加热、冷冻、暴晒等条件下存放一定时间后酸浆苦素成分的含量变化。结果:不同贮藏条件下,酸浆宿萼中酸浆苦素类成分含量变化显著。结论:贮藏条件对锦灯笼药材的质量有很大影响应,应严格控制。

酸浆宿萼的化学成分

目的研究茄科植物酸浆宿萼(Physalis alkekengiL.var.franchetii(Mast.)Makino)的化学成分。方法用体积分数为80%的乙醇溶液对酸浆宿萼进行加热回流提取,回收乙醇,浓缩后用水混悬,依次用环己烷、乙酸乙酯萃取,取乙酸乙酯层经硅胶柱色谱,CHCl3MeOH混合溶剂做梯度洗脱;CHCl3MeOH体积比为100∶2、100∶6,洗脱部分以及萃取后的水层再次经硅胶柱色谱、Sephadex LH 20柱色谱、反相ODS开放柱色谱及RP HPLC等,共得到7个化合物;利用其理化性质和波谱学分析数据,鉴定化学结构。结果分离得到了7个化合物中4个为酸浆苦素类化合物,分别鉴定为酸浆苦素D(Ⅰ)、酸浆苦素L(Ⅱ)、酸浆苦素O(Ⅲ)、4,7二脱氢新酸浆苦素B(Ⅳ);3个黄酮类化合物,分别鉴定为木犀草素(Ⅴ)、商陆素(Ⅵ)、木犀草素7,4′二OβD葡萄糖苷(Ⅶ)。结论商陆素(Ⅵ)、木犀草素7,4′二OβD葡萄糖苷(Ⅶ)为首次从该植物中分离得到的2个已知化合物。

酸浆化学成分及酸浆苦素G的结构订正

目的：对吉林产酸浆的化学成分进行研究。方法：运用层析手段和波谱方法分离并鉴定了8个化合物。结果：对酸浆苦素G（physalin G，1）的结构进行了订正并对其核磁数据进行了正确归属，其余化合物分别为酸浆苦素A（physalin A，2），酸浆苦素B（physalin B，3），酸浆苦素D（physalin D，4），酸浆苦素P（physalin P，5），金圣草黄素（chrysoeriol，6），马尾藻甾醇（saringosteml，7），丁香酸（syringicacid，8）。结论：化合物1的6位构型订正为尺，化合物6～8为首次从该属中分离得到。

锦灯笼的化学成分研究

从锦灯笼[Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makino]中提取物中分离出12个化合物,通过波谱方法和理化性质分别鉴定为:酸浆苦素B(1),酸浆苦素A(2),4,7-didehydroneophyalin B(3),(Z)-9,10,11-三羟基-12-十八碳烯酸(4),酸浆苦素F(5)山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(6),3′,4′-二甲基槲皮素(7),山奈酚-3,7-二氧-α-L-双鼠李糖苷(8),十五碳酸(9),二十四碳酸(10),3,4-二羟基苯乙醇(11),齐墩果酸(12)。化合物6-11为首次从该属植物中分出,化合物5为首次从该种植物中分出。

HPLC法测定锦灯笼中酸浆苦素类成分的含量

目的:建立测定锦灯笼药材中酸浆苦素类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Cromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(34∶66),检测波长为220nm。结果:4种酸浆苦素类成分均达到基线分离,而且各个成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系。酸浆苦素A、酸浆苦素O、酸浆苦素L和酸浆苦素B的平均加样回收率分别为97.8%、98.7%、102.6%、103.3%,RSD分别为1.98%、2.20%、1.85%、1.39%(n=6)。结论:本法快速、灵敏、准确、可靠、重复性好,可同时测定锦灯笼药材中4种酸浆苦素类成分的含量,适用于锦灯笼药材的质量控制。

酸浆苦素L在大鼠体内的药动学研究

目的建立一种特异、灵敏、快速地检测酸浆苦素L在大鼠体内的药动学特征的LC-MS/MS方法。方法采用Waters XBridgetm-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),含有0.1%甲酸的水溶液-乙腈(45︰55)为流动相,等度洗脱,流速为0.6 m L·min^(-1)。采用负离子模式、MRM模式进行检测。结果酸浆苦素L浓度在0.492~493 ng·mL^(-1)与峰面积呈良好线性关系,最低定量限为0.492 ng·mL^(-1);批间、批内RSD均<7.86%,平均回收率为99.23%~106.73%,方法重复性良好。药动学结果表示,每只SD雄性大鼠灌胃2.0 mg酸浆苦素L后,酸浆苦素L在大鼠体内平均达峰时间tmax为0.69 h,平均药峰浓度Cmax为77.48 ng·mL^(-1),药时曲线下面积AUC0→t为280.78 ng·h·mL^(-1),平均半衰期t1/2为2.89 h。结论本研究探明了酸浆苦素L在大鼠体内的药动学特征,为锦灯笼在动物体内的血药监测提供了一个新的指标,利于研究人员对锦灯笼(尤其是酸浆苦素类化合物)药理活性与药动学的深入研究。

锦灯笼药材质量标准研究

目的：建立锦灯笼药材的质量标准。方法：采用薄层鉴别,以硅胶HSG为薄层板,氯仿-丙酮-甲醇（25∶1∶1）为展开剂,薄层色谱在紫外光灯（365 nm）下检识,酸浆苦味素L荧光斑点清晰,分离效果理想。高效液相色谱方法采用VenusilXBP C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.2%磷酸（20∶80）为流动相,检测波长350 nm,流速1 mL.min-1对锦灯笼中的木犀草苷含量进行测定。结果：木犀草苷含量在0.50~249.40 mg.L-1呈良好的线性关系Y=55 313X＋3.164 1,r=1.000。平均回收率分别98.79%,RSD 1.1%,日内和日间精密度RSD均分别小于2%。结论：建立的定性和定量方法可用于锦灯笼药材的质量控制。

酸浆化学成分研究(Ⅱ)

目的研究酸浆Physalis alkekengivar.franchetii宿萼内活性成分。方法采用硅胶、凝胶、高效液相等色谱技术分离,利用理化性质和核磁共振光谱、MS等技术鉴定结构。结果分离得到4个化合物,分别为反式咖啡酸乙酯(1)、25,27-二脱氢酸浆苦素L(2)、酸浆苦素D(3)、大血藤苷E(cuneataside E,4)。结论化合物2为新的天然产物,化合物4为首次从该植物中分离得到。

苦蘵的化学成分研究

目的研究苦蘵(Physalis angulata L.)全草的化学成分。方法利用色谱方法分离和纯化化合物,并通过光谱方法及理化性质鉴定其结构。结果从苦蘵中分离获得13个化合物,分别鉴定为酸浆苦素A(1)、酸浆苦素B(2)、酸浆苦素E(3)、酸浆苦素P(4)、豆甾-5-烯-3β-醇(5)、麦角甾-5,24(28)-二烯-3β-醇(6)、菜籽甾醇(7)、豆甾烷-22-烯-3,6-二酮(8)、孕甾-5-烯-3-醇-20-羧酸(9)、麦角甾-5,24(28)-二烯-3β,23S-二醇(10)、麦角甾-5,25(26)-二烯-3β,24ξ-二醇(11)、正十六酸(12)、正十七酸(13)。结论除化合物2、3外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物5~10、12~13首次从该属植物中获得。

苦蘵的化学成分及其细胞毒活性研究

目的对酸浆属植物苦蘵Physalis angulata的全草进行化学成分及肿瘤细胞毒活性研究。方法运用硅胶、Sephadex LH-20凝胶等柱色谱和HPLC等方法,并结合液质联用分析技术,采用活性跟踪的方法从苦蘵全草中分离细胞毒活性成分。根据理化常数测定和各种谱学(1D和2D NMR、MS)数据分析等鉴定化合物结构,MTT法测定化合物的细胞毒活性。结果从苦蘵全草的95%乙醇水提取物中共分离得到12个化合物,分别鉴定为酸浆苦素A(1)、酸浆苦素B(2)、酸浆苦素C(3)、酸浆苦素D(4)、酸浆苦素F(5)、酸浆苦素H(6)、酸浆苦素I(7)、5α-乙氧基-6β-羟基-5,6-二氢酸浆苦素B(8)、酸浆苦素O(9)、β-谷甾醇(10)、2-羧基苯胺羰酸甲酯(11)、2-(乙酰胺基)-苯甲酸(12)。结论化合物11为新天然产物,化合物1~3、9为首次从苦蘵中分得,化合物1~9为酸浆苦素类(physalins)甾体化合物。细胞毒活性实验结果显示,化合物1~9对肺癌细胞株A549均具有较强的增殖抑制活性,其中以2、3、6、8的抑制活性最为显著,其IC50值为1.9~20.2μmol/L。

酸浆化学成分的研究

目的研究酸浆Physalis alkekengi var.franchetii的活性成分。方法酸浆的宿萼经乙醇渗漉提取,提取物经硅胶、Sephadex LH-20色谱分离,并通过理化常数和波谱学方法鉴定化合物结构。结果分离鉴定了11个化合物,分别为β-谷甾醇(Ⅰ)、酸浆苦素A(Ⅱ)、酸浆苦素B(Ⅲ)、酸浆苦素O(Ⅳ)、酸浆苦素L(Ⅴ)、酸浆苦素M(Ⅵ)、胡萝卜苷(Ⅶ)、商陆素(Ⅷ)、5,4′,5′-三羟基-7,3′-二甲氧基黄酮醇(Ⅸ)、木犀草素(Ⅹ)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅺ)。结论化合物Ⅸ为新化合物,命名为酸浆黄酮醇(physaflavonol)。

锦灯笼果实的化学成分研究

从锦灯笼中分离得到5个甾体类化合物,分别鉴定为酸浆素A(1,alkekengilin A)、酸浆素B(2,alkekengilin B)、酸浆苦素D(3,physalin D)、酸浆苦素P(4,physalin P)、4,7-二去氢新酸浆苦素B(5,4,7-didehydro-neophysalin B).其中酸浆素A(1,alkekengilin A)和酸浆素B(2,alkekengilin B)为新的天然产物.运用现代波谱技术对上述化合物的结构进行了确证.

小酸浆中甾体类化学成分研究

目的研究小酸浆Physalis minima全草中甾体类化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、中压ODS柱色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,根据理化常数和核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构。结果从小酸浆全草的乙醇提取物中分离得到7个甾体类化学成分,其中酸浆苦素类化合物2个,分别鉴定为16,24-cyclo-13,14-secoergost-2-ene-18,26-dioicacid-14:17,14:27-diepoxy-5α,6β,13α,20α,22β,25β-hexahydroxy-1,15-dioxo-γ-lactone-δ-lactone(1)、酸浆苦素D(2);醉茄内酯类化合物5个,分别鉴定为physagulin L(3)、physagulin M(4)、physaminimin F(5)、physagulin K(6)、withagulatin A(7)。结论化合物1为新化合物,命名为25-羟基酸浆苦素D;化合物3、4、7为首次从该植物中分离得到。

锦灯笼中酸浆苦素类化学成分的研究

目的研究锦灯笼95%乙醇提取物的石油醚、氯仿、醋酸乙酯萃取部位中化学成分。方法利用硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、制备液相色谱等方法进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果分离得到了7个化合物,经结构鉴定分别为酸浆苦素A(1)、酸浆苦素D(2)、酸浆苦素L(3)、酸浆苦素O(4)、木犀草素(5)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)和胡萝卜苷(7)。结论共分离得到7个化合物,并对酸浆苦素类化合物1～4进行了较为详细的解析和更为全面的NMR归属。