piRNA-5938可调控心肌细胞凋亡和线粒体分裂

背景:心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中扮演了重要角色。最新研究表明生殖系统调控分子PIWI相互作用RNA(PIWI-Interacting RNA,piRNA)参与了心脏病理过程调控,然而在心肌细胞凋亡中的作用尚未阐明,尤其涉及线粒体途径的机制尚不清楚。目的:探究piRNA-5938对心肌细胞凋亡和线粒体分裂的调节作用及分子机制。方法:深度测序检测正常和缺血再灌注模型小鼠及大鼠心脏中piRNA的表达丰度,实时荧光定量PCR法验证结果。分别用双氧水和缺氧再复氧条件构建心肌细胞凋亡模型,实时荧光定量PCR法检测piRNA-5938的表达水平。合成piPNA-5938特异性拮抗剂转染心肌细胞,再用双氧水处理,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MitoTracker法检测线粒体分裂情况。RNAhybrid软件预测与piRNA-5938相互作用的microRNA。结果与结论:①与假手术组比,缺血再灌注小鼠心脏中422种piRNA表达水平改变,其中289条上调,133条下调;piRNA-5938的表达显著增加(P<0.01);②双氧水诱导心肌细胞凋亡后piRNA-5938的表达水平显著上调,且呈浓度依赖性(P<0.05);③缺氧再复氧诱导心肌细胞凋亡后piRNA-5938表达显著增加(P<0.01);④与阴性对照组比,敲低piRNA-5938后,双氧水诱导的心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05);⑤敲低piRNA-5938后,双氧水诱导的心肌细胞线粒体分裂明显得到改善(P<0.05);⑥piRNA-5938与线粒体分裂调控分子miR-324和miR-668序列能很好地互补配对,且具有高度保守性;⑦提示piRNA-5938调控了心肌细胞凋亡和线粒体分裂,并且可能通过miR-324或miR-668发挥作用。

piRNA-001184在多发性骨髓瘤中的表达及其与CTGF、CDKN2A基因甲基化的相关性研究

目的探讨piRNA-001184在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的表达及其与CTGF、CDKN2A基因甲基化的相关性。方法选取2020年8月至2022年12月于内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院就诊的69例MM患者纳入实验组,收集同期18例缺铁性贫血患者纳入对照组。应用荧光定量聚合酶链反应检测患者的piRNA-001184表达水平,采用Pearson线性相关分析piRNA-001184与CTGF、CDKN2A表达水平的相关性。结果实验组患者的piRNA-001184表达水平显著高于对照组[(21.56±6.19)vs.(10.60±2.45),t=7.388,P<0.001]。不同病程患者的piRNA-001184表达水平比较差异有统计学意义(F=110.977,P<0.001),表达水平依次为初发组>复发组>缓解组。不同国际分期系统(international staging system,ISS)患者的piRNA-001184表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05),表达水平依次为Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期。piRNA-001184表达水平与CTGF、CDKN2A基因表达水平均呈正相关(P<0.05)。结论MM患者piRNA-001184表达明显上调。监测piRNA-001184可能对MM的诊断、分期及预后判断有参考价值。

沉默piRNA-651抑制骨肉瘤细胞系U20S增殖和转移的影响

目的研究非编码小RNA piRNA-651对骨肉瘤U20S细胞增殖、侵袭与转移的影响。方法通过RNA干扰技术沉默U20S细胞中的piRNA-651,并应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测骨肉瘤U20S细胞中piRNA-651的表达情况;流式细胞术检测细胞周期的变化,MTT实验检测沉默piRNA-651表达对细胞增殖的影响,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化,细胞划痕实验检测细胞转移能力的变化。结果 piRNA-651-siRNA可有效沉默piRNA-651在骨肉瘤细胞U20S的表达,敲低U20S细胞中piRNA-651的表达可以明显阻滞骨肉瘤细胞的细胞周期,抑制骨肉瘤细胞的增殖、侵袭与转移能力。结论 piRNA-651在骨肉瘤的发生发展及侵袭转移中发挥着重要作用。

食管鳞状细胞癌piRNA-19166的表达及其临床病理意义

目的检测食管鳞状细胞癌中piRNA-19166的表达水平,分析其临床病理意义。方法应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术检测piRNA-19166在96例食管鳞状细胞癌组织和癌旁正常组织中的表达,并分析其与食管鳞状细胞癌患者病理资料的关系。应用qRT-PCR检测piRNA-19166在3种食管癌细胞和正常食管上皮细胞中的表达。结果 96例食管鳞状细胞癌组织中,71例piRNA-19166表达下降,25例表达正常或升高;与癌旁正常食管组织相比,piRNA-19166在食管癌细胞株EC9706、TE-1、ECa10中均呈低表达,其中ECa10细胞、EC9706细胞中piRNA-19166低表达差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。本研究结果显示,piRNA-19166低表达与分化程度、淋巴结转移、TNM分期有显著相关性(P <0.01)。结论 PiRNA-19166可能是一种新的食管癌肿瘤抑制基因,低表达的piRNA-19166促进了食管癌的发生、发展和转移。

空腹血糖与piR-30715的交互作用对胃癌术后患者预后的影响

该文旨在探讨空腹血糖和PIWI蛋白相互作用RNA 30715(PIWI interacting RNA-30715,piR-30715)与胃癌预后的关系。于2014年9月~2016年10月,收集福建省肿瘤医院收治的66例接受根治性胃切除术的胃癌患者。分析癌组织及癌旁组织的piR-30715、PIWI样蛋白4(PIWI-like 4,PIWIL4)表达情况;Kaplan-Meier生存曲线分析空腹血糖、piR-30715、PIWIL4与胃癌术后患者预后的关系;COX回归分析空腹血糖升高和piR-30715对胃癌术后患者预后的交互作用。与癌旁组织比,癌组织的piR-30715、PIWIL4阳性表达例数明显增高(P<0.05)。随访截止到2020年12月31日,66例胃癌随访时间为1.25~75.73个月,中位随访时间为57.05个月。66例胃癌患者中,25例(37.88%)死亡,41例(62.12%)存活。单因素分析显示,空腹血糖(OR=1.965,P<0.001)、piR-30715(OR=2.002,P=0.016)、PIWIL4阳性(OR=2.683,P=0.018)、分期(tumor node metastasis,TNM)(OR=5.755,P=0.018)、远处转移(OR=4.693,P=0.003)及淋巴结转移(OR=3.654,P=0.036)均与胃癌患者预后相关。COX分析显示,空腹血糖升高和piR-30715高表达是胃癌预后的独立危险因素(P<0.05)。生存分析显示,高空腹血糖组和piR-30715高表达组的胃癌患者的总体生存率较低(P<0.05)。空腹血糖和piR-30715对胃癌预后存在相乘交互作用(P相乘=0.003),无相加交互作用(P>0.05)。空腹血糖升高和piR-30715高表达是胃癌预后的独立危险因素,空腹血糖升高与piR-30715高表达对胃癌预后有相乘交互作用。