基于双酶辅助双水相提取毕赤酵母酯化酶工艺优化及其酶学特性研究

以高产酯化酶毕赤酵母(Pichia farinosa)为研究对象,利用双水相萃取体系,在单因素试验基础上,选择聚乙二醇(PEG)分子质量、PEG质量分数、磷酸盐质量分数为主体因素,以比酶活力为指标进行结果分析,采用正交设计优化酯化酶提取工艺条件:在25mL 4%毕赤酵母细胞混悬液中添加1∶1(m/m)甘露聚糖酶和β-葡聚糖酶双酶破壁剂,使其用量达1.2mg/g菌体,破壁温度为55℃,双水相体系中NaCl质量分数为1%,PEG分子质量为800,PEG质量分数为29%,磷酸盐质量分数为8%,在此条件下酯化酶比酶活力为3050U/g。酶学特性结果显示,该酯化酶最适反应温度35℃,最适pH 6.0时酯化酶酶活力最高,金属离子Zn^(2+)可提高酯化酶活性,Na^(+)影响较小,Mg^(2+)、Mn^(2+)、Cu^(2+)均有一定的抑制作用,且Cu2+抑制作用最明显。本研究对毕赤酵母功能微生物酯化酶在酿酒领域的开发应用具有重要的参考价值。

粉状毕赤酵母NGH的氨氮降解特性及除氨效果研究

从鸡粪中分离筛选出一株具有氨氮去除能力的菌株,经形态学观察、分子生物学方法和生物化学法鉴定,表明菌株为粉状毕赤酵母(Pichia farinosa),命名为Pichia farinose NGH。通过调整培养条件,研究菌株的最佳生长温度、pH,最佳降解碳源、C/N,以及菌株对不同初始氨氮浓度的耐受性。结果表明:菌株NGH可在20~35℃、pH为3~7条件下生长良好,当碳源为葡萄糖、碳氮质量比为20时氨氮降解效果最佳。菌株NGH对高浓度的氨氮具有很强的耐受性,能够耐受浓度范围为100~1 200mg/L的氨氮。将菌株NGH的菌悬液接种于肉鸡粪便后,可抑制鸡粪氨气的排放,最高抑制率可达到25.52%。表明菌株NGH在污水处理、控制粪便氨气排放等领域具有一定的应用潜力。

小儿罕见真菌感染的临床报道

目的 探讨念珠菌病的新类型和新条件下小儿真菌感染的临床表现和致病菌。方法 回顾性收集1975～2005年的临床资料44例，进行体外毛发感染试验、电镜观察、动物试验，流式细胞（FCM）、随机括增多态性DNA（RAPD）以及DNA基因序列检测等。结果 ①累计发现44例婴儿头部念珠菌病，其中病期长者可感染头发。②粉末毕赤酵母可致婴儿皮肤感染。③一种罕见的林生地霉可致脓癣样地霉病。结论 我们发现的婴儿头部念珠菌病，慢性皮肤、黏膜念珠菌病伴皮肤粉末毕赤酵母感染和罕见的林生地霉引起儿童脓癣样地霉病，均为文献率先报道，对防治和降低念珠菌病和其他酵母样真菌感染患者的死亡率有一定意义。

酵素菌中酵母菌的分离鉴定

目的 对分离自酵素菌的 11株酵母菌 (Yeast)进行分类鉴定。方法 通过实验观察酵母菌株的细胞形态、大小、结构 ,繁殖方式 :单极芽殖、二极芽殖、多边芽殖或裂殖。能否形成非结合子囊、结合子囊和子囊孢子。菌落类型 :光滑型、粗糙型或粘液型。菌落的大小形态、质地、颜色、透明度、气味。假菌丝生长试验 ,掷孢子试验。碳水化合物的发酵试验 ,碳源、氮源的同化试验。无维生素培养基生长试验 ,放线菌酮抗性试验 ,尿酶、卵磷、土温分解试验。重氮基蓝B试验 ,类淀粉化合物形成试验 ,5 0 %葡萄糖生长试验 ,10 %NaCl生长试验 ,37℃、40℃生长试验等项生理学和生物化学实验 ,对酵母菌的表型性状进行研究。结果 5株酵母菌鉴定为粉状毕赤酵母 ;6株酵母菌鉴定为酿酒酵母。结论 粉状毕赤酵母和酿酒酵母是构成酵素菌菌种的主要活性菌种。对分离自酵素菌的 11株酵母菌 (Yeast)进行分类鉴定。

腐植酸生物菌肥对保护地次生盐渍化土壤改良效果研究

利用解淀粉芽孢杆菌和粉状毕赤酵母菌接种到褐煤腐植酸中,经好气性发酵生产出生物菌肥,应用于保护地次生盐渍化土壤改良。结果表明,保护地土壤理化性状显著改善,土壤微生物数量明显增多,生物量碳、土壤的呼吸作用和酶活性也有一定增加;土壤中南方根结线虫数量明显减少,有益的小杆线虫数量增多;黄瓜666.7 m2产量9918.4 kg,比CK增产22.61%;黄瓜根系中根结比率降低;黄瓜长势良好,未出现盐渍化危害症状。