RP-HPLC法同时测定沙地柏中3种鬼臼毒素类化合物的含量

用RP—HPLC法同时测定了沙地柏3种鬼臼类化舍物（鬼臼毒素、脱氧鬼臼毒素和苦鬼臼毒素）的含量。采用YMC C13反相柱，甲醇：水（55：45）为流动相，紫外检测波长为290nm，鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素在62．50～1000．00ug／mL范围内的线性方程分别为：Y=（3．5024＋252．1221X）×10^-6，Y=（3．5805＋621．0468X）×10^-6；相关系数为r=0．9999和0．9992；回收率分别为100．932％（RSD=1．388％）和98．968％（RSD=1．108％）；苦鬼臼毒素在6．25-100．0ug／mL范围内的线性方程为：Y=（4．7818＋6369．7680X）×10^-6，相关系数r=0．9996，回收率为100．110％（RSD=1．344％）。沙地柏叶中的鬼臼毒素、脱氧鬼臼毒素和苦鬼臼毒素含量分别为3．894、3．345、0．427mg／g，茎中的含量分别为2．225、1．829、0．241mg／g；超临界流体萃取沙地柏叶中的3种化舍物含量分别为2．327、2．116、0．191mg／g，茎中的含量分别为1．784、1.446、0．108mg／g。该方法步骤简便，结果准确，分析速度快。

人肺腺癌厄洛替尼耐药细胞系PC-9/ER的建立及其特性

目的:构建厄洛替尼耐药人肺腺癌细胞模型PC-9/ER,观察单用人表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼或联合胰岛素样生长因子受体1(insulinlike growth factor receptor 1,IGFIR)酪氨酸激酶抑制剂苦鬼臼毒(picropodophyllotoxin,PPP)作用于该细胞后,该细胞对厄洛替尼耐药性的影响,并探讨耐药相关机制。方法:选择人肺腺癌细胞株PC-9,采用逐步递增厄洛替尼浓度的方法体外诱导构建耐药株PC-9/ER,CCK-8法检测耐药指数;细胞计数法绘制PC-9和PC-9/ER的生长曲线,并计算出两细胞系的倍增时间;流式细胞术检测两细胞系的细胞周期;Western Blot法检测p-EGFR及p-IGFIR的表达水平,并进一步检测厄洛替尼及PPP单独或联合作用于PC-9/ER后,各组Akt,ERK,p-Akt及p-ERK的表达水平。结果:PC-9/ER细胞株的耐药指数是72.3。细胞生长曲线显示,PC-9/ER细胞生长较亲代细胞慢,PC-9与PC-9/ER细胞的倍增时间分别为32.9及36.9 h(P=0.003)。与PC-9相比,PC-9/ER细胞的G1期细胞增多(P=0.001),而S期细胞则明显下降(P:0.015)。Western Blot结果表明,PC-9/ER细胞中p-IGF1R表达比亲代细胞明显增多(P=0.016),而p-EGFR无明显变化(P=0.152)。在亲代及耐药细胞系,厄洛替尼联合PPP组均较其他组更能显著的抑制细胞增殖(P<0.05);且Western Blot法表明联合用药组EGFR下游磷酸化的Akt、ERK的表达水平明显减少。结论:成功构建了人肺腺癌厄洛替尼耐药细胞株PC-9/ER,IGF1R通路可能与肺腺癌EGFR-TKI获得性耐药有关。

苦鬼臼毒与厄洛替尼对人肺癌PC-9/ER细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的 :探讨苦鬼臼毒(picropodophyllotoxin,PPP)对厄洛替尼耐药裸鼠移植瘤生长的影响。方法 :建立人肺癌耐药裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、厄洛替尼组、PPP组、PPP+厄洛替尼联合组。检测各组移植瘤体积、重量,计算抑瘤率。结果:PPP及厄洛替尼联合组较其他组相比,移植瘤增长速度明显减慢,瘤体体积及重量明显较小(P<0.05)。厄洛替尼组、PPP组、PPP+厄洛替尼联合组抑瘤率分别为10.4%、42.3%、67.8%。结论:成功建立人肺癌耐药裸鼠移植瘤模型,PPP联合厄洛替尼能有效抑制肿瘤生长,为肺癌的治疗提供新的思路。

浙贝母化学成分研究Ⅳ

我们曾报道从浙贝母(Fritillaria thunbergii Miq.)的鳞茎中分离到3种新生物碱——浙贝宁、浙贝丙素和浙贝酮,以及已知的浙贝甲素、浙贝乙素和 eduardine。进一步深入研究时,又分离到两种化合物,分别鉴定为浙贝宁甙(zhebeininoside,Ⅰ)和苦鬼臼毒素(picropodophyllotoxin,Ⅱ)。化合物Ⅰ为新的生物碱甙,化合物Ⅱ在该属植物中首次得到。