湖南省不同品种公猪精液品质及运动性能的研究

[目的]研究不同品种公猪精液质量的差异,提高公猪饲养管理水平。[方法]收集2021年4月—2022年11月,湖南省32个生猪良补县51批次247头成年公猪(长白猪73头、大白猪75头、杜洛克猪99头)的精液质量数据,通过方差分析探讨不同品种公猪精液的活力、畸形率和精子运动参数等差异。[结果]不同品种公猪精液的活力和畸形率没有显著差异;长白猪精子的缓慢比例显著高于杜洛克猪和大白猪,长白猪精子的转圈比例显著低于杜洛克猪和大白猪,其他运动轨迹参数差异不显著。[结论]长白猪精子的迁移速率低于杜洛克猪和大白猪,长白猪前向运动精子数的比例高于杜洛克猪和大白猪。

抗菌肽在猪精液常温保存中的应用研究进展

人工授精(AI)是畜牧业加速发展的核心技术之一,精液保存为其中的一个关键环节。猪精液在保存过程中容易受到细菌污染而导致精子质量下降,随着全面禁抗时代的到来,迫切需要开发具有不同活性的抗菌替代品,以提高精液保存效果。抗菌肽(AMPs)因具有广谱抗菌活性和较低耐药性,通过细胞膜损伤和非膜损伤机制在猪精液保存过程中发挥抗菌作用,目前已成为抗生素的重要替代品。本文综述了AMPs的抑菌机制及其在猪精液保存技术中应用的研究进展,旨在为猪精液常温保存抗菌肽产品的开发提供科学依据。

八眉猪精液品质分析研究

本试验选择生长发育良好,年龄在1.5~2.5岁的八眉猪公猪11头,按常规方法采集精液,对其精液品质进行评定分析。结果表明,11头试验猪精液颜色为乳白色或浅灰色,略带腥味,公猪平均射精量为(117.34±43.27) ml,平均精子活率为65.02%±4.26%,平均精子密度为(1.52±0.7)×10^(8)个/毫升;解冻后精子活率均≥35%,精子畸形率≤20%;对精液品质特性进行相关性分析发现,精液量、精子活率、精子密度间相关性不显著(P>0.05)。经评定,其中一头公猪精子活率不达标,其余10头公猪精液符合国标要求,可以进行冻精制作及作为资源保存。

猪冷冻精液在人工授精中的研究进展

猪冷冻精液在传播优良品种、提高优秀公畜利用率和降低生产成本方面具有重要作用。随着集约化养猪模式的不断发展和人工授精技术普及率的提高,以及地方猪种质资源保存和利用的持续加强,猪冷冻精液将会得到更多应用。然而,猪精子容易受冷休克的影响,且常规人工输精模式不适用于冷冻精液,导致猪冷冻精液在生产中使用率很低。文章通过介绍目前国内外猪冷冻精液在人工授精中的应用现状,分析影响猪冷冻精液应用效果的主要因素,并提出了提高猪冷冻精液在人工授精中应用效果的相关措施,以期为猪冷冻精液生产技术进步及在人工授精中的应用提供参考。

不同品种公猪的精液品质及受精能力分析

为分析不同品种公猪精液品质及受精能力的差异,测定临沂某猪场的沂蒙黑猪、江泉黑猪和杜洛克3个品种12~36月龄公猪精液品质及受精能力的各项指标。采用单因素方差分析和多重比较方法,比较不同品种各项指标均数的差异性,校正品种效应后,计算各项指标间的相关系数。结果表明,江泉黑猪与沂蒙黑猪在采精量、精子密度、有效精子总数和稀释份数上无显著差异,但均显著高于杜洛克;江泉黑猪与杜洛克在精子活力上无显著差异,但均显著高于沂蒙黑猪;3个品种公猪的精液在稀释后,每份精液的有效精子数无显著差异,受胎率也无显著差异;江泉黑猪在采精量、有效精子总数、稀释份数上表现出较高的杂种优势,杂种优势率在3.8%~5.5%。相关性分析结果表明,原精的有效精子总数与稀释份数呈显著正相关(r=0.99,P<0.01),采精量与原精的有效精子总数和稀释份数均呈显著正相关(r=0.92,P<0.01);采精量与原精的精子密度、稀释后的精子密度、直线运动精子数、有效精子数存在中等程度的负遗传相关(r=-0.37~-0.21),但对受胎率无显著影响(r=-0.06);除了原精的精子密度与受胎率呈中等程度的正相关外(r=0.28,P<0.01),稀释前和稀释后各精液品质指标与受胎率均呈弱相关。综上,在人工授精过程中精液稀释有利于保证母畜受孕,江泉黑猪在采精量、有效精子总数等指标上存在一定程度的杂种优势且优于父本杜洛克。

内江猪精液品质分析及冷冻程序优化探索

【目的】围绕内江猪精液品质和冷冻精液流程优化进行研究,以更好实现对内江猪的保种和开发利用。【方法】使用同一时期采精的5头内江猪精液检测了精子的活率、活力、运动状态和生化指标(甘油三酯、过氧化氢等),分析精子活力和精浆各生化指标相关性,并根据课题组此前的研究,进行了冷冻精液流程优化。【结果】平衡12 h后内江猪精液活力指标显著下降,原地移动精子数显著上升(P<0.05)。精子活力与精浆H_(2)O_(2)和MDA含量呈负相关,而与TG含量呈正相关关系。采用温和的离心方式(2000×g,7 min)、较高的甘油浓度(终浓度8%)对冷冻精液流程优化后,精子冷冻前活率提升了10.28%,活力提升了15.75%(P<0.05)。在低温慢速(37℃,20 s)条件下,冷冻保存内江猪精液解冻后活率最高(53.18±5.68)%。【结论】根据内江猪精液特点,优化后的冷冻程序和低温慢速(37℃,20 s)的解冻程序更适合内江猪。

种猪常温精液畸形率检测及不确定度评定

试验旨在探讨检测过程中各因素对畸形率检测结果准确性的影响。试验建立测量不确定度模型,通过检测种猪常温精液精子畸形率,针对主要影响种猪精子畸形率可靠性的因素进行分析,建立种猪精液品质检测结果可靠性评估的方法。结果显示,测量标准不确定度结果为0.84%,扩展不确定度结果为1.68%。研究表明,生物投影显微镜的分辨率对精子畸形率检测的准确度影响较小,配制吉姆萨染色液浓度不影响检测结果,操作人员的技术水平对不确定度分量的结果影响较大。

不同采精季节和品种对公猪精液性状的影响

[目的]研究公猪采精日龄、季节、品种对精液性状的影响,为养殖企业或公猪站合理配置公猪数量和更新公猪群提供科学依据。[方法]将公猪精液分别按照品种(皮特兰、杜洛克、长白和大白)和采精季节(春、夏、秋、冬)分组,测量精液体积、密度和活力,比较不同采精季节、不同品种公猪间精液体积、密度和总精子数等精液性状的差异,进一步分析总精子数与公猪品种、采精季节和采精日龄间的一般线性关系。[结果]公猪的精液体积与精液密度、采精日龄(288~1156 d)间存在极显著相关。精液体积在秋季最低,秋、冬季的精液密度优于春季和夏季,精子总数在秋、冬季时显著高于春季和夏季。皮特兰和杜洛克公猪的精液体积显著低于长白和大白公猪,但杜洛克公猪的精液密度显著高于其他3个品种,且杜洛克公猪的总精子数显著优于其他品种。此外,公猪达到采精日龄后,总精子数与采精日龄呈负相关,公猪日龄约为719日龄(24月龄)时达到峰值。[结论]在精液需求量相同的情况下,秋、冬季节可适当减少公猪饲养数量,尤其是杜洛克公猪的数量。

猪精液超低温冷冻保存研究进展

猪人工授精(AI)技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,从而大大提高猪种资源的利用率,但冷冻解冻后的精液质量较差,受胎率、窝产仔数远低于鲜精,极大地限制了猪精液冷冻保存技术的广泛应用。本文综述了猪精液冷冻保存研究概况、猪精液冷冻损伤机理和猪精液冷冻保存影响因素,以期为猪精液超低温冷冻保存研究提供新的思路和方法。

猪精液4℃低温保存技术研究

为丰富猪鲜精保存技术、改善与提高精液保存质量,本研究以市场占有率高、性能稳定和可耐受4℃低温的长效稀释剂为对照,探讨本课题组研制的4℃稀释剂(低温Ⅰ号、低温Ⅱ号)对猪精液低温保存效果的影响。结果表明:低温Ⅰ号和低温Ⅱ号稀释剂对猪精液的有效保存时间和总存活时间均显著高于对照组(P<0.05)。保存至第6天时,对照组精子活力显著降低(P<0.05),保存至第10天时,低温Ⅰ号、低温Ⅱ号、对照组精子活力分别为74.6、76.0、0;保存第10天时,对照组pH显著低于2个实验组(P<0.05);保存从第5天开始,实验组质膜完整性显著高于对照组(P<0.05)。综上,本课题组研制的稀释剂对猪精液4℃低温保存效果较好,而且低温Ⅱ号对精子活力和质膜完整性保存效果更优。

影响猪精子耐冻性的候选基因分析

在对通城猪精液冷冻保存的过程中,发现精液冻存质量存在个体差异。根据多次精液冻存后的精子活力检测结果,结合系谱关系筛选出精子耐冻与不耐冻个体各3头,并采用“中芯一号”SNP芯片进行群体遗传分化指数(FST)分析,应用生物信息学方法挖掘影响猪精子耐冻性差异的关键候选基因。结果显示:22头通城猪精液冻存后的精子活力存在明显差异,3头精子耐冻个体之间和3头精子不耐冻个体之间分别具有更近的亲缘关系,表明猪精子耐冻性差异可能受遗传因素影响;对耐冻性差异个体SNP芯片数据的FST分析结果显示,FST平均值为0.1705,存在较高程度的遗传分化;进一步选取FST前1%(FST>0.53)的266个SNP位点,并在其上下游100 kb区域共注释到了397个候选基因,富集在细胞形态、肌动蛋白细胞骨架和离子通道等生物学过程;其中KCNG4、ARPC1B、DNAAF4、MNS1、LIMK2、RPL31和VIM等基因可作为猪精子耐冻性差异的关键候选基因。以上结果说明,猪精子耐冻性受遗传因素影响,并受到关键基因控制,值得进一步对其基因功能进行研究。

稀释方法、孵育温度和时间对冷冻-解冻后猪精液质量的影响

试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P<0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P>0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P>0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P>0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P<0.01)。

多指标正交设计评价和优化巴马香猪精液冷冻稀释液

该文通过多指标正交实验设计对巴马香猪精液冷冻稀释液中低密度脂蛋白(LDL,因素A)、海藻糖(因素B)和甘油(因素C)等3种保护剂联合使用时的作用进行评价,并分别对3种物质的最佳体积质量分数、摩尔浓度和体积百分比进行优化.结果表明3种保护剂对精子活率(TMS)、质膜完整性(PMI)和彗星率(CR)作用的主次顺序均为A>C>B,对精子顶体完整性(AI)作用的主次顺序为B>A>C;3种保护剂对TMS和PMI均有极显著的保护作用(p<0.01),对CR均无显著性作用(p>0.05);LDL和海藻糖对AI有显著的保护作用(p<0.05),甘油对AI无显性作用(p>0.05);通过因素与指标关系趋势图的绘制,发现由各个指标得到的最佳组合均为A2B3C2,且指标间的相关性均达到了显著水平(p<0.05).因此,用TMS,PMI,AI和CR评价巴马香猪冷冻-解冻后精液质量时,指标间不存在矛盾,用9%(w/v)低密度脂蛋白、200mmol/L海藻糖和2%甘油为巴马香猪精液冷冻稀释液中最优组合.

不同输精方式和不同精液类型对母猪繁殖性能的影响

为探究不同输精方法(常规输精和深部输精)和不同精液类型(新鲜精液和冷冻精液)对母猪繁殖性能的影响。对使用新鲜精液常规输精和深部输精、冷冻精液常规输精和深部输精、以及不同剂量的冷冻精液配种效果进行比较分析。结果表明:新鲜精液采用深部输精可显著提高受孕率,总产仔数(12.71头)、活仔数(11.54头)、健仔数(11.17头)、初生重(1.65 kg)等繁殖性状均显著高于常规输精(P<0.05);使用冷冻精液显著地降低了受孕率41.38%和受孕分娩率41.38%(P<0.05),新鲜精液输精后代在初生窝重和健仔重等性状上表现出明显优势(P<0.05);此外对冷冻精液采用深部输精技术时,适当加大输精剂量能显著提高母猪繁殖性能,总产仔数等繁殖性状能够达到常规输精的效果水平。说明实现冷冻精液技术与深部输精技术的结合能够显著提高猪的繁殖生产效率。

不同稀释粉对猪精液保存效果的影响

为探讨不同精液稀释液在常温状态下保存猪精液的效果,试验选用4种市场上常见的猪长效精液稀释粉,并在17℃下保存。于0、24、48、72、96及120 h检测精子活力、直线速度及活率等指标。结果表明,所选的稀释液均对猪的精液具有较好的保存效果。在0～120 h的精液保存中,2号稀释液对猪精液的保存效果最佳,其精子存活时间较长、活率较高、活力较好且效果较稳定,利于生产应用。

滇南小耳猪电刺激采精及精子功能的检测

采用Lane PulsatorⅣ型直肠电刺激采精法对滇南小耳猪进行采精,采精仪电压参数设为4～5档,电刺激时间1～5 s,在麻醉情况下成功采精。据精液的色泽,明显分为3段:前段清亮(精液量28±12 mL;密度(2.5±1.2)×10~6个·mL^(-1);活力18.2±5.8)%,中段为胶冻絮状液体(26±14 mL;(4.7±3.9)×10~8个·mL^(-1);(69.3±15.4)%)和后段清亮(22±10 mL;(5.8±5.3)×10~6个·mL^(-1);(35.4±12.2)%)。与间隔3 d和14 d重复采精比较,间隔7 d采精的效果较好,中段精液的品质较好。中段精液对超教排卵母猪的人工授精实验中,卵子受精率为81.3%,囊胚率达到71.9%。直肠电刺激采精方法是适用于滇南小耳猪的安全有效的采精技术。

关中黑猪精液常温保存研究

关中黑猪是陕西省培育品种,具有抗病能力强、繁殖力高、耐粗饲和肉质好等特点。由于国外瘦肉型猪对国内市场的冲击,关中黑猪的市场环境日益下降,使得许多优良性状发生分离变化。本研究选取5种常用猪精液常温保存稀释剂,对关中黑猪精液保存最适宜温度及抗生素选择进行研究。结果表明,关中黑猪种公猪鲜精活力为0.85,畸形率16%,pH7.3,精子密度2.36亿/mL,平均采精量250mL,色泽为乳白色。在不同的稀释剂中,保存效果最好的是Ⅲ号稀释剂,可保存5d,活力为0.5,Ⅰ号稀释剂效果次之,Ⅱ号稀释液略好于Ⅳ、Ⅴ号稀释液。在短时间内（≦2d）,Ⅰ号稀释剂与Ⅲ号稀释剂保存效果无明显差异,而Ⅰ号稀释剂成本更低,更适用于生产实践中关中黑猪精液短期保存。此外,添加青霉素、庆大霉素或青霉素＋庆大霉素的混合液后保存效果没有差异。因此,关中黑猪精常温保存的最佳温度是15~20℃,本研究为关中黑猪人工授精技术及提高育种水平提供依据。

猪精液冷冻稀释液配方的筛选

本试验优选出的冷冻稀释液1号和2号配方,冻精活率达0.5,解冻后精子在38～40℃恒温下存活指数分别为1.98±0.64和2.27±0.62。应用日立 H-800型透射电子显微镜对冻精进行超微结构观察,精子顶体完整率分别达59.61%和63.54%。2号配方的冷配情期受胎率达70.57%,其顶体完整率与受胎率呈正相关。

原花青素对猪精液常温保存效果的影响

为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P<0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。

采精频率对藏猪种公猪精液品质的影响

为研究采精频率对藏猪种公猪精液品质的影响,选择3~5岁健康藏猪种公猪20头,随机分为4组,每组5头。试验Ⅰ组隔日采精1次;试验Ⅱ组连续2 d采精,休息1 d,再连续2 d采精;试验Ⅲ组连续3 d采精,休息1 d,再连续3 d采精;试验Ⅳ组采精1次,休息2 d,再采精1次。采精时间均为早上9：00,持续2个月。试验重复3次。结果显示,精子密度、精子活力、精浆超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量,从高到低依次均为试验Ⅳ组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组。说明在本试验条件下,试验Ⅳ组,即采精1次,休息2 d,再采精1次,藏猪公猪精液品质最好。