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Pigment Epithelium-derived Factor in Cataractous Aqueous Humor and Lens Epithelial Cells 被引量:4
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作者 Tian Liu Yizhi Liu Mingxing Wu 《眼科学报》 2006年第1期40-46,53,共8页
Purpose: To study the characteristics of PEDF in cataractous aqueous humor and its expression in human lens epithelium. Methods: The PEDF concentration in the aqueous humor was measured by enzyme -linked immunosorbent... Purpose: To study the characteristics of PEDF in cataractous aqueous humor and its expression in human lens epithelium. Methods: The PEDF concentration in the aqueous humor was measured by enzyme -linked immunosorbent assay in senile (130cases) and congenital (18cases) cataract patients who underwent cataract phacoemulsification extraction surgery. Anterior lens capsular specimens were obtained from these patients to count lens epithelial cells (LEC) density. The Lens Opacities Classification System Ⅲ was used to classify the senile cataracts as cortical, nuclear, posterior subcapsular and mixed types of opacity, and quantitative analysis of the nuclear opacities was performed by Pentacam Scheimpflug imaging system. Anterior lens capsular specimens from another senile (10cases) and congenital (10cases) cataract were collected for immunofluorescence with polyclonal antibodies specific to human pigment epithelium -derived factor (PEDF). Results:The mean aqueous level of PEDF was(178. 9±87. 5)ng/ml, and there was negative linear correlation of PEDF level and age (r=0. 811, P<0. 001). In senile cases, the aqueous PEDF concentration decreased with increasing nuclear opacities (r=0. 447, P < 0.01) , and the mean PEDF level in nuclear cataract was significantly lower than that in posterior subcapsular opacity (P < 0.01) . PEDF immunostaining was detected in LEC of all capsular specimens. Conclusion : The PEDF level in human aqueous humor is related to age, types of cataracts and lens opacity. PEDF also express in human LEC. The study results suggest PEDF may regulate and/or protect LEC by paracrine and autocrine, and lack of PEDF may play a role in cataractogenesis. 展开更多
关键词 色素上皮 液体 上皮细胞 眼科
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应用反义寡核苷酸沉默PDGFR-α表达对RPE细胞增生和凋亡的影响 被引量:5
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作者 彭燕一 邱梅园 +2 位作者 丁芝祥 廖妙云 范才文 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期341-345,共5页
背景视网膜色素上皮(RPE)细胞能分泌血小板源性生长因子(PDGF),又具有PDGF受体(PDGFR),已有研究表明PDGF对增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的形成起着关键性作用。目的应用反义寡核苷酸(ASODN)技术抑制血小板源性生长因子受体... 背景视网膜色素上皮(RPE)细胞能分泌血小板源性生长因子(PDGF),又具有PDGF受体(PDGFR),已有研究表明PDGF对增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的形成起着关键性作用。目的应用反义寡核苷酸(ASODN)技术抑制血小板源性生长因子受体-α(PDGFR-α)基因的表达,观察其对RPE细胞增生和凋亡的影响。方法将人RPE细胞株在含质量分数10%胎牛血清的低糖DMEM培养基中进行培养,取对数生长期细胞调节细胞密度为5×10^5个/孔,接种于96孔板,待细胞生长至80%~90%融合时进行转染。空白对照组不加PDGFR—dASODN及阳离子脂质体Lipofectamine 2000,1.0μmol/LLipo—ASODN组、2.0μmol/LLipo—ASODN组使用阳离子脂质体Lipofectamine2000将靶向PDGFR—a基因的ASODN转染至RPE细胞株。细胞转染48h后,MTT法检测各组细胞的吸光度(4)值并以A490表示,逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测PDGFR—dmRNA在RPE细胞中表达的变化;hoechst33258荧光染色观察培养细胞的凋亡情况;流式细胞仪检测RPE细胞的细胞周期和凋亡率。结果空白对照组、1.0μmol/LLipo—ASODN组及2.0μmol/LLipo—ASODN组RPE细胞的A490值分别为1.45±0.12、1.07±0.06、0.65±0.05,差异有统计学意义(F=97.72,P=0.00),1.0μmol/LLipo—ASODN组和2.0μmol/LLipo—ASODN组RPE细胞A490值明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P=0.00、0.00);2.0μmol/L Lipo—ASODN组RPE细胞A490值明显低于1.0μmol/LLipo—ASODN组,差异有统计学意义(P=0.00)。Hoechst33258荧光染色显示,转染PDGFR—αASODN后RPE细胞凋亡数量多于空白对照组。流式细胞仪检测表明,转染PDGFR—αASODN后RPE细胞阻滞于G0/G1期(F=206.70。P=0.00),1.0μmol/LLipo—ASODN组和2.0μmol/LLipo—ASODN组RPE细胞凋亡率均明显高于空白对照组(37.8±1.3vs10.5±0.1,61.2±1.9∥s10.5±0.1)(F=1808.90,P=0.00)。PDGFR—α在RPE细胞中的表达随PDGFR—dASODN浓度的升高有降低的趋势。结论利用ASODN技术沉默PDGFR—α基因表达可以显著抑制PVR过程中RPE细胞的增生,并能诱导其凋亡,不同浓度PDGFR—OLASODN转染后能下调PDGFR—dmRNA的表达,PDGFR-α基因的ASODN靶向技术为PVR的基因治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 血小板源性生长因子-α受体 反义寡核苷酸 视网膜色素上皮细胞 增生 凋亡
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HIF-1α的RNA干涉可引起缺氧条件下人角膜上皮细胞VEGF表达下调和PEDF表达上调 被引量:4
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作者 张晓玲 陈剑 +2 位作者 姚敏 刘小勇 周清 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期880-884,共5页
目的探讨shRNA干扰HIF-1α表达对缺氧条件下人角膜上皮细胞(h CEC)血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法针对HIF-1αmRNA序列靶点设计及合成3个小发夹RNA(shRNA),分别在体外转染自发永生化人角膜上皮细胞(S-... 目的探讨shRNA干扰HIF-1α表达对缺氧条件下人角膜上皮细胞(h CEC)血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法针对HIF-1αmRNA序列靶点设计及合成3个小发夹RNA(shRNA),分别在体外转染自发永生化人角膜上皮细胞(S-ihCEC),转染后的S-ihCEC在1 mmol/L Co Cl2中缺氧诱导培养6 h,实时定量PCR检测HIF-1α、VEGF、PEDF的mRNA表达,Western blot法检测HIF-1α、VEGF的蛋白表达,ELISA检测PEDF的水平。结果与缺氧组比较,转染HIF-1αshRNA的S-ihCEC中HIF-1αmRNA表达下调、HIF-1α蛋白表达下调,VEGF mRNA表达下调、VEGF蛋白表达下调,PEDF mRNA表达上调(1. 22±0. 18)倍,PEDF水平升高。结论针对HIF-1α的shRNA能有效干扰S-ihCEC中HIF-1α的表达,并下调VEGF表达、上调PEDF的表达。 展开更多
关键词 缺氧 小发夹RNA 自发永生化人角膜上皮细胞 缺氧诱导因子- 血管内皮生长因子 色素上皮生长因子
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人原代晶状体上皮细胞中PEDF基因下调引起波形蛋白和αB-晶状体蛋白含量的变化
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作者 杨静 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第8期713-717,共5页
目的 研究人原代晶状体上皮细胞中,下调色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表达对波形蛋白和αB-晶状体蛋白表达的影响。方法 取20~35岁青年人晶状体上皮细胞进行原代培养。构建三种短发卡RNA(short hairpi... 目的 研究人原代晶状体上皮细胞中,下调色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表达对波形蛋白和αB-晶状体蛋白表达的影响。方法 取20~35岁青年人晶状体上皮细胞进行原代培养。构建三种短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)以特异性下调原代人晶状体上皮细胞中的PEDF基因RNA表达水平。感染细胞后,用Real-time PCR检测PEDF基因mRNA的表达水平,确定RNA干扰效率。人原代晶状体上皮细胞PEDF基因RNA干扰48 h后,用Western Blot检测其中波形蛋白以及αB-晶状体蛋白表达水平的变化,以shRNA-scramble组为阴性对照组。结果 人原代晶状体上皮细胞被成功分离培养,带有绿色荧光蛋白的表达PEDF shRNA的病毒载体对人原代晶状体上皮细胞的感染效率都在80%左右。Realtime PCR结果显示PEDF基因mRNA的表达明显被三种shRNA下调。Western Blot结果显示PEDF基因的表达下调引起了波形蛋白的表达下降(在三个实验组中分别下降了72%、79%和93%)以及αB-晶状体蛋白的表达增加(在三个实验组中分别增加了219%、204%、93%)。结论 人原代晶状体上皮细胞中PEDF基因下调可引起维持晶状体透明性的两种重要蛋白的改变,提示PEDF与白内障形成有一定的联系。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 RNA干扰 波形蛋白 αB-晶状体蛋白 人晶状体上皮细胞
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PEDF基因修饰骨髓干细胞对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量:5
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作者 刘宇 石云 +3 位作者 张旭 高妍 王欢 王斌 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1091-1095,1099,共6页
目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)基因修饰骨髓干细胞(MSC)对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响。方法SPF级SD大鼠40只,随机均为分4组:糖尿病组(DM组)、糖尿病心肌梗死模型组(... 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)基因修饰骨髓干细胞(MSC)对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响。方法SPF级SD大鼠40只,随机均为分4组:糖尿病组(DM组)、糖尿病心肌梗死模型组(DMI组)、给予沉默PEDF的MSC糖尿病心肌梗死组(PM组)以及给予沉默PEDF的MSC和Wnt/β-catenin通路抑制剂的糖尿病心肌梗死组(WPM组)。采用高脂喂养+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合结扎大鼠冠状动脉建立糖尿病心肌梗死模型。PM组于模型成功后移植PEDF-/MSC(50μL)。WPM组于模型成功后移植PEDF-/MSC(50μL),30 min后静脉注射HY-15597(8 mg/kg)。观察大鼠心功能情况;HE染色观察大鼠心脏的病理变化;免疫荧光检测各组大鼠心肌组织中血管生成因子VEGF、IGF-1、PDGF B的表达;Western blotting检测各组大鼠心肌组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果术后24 h,PM组CK、CK-MB、BNP水平明显低于DMI组(P<0.05),术后4周CK、CK-MB、BNP水平检测结果显示,与24 h结果比较DMI组和PM组各项指标均下降(P<0.05)。与DMI组比较,超声提示PM组大鼠左室射血分数(LVEF)明显升高(P<0.05);病理学检查PM组可见心肌细胞改善,损伤程度有所好转,心肌细胞形态尚完整,肌纤维排列有序,心肌组织充血、肿胀减轻。免疫荧光提示沉默PEDF的MSC可以促进血管生成因子表达,同时显著下调wnt3a、β-catenin、survivin的表达(P<0.05)。结论沉默PEDF的MSC可通过促进血管生成改善糖尿病大鼠心肌梗死的心功能,对心脏具有保护作用。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 骨髓干细胞 糖尿病心肌梗死 大鼠 心肌损伤 信号通路
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人参皂苷Rg1对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮细胞损伤的抑制作用及机制
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作者 白玫 苗得雨 吴忧 《山东医药》 CAS 2024年第34期29-33,共5页
目的探究人参皂苷Rg1(GRg1)对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮(ARPE)细胞损伤的作用及机制。方法体外培养ARPE-19细胞,将其随机分为对照组、模型组及GRg1高、中、低剂量组与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂组。除对照组外,其余组采取氯化... 目的探究人参皂苷Rg1(GRg1)对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮(ARPE)细胞损伤的作用及机制。方法体外培养ARPE-19细胞,将其随机分为对照组、模型组及GRg1高、中、低剂量组与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂组。除对照组外,其余组采取氯化钴诱导ARPE-19细胞构建缺氧模型,通过CCK-8法、TUNEL法测定各组不同时间点细胞活性及凋亡情况,DCFH-DA荧光探针对各组活性氧(ROS)水平,经由RT-qPCR、Western blotting法测定各组细胞内HIF-1α、BDNF、PACAP38 mRNA与蛋白表达。结果与对照组相比,各组给药0、12、24 h时ARPE-19细胞活性均低、凋亡率高(P均<0.05);GRg1高剂量组给药12、24、48 h时ARPE-19细胞活性均高于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05),细胞凋亡率均低于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组给药24、48 h时细胞活性均高于GRg1中剂量组(P均<0.05)。与对照组相比,各组给药48 h时ARPE-19细胞ROS、HIF-1αmRNA及蛋白表达均高(P均<0.05);GRg1高剂量组ARPE-19细胞ROSHIF-1αmRNA及蛋白表达均低于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组ARPE-19细胞BDNF、PACAP38 mRNA及蛋白表达均高于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组与HIF-1α抑制剂组给药不同时间点细胞活性与凋亡率、细胞ROS、HIF-1α、BDNF、PACAP38表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论GRg1能减轻缺氧诱导所致ARPE-19细胞损伤,其机制可能与抑制细胞ROS、HIF-1α表达,上调BDNF、PACAP38表达有关。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 缺氧 人参皂苷RG1 脑源性神经营养因子 垂体腺苷酸环化酶激活多肽38
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高度近视对糖尿病豚鼠视网膜血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子表达的影响 被引量:10
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作者 王爽 梁申芝 +1 位作者 万光明 徐亚娟 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期398-402,共5页
背景 研究发现糖尿病合并高度近视患者较少发生糖尿病视网膜病变(DR),高度近视对DR的发生和发展可能具有保护作用.DR的主要病理基础是新生血管的形成,而血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)在DR的发生和发展过程中具... 背景 研究发现糖尿病合并高度近视患者较少发生糖尿病视网膜病变(DR),高度近视对DR的发生和发展可能具有保护作用.DR的主要病理基础是新生血管的形成,而血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)在DR的发生和发展过程中具有重要作用. 目的 观察高度近视合并糖尿病豚鼠视网膜中VEGF和PEDF表达的变化,探讨高度近视对DR的影响.方法 将出生3d的豚鼠48只采用随机数字表法随机分为正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组,每组12只.高度近视组豚鼠用半透明眼罩行右眼遮盖,构建高度近视动物模型;采用60 mg/kg的链脲佐菌素(STZ)腹腔内注射4次,每3天1次,制作糖尿病豚鼠模型;糖尿病合并高度近视组豚鼠采用半透明眼罩联合STZ制作糖尿病合并高度近视模型.造模成功后行常规苏木精-伊红染色观察视网膜结构,免疫组织化学染色检测视网膜中VEGF和PEDF的表达情况,应用Biosens数字成像分析系统分析阳性反应部位的平均吸光度(A)值. 结果 正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组的屈光度分别为(+0.25±177;0.07)、(-7.50±177;0.04)、(+0.25±177;0.03)和(-7.50±177;0.02)D;空腹血糖分别为(5.3±177;0.1)、(5.1±177;0.2)、(19.7±177;0.4)和(18.5±177;0.3)mmol/L.各组豚鼠均造模成功.与正常对照组相比,高度近视组视网膜组织变薄,神经节细胞数目减少;糖尿病组视网膜组织结构疏松、肿胀;糖尿病合并高度近视组视网膜组织变薄,结构肿胀.正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组VEGF阳性反应部位平均A值分别为128.61 ±177;5.57、118.24±177;2.59、155.60±177;9.70和135.15±177;5.22,各组间总体比较差异有统计学意义(F=17.365,P=0.032),其中糖尿病合并高度近视组豚鼠视网膜中VEGF表达水平(A值)明显低于糖尿病组,差异有统计学意义(t=5.210,P<0.05);PEDF阳性反应部位平均A值分别为145.57±177;8.35、149.54±177;6.20、127.71 ±177;2.45和1 37.53±177;7.38,各组间总体比较差异有统计学意义(F=19.210,P=0.019),其中糖尿病合并高度近视组豚鼠视网膜中PEDF水平明显高于糖尿病组,差异有统计学意义(t=4.521,P<0.05).结论 高度近视合并糖尿病的豚鼠视网膜中VEGF表达量下调,而PEDF表达上调,这可能是高度近视眼不易发生DR的主要机制. 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 高度近视 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子
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卵巢过度刺激综合征与卵泡液血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子水平的关系 被引量:7
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作者 谭慧芳 祁秀娟 +3 位作者 丁钰 王琳 孙月荣 郭晓静 《生殖医学杂志》 CAS 2013年第3期171-176,共6页
目的通过对卵泡液中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)水平的测定,探讨二者与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵巢过度刺激综合征(OHSS)的关系及其对OHSS的预测价值。方法本研究为单中心的前瞻性病例对照研究。71例IVF-E... 目的通过对卵泡液中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)水平的测定,探讨二者与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵巢过度刺激综合征(OHSS)的关系及其对OHSS的预测价值。方法本研究为单中心的前瞻性病例对照研究。71例IVF-ET患者在接受控制性超排卵(COH)过程中呈OHSS高危者43例,其中发生中重度OHSS的13例为OHSS组,未发生OHSS的30例为高危组;同期在COH中卵巢反应正常的28例患者为对照组。采用酶联免疫吸附法分别检测三组患者取卵日卵泡液中VEGF和PEDF水平。结果 (1)OHSS组的卵泡液VEGF水平明显高于高危组和对照组(P<0.05),高危组和对照组间比较无显著性差异(P>0.05)。(2)OHSS组的卵泡液PEDF水平明显低于高危组和对照组(P<0.05),高危组和对照组间比较无显著性差异(P>0.05)。(3)卵泡液VEGF水平与注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)日血清雌激素水平呈正相关(r=0.391,P<0.01),与卵泡液PEDF水平呈负相关(r=-0.280,P<0.05)。结论卵泡液中VEGF和PEDF与OHSS的发病密切相关,局部VEGF和PEDF的失衡可能在OHSS的发病中起一定作用。卵泡液VEGF/PEDF的升高可用于预测OHSS的发生。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子 卵巢过度刺激综合征 体外受精-胚胎移植
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脑小血管病认知障碍与血清VEGF及PEDF的相关性研究 被引量:5
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作者 郭霞 孙洪英 +3 位作者 雍雯 王楠 刘美玉 吴丽娥 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1360-1365,共6页
目的:探讨血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及色素上皮衍生因子(pigment epithelial derived factors,PEDF)与脑小血管病(cerebral small-vascular disease,CSVD)认知障碍的关系,为筛查CSVD血管性认知功... 目的:探讨血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及色素上皮衍生因子(pigment epithelial derived factors,PEDF)与脑小血管病(cerebral small-vascular disease,CSVD)认知障碍的关系,为筛查CSVD血管性认知功能障碍(vascular cognitive impairment,VCI)提供有效的生物学标记物。方法:连续性纳入2019年6月至2020年6月包头医学院第一附属医院神经内科住院的CSVD患者,完善患者临床信息资料、3.0 T头颅MRI检查包括T1加权成像、T2加权成像、液体衰减反转恢复序列、弥散加权成像及磁敏感加权成像等相关检查,采用VEGF、PEDF ELISA试剂盒检测血清VEGF、PEDF浓度。应用多变量logistic回归分析确定CSVD认知障碍的独立影响因素,运用SPSS 26.0描绘受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,评价血清VEGF、PEDF浓度对CSVD认知障碍的预测价值。结果:①共纳入193例患者,VCI组90例(46.6%),非VCI组103例(53.4%)。2组比较显示,VCI组受教育年限、既往高血压病史、腔隙性梗死或短暂性脑缺血发作史(transient ischemic attack,TIA)、入院收缩压、舒张压、空腹血糖、血肌酐、胱抑素C、血清VEGF浓度、血清PEDF浓度与非VCI组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②运用多变量logistic回归模型分析显示VEGF浓度较高(优势比1.393,95%CI=1.011~1.920,P=0.042)是CSVD认知障碍的独立危险因素;而血清PEDF相对低表达(优势比0.521,95%CI=0.384~0.707,P=0.000)是脑小血管病患者认知功能障碍的独立保护因素;ROC曲线分析显示血清VEGF浓度联合PEDF浓度联合预测脑小血管病认知障碍的曲线下面积为0.769(95%CI=0.705~0.832,P<0.001),敏感性为0.911,特异性为0.612;最佳截断值为128.61 pg/mL、100.95 ng/mL,均具有较好的预测价值。结论:血清VEGF浓度和PEDF浓度与CSVD认知障碍存在显著相关性,血清VEGF浓度联合PEDF浓度可作为CSVD认知障碍的指标。 展开更多
关键词 脑小血管病 认知障碍 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子
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臭氧治疗对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和VEGF、PEDF因子表达的影响 被引量:5
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作者 王清 郭乔茜 +2 位作者 李琴 谢婷玉 陈雪艺 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第3期232-235,共4页
目的探讨臭氧治疗对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的影响及其相关机制。方法雄性SD大鼠72只,其中正常对照组(... 目的探讨臭氧治疗对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的影响及其相关机制。方法雄性SD大鼠72只,其中正常对照组(N组)18只,余54只采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素腹腔注射法制作糖尿病大鼠模型,成功造模52只(成模率90%),随机分为3组:糖尿病模型组(D组,17只)无干预;氧气干预组(D+O2组,17只)给予氧气灌肠,每周3次;臭氧治疗组(D+O3组,18只)给予臭氧灌肠,每周3次。1个月后,麻醉下摘除眼球,TUNEL法检测细胞凋亡,并计算凋亡指数(apoptotic index,AI);荧光定量聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测VEGF mRNA和PEDF mRNA表达。结果 TUNEL法检测结果显示:凋亡细胞主要表达在视网膜神经节细胞层、内核层和血管内皮细胞层。N组、D组、D+O2组、D+O3组AI值分别为:1.97±0.53、34.43±5.56、34.68±5.80、19.22±3.30,各组间差异有统计学意义(F=89.070,P=0.000)。进一步两两比较结果显示:N组与D组、D+O2组、D+O3组间以及D+O3组与D组、D+O2组间差异均有统计学意义(均为P=0.000)。RT-PCR检测结果显示:N组、D组、D+O2组、D+O3组VEGF mRNA相对表达量分别为:4.22±1.18、11.60±3.42、10.75±2.81、7.40±2.13,各组间差异有统计学意义(F=23.923,P=0.000)。进一步两两比较结果显示:D组、D+O2组、D+O3组大鼠视网膜中VEGF mRNA的表达量明显高于N组,差异均有统计学意义(均为P=0.000);D+O3组VEGF mRNA的表达量低于D组和D+O2组,差异均有统计学意义(均为P=0.000)。RT-PCR检测结果显示:N组、D组、D+O2组、D+O3组PEDF mRNA相对表达量分别为:0.22±0.12、0.13±0.08、0.12±0.07、0.19±0.09,各组间差异无统计学意义(F=2.803,P=0.053)。进一步两两比较结果显示:N组与D组、D+O2组比较差异均有统计学意义(P=0.018、P=0.029),余组间比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论臭氧治疗可以减少糖尿病早期视网膜细胞凋亡,减少VEGF分泌,可能同时对PEDF有保护作用,对早期的糖尿病视网膜病变病程的发展可能有延缓的作用。 展开更多
关键词 臭氧 糖尿病视网膜病变 细胞凋亡 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子
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色素上皮衍生因子基因修饰的脐带间充质干细胞对糖尿病大鼠视网膜组织病理改变的影响 被引量:2
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作者 韩新红 李艳 +2 位作者 李聪伶 单田慧 王淑娜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第2期126-130,共5页
目的观察玻璃体内注射色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(pigment epithelial-derived factor gene-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells,PEDF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜组织病理结构改变的影响。方法组... 目的观察玻璃体内注射色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(pigment epithelial-derived factor gene-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells,PEDF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜组织病理结构改变的影响。方法组织块培养法获取人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)。获取的h UCMSCs表达CD105、CD73和CD90,不表达CD34、CD45、CD11b、CD19和HLA-DR。用慢病毒载体以感染复数值为50对其转染。利用链脲佐菌素腹腔注射途径诱导糖尿病大鼠模型,实验动物分为四组:正常对照组(N组)、实验对照组糖尿病注射PBS组(D1组)、糖尿病注射h UCMSCs治疗组(D2组)、糖尿病注射PEDF-MSCs治疗组(D3组)。造模成功后3个月进行干预治疗,N组不予特殊治疗。玻璃体内注射2周后利用荧光显微镜观察PEDF-MSCs在大鼠眼内表达情况。干预治疗2周后进行HE染色观察各层视网膜结构,及各组视网膜总厚度变化。结果玻璃体内注射后2周,荧光显微镜下观察到D2组大鼠玻璃体内簇状排列的红色荧光,视网膜中未发现明显红色荧光;D3组大鼠玻璃体内簇状排列的绿色荧光,视网膜中未发现明显绿色荧光。HE染色显示,N组大鼠的视网膜各层结构完整,层次清晰,细胞排列整齐,染色均匀;D1组大鼠视网膜神经纤维层(nerve fiber layer,NFL)出现明显水肿、血管扩张,内丛状层(innerplexiform layer,IPL)结构疏松,内核层(inner nuclear layer,INL)细胞排列紊乱;D2组NFL水肿减轻;D3组NFL水肿明显减轻,INL与外核层(outer nuclear layer,ONL)层细胞排列规整。视网膜总厚度N组为(103.82±4.15)μm、D1组为(138.86±4.71)μm、D2组为(131.17±3.89)μm、D3组为(112.24±4.22)μm;各组间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 PEDF-MSCs可较长时间在糖尿病大鼠玻璃体内存活且持续表达。玻璃体内注射PEDF-MSCs能明显改善糖尿病大鼠视网膜损伤,减轻视网膜水肿。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 间充质干细胞 糖尿病视网膜病变 大鼠
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玻璃体腔注射抗氧化剂NAC对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用 被引量:2
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作者 陈玲 刘彦芳 林萍 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期438-441,共4页
目的:探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对早期糖尿病大鼠视网膜保护作用的机制。方法:健康成年雄性SD大鼠30只,按照随机分配的原则分为正常对照组(CON组,n=10),糖尿病组(DM组,n=20)。DM组禁食12h后,按照60mg/kg体质量剂量一次性左下腹... 目的:探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对早期糖尿病大鼠视网膜保护作用的机制。方法:健康成年雄性SD大鼠30只,按照随机分配的原则分为正常对照组(CON组,n=10),糖尿病组(DM组,n=20)。DM组禁食12h后,按照60mg/kg体质量剂量一次性左下腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)溶液,CON组注入等量的柠檬酸缓冲溶液。用药72h后,鼠尾静脉取血检测血糖,≥16.7mmol/L者定为糖尿病模型动物。成模大鼠随机分为糖尿病对照组(D组)和NAC治疗组(N组)。模型建立后,N组大鼠每周通过玻璃体腔注射4μL 1.6μg/μL的NAC,CON组、D组大鼠则给予玻璃体腔注射4μL 0.01mmol/L的磷酸缓冲盐溶液(pbs)不限饮食水,分组喂养。每周记录各组大鼠体质量及血糖。糖尿病成模后2mo,处死实验动物,通过HE染色法,检测各组大鼠视网膜内核层厚度;通过免疫荧光法,检测各组大鼠视网膜神经节细胞数量及视网膜中色素上皮衍生因子(PEDF)水平。结果:N组视网膜内核层厚度较D组厚度增加(P<0.01),与CON组厚度无差异(P>0.05)。与CON组相比,D组视网膜神经节细胞数量减少(P<0.01),N组视网膜神经节细胞略减少(P>0.05)。D组视网膜神经节细胞较N组减少(P<0.01)。与CON组相比,D组PEDF表达下降(P<0.01),N组PEDF表达略下降(P>0.05)。D组PEDF表达较N组下降(P<0.01)。结论:抗氧化剂NAC对早期糖尿病大鼠视网膜组织有保护作用的机制可能是通过上调视网膜中PEDF水平。 展开更多
关键词 抗氧化剂 N-乙酰半胱氨酸 玻璃体腔注射 色素上皮衍生因子
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色素上皮衍生因子对高糖环境下肺鳞癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响 被引量:1
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作者 马建梅 张彦 +3 位作者 陈承 史红阳 倪菁 马卫国 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期263-268,共6页
目的研究色素上皮衍生因子(PEDF)对高糖环境下肺鳞癌细胞株增殖、凋亡、侵袭的影响,探索PEDF对肺癌合并糖尿病的疾病发展、预后及治疗的意义。方法培养肺鳞癌细胞株SK-MES-1,分为阴性对照组、高糖组及PEDF干预高糖1、2、3组,倒置显微镜... 目的研究色素上皮衍生因子(PEDF)对高糖环境下肺鳞癌细胞株增殖、凋亡、侵袭的影响,探索PEDF对肺癌合并糖尿病的疾病发展、预后及治疗的意义。方法培养肺鳞癌细胞株SK-MES-1,分为阴性对照组、高糖组及PEDF干预高糖1、2、3组,倒置显微镜观察各组细胞形态改变;MTT比色法分析各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡率;Transwell细胞侵袭实验检测各组细胞穿透数;ELISA法检测各组细胞培养基上清液中VEGF的表达。结果①高糖组较阴性对照组细胞增殖抑制率降低、凋亡率降低、阻滞于G0/G1期的百分比相对减少、细胞穿透数增加、VEGF浓度增高(P<0.05);②随着PEDF干预浓度的增高,各组细胞的增殖抑制率和凋亡率、G0/G1期的百分比增加,细胞穿透数减少,VEGF浓度降低,各组差异有统计学意义(P<0.05);结论①高糖环境促进肺鳞癌发展。②PEDF抑制高糖环境下肺鳞癌细胞的增殖,促进早期凋亡,减弱侵袭力,并呈浓度依赖;预测PEDF将成为肺癌合并糖尿病的靶向治疗药物。 展开更多
关键词 高糖 色素上皮衍生因子(PEDF) 肺癌
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PM2.5对支气管上皮细胞色素上皮衍生因子表达的影响 被引量:1
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作者 朱成华 施丽君 +2 位作者 张灵凤 计晓兰 杜强 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2016年第10期1151-1153,共3页
目的探索不同浓度PM2.5对支气管上皮细胞(BEAS-2B)色素上皮衍生因子(PEDF)蛋白表达的影响。方法 BEAS-2B细胞传代培养,加入低、中、高浓度PM2.5悬液(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)刺激24 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养... 目的探索不同浓度PM2.5对支气管上皮细胞(BEAS-2B)色素上皮衍生因子(PEDF)蛋白表达的影响。方法 BEAS-2B细胞传代培养,加入低、中、高浓度PM2.5悬液(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)刺激24 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中PEDF水平;Western blotting检测BEAS-2B细胞中PEDF蛋白表达水平。结果与对照组相比,PM2.5浓度为25μg/ml时,细胞内和上清液中PEDF蛋白水平均有增加趋势,但无统计学意义(t=-0.730,t=-1.840,P>0.05);PM2.5浓度为50μg/ml和100μg/ml时,细胞内和上清液中PEDF蛋白表达水平明显增高(t>5.798,P<0.01)。结论中、高浓度PM2.5能够增加支气管上皮细胞中PEDF蛋白水平,并呈浓度依赖性。 展开更多
关键词 细颗粒物 支气管上皮细胞 色素上皮衍生因子
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视网膜和脉络膜新生血管的基因治疗 被引量:3
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作者 禹海 陈蕾 《眼科新进展》 CAS 2007年第4期308-314,共7页
抑制视网膜或脉络膜新生血管是治疗视网膜或脉络膜血管性疾病的关键。基因治疗是目前研究的热点,我们从动物模型、载体、治疗性靶基因的选择等方面对视网膜和脉络膜新生血管治疗的进展进行综述。
关键词 视网膜新生血管 脉络膜新生血管 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子 基因治疗
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色素上皮衍生因子修饰的人脐带间充质干细胞构建方法 被引量:2
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作者 闻慧 张芸 +7 位作者 纪惜銮 刘晓雷 杨顺 罗朝霞 谢亮 邹文文 李结明 姜舒 《国际眼科杂志》 CAS 2017年第7期1226-1231,共6页
目的:构建携带色素上皮衍生因子(pigment epithelialderived factor,PEDF)基因的重组慢病毒,感染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs),探讨PEDF在hUCMSCs中的表达及重组慢病毒对hUCMSCs... 目的:构建携带色素上皮衍生因子(pigment epithelialderived factor,PEDF)基因的重组慢病毒,感染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs),探讨PEDF在hUCMSCs中的表达及重组慢病毒对hUCMSCs活性的影响。方法:利用pLenti-CMV-hChR2-EYFP载体系统,构建携带PEDF基因的重组慢病毒pLenti-CMV-PEDF-EYFP,进一步感染hUCMSCs,获得携带PEDF基因的hUCMSCs(PEDF-hUCMSCs),激光共聚焦显微镜和ELISA法检测PEDF-hUCMSCs的PEDF蛋白表达情况,采用CCK8法检测PEDF-hUCMSCs的活性。通过观察细胞形态和流式细胞术检测验证重组慢病毒pLenti-CMV-PEDFEYFP感染hUCMSCs后对细胞传代、细胞表型的影响。结果:成功构建携带PEDF基因的重组慢病毒pLentiCMV-PEDF-EYFP,高效感染hUCMSCs,获得的PEDFhUCMSCs能有效表达PEDF蛋白,检测结果显示重组病毒感染组细胞与空白对照组细胞活性无统计学差异(P>0.05)。重组慢病毒pLenti-CMV-PEDF-EYFP感染对hUCMSCs的增殖能力、细胞形态和细胞表型没有明显改变。结论:携带PEDF基因的重组慢病毒pLenti-CMV-PEDFEYFP修饰的PEDF-hUCMSCs能有效表达PEDF蛋白。 展开更多
关键词 色素上皮衍生因子 慢病毒载体 人脐带间充质干细胞
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p42/p44MAPK通路在高糖诱导的hRPE细胞VEGF表达中的作用 被引量:1
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作者 张春侠 胡建民 庄铭忠 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第8期1382-1385,共4页
目的:探讨p42/p44丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinases,MAPK)信号转导通路在高糖诱导的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表... 目的:探讨p42/p44丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinases,MAPK)信号转导通路在高糖诱导的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达中的作用。方法:采用hRPE细胞株,将细胞分为正常对照组(5.6mmol/L葡萄糖)、高糖对照组(15,20,30mmol/L葡萄糖)、PD98059处理组(20μmol/L p42/p44MAPK高效选择性抑制剂PD98059处理hRPE细胞)和溶剂二甲基亚砜对照组(dimethyl sulfoxide,DMSO组)。应用逆转录PCR(RTPCR)技术检测VEGF及色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)mRNA的表达。应用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术检测细胞上清液中VEGF蛋白的表达结果:高糖作用下VEGF mRNA和蛋白表达显著增高,PD98059处理组VEGF mRNA和蛋白表达受到抑制,且VEGF mRNA/PEDF mRNA比值较高糖组显著降低。结论:p42/p44MAPK信号转导通路可能参与了高糖引起的hRPE细胞VEGF的表达。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 高浓度葡萄糖 血管内皮生长因子 色素上皮源性衍生因子 丝裂原活化蛋白激酶
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色素上皮源性因子、内质网氨基肽酶1和Sprouty1在银屑病皮损组织中的表达及相关性研究 被引量:1
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作者 凌琬茗 张晓茹 +2 位作者 刘晓霞 陈银肖 刘岩 《实用皮肤病学杂志》 2023年第3期129-132,共4页
目的研究银屑病皮损组织中色素上皮源性因子(PEDF)、表皮内质网氨基肽酶1(ERAP1)和Sprouty1的表达情况及相关性。方法收集河北省儿童医院皮肤科病理室2019年1月—2020年12月诊断的120例银屑病患者皮损组织蜡块标本进行研究,并纳入病例组... 目的研究银屑病皮损组织中色素上皮源性因子(PEDF)、表皮内质网氨基肽酶1(ERAP1)和Sprouty1的表达情况及相关性。方法收集河北省儿童医院皮肤科病理室2019年1月—2020年12月诊断的120例银屑病患者皮损组织蜡块标本进行研究,并纳入病例组;另外选取该院实验室保存的120例健康体检者的皮肤组织蜡块标本作为对照,纳入健康对照组。对比两组PEDF、ERAP1和Sprouty1的表达差异,单因素分析银屑病患者不同病情严重程度的PEDF、ERAP1和Sprouty1表达差异,分析PEDF、ERAP1和Sprouty1与银屑病患者皮损严重程度的相关性。结果①与健康对照组相比,病例组的PEDF、ERAP1 mRNA和蛋白均呈高表达,Sprouty1 mRNA和蛋白均呈低表达(P<0.05);②重度银屑病患者皮损的PEDF、ERAP1表达明显高于轻中度患者,Sprouty1表达明显低于轻中度患者(P<0.05);③PEDF、ERAP1的表达均与银屑病皮损面积严重度指数(PASI)评分呈正相关,Sprouty1的表达与PASI评分呈负相关。结论银屑病患者皮损组织中PEDF、ERAP1和Sprouty1的表达与正常组织存在明显差异,PEDF、ERAP1和Sprouty1的表达均与银屑病皮损组织严重程度存在密切关系。在银屑病患者治疗以及诊断中可将PEDF、ERAP1和Sprouty1作为新的研究方向进行深入探索。 展开更多
关键词 银屑病 色素上皮源性因子 表皮内质网氨基肽酶1 Sprouty1蛋白 相关性
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腺相关病毒介导色素上皮衍生因子转染人虹膜色素上皮细胞的体外研究
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作者 赵莼 王方 +3 位作者 计菁 施沃栋 范先群 罗敏 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1078-1081,共4页
目的探讨以腺相关病毒(AAV)为载体,对体外培养的人虹膜色素上皮(IPE)细胞进行色素上皮衍生因子(PEDF)转染,获得高效表达PEDF转基因细胞的可行性。方法构建携带PEDF基因的重组AAV载体AAV-PEDF,体外培养人IPE,用1×106pfu的AAV-PEDF... 目的探讨以腺相关病毒(AAV)为载体,对体外培养的人虹膜色素上皮(IPE)细胞进行色素上皮衍生因子(PEDF)转染,获得高效表达PEDF转基因细胞的可行性。方法构建携带PEDF基因的重组AAV载体AAV-PEDF,体外培养人IPE,用1×106pfu的AAV-PEDF按感染复数(MO I)为0、2、10和20分别感染体外培养的IPE细胞;荧光显微镜下观察细胞绿色荧光蛋白表达情况;流式细胞术检测细胞转染效率;RT-PCR和W estern b lotting法鉴定PEDF在IPE细胞中的表达。结果 AAV-PEDF转染后,IPE细胞生长正常,用荧光显微镜、RT-PCR和W estern b lotting均检测到PEDF表达。在MO I为20时,细胞感染阳性率达64.22%。结论 AAV-PEDF能有效地转染体外培养的IPE细胞并有效表达PEDF。 展开更多
关键词 腺相关病毒 色素上皮衍生因子 虹膜色素上皮细胞 转染
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白内障晶状体上皮细胞中色素上皮细胞衍生因子的表达
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作者 刘静 刘冰 +4 位作者 张红松 金姬 关明 彭智培 Dennis Lam 《国际眼科杂志》 CAS 2010年第12期2253-2255,共3页
目的:观察色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在人类白内障晶状体上皮细胞中的表达,以探讨PEDF在白内障发病机制中的作用。方法:白内障超声乳化手术中,实施前囊膜环形撕囊时摘取晶状体前囊连同晶状体上皮细... 目的:观察色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在人类白内障晶状体上皮细胞中的表达,以探讨PEDF在白内障发病机制中的作用。方法:白内障超声乳化手术中,实施前囊膜环形撕囊时摘取晶状体前囊连同晶状体上皮细胞,采用免疫组化的方法检测PEDF和VEGF在晶状体上皮细胞中的表达。结果:老年性白内障晶状体上皮细胞虽然PEDF存在高强度表达,与VEGF相比,这种表达还是较弱。结论:老年性白内障晶状体上皮细胞存在PEDF和VEGF的表达,而且二者之间存在着一定的相互作用,由此推断PEDF和VEGF在老年性白内障的发病机制中处于重要的作用。 展开更多
关键词 色素上皮细胞衍生因子 晶状体上皮细胞 老年性白内障 白内障超声乳化 免疫组化
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