肺炎克雷伯菌质粒pIMP26_DQ49的高通量测序分析

目的通过对肺炎克雷伯菌DQ49耐药质粒pIMP26_DQ49的测序及分析,研究其与肺炎克雷伯菌耐药的关系。方法利用多位点序列分型技术(MLST)检测肺炎克雷伯菌DQ49的序列分型(ST),通过接合实验得到携带耐药基因bla_(IMP-26)的质粒pIMP26_DQ49,利用Illumina Miseq高通量测序平台对该质粒进行测序,得到的数据用Edena软件拼接,并利用RAST网上注释工具对得到的质粒全序列进行注释,同时使用网上序列比对工具BLAST进行分析。结果 MLST分析该菌的ST型为新的ST型ST2460(基因型42-22-26-96-233-38-51);接合实验证明该质粒能通过接合转移进行传播;测序结果表明,pIMP26-DQ49属于质粒不相容群(Inc)中的IncN群,是大小为55 179 bp的环状质粒,携带3个耐药基因,G+C含量为50.4%,预测编码52个功能基因。BLAST发现pIMP26-DQ49与已报道的pIMP-HZ1序列相似度高达99%,且携带的可移动基因元件也高度相似,其耐药基因环境包含可导致转座事件发生的IS903D、IS2、Tn2、Tn3、tnp、tnpA,以及能捕获和整合外源性基因的1类整合子基因intl1。结论质粒pIMP26-DQ49携带超广谱β-内酰胺酶基因bla_(TEM-1)、喹诺酮耐药基因qnrS1和金属型碳青霉烯酶基因bla_(IMP-26),其存在可能对相应的耐药基因在肠杆菌科细菌中的传播发挥重要作用。

重组穿梭质粒pIMP1-eHER2/neu的构建及其生孢梭菌稳定转化株的筛选与鉴定

目的:制备人原癌基因HER2/neu的细胞外区域(ECD)基因修饰的重组生孢梭菌,为进一步研究其抗肿瘤作用奠定基础。方法:利用SOE-PCR将HER2/neu ECD基因连接到厌氧菌的内β1,4-葡聚糖酶的启动子和信号肽基因(eg-lAp)下游,构建融合基因eglAp-HER2/neu;将其插入大肠杆菌-厌氧菌穿梭质粒pIMP1,构建重组质粒;首先将重组质粒导入大肠杆菌DH5α内并进行鉴定;然后用电穿孔法将重组质粒导入生孢梭菌。利用红霉素抗性筛选重组生孢梭菌;采用菌液PCR鉴定阳性克隆。结果:酶切和测序结果显示,插入质粒pIMP1内的eglAp-HER2/neu融合基因序列及读框正确。菌液PCR结果表明,重组质粒pIMP1-eHER2/neu成功转化生孢梭菌;经过20多代抗生素压力筛选,重组生孢梭菌仍能稳定携带pIMP1-eHER2/neu。结论:成功制备了重组质粒pIMP1-eHER2/neu生孢梭菌的稳定转化株,为其进一步的抗肿瘤作用研究奠定基础。

重组大肠埃希菌-厌氧梭菌穿梭质粒pIMP1-eIL-12稳定转化生孢梭菌

目的近些年来,以厌氧芽孢梭菌作为实体瘤基因治疗载体的研究逐渐受到关注。文中用重组人白细胞介素-12(rhIL-12)基因重组大肠埃希菌(E.coli)-厌氧梭菌穿梭质粒pIMP1,并稳定转化生孢梭菌,为增强杀伤肿瘤细胞的研究提供基础。方法用SOE-PCR法将rhIL-12基因连到厌氧梭菌的内源性β1,4-葡聚糖酶(endo-1,4-glucanase,eglA)启动子和信号肽之后,构建融合基因eglAp-rhIL-12,将其插入pIMP1,构建重组质粒pIMP1-eIL-12;重组质粒首先在E.coli DH5α内进行鉴定,然后用电穿孔法转化生孢梭菌;利用红霉素抗性筛选阳性克隆,并提取质粒鉴定阳性克隆。结果酶切和测序结果表明插入到pIMP1内的融合基因eglAp-rhIL-12序列及读框正确;抗生素压力筛选和20多代随机质粒提取酶切鉴定结果表明重组质粒pIMP1-eIL-12已稳定转化生孢梭菌。结论成功获得重组质粒pIMP1-eIL-12及其生孢梭菌稳定转化株,为以后的抗肿瘤研究奠定了基础。

SNEAKER PIMPS鞋展登陆北京

世界著名的 SNEAKER PIMPS 鞋展于2005年2月25日正式登陆北京,这是中国的 Sneaker 文化中心——北京——与世界先进时尚的 Sneaker 文化的又一次亲密接触。3月4日,这次鞋展也在上海与广大鞋迷见面。在这次的 SNEAKER PIMPS 鞋展中,来自世界各地的5位艺术家,和他们带来的500多双极品波鞋给中国的 Sneaker 人留下了深刻的印象。鞋展的形式极其前卫,HIPHOP 音乐加上现场 DJ 打碟,让人们觉得这不单单是一次鞋展。

输电铁塔热浸镀锌钢板单面锌瘤成因分析

针对输电铁塔Q235钢板热浸镀锌层单面出现的锌瘤缺陷,利用研究级正置显微镜(UMM)、扫描电镜(SEM)和能谱仪(EDS)分析了锌瘤的微观结构。结果表明,锌瘤热浸镀锌层的η相内存在大量块状ζ相粒子,ζ相出现粗大柱状形态的爆发式增长。锌瘤侧的Q235钢表面存在直径为50~100μm且与锌瘤位置对应的凹坑。调查生产现场后发现,这些凹坑为氧化锈蚀坑,它们可以扩大Zn/Fe反应界面面积,增强Zn/Fe反应活性,并为ζ相的爆发式增长提供充足的Fe原子,进而导致锌瘤产生。建议实施严格的来料管理,改善钢板的储存条件,以及加强过程管控,防止严重锈蚀的钢板进入热浸镀锌生产线。

高功率微波条件下的无源互调问题综述

由于高功率微波(HPM)武器的应用和电子系统的复杂化,无源互调(PIM)问题变得日益突出。本文介绍了PIM问题的由来、发展概况,以及存在的问题,并且对无源互调产物(PIMP)的效应、预测和测量作了详细的论述。

hIL-12及HER2/neu ECD修饰的生孢梭菌工程菌的构建及鉴定

目的构建人IL-12(hIL-12)基因和乳腺癌靶基因HER2/neu胞外区(ECD)分别修饰的生孢梭菌工程菌,探讨其在乳腺癌基因治疗中的作用。方法将hIL-12和HER2/neu ECD的基因分别连接到厌氧梭菌的内源性β-1,4-葡聚糖酶启动子和信号肽序列(eglAp)之后,得到融合基因eglAp-hIL-12和eglAp-HER2/neu。将融合基因插入大肠杆菌-厌氧菌穿梭质粒pIMP1,得到重组质粒pIMP1-ehIL-12和pIMP1-eHER2/neu。将重组质粒首先转化大肠杆菌DH5α,通过酶切和测序鉴定无误后,再用电穿孔法转化生孢梭菌;利用红霉素抗性筛选阳性克隆,采用菌液PCR和质粒提取鉴定阳性克隆,采用ELISA法对生孢梭菌培养上清中目的产物进行分析。结果酶切和测序结果表明重组质粒内的融合基因eglAp-hIL-12和eglAp-HER2/neu序列和读框正确,菌液PCR、质粒提取和ELISA结果显示hIL-12和HER2/neu ECD基因成功修饰生孢梭菌并表达。经过20多代抗生素压力筛选,重组生孢梭菌仍能稳定携带和表达外源基因。结论成功获得hIL-12和HER2/neu ECD基因分别修饰的生孢梭菌工程菌株,为进一步的抗肿瘤研究奠定基础。

用IM Microscope方法计算无源互调产物

在微波与射频无源互调的研究中,预测无源互调产物的电平是非常重要的。在IM Micro-scope方法的基础上进行了改进,在预测过程中直接引入输入信号经过非线性器件后输出信号的幅度和相位变化模型,给出了详细的数学模型,并实例验证了该方法的正确性。

用IM Microscope方法计算无源互调产物

在微波与射频无源互调的研究中,预测无源互调产物的电平是非常重要的,因为这样可以直观的看出无源互调噪声对于器件或者系统的影响。在众多的预测方法中,IM Microscope 方法具有很多优点。文中在IM Microscope 方法的基础上进行了改进,在预测过程中直接引入输入信号经过非线性器件后输出信号的幅度和相位变化模型,给出了详细的数学模型,这样可以大大减少很多的测量工作。

论王安忆《长恨歌》的城市景观

王安忆的《长恨歌》写了一个城市故事。日常生活下的城市图象、"漂"于细节上的城市时间、卑微虚无的城市悲剧,共同构筑了这个故事的城市景观,也是王安忆对城市的独特感悟。

面向远距离目标感知通信一体化的OFDM信号波形设计

车对车(V2V)通信中,通信性能和感知性能是两个重要的性能指标,合适的波形设计能够提高感知的精度和通信的效率。通过对远距离V2V场景进行感知通信一体化波形设计,提出基于正交频分复用(OFDM)信号的脉冲分组索引导频调制(PIMP-OFDM)波形设计方案。该方案在发射端利用发送数据控制OFDM时频结构中的导频嵌入位置,接收端对导频矩阵进行脉冲压缩重构,并对重构后的导频矩阵进行二维傅里叶变换,实现对目标速度和距离的测量。仿真结果表明,PIMP-OFDM方案减少了雷达探测图中虚警目标峰值的个数和幅度,这样既减少了目标运动对目标距离感知带来的影响,又能够利用导频位置的随机性多传输一部分数据比特,从而提升通信效率和感知精度。

SP,Is a piece of Rizza？

中国菜谱里有“拼盘儿”，欧美人喜欢“Pizza”。这玩意儿，学问可大了.有了他，你请客的时候就不用猜客人的口味刻薄了.

从《都剧赋》探析清代戏坛文化变革与狎优之风

清代是所有文体俱出的时代,其中内容所反映者为时代特色所产生的社会现象。《都剧赋》一作则是细述明清以来在戏曲行业以外发展且盛行的狎优相公之风,投射了演员与观众在演艺以外的一种异样互动,将振兴道德作为主旨是赋作中极为特殊的一类。

关于城市地下快速路排水系统设计若干问题的探讨

城市地下快速路是一种新型的道路形式。对地下快速路排水系统的主要设计原则、设计标准的选取进行了论述。结合实际工程经验,对雨废水收集系统、雨废水泵房的设计和防汛设计等进行了详细介绍,可为类似工程设计提供参考。

发动机研发测试间的通风空调设计

介绍了某技术研发中心项目内的四个发动机研发测试间的通风空调设计,重点阐述了四季变化时测试间的空调控制方法,以及噪声控制措施,并总结了设计经验教训,对存在的问题进行剖析,从而达到既满足设计要求又节能的目的。

循环流化床锅炉煤泥输送和掺烧的应用与分析

针对洗煤厂煤泥的综合利用有利于提高电厂效益、降低成本,介绍了某热电厂循环流化床锅炉煤泥输送系统配置和生产流程。通过分析、解决某热电厂煤泥系统运行中遇到的问题和技术改进,使煤泥生产力显著提高,增加了锅炉掺烧煤泥量,大大减少了原煤的燃烧量,对提高电厂经济效益方面具有借鉴意义。

谈潜孔锤跟管施工工艺在地源热泵工程复杂地况情况下的应用

目前,地源热泵作为一种绿色、环保、高效节能的新技术在国内空调领域得到了极为广泛的应用,作为地源热泵系统的重要组成部分的地下换热器,其施工顺利与否与地质状况息息相关,针对北京昌平地区某地源热泵工程地质状况存在"沙土+卵石+粉质黏土+岩石"相结合的问题,依照地源热泵系统工程技术规范及类似工程经验,对潜孔锤跟管施工工艺在复杂地况中的应用进行简述。

IL-12修饰的生孢梭菌抗小鼠乳腺癌作用观察

目的基于实体瘤内部普遍存在缺氧区及生孢梭菌厌氧生长的特性,利用生孢梭菌靶向递送IL-12至肿瘤部位,观察其抗肿瘤效果及其毒副作用。方法利用基因工程技术将IL-12cDNA克隆至大肠埃希菌-厌氧菌穿梭质粒pIMP1并转入生孢梭菌。用ELISA和Western blot分析其IL-12的表达;IFN-γ诱导试验测定其生物学活性;利用小鼠乳腺癌细胞EMT6制备小鼠肿瘤模型,尾静脉注射重组梭菌后观察其抗肿瘤效果及其毒性表现。结果 ELISA和Western blot显示重组生孢梭菌可分泌IL-12,体外与小鼠脾脏细胞共同培养可以引起IFN-γ的释放。重组生孢梭菌静脉注射到荷瘤小鼠体内后,小鼠血清IFN-γ显著增高,肿瘤萎缩。实验过程中未观察到与IL-12相关的腹泻、体重减轻和死亡等毒性作用。结论利用重组生孢梭菌生产的IL-12具有抗小鼠乳腺肿瘤作用,且没有明显毒性。

BACK SPACE

奢华厕所？对，你没有看错，这款名为“Pimped Out John”的奢华卫生间的设计理念是完成你最狂野的卫生间梦想，卫生间里配置了笔记本电脑，平板电视，iPod音乐播放器，Xbox游戏机、塞满饮料和小吃的冰箱以及健身器材。这个卫生间的样板是由美国俄亥俄州的Roto-Rooter公司花5000美元打造出来的，想想能体验这么超豪华的如厕感觉，这个价格也不算贵了。