菠萝DNA的提取及AFLP反应体系的建立

为了应用AFLP分子标记对菠萝种资源进行种质鉴定、分类及亲缘关系等方面的研究,最重要的是要获得高质量的DNA,菠萝叶片革质化程度较高,且纤维、多糖、多酚等次生代谢物质含量较多,严重干扰DNA的抽提或影响其后的AFLP双酶切及其扩增反应,本研究以菠萝叶片为材料,利用改良CTAB法得到了39个高质量的菠萝分类群的DNA基因组,并进行了AFLP分析,得到了条带清晰、多态性好的菠萝品种指纹图谱,这为菠萝基因库的建立、优良品种选育以及亲缘关系的系列研究提供理论依据。

菠萝皮可溶性膳食纤维碱法提取工艺的优化

以菠萝(Ananas comosus L.)皮为原料,采用碱法提取可溶性膳食纤维。通过设计单因素试验分别考察了料液比、浸提温度、浸提液pH、浸提时间4个因素对菠萝皮可溶性膳食纤维提取率的影响,并在此基础上,采用正交试验优化菠萝皮可溶性膳食纤维的提取工艺。结果表明,菠萝皮可溶性膳食纤维的优化工艺为料液比1∶20(m/V,g∶mL)、浸提温度80℃、浸提液pH 12、浸提时间90 min,在此条件下,菠萝皮可溶性膳食纤维的提取率可达23.58%,所得膳食纤维的持水力和溶胀性分别为11.59 g/g和14.7 mL/g。

菠萝冠芽变异及鸡冠状冠芽遗传稳定性初步研究

考察了无刺卡因、巴厘和珍珠3个菠萝品种吸芽苗冠芽的变异情况,结果显示:无刺卡因冠芽全为单冠芽,巴厘和珍珠则存在冠芽变异,其中珍珠发生冠芽变异显著高于无刺卡因和巴厘,主要是因为珍珠的复冠率显著高于无刺卡因和巴厘,但3个品种鸡冠状冠芽发生率的差异未达到显著。利用从巴厘和珍珠中发现的3株鸡冠状冠芽及其母株再次繁育成苗,所有鸡冠状冠芽苗成熟时均未再现鸡冠状冠芽表型,表明鸡冠状冠芽不能稳定遗传,受环境影响。然而珍珠鸡冠状冠芽母株的吸芽苗却又再现复冠和鸡冠状冠芽,再次表明品种珍珠的吸芽易于产生冠芽变异。

不同分子标记在菠萝中检测效率的比较

以来自不同国家的47份菠萝[Ananas comosus(L.)Merr]种质为材料,对ISSR、SSR、SCo T和RAPD 4种标记在菠萝基因组中的检测效率进行了比较。结果表明,不同分子标记检测效率差异较大,引物筛选率以RAPD最高,达到了47.06%;扩增总条带数和多态性条带数均以ISSR最高,分别为238条和222条;而多态性条带百分比最高的是SSR,达到了92.88%;在有效等位基因数(Ne)、Nei’s基因多样性指数(H)、Shannon’s信息指数(I)和多态性信息含量(PIC)方面,SCo T和SSR综合表现要优于其他标记。