半夏提取物对淡色库蚊幼虫的杀虫活性

通过不同萃取相(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水)提取半夏(Pinellia ternata)的活性物质,采用浸液法测定半夏提取物对淡色库蚊(Culex pipiens pallens)幼虫的杀虫活性。结果表明,半夏甲醇提取物对淡色库蚊幼虫具有显著的毒杀活性;在0.5 mg·mL^(-1)浓度处理下,石油醚、氯仿萃取相对淡色库蚊幼虫具有显著的杀虫活性,致死率在50%以上。对石油醚、氯仿萃取相进行室内毒力测定,LC50分别为0.21和0.31 mg·mL^(-1)。研究结果可为新型植物源农药综合利用提供参考。

半夏多糖的分离提取及其药理活性研究进展

半夏作为我国传统的大宗药材,具备祛湿化痰、降逆止呕以及消痞散结的功效。半夏富含生物碱、凝集素、多糖和有机酸等多种活性成分,多糖作为半夏的主要活性成分,有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、抗炎及免疫调节等多种药理活性。从半夏多糖的分离提取、结构表征、药理活性角度出发,系统综述半夏多糖的研究现状,以期为未来半夏多糖广泛应用于各个领域提供理论基础。

半夏多糖的提取纯化、结构分析及药理作用研究进展

半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb.) Breit.的块茎,具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结的功效,而与功效相对应的物质基础尚不明确。根据半夏现代研究进展,可以得知半夏主要含有生物碱类、黄酮类、蛋白质、多糖等成分,其中多糖是半夏重要的活性成分,是其发挥功效的物质基础之一,研究却比较浅显、不够深入。对半夏多糖现代研究进展进行总结,从提取工艺优化、分离纯化及结构分析、药理作用和炮制后多糖含量变化等方面进行了综述。结果表明,目前半夏主要集中于粗多糖的提取工艺优化和抗肿瘤、抗氧化等药理作用研究,而对于半夏初始功效涉及不足。应进一步加强对半夏多糖的研究,通过分析多糖结构和确定初始功效的物质基础与生物活性,为半夏多糖及其物质基础研究提供参考。

半夏总黄酮双水相提取工艺优化及抗氧化活性分析

以半夏为试验原料,采用超声波辅助乙醇-硫酸铵双水相体系提取半夏总黄酮,并对其抗氧化活性进行分析。在单因素试验的基础上,用响应面法对半夏总黄酮的提取工艺优化,并以VC为对照,研究其清除DPPH·和·OH的能力。结果表明总黄酮的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数38%,硫酸铵质量浓度0.18g/mL,超声时间31 min,超声温度51℃。在最佳提取条件下,测得半夏总黄酮提取率为8.572%,与预测值接近。半夏总黄酮具有一定的抗氧化活性,当浓度为0.5 mg/mL时,对DPPH·清除率为80.5%,IC_(50)值为0.2753mg/mL;当浓度为0.5 mg/mL时,对·OH清除率为76.3%,IC_(50)值为0.3058 mg/mL。双水相法提取工艺稳定可行,可用于半夏中总黄酮的提取,为半夏资源的开发利用提供理论基础。

半夏提取物与Bt对小菜蛾的联合毒力研究

为减缓小菜蛾对Bt的抗药性,提高防效,以半夏提取物为增效剂与Bt进行混配,通过室内毒力测定,筛选二者的最佳混配比例。结果显示,72 h内,半夏提取物和Bt对小菜蛾3龄幼虫的致死中浓度(LC_(50))分别为388.354 g/L和0.0687 g/L。半夏提取物和Bt分别按LC25致死浓度进行不同体积比混配,毒力测定结果显示,复配比例为2∶8和1∶9时,毒效比率分别为1.32和1.36,均大于1.25,共毒系数分别为231和275,均大于200。半夏提取物对Bt具有明显增效作用,具有开发为Bt混配制剂的潜力。

半夏提取物通过AMPK/FOXO3a信号通路对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨半夏提取物(EP)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:采用卵清蛋白致敏和激发方式构建哮喘大鼠模型,分离并培养大鼠ASMCs,免疫荧光染色鉴定ASMCs中的α-肌动蛋白(α-actin),符合ASMCs特征后将ASMCs分为对照组、模型组、EP组、Compound C组、EP+Compound C组,MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-6、TNF-α水平;Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK、叉头框蛋白O3a(FOXO3a)、p-FOXO3a蛋白表达。结果:免疫荧光染色显示98%细胞的细胞质中呈现绿色荧光的肌丝,α-actin呈阳性表达,证明培养的细胞为ASMCs。与对照组比较,模型组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著升高,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白表达及p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,EP组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著降低,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白表达及p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a水平显著升高(P<0.05),而Compound C组上述对应指标呈相反趋势(P<0.05);与EP组比较,EP+Compound C组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著升高,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3蛋白表达及p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a水平显著降低(P<0.05)。结论:EP可能通过激活AMPK/FOXO3a通路抑制哮喘大鼠ASMCs增殖,促进细胞凋亡。

掌叶半夏提取物的有效部位对体外培养宫颈癌细胞的促凋亡作用

目的:观察中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的两种宫颈癌细胞株的作用,力求寻找一种能有效防治女性宫颈病变的纯中药制剂。方法:将4种不同浓度PE分别作用于Hela和Caski细胞1-5天,用倒置相差显微镜观察细胞生长及摄影,溴化噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:PE对两种宫颈癌细胞株的生长均表现出明显的抑制作用,流式细胞术检测结果显示PE作用后两种细胞株均呈现出凋亡,且随着作用时间延长,凋亡细胞的比例明显增加。结论:PE对两种宫颈癌细胞株有明显的抑制生长和促凋亡作用;为进一步研究PE的药物作用机制和新药的研制开发奠定了初步的基础。

掌叶半夏提取物对宫颈癌荷瘤小鼠脾脏免疫的作用

目的观察掌叶半夏提取物(Pinellia extracts,PE)对HPV+TC-1荷瘤小鼠T细胞免疫应答的作用。方法宫颈癌荷瘤小鼠建模后随分成4组:机对照组(生理盐水,0.2 mL/d,灌胃)、PE低剂量组(10 mg/kg,0.2mL/d,灌胃)、PE高剂量组(20 mg/kg,0.2 mL/d,灌胃)、CDDP组(4 mg/kg,0.2 mL/3 d,腹腔注射)。给药期间测瘤、描绘肿瘤生长曲线,21天后处死小鼠并计算抑瘤率,流式细胞术检测脾脏CD4+和CD8+T细细胞以及Th1、Th2、Treg和Th17亚群的比例。结果抑瘤率:CDDP组(29.82%)>PE高剂量组(21.73%)>PE低剂量组(8.23%);PE高剂量组和CDDP组CD4+和CD8+T细胞比例较阴性对照组均显著增多(P<0.01);PE两组Th1比例显著升高、Th2和Th17比例显著下降(呈现剂量依赖性),Treg亚群分泌TGF-!减少,而FOXP3水平增高。结论 PE能通过诱导CD4+T细胞向Th1型分化,抑制Th1/Th2漂移,改善Treg和Th17的比例,发挥抗肿瘤免疫作用。

半夏中总游离有机酸的作用研究

目的 对半夏药材中的总游离有机酸进行提取分离和药理作用的研究。方法 以 95 %醇提取分离总游离有机酸 ,以氨水致咳模型、酚红祛痰、家鸽呕吐实验、MTT法体外肿瘤细胞试验检测有机酸的作用。结果 以 95 %的醇提取并经一系列的分离 ,得到半夏的总游离有机酸部分 ,药理研究证实半夏中含有的总游离有机酸具有止咳、祛痰、体外抑制肿瘤细胞的作用。结论 半夏药材中的有机酸组分为半夏的有效成分之一。

掌叶半夏有效提取物对HeLa细胞的作用及机制

目的观察中药掌叶半夏有效提取物(Pinellia extract,PE)对HeLa细胞的作用,并对可能的机制进行初步研究,为其临床用于防治女性宫颈病变提供科学依据。方法用倒置相差显微镜观察细胞生长并摄影,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原(proliferatingcell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达,免疫荧光实验检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达。结果PE对HeLa细胞的生长表现出明显的抑制作用,流式细胞术检测结果显示PE作用后HeLa细胞出现凋亡,且随着作用时间延长,凋亡细胞的比例明显增加;免疫细胞化学实验和免疫荧光实验结果表明:PE作用24 h后HeLa细胞PCNA和Bcl-2蛋白表达均明显减少。结论PE对HeLa细胞有明显的抑制生长和促进凋亡的作用,其促凋亡机制是通过降低PCNA和Bcl-2蛋白表达来实现的,这为进一步研究PE的作用机制以及抗癌新药的研制开发奠定了初步的实验基础。

复方半夏水提取物的镇咳、祛痰、平喘作用研究

[目的]研究复方半夏水提取物的镇咳、祛痰、平喘作用。[方法]用乙酰胆碱和组胺诱发豚鼠哮喘,研究药物对引喘潜伏期的影响;用人工气胸后组胺致痉实验研究药物对肺溢流量的影响;用氨水引咳实验研究药物对咳嗽潜伏期及咳嗽次数的影响;用酚红分泌实验研究复方半夏水提取物的祛痰作用。[结果]复方半夏水提取物可剂量依赖性地延长引喘潜伏期,降低肺溢流量,显著延长咳嗽潜伏期并减少咳嗽次数,1.2g/kg复方半夏水提取物可显著增加小鼠呼吸道分泌的酚红量。[结论]复方半夏水提取物具有平喘、镇咳、祛痰作用。

半夏茬后土壤微生物数量变化及其化感作用初探

为了探寻半夏茬后土壤微生物数量变化及茬后土壤对半夏植株生长的化感作用,用涂布平板法培养微生物研究土壤微生物数量,并用浇灌法处理盆栽半夏幼苗,研究土壤浸提液的化感作用。结果表明,种植半夏后,土壤中微生物数量大量增加,细菌、真菌和放线菌数量分别是种植前的1.26倍、43.28倍和4.09倍。茬后土壤浸提液总体上表现为对半夏植株的株高、叶片长和叶片宽有抑制作用,且具有浓度效应,浓度越高作用效果越强,当土壤浸提液质量浓度达到4×103g/L时,对半夏生长具有严重抑制作用,对株高抑制率最高达20.23%,对叶片长度抑制率最高达17.46%,对叶片宽度抑制率最高达12.58%。综上,种植半夏会使土壤微生物数量大幅度增加,致病性微生物的增加可能是半夏连作障碍发生的重要原因之一;半夏茬后土壤浸提液对半夏幼苗生长的抑制作用可能是由土壤中化感物质增加引起的。

半夏乙醇提取物对小菜蛾幼虫生物活性的研究

【研究目的】为了有效控制小菜蛾的危害,研发新型、高效植物源杀虫剂。【方法】采用95%乙醇对半夏干粉进行索式提取,以叶片浸渍法和浸虫法测定了提取液对小菜蛾幼虫的杀虫活性。【结果】半夏乙醇提取物对小菜蛾3龄幼虫具有较好的拒食、触杀、胃毒和生长抑制的作用,提取物浓度越高,效果越明显。在触杀试验中,当提取物在100 mg/ml浓度下,处理72 h后小菜蛾幼虫的校正死亡率为61.44%。在选择性拒食试验中,提取物对3龄幼虫的AFC50分别为32.68 mg/m(l24 h)和39.16 mg/ml(48 h);在非选择性拒食试验中,提取物对3龄幼虫的AFC50分别为17.26 mg/m(l24 h)和21.32 mg/ml(48 h)。半夏乙醇提取物对小菜蛾的胃毒及生长发育抑制作用也明显。饲喂72 h时,浓度为100 mg/ml处理的小菜蛾幼虫校正死亡率高达69.41%;在处理48 h,浓度为100 mg/ml的提取物对小菜蛾3龄幼虫的生长抑制率为64.43%。【结论】半夏提取物对小菜蛾幼虫具有较高的生物活性和理想的控制效果。

掌叶半夏有效提取物对宫颈癌细胞株增殖的抑制作用

目的既往的临床研究证实中药掌叶半夏可有效治疗宫颈癌。在此基础上,课题组观察了中药掌叶半夏有效提取物(Pinellia Extract,PE)对宫颈癌细胞株CaSki和HeLa细胞增殖的作用,先前采用MTT法检测细胞活性以及倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,初步显示了PE对CaSki和HeLa细胞的增殖有抑制作用;本文将对PE的增殖抑制作用进行进一步的研究。方法采用扫描电镜和透射电镜观察PE作用后CaSki和HeLa细胞表面及内部超微结构的变化,In-cell Western blot检测不同浓度PE作用15min后CaSki和HeLa细胞磷酸化ERK的表达。结果0.15mg/mlPE作用24h后CaSki和HeLa细胞表面结构及内部结构均发生了显著的变化,提示细胞增殖受到抑制;不同浓度PE作用15min后CaSki和HeLa细胞磷酸化ERK的表达随PE浓度的增加逐渐下降。结论PE对CaSki和HeLa宫颈癌细胞株的增殖有明显抑制作用,表现在细胞表面及内部超微结构的变化;增殖抑制作用之一是阻断ERK的磷酸化。实验结果为进一步研究PE的抗宫颈癌作用机制以及新药的研制开发奠定了一定的理论依据和实验基础。

半夏乙醇提取物体外抑菌实验的初步研究

探讨半夏乙醇提取物对常见微生物(细菌、酵母菌、霉菌)的抑菌效果,以得出抑菌谱。分别用75%、95%乙醇对生半夏进行回流提取并用琼脂扩散法和液体混合法测定了半夏提取液对一系列供试细菌和真菌的最低抑菌浓度(MIC)。75%乙醇提取半夏的提取率为5.24%,而95%乙醇提取半夏的提取率为2.73%;75%乙醇半夏提取液对供试细菌和真菌存在一定的抑制作用,对各种菌的最低抑菌浓度分别为:大肠杆菌25mg/mL,恶臭假单胞菌12.5mg/mL,藤黄微球菌12.5mg/mL,金黄色葡萄球菌12.5mg/mL,枯草芽孢杆菌10mg/mL,酿酒酵母10mg/mL,裂殖酵母20mg/mL,黑曲霉菌12.5mg/mL,甜瓜枯萎霉菌25mg/mL。半夏醇提液具有广谱的抗菌活性,可以有效的抑制革兰氏阳性和革兰氏阴性菌,对真菌的抑菌作用也有一定的效果。

天南星(虎掌南星)抗惊厥作用探讨

以对抗士的宁引起小鼠强直性惊厥及死亡为指标,比较研究了天南星不同温度提取的水溶物的抗惊厥作用。结果发现天南星冷浸出物对士的宁引起小鼠惊厥有明显抑制作用,且可明显降低惊厥小鼠的死亡率。提示天南星水溶性成分有一定抗惊厥作用,且这类成分加热可被破坏。

山东半夏不同炮制品相关毒性物质基础含量与急毒实验比较研究

目的进行山东半夏不同炮制品相关毒性物质基础含量与急性毒性的比较研究,考察炮制对相关毒性物质基础含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、酸碱滴定法和经典急性毒性实验法,进行半夏、清半夏水提组分总生物碱、总有机酸及其可测单一成分的含量测定和急性毒性比较研究。结果相关物质基础含量测定结果显示:总有机酸、总生物碱和鸟苷含量大小为半夏>清半夏;琥珀酸、麻黄碱含量为清半夏>半夏。毒性研究结果显示:半夏、清半夏水提组分MLD值为301.2g/kg和374.4g/kg,分别相当于临床70kg成人每公斤体重日用量的2342.7倍和2912.0倍。结论炮制对山东半夏相关毒性物质含量与毒性有一定的影响,半夏毒性大于其炮制品清半夏。

提取工艺对半夏急性毒性与相关物质基础含量的影响研究

目的考察提取工艺对半夏相关毒性物质基础含量与急性毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、酸碱滴定法和经典急性毒性实验法,进行半夏不同提取工艺样品的含量测定和急性毒性比较研究。结果半夏不同提取工艺样品总有机酸含量:75%醇渗液>75%醇提液>30%醇提液>30%醇渗液>水提组分≈水渗液;总生物碱含量:75%醇渗液>75%醇提液>30%醇渗液>30%醇提液>水渗液≈水提组分。毒性研究结果显示:75%醇渗液和75%醇提液可测出MTD值,其余组测得MLD值,毒性大小依次为75%醇渗液>75%醇提液>30%醇渗漉组>30%醇提组>水渗组>水提组。结论提取工艺对半夏毒性及相关毒性物质含量有一定的影响,其毒性大小与总生物碱、总有机酸含量呈一定相关性。

复方半夏水提取物药理作用研究

目的:研究复方半夏水提取物的抗过敏、抗病毒、抗菌作用。方法:用蓝斑实验检测药物对被动皮肤过敏反应的影响;用二硝基氟苯法检测药物对迟发型变态反应的影响;用肉芽肿实验研究药物的抗炎作用;体外实验研究药物的抗菌和抗病毒作用。结果:复方半夏水提取物可剂量依赖性地减小致敏后皮肤的蓝斑直径并显著降低蓝斑光密度,对小鼠耳肿胀度、胸腺指数和脾指数无明显影响,对大鼠棉球肉芽肿重量系数无显著影响。复方半夏水提取物对白葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、甲型和乙型溶血链球菌无明显杀菌作用,可抑制呼吸合胞病毒的生长。结论:复方半夏水提取物具有抗病毒、抗被动皮肤过敏反应,但无抗菌、抗炎作用,对迟发性变态反应也无影响。

半夏、钩藤乙醇提取物4∶1配伍对青霉素诱发惊厥大鼠痫性放电的影响

目的研究半夏、钩藤乙醇提取物单用和4:1配伍对青霉素皮层定位注射诱发惊厥发作和痫性放电的作用。方法制备大鼠运动皮层定位注射青霉素诱发惊厥模型,以托吡酯(0.154g/kg)作阳性对照,半夏(36.4g/kg)、钩藤(38.5g/kg)、半夏+钩藤(24.5g/kg)灌胃(ig)后,采用RM6240C多道生理信号采集处理系统同步记录大鼠皮层和海马的EEG,观察药物对痫性行为、痫性放电潜伏期、痫波发放频率及最高波幅的影响。结果半夏、钩藤乙醇提取物单用和4:1合用,均可明显抑制痫性行为和痫性放电,其中合用组较两单药组显著延长痫性行为发作潜伏期和痫性放电的潜伏期,但对痫波发放频率及最高波幅的影响无统计学意义。结论半夏和钩藤乙醇提取物单用和4:1配伍用药能明显抑制青霉素皮层定位注射诱发大鼠惊厥和痫性放电,两药配伍应用的抗惊厥作用优于单用。