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Cation Selectivity of Channels Formed at Planar Lipid Bilayer by Pinellia ternata Lectin 被引量:3
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作者 张辉 施玉醻 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1994年第5期547-556,共10页
By means of the two-compartment system. PTL-channels, the first lectin channels formed on planar lipid bilayers by Pinellia ternata lectin (PTL) have been studied. The results show (i) PTL-channels are voltage-indepen... By means of the two-compartment system. PTL-channels, the first lectin channels formed on planar lipid bilayers by Pinellia ternata lectin (PTL) have been studied. The results show (i) PTL-channels are voltage-independent and have apparent subunits; (ii) in 50 mmol/L KC1 and 25 mmol/L BaCl2 solutions, a single channel has unit conductance of 21 pS and 42 pS, respectively; (iii) the channel exhibits a slightly higher permeability to divalent than monovalent cation (PBa/PK=4.1), and (iv) the selectivity among divalent or monovalent cations is poor. The cation selectivity sequence for the channel will follow PBa(7. 0)-Psr (6. 4)~PMg(6. 4)>PK(1. 7)>PN.(1. 0)~PLi(l. 0).Moreover, these data also give explanation to the facilitatory action of PTL on the release of acetyl-choline from motor nerve terminals. 展开更多
关键词 pinellia ternata Briet lectin LIPID BILAYER SINGLE-CHANNEL recording CATION selectivity.
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Effect of Pinellia ternata Lectin on Membrane Currents of Mouse Motor Nerve Terminals
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作者 施玉樑 徐幼芬 张辉 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1994年第4期448-453,共6页
Pinellia ternata lectin (PTL) extracted from the fresh juice of rhizome of pinellia ternata used as a traditional Chinese medicine facilitated the quantal release of acetylcholine (ACh) in the mouse motor nerve termin... Pinellia ternata lectin (PTL) extracted from the fresh juice of rhizome of pinellia ternata used as a traditional Chinese medicine facilitated the quantal release of acetylcholine (ACh) in the mouse motor nerve terminals and formed cation channels in artificial lipid bilayer. Here we report the action of PTL on presynaptic membrane currents of motor nerve terminals.The experiments were performed on the intercostal nerve triangularis sterni muscle preparations. By means of the perineurial recording, the effects of PTL on the sodium current in the preterminal part , three potassium currents and two calcium currents generated from the nerve terminals were investigated. The results show that PTL increases voltage-dependent fast Ca2+ current (ICa,f), Na+ current (INa) and Ca2+-acti-vated K+ current (IK,Ca) without action on either the voltage-dependent fast K+ current (IK,f) or the slow K+ current (IK,S). These effects are irreversible, but can be reversed by mannan, the specific binding sugar for PTL.The total action of PTL can be considered to raise [Ca2+], by promoting Ca2+ influx, and then facilitate the neurotransmitter release. To our knowledge, this is the first report about the influence of lectin on presynaptic membrane currents at mammalian motor nerve terminals. 展开更多
关键词 pinellia ternata lectin motor NERVE TERMINAL peYineurial RECORDING membrane currents.
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Characterization and biological activities of lectin isolated from <i>Pinellia ternata</i>
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作者 Ruijuan Feng Weibiao Zhang Tao Xu 《Advances in Biological Chemistry》 2012年第2期115-122,共8页
In this paper, Pinellia ternata lectin (PTL) purified from 95% saturated ammonium sulfate precipitation by applying mannose-Sepharose 4B affinity column chromatography was first described. The mannose-Sepharose 4B aff... In this paper, Pinellia ternata lectin (PTL) purified from 95% saturated ammonium sulfate precipitation by applying mannose-Sepharose 4B affinity column chromatography was first described. The mannose-Sepharose 4B affinity adsorption gel has already been designed and prepared before the experiments according the combinative characterization between lectin and mannose. Mass spectrometry analysis result shows that PTL is a glycoprotein with the molecular weight of 12.165 kD. It was conclude that PTL had strong agglutination effects on mouse red blood cells, and the minimum reaction concentration was 25 μg/ml according the Hemagglutination. Results of automatic amino acid analysis indicated that PTL mainly contained 15 varieties of amino acids, of which the minimum content was cysteine and aspartate was the maximum. Cell experiment results suggested that PTL of low concentrations (0.004 mg/ml, 0.02 mg/ml and 0.1 mg/ml) promoted HeLa cell proliferation, but the effect weakened with the concentrations and treated-time increasing. However, the HeLa cells pro- liferation was intensively inhibited by higher PTL concentrations (0.5 mg/ml and 1 mg/ml), and the effect increased in a dose and time dependent manner. 展开更多
关键词 pinellia ternata lectin Mannose-Sepharose 4B Affinity Chromatography GLYCOPROTEIN Hela Cell MTT Method
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半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析
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作者 黄益曼 李春晖 +5 位作者 柏家辉 陆颖洁 李添 董志颖 苏越 郭寅龙 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期226-236,共11页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备的时长和比例,以麦胚凝集素(TVL)为内标,直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明,CNC辅助MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间的延长,姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降,浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中,由于pH值的改变,法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外,将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中,均未检出PTL。该方法操作简便,可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化,为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。 展开更多
关键词 半夏 炮制方法 半夏凝集素(PTL) 纤维素纳米晶体(CNC) 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
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半夏凝集素在脂双层形成的阳离子通道 被引量:5
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作者 施玉樑 王文萍 +2 位作者 张辉 王克夷 郭锰 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期142-148,共7页
半夏凝集素是从多年生植物三叶半夏的块茎鲜汁中分离纯化的糖结合蛋白,具凝集素活性,与甘露聚糖有专一结合。本工作利用双室系统观察了它对人工脂双层的作用。 人工脂双层由卵磷脂和胆固醇(重量比为4:1)的正癸烷溶液形成。电阻≥10GΩ... 半夏凝集素是从多年生植物三叶半夏的块茎鲜汁中分离纯化的糖结合蛋白,具凝集素活性,与甘露聚糖有专一结合。本工作利用双室系统观察了它对人工脂双层的作用。 人工脂双层由卵磷脂和胆固醇(重量比为4:1)的正癸烷溶液形成。电阻≥10GΩ。在电压箝位下将半夏凝集素(1—4μg/ml)加至系统的一小室,几分钟后即观察到通道样活动噪音,脂双层电阻下降。甘露聚糖对这种变化有明显的对抗作用,加入40μg/ml的甘露聚糖可使脂双层的膜电阻立即从2GΩ恢复到对照水平(≥10GΩ)。在低浓度半夏凝集素和低维持电压下可获得单位电导涨落记录。在100mmol/L对称KCl溶液中记录的半夏凝集素单通道电流的优势电导为35pS。通过测定在非对称盐溶液中的平衡电位,根据Goldman—Hodgkin—Katz电位方程可推算出通道的离子选择性。结果表明,半夏凝集素形成的通道为阳离子通道。 展开更多
关键词 半夏凝集素 脂双层 阳离子通道
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半夏凝集素的分离纯化和在植物中的分布 被引量:11
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作者 王克夷 郭锰 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第5期544-548,共5页
从半夏(Pinellia ternata)块根中,经95%硫酸铵沉淀和固定化猪甲状腺球蛋白柱亲和层析分离得到一种凝集素,称为半夏凝集素(PTL)。凝胶过滤、SDS-PAGE和免疫双扩散鉴定PTL是均一的样品,分子量约44kD,由四个约12kD的亚基组成。PTL主要存... 从半夏(Pinellia ternata)块根中,经95%硫酸铵沉淀和固定化猪甲状腺球蛋白柱亲和层析分离得到一种凝集素,称为半夏凝集素(PTL)。凝胶过滤、SDS-PAGE和免疫双扩散鉴定PTL是均一的样品,分子量约44kD,由四个约12kD的亚基组成。PTL主要存在于半夏的块茎中,茎中也有少量存在。 展开更多
关键词 半夏 凝集素 植物 分离 提纯
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半夏凝集素的分离纯化及其对HeLa细胞生长的影响 被引量:3
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作者 冯瑞娟 刘学锋 +3 位作者 汪波 陈文铎 董淼 徐涛 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2012年第6期858-862,共5页
利用甘露糖-Sepharose 4B亲和柱从半夏总蛋白中分离纯化得到一种12kD的半夏凝集素,经质谱分析明确其为半夏凝集素单体。将该12kD凝集素单体作用于体外培养的HeLa细胞,MTT法检测细胞活性并用倒置相差显微镜观察凝集素对HeLa细胞生长状态... 利用甘露糖-Sepharose 4B亲和柱从半夏总蛋白中分离纯化得到一种12kD的半夏凝集素,经质谱分析明确其为半夏凝集素单体。将该12kD凝集素单体作用于体外培养的HeLa细胞,MTT法检测细胞活性并用倒置相差显微镜观察凝集素对HeLa细胞生长状态的影响。结果显示:低浓度(0.004、0.02、0.1mg/mL)半夏凝集素具有一定促进HeLa细胞增殖的作用;高浓度(0.5、1mg/mL)半夏凝集素有一定抑制Hela细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 半夏凝集素 亲和柱 分离纯化 HELA细胞 MTT法
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半夏提取物对呼吸和消化系统药理作用的研究进展 被引量:90
8
作者 张明发 沈雅琴 《抗感染药学》 2017年第8期1457-1462,共6页
半夏具有镇咳、祛痰、平喘等呼吸系统的药理作用,也具有止呕、抑制胃分泌功能、抗溃疡、抗腹泻、调节胃肠运动、抑制胰蛋白酶活性等消化系统的药理作用。半夏所含的有机酸和生物碱可能是产生其呼吸系统药理作用的主要有效组分。半夏所... 半夏具有镇咳、祛痰、平喘等呼吸系统的药理作用,也具有止呕、抑制胃分泌功能、抗溃疡、抗腹泻、调节胃肠运动、抑制胰蛋白酶活性等消化系统的药理作用。半夏所含的有机酸和生物碱可能是产生其呼吸系统药理作用的主要有效组分。半夏所含的生物碱、多糖、蛋白(主要为半夏凝集素蛋白)可能是产生其消化系统药理作用的主要有效组分。综述半夏提取物对呼吸和消化系统药理作用的文献,并对其研究进展做了分析。 展开更多
关键词 半夏 半夏凝集素 生物碱 有机酸 呼吸系统 消化系统 药理作用
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半夏及其炮制品对神经和循环系统的药理作用研究进展 被引量:52
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作者 张明发 沈雅琴 《抗感染药学》 2017年第9期1643-1648,共6页
半夏及其炮制品具有镇静催眠、抗惊厥的中枢抑制作用,也具有抗抑郁,改善学习记忆作用,半夏所含的生物碱可能是其产生中枢神经药理作用的活性成分。半夏还能提高迷走神经和运动神经的活动,半夏凝集素可能是其直接作用于神经末梢,易化神... 半夏及其炮制品具有镇静催眠、抗惊厥的中枢抑制作用,也具有抗抑郁,改善学习记忆作用,半夏所含的生物碱可能是其产生中枢神经药理作用的活性成分。半夏还能提高迷走神经和运动神经的活动,半夏凝集素可能是其直接作用于神经末梢,易化神经递质释放的活性成分。半夏还可通过提高失偶联蛋白-1、过氧化物酶体增殖物激活受体-α、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ辅激活子-1α的基因表达,促进脂肪氧化和机体产热,产生降血脂作用。半夏及其炮制品还具有抗心律失常,增加冠脉流量,保护心脏缺血再灌注损伤和血管内皮细胞损伤作用。半夏还能抑制血小板聚集、血栓形成和防止凝血因子耗竭以及改善血液流变学各项参数。综述半夏及其炮制品对神经和循环系统的药理作用文献,对其研究进展做了分析。 展开更多
关键词 半夏 半夏凝集素 神经系统 血液系统 药理作用
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中药半夏提取物的毒性及其“抗早孕”药理作用的研究进展 被引量:10
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作者 张明发 沈雅琴 《抗感染药学》 2017年第7期1273-1279,共7页
中药半夏具有肝、肾、肠毒性,引起功能异常和组织病理损伤。半夏还具有强烈的刺激毒性,引起接触部位的组织(嘴唇、口腔、声带、胃肠、眼等黏膜)发生炎症反应。半夏也具有致突变和生殖毒性,引起母体阴道出血、胚胎早期死亡,并流产,产生&q... 中药半夏具有肝、肾、肠毒性,引起功能异常和组织病理损伤。半夏还具有强烈的刺激毒性,引起接触部位的组织(嘴唇、口腔、声带、胃肠、眼等黏膜)发生炎症反应。半夏也具有致突变和生殖毒性,引起母体阴道出血、胚胎早期死亡,并流产,产生"抗早孕"作用。这些毒性均以生半夏为最大,生半夏经炮制或加热(如水煎)毒性减弱,甚至消失。半夏生物碱可能是致肝毒性的主要成分。半夏草酸钙针晶及其携带的半夏凝集素是半夏刺激毒性的主要成分,其中针晶引起机械性刺激,而半夏凝集素引起化学性刺激毒性。半夏凝集素也是"抗早孕"的活性成分。综述中药半夏致急慢性毒性、剌激毒性、突变毒性和"抗早孕"生殖毒性药理作用的研究文献资料,并对其研究进展做了分析,为临床合理使用中药半夏提供参考。 展开更多
关键词 半夏 半夏凝集素 慢性毒性 刺激毒性 生殖毒性 抗早孕
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ELISA法测定半夏及其炮制品中半夏凝集素含量
11
作者 郁红礼 谢雨薇 +5 位作者 吴皓 王迅 刘冰冰 崔小兵 张萍 许艳青 《中国药品标准》 CAS 2023年第3期268-274,共7页
目的:研究双抗夹心酶联免疫ELISA法作为半夏及其炮制品中毒蛋白半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin,PTL)检查方法的可行性。方法:采用双抗夹心ELISA法,测定半夏不同炮制品中PTL含量。结果:方法学考察结果显示,非线性四参数曲线拟... 目的:研究双抗夹心酶联免疫ELISA法作为半夏及其炮制品中毒蛋白半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin,PTL)检查方法的可行性。方法:采用双抗夹心ELISA法,测定半夏不同炮制品中PTL含量。结果:方法学考察结果显示,非线性四参数曲线拟合相关系数r^(2)=0.9999,表明当PTL浓度在0.075~4.80 ng•mL^(-1)浓度范围内,以非线性四参数拟合曲线计算PTL含量的准确度高,且方法精密度、稳定性、重复性较好。26批半夏生品及75批半夏炮制品(清半夏、法半夏、姜半夏各25批)中半夏中PTL含量均值为30.9 mg•g^(-1),其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL含量均值分别为0.92 mg•g^(-1),48.80μg•g^(-1),130.32 ng•g^(-1),表明炮制后PTL含量显著下降,姜半夏中PTL含量最低,其次为法半夏,清半夏含量最高。同时建立半夏不同饮片中内源性毒性蛋白凝集素蛋白限度检查方法,建议清半夏、法半夏、姜半夏中PTL含量分别不超过2.70 mg•g^(-1)、160.0μg•g^(-1)、510.0 ng•g^(-1)。结论:ELISA法测定半夏凝集素蛋白准确可靠,且成本低,可快速批量测定,可以作为半夏及其炮制品中PTL检查方法。 展开更多
关键词 半夏 半夏凝集素 有毒物质控制 含量测定 ELISA 炮制
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宿半夏凝集素基因的克隆与分析
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作者 朱艳芳 朱斌 +3 位作者 梁志鹏 董庆 薛涛 盛玮 《淮北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2022年第4期70-76,共7页
半夏凝集素具有多种功能,为了深入研究和开发利用宿半夏凝集素(PTA),本研究克隆宿半夏凝集素基因(PtPTA).以宿半夏块茎为试验材料,通过PCR扩增得到PtPTA全长序列并分析. PtPTA开放阅读框为810bp,编码269个氨基酸,N-端有24个氨基酸残基... 半夏凝集素具有多种功能,为了深入研究和开发利用宿半夏凝集素(PTA),本研究克隆宿半夏凝集素基因(PtPTA).以宿半夏块茎为试验材料,通过PCR扩增得到PtPTA全长序列并分析. PtPTA开放阅读框为810bp,编码269个氨基酸,N-端有24个氨基酸残基的信号肽,总分子量为29 285.25,理论等电点为6.58,带负电氨基酸残基(Asp+Glu)总数为23,带正电氨基酸残基(Arg+Lys)总数为22,属于稳定的亲水蛋白.该蛋白与其他6种半夏凝集素氨基酸序列相似度达97.82%,具有典型的跨膜结构域,属于跨膜亲水蛋白,预测定位于细胞膜.本研究获得宿半夏凝集素基因的全长序列,为其功能的深入研究及开发利用奠定基础. 展开更多
关键词 宿半夏 凝集素 基因克隆 生物信息学分析
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半夏凝集素的糖结合活性研究
13
作者 郭锰 王克夷 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第5期554-558,共5页
半夏凝集素(PTL)可与甘露聚糖结合。本文以PTL与^(125)I标记的甘露聚糖的结合活性为指标,观察了一些金属离子对PTL的糖结合活性的影响,井对PTL的糖结合专一性作了较系统的研究。结果表明常见的金属离子或EDTA对其糖结合活性无显著影响,... 半夏凝集素(PTL)可与甘露聚糖结合。本文以PTL与^(125)I标记的甘露聚糖的结合活性为指标,观察了一些金属离子对PTL的糖结合活性的影响,井对PTL的糖结合专一性作了较系统的研究。结果表明常见的金属离子或EDTA对其糖结合活性无显著影响,但K^+可明显增加PTL的糖结合活性。大多数单糖,二糖不抑制PTL与甘露聚糖的结合,但一些疏水配基形成的糖苷可产生显著的抑制效应。PTL专一与高甘露糖型糖链结合。 展开更多
关键词 半夏 凝集素 糖结合活性
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姜辣素拮抗半夏凝集素蛋白刺激巨噬细胞所致炎症因子TNF-α释放增加、ROS过量生成及RIP3表达增高 被引量:16
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作者 郁红礼 毛善虎 +3 位作者 赵腾斐 吴皓 潘耀宗 束晨燕 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期3630-3635,共6页
为探索姜辣素拮抗半夏凝集素蛋白致炎作用,该研究采用ELISA法测定生姜不同提取部位对半夏凝集素蛋白所致巨噬细胞释放炎症因子TNF-α的影响;采用荧光探针测定姜辣素对半夏凝集素蛋白刺激巨噬细胞氧自由基ROS水平变化的影响;采用Western ... 为探索姜辣素拮抗半夏凝集素蛋白致炎作用,该研究采用ELISA法测定生姜不同提取部位对半夏凝集素蛋白所致巨噬细胞释放炎症因子TNF-α的影响;采用荧光探针测定姜辣素对半夏凝集素蛋白刺激巨噬细胞氧自由基ROS水平变化的影响;采用Western blot法研究姜辣素对半夏凝集素蛋白致巨噬细胞中细胞受体相互作用蛋白RIP3的表达水平增高的影响;扫描电镜研究姜辣素对半夏凝集素蛋白致巨噬细胞形态变化的影响。结果显示姜辣素可显著抑制半夏凝集素蛋白刺激巨噬细胞所导致炎症因子释放增加、ROS过量生成及RIP3的表达增高,扫描电镜显示姜辣素可抑制半夏凝集素蛋白导致的细胞变形坏死。生姜解半夏毒的机制可能与姜辣素抑制半夏凝集素蛋白刺激巨噬细胞导致的炎症因子释放、ROS的过量生成、RIP3的表达增高及巨噬细胞坏死相关,机体表现为抑制炎症的发生发展。 展开更多
关键词 姜辣素 抗炎 半夏 凝集素蛋白 TNF-Α ROS RIP3 细胞形态变化
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半夏凝集素基因的克隆(英文) 被引量:5
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作者 姚剑虹 孙小芬 唐克轩 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期461-464,共4页
利用RACE -PCR技术从半夏花序中克隆出半夏凝集素的全长cDNA .通过比较半夏同其他天南星科植物的凝集素基因序列和推测的氨基酸序列 ,发现半夏凝集素基因编码一具有信号肽的前体蛋白 .半夏凝集素同其他天南星科植物凝集素一样 ,为具有
关键词 天南星科 CDNA 凝集素 半夏 RACE-PCR 基因克隆 氨基酸序列 基因编码
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