破壁与不破壁松花粉对免疫功能影响的比较研究

目的 :比较破壁与不破壁松花粉的药理活性 ,观察二者对免疫功能的影响。方法 :实验观察二者对小鼠血清溶血素生成及对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果 :破壁与不破壁松花粉能明显促进鸡红细胞免疫的小鼠血清溶血素 (Ig M)生成 ,具有增强体液免疫作用 (P<0 .0 5 )。并且二者均具有提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的趋势 ,但与对照组比无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论 :未发现破壁与不破壁松花粉对免疫功能作用的明显差别 (P>0 .0 5 ) 。

松花粉醇提物抗肿瘤作用的初步研究

目的探讨松花粉醇提物的体内外抗肿瘤疗效。方法体外检测:MTT法测定松花粉醇提物对人结肠癌细胞247、HCT116、人宫颈癌细胞HeLa及人胚肾细胞K293的细胞毒作用;体内检测:建立Lewis肺癌小鼠模型,计算各组小鼠的肿瘤、胸腺、脾脏重量、抑瘤率及免疫器官指数。结果松花粉醇提物对以上3种肿瘤细胞均表现出明显的抑制作用,而对K293的毒性较弱;能明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长,并能提高小鼠的胸腺和脾脏指数。结论松花粉醇提物在体内外实验中有明显的抑瘤作用,且对免疫器官有一定的保护作用,为肿瘤的预防、治疗及术后恢复提供了一定的理论依据。

破壁松花粉的毒理试验

背景与目的:检测破壁松花粉作为保健食品的安全性。材料与方法:按照常规方法进行小鼠经口急性毒性、小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验以及大鼠30d喂养试验。结果:破壁松花粉对2种性别的SPF级昆明种小鼠在灌胃量达15g/kg下,2周内动物未见明显中毒症状。微核试验和精子畸形试验结果均为阴性。30d喂养试验结果表明:该受试物对Wistar大鼠的临床检查、血液学、生化学、脏器重量和系数以及病理组织学等指标无明显的毒性作用。结论:破壁松花粉可以通过急性毒性、微核试验、精子畸形试验和30d喂养试验的毒理学安全性评价。

顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分析松花粉挥发性成分

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法(HS-SPME-GC-MS)分离,鉴定了松花粉中的挥发性成分。实验中筛选了固相微萃取纤维,优化了SPME的操作条件。样品在70℃下,用100μm聚丙烯酸酯(PA)固相微萃取纤维对松花粉样品顶空吸附30 min,于250℃脱附10 min然后采用GC-MS对解析物进行分离鉴定。采用HS-SPME-GC-MS测得85个峰,鉴定出70种组分,主要为脂肪类化合物。结果表明:HS-SPME可用于松花粉中挥发性成分的快速分析。

黑松花粉对豚鼠离体肠道平滑肌活动的影响

目的 观察黑松花粉对豚鼠离体小肠、结肠平滑肌活动的作用。方法 用破壁与未破壁的黑松花粉液进行对比 ,通过换能器用二道生理记录仪记录肠段的机械活动。结果 破壁黑松花粉液能增强小肠与结肠平滑肌的张力 ,与基础未破壁花粉液比较 ,差别有显著性 (P <0 .0 0 1和 0 .0 1)。

松花粉预防和延缓腮腺组织衰老IGF-1在导管细胞中的表达

目的:观察松花粉预防和延缓腮腺组织衰老IGF-I在腮腺导管细胞中的表达。方法:D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老雄性大鼠模型,采用免疫组织化学方法(SP法)观察不同剂量的松花粉对衰老的腮腺组织IGF-I表达的影响。结果:IGF-I在腮腺组织广泛表达,D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组IGF-1的表达明显下降,与正常对照组比较差异显著(P<0.01);而经松花粉给药后IGF-I的表达明显上升,其中预防中剂量组效果明显。结论:松花粉具有改善衰老雄性大鼠腮腺功能紊乱,预防和延缓腮腺组织衰老的作用。

松花粉辅助紫杉醇联合铂类化疗的增效减毒作用

目的研究松花粉对紫杉醇联合铂类(paclitaxel and cisplatin,TP)方案化疗有无减毒和增效作用。方法取人肺癌H460细胞株制备的移植瘤裸鼠48只,按瘤体积均衡原则分为模型组、松花粉600、300、150 mg/kg三个剂量+TP方案化疗组、单用TP方案化疗组、单用松花粉600、300、150 mg/kg三个单剂量组,每组6只。各组给予相应的药物后以裸鼠的体重、进食量、抑瘤率、血液学和肝肾功能等为评价指标,全面评价松花粉对TP化疗方案有无增效和减毒作用。结果模型动物给予TP方案化疗的同时灌胃给予松花粉(150、300、600 mg/kg)可明显提高单用TP化疗方案的抑瘤率,抑制化疗药物引起的体重减轻和摄食量的减少、抑制化疗引起的白细胞降低和肝肾功能的损伤。结论 TP方案化疗的同时给予松花粉具有明显的增效减毒作用。

松花粉对环磷酰胺增效减毒作用研究

目的研究松花粉对环磷酰胺化疗有无增效和减毒作用。方法采用腹水型S180小鼠为实验系统,通过检测抑瘤率、血液学和肝功能指标,评价松花粉对环磷酰胺化疗的增效和减毒作用;采用免疫低下小鼠模型为实验系统,通过检测巨细胞吞噬功能、溶血素水平和胸腺、脾脏指数,评价松花粉的免疫调节作用。结果松花粉(150、300、600 mg/kg)与环磷酰胺合用后抑瘤率明显提高,可明显抑制环磷酰胺引起的白细胞下降和肝功能的损伤,可提高免疫低下小鼠单核吞噬细胞的吞噬功能、溶血素水平和免疫器官系数。结论松花粉可通过调节免疫对环磷酰胺化疗起到明显的增效减毒作用。

蒲黄、松花粉相互掺伪的鉴别

目的鉴别相互掺伪的蒲黄及松花粉。方法采用显微镜观察蒲黄及松花粉花粉粒的特征。结果蒲黄花粉粒表面有网状雕纹和有凸状波纹等;而松花粉的花粉粒表面光滑且两侧各有一膨大的气囊等。结论蒲黄、松花粉二者来源不同,功效各异,应分别使用,对症下药,不能混淆。

油松花粉遗传毒性研究

目的探讨油松花粉的遗传毒性,为其应用提供安全性毒理学评价依据。方法用鼠伤寒沙门细菌营养缺陷型突变株TA97(a)、TA 98、TA 100和TA 102,采用平皿掺入法进行Ames实验,将实验分为加和不加代谢激活系统S9 2组平行实验。受实物设5个剂量组(0.008、0.040、0.200、1.000、5.000 mg/皿)。应用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率;利用小鼠精子畸形实验,观察不同浓度的油松花粉致小鼠精子畸形的数目。结果在Ames实验中,油松花粉各剂量组引起的回变菌落数未超过对照组自发回变菌落数的1倍以上;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验显示,油松花粉3个剂量组的微核发生率均在正常范围内,与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),与阳性对照组比较差异显著(P<0.05);小鼠精子畸形实验显示,油松花粉3个剂量组的精子畸形率均在正常范围内,与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),与阳性对照组比较差异显著(P<0.05)。结论油松花粉对所实菌株、小鼠体细胞及生殖细胞无诱变性。

松花粉预防腮腺组织衰老IGF-1的表达

目的:观察松花粉预防腮腺组织衰老IGF-1在腮腺中的表达。方法:D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老雄性大鼠模型,采用原位杂交检测技术,观察不同剂量的松花粉对衰老的腮腺组织IGF-1表达的影响。结果:IGF-1在腮腺组织广泛表达,D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组IGF-1的表达明显下降,与正常对照组比较差异显著(P<0.01);而经松花粉预防给药后IGF-1的表达明显上升,其中预防中剂量组效果明显。结论:松花粉具有改善衰老雄性大鼠腮腺功能紊乱,预防腮腺组织衰老的作用。

松花粉预防和延缓腮腺组织衰老EGFR在导管细胞中的表达

目的观察松花粉预防和延缓腮腺组织衰老EGFR在腮腺导管细胞中的表达。方法D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老雄性大鼠模型,采用免疫组织化学方法(SP法)观察不同剂量的松花粉对衰老的腮腺组织EGFR表达的影响。结果EGFR在腮腺组织广泛表达,D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠模型组EGFR的表达明显下降,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0·01);而经松花粉给药后EGFR的表达明显上升,其中预防中剂量组效果明显。结论松花粉具有改善衰老雄性大鼠腮腺功能紊乱,预防和延缓腮腺组织衰老的作用。

松花粉对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型肾脏mtDNA的保护作用

目的探讨松花粉对衰老模型小鼠肾脏线粒体DNA(mtDNA)的保护作用及其延缓衰老的机理。方法将30只雄性昆明小白鼠随机分为青年对照组、衰老模型组、松花粉治疗组;衰老模型组、松花粉治疗组采用每天5%D-半乳糖溶液100mg/kg颈背部皮下注射,复制亚急性衰老小鼠模型;青年对照组给予0.9%氯化钠注射液;松花粉治疗组在造模的同时每天给予750mg/kg的松花粉灌胃;青年对照组与衰老模型组以等体积的0.9%氯化钠注射液灌胃。连续50d后观察各组肾脏病理改变,并检测肾脏组织mtDNA的相对含量、肾脏组织SOD活性及其MDA的含量。结果松花粉能够改善衰老小鼠肾脏的病理改变,并能降低衰老小鼠肾脏组织mtDNA的相对含量,提高肾脏组织SOD活性及降低其MDA含量(P<0.05)。结论松花粉可能通过减轻肾脏的氧化损伤,从而保护肾脏mtDNA延缓肾脏的衰老。

松花粉对痴呆模型小鼠记忆障碍及脑组织单胺氧化酶、乙酰胆碱酯酶活性改变的影响

[目的]探讨松花粉对老年性痴呆模型小鼠学习记忆障碍及脑组织单胺氧化酶(MAO)及乙酰胆碱酯酶(AchE)活性改变的影响.[方法]将实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、松花粉小、大剂量组、脑复康组.腹腔连续注射给予小鼠D-氨基半乳糖(100mg/kg)50d,制作痴呆模型,灌胃给予175,350mg/kg松花粉,采用跳台实验和生物化学检测方法观察各组小鼠潜伏期、错误次数和脑组织MAO,AchE活性.[结果]与模型对照组比较,松花粉大剂量组小鼠跳台实验潜伏期明显延长,错误次数明显减少(P<0.01),脑组织MAO活性明显降低,松花粉小、大剂量组AchE活性明显降低,相比较差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).[结论]松花粉通过抑制MAO和AchE活性,改善痴呆模型小鼠的学习记忆障碍及脑组织生物化学指标改变,对痴呆模型小鼠记忆障碍有一定的改善和保护作用.

基于网络药理学的松花粉调节高脂血症机制探讨

目的:基于网络药理学方法研究松花粉对高脂血症治疗的潜在作用机制。方法:检索中药系统药理学数据库与分析平台、中国知网、PubMed数据库,获取中药松花粉化学成分;利用PubChem数据库将成分标准化,并导入SwissTargetPrediction数据库筛选其潜在作用靶点;通过GeneCards、OMIM数据库获得高脂血症相关潜在靶点;利用Venny软件将所得松花粉相关靶点与高脂血症相关靶点取交集,并使用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络模型和成分-靶点网络;通过Metascape平台进行交集靶点的基因本体富集分析及京都基因和基因组百科全书富集分析。结果:松花粉治疗高脂血症关键活性成分为山柰酚、香橙素、β-谷甾醇、花旗松素等,关键靶点蛋白有类视黄醇X受体α(RXRA)、β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)、血管内皮生长因子(VEGFA)、蛋白激酶B1(Akt1)、磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基α(PIK3R1)、甲状腺素运载蛋白(TTR)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARA)等。松花粉治疗高脂血症的通路主要涉及缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、PPAR信号通路、卵巢类固醇及类固醇生物生成、脂肪细胞脂解调节、胆汁分泌、胰高血糖素信号通路、脂肪消化和吸收等通路,其主要分子和生物功能主要与脂质结合、类固醇代谢、炎症反应、脂质应答、激素调节等相关。结论:研究结果初步说明了松花粉治疗高脂血症可能的作用机制,体现了松花粉多靶点、多通路、联合调控、调节平衡的作用特点,为松花粉相关药物开发和临床应用提供参考。

松花粉对急性汞中毒大鼠肝肾的保护作用及机制研究

目的研究松花粉对急性汞中毒大鼠肝肾的保护作用及机制。方法将大鼠随机均分为正常对照组,染汞模型组,松花粉低、中、高剂量组(2、4、8 g/kg)。通过皮下注射HgCl_2建立急性汞中毒模型,末次染汞后,各组分别灌胃给予相应药物,2次/d,共5 d。通过电感耦合等离子体质谱仪,测定肝汞、肾汞、血汞和尿汞的含量。通过试剂盒,测定尿素氮(BUN)、尿蛋白、尿乳酸脱氢酶(LDH)、尿碱性磷酸酶(ALP),血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清总胆红素(TBIL),以及肝、肾中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量或活性。结果与正常对照组比较,染汞模型组大鼠的肝汞、肾汞、血汞、尿汞、BUN、尿蛋白、尿LDH、尿ALP、血清ALT、血清AST、血清TBIL、肾脏MDA和肝脏MDA含量或活性均升高(P<0.01),肾脏和肝脏SOD、GSH-Px、GSH含量或活性降低(P<0.01)。与染汞模型组比较,松花粉低、中、高剂量组大鼠的尿汞含量增加(P<0.05或P<0.01),上述其余指标均能显著地向正常对照组的数值变化(P<0.05或P<0.01)。结论松花粉具有清除体内汞蓄积、修复急性汞中毒诱导的急性肝肾损伤的作用,其机制与抑制脂质过氧化损伤相关。

松花粉对甘油诱导大鼠急性肾衰竭的保护作用

目的:研究松花粉对甘油诱发大鼠急性肾衰竭(acute renal failure,ARF)的保护作用及机制。方法:采用双侧后肢注射50%甘油溶液(10mL·kg-1)诱发大鼠成急性肾衰竭模型,检测大鼠血清肌酐(Scr)、血清尿素氮(BUN)的含量,肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量,同时测定肾组织中一氧化氮(NO)的含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性;HE染色观察肾病理组织形态学变化。结果:与空白组大鼠相比,模型组大鼠血清Scr和BUN的含量明显上升,肾组织中SOD的活性和GSH的含量显著降低,MDA的含量显著升高;组织病理检查发现,模型组大鼠肾小管损伤明显,肾皮质细胞部分脱落,肾小球肿胀,间质炎性侵润明显。给予松花粉治疗后,可显著降低ARF大鼠血清Scr和BUN,升高肾组织中SOD的活性、GSH的含量,降低MDA的含量,同时发现,松花粉可明显降低肾组织中NO的含量和iNOS的活性,并显著降低肾组织损伤。结论:松花粉对甘油致大鼠ARF具有治疗作用,其作用机制可能与抑制iNOS的活性,降低体内NO过多产生,降低NO相关的脂质过氧化过程有关。

松花粉中柚皮素HPLC含量测定方法研究

目的:建立松花粉中柚皮素HPLC法测定方法,提高松花粉质量标准。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定柚皮素含量,以甲醇-0.05%磷酸溶液(45∶55)为流动相,检测波长为288 nm测定柚皮素的含量。结果 :柚皮素质量浓度在10.0~216.0μg/ml范围内线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率99.26%,RSD为1.04%(n=9)。运用该方法测得12批次不同产地的松花粉中柚皮素含量在0.13%~0.27%之间。结论 :建立的HPLC分析方法操作简便、快速、专属性强、重复性好,可作为该松花粉的质量控制方法。

松花粉、蒲黄、海金沙药材真伪鉴别的教学实践

目的:培养学生对松花粉、蒲黄、海金沙药材的真伪鉴别能力。方法:首先,教师采用灵活多样的教学方法培养学生的学习兴趣,然后用图片对比法、课堂演示法等方法对3种中药材的正品及其伪品的鉴别进行教学,并开展标本实训和显微鉴别实训。结果与结论:3种药材颜色、理化性质、显微特征等方面有较明显的区别。通过教学,学生不仅能准确区分3种中药材,并能鉴别各药材的真伪。图片对比法、课堂演示法简单形象,可用于培养学生中药真伪鉴别能力。

枸杞松花粉运动饮料的研制

以枸杞和松花粉为原料,对枸杞松花粉运动饮料的研制工艺进行研究。确定枸杞汁和松花粉最佳体积比为2︰1。通过响应面分析法确定运动饮料的最佳配方,即柠檬酸质量分数0.21%,蔗糖质量分数5.7%,蜂蜜质量分数1.7%,VC质量分数0.74%。通过正交试验确定枸杞松花粉运动饮料复合稳定剂的最佳配比,即黄原胶质量分数0.03%、羧甲基纤维素钠质量分数0.07%、海藻酸钠质量分数0.04%。