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卵巢上皮性癌组织中PITX2和β-catenin蛋白的表达 被引量:4
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作者 郭欢欢 李红雨 +5 位作者 赵书君 姚俊阁 刘星烁 曹蒙 韩会会 张敏 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第2期260-263,共4页
目的:探讨卵巢上皮性癌组织中PITX2和β-catenin蛋白的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测80例卵巢上皮性癌组织、40例卵巢上皮性良性肿瘤组织和40例正常卵巢组织中PITX2与β-catenin蛋白的表达。采用ELISA检测40例卵巢上皮性癌患者... 目的:探讨卵巢上皮性癌组织中PITX2和β-catenin蛋白的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测80例卵巢上皮性癌组织、40例卵巢上皮性良性肿瘤组织和40例正常卵巢组织中PITX2与β-catenin蛋白的表达。采用ELISA检测40例卵巢上皮性癌患者术前和术后(7 d)血清中PITX2蛋白的含量。结果:不同类型卵巢组织中PITX2、β-catenin蛋白的表达差异有统计学意义(χ2=85.380和80.200,P<0.001),卵巢上皮性癌组织中PITX2蛋白的阳性表达率与β-catenin蛋白的异位阳性表达率高于卵巢上皮性良性肿瘤组织和正常卵巢组织,而两者在卵巢上皮性良性肿瘤组织和正常卵巢组织中低表达或不表达。PITX2蛋白的阳性表达率及β-catenin蛋白的异位阳性表达率与卵巢上皮性癌的组织分化程度、FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。卵巢上皮性癌组织中PITX2表达与β-catenin的异位表达呈正关联(rP=0.411,P<0.001)。卵巢上皮性癌患者术前血清中PITX2的含量高于术后血清中的含量(t配对=16.582,P<0.001)。结论:卵巢上皮性癌组织中β-catenin的激活可能引起细胞中PITX2的上调,从而进一步引起细胞异常增殖、分化及肿瘤的发生发展。 展开更多
关键词 卵巢上皮性癌 pitx2蛋白 Β-CATENIN蛋白
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PITX2 R62H突变导致角膜环状皮样瘤的分子基础 被引量:2
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作者 刘小平 朱飞舟 +12 位作者 王果 邓启盼 张静 李琼 凌捷 邬玲仟 梁德生 潘乾 龙志高 龚惠勇 夏家辉 张灼华 夏昆 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第3期274-282,共9页
角膜环状皮样瘤(RDC)是一种呈常染色体显性遗传的角膜良性肿瘤,前期研究证明,PITX2基因的G185A突变(R62H)是导致RDC发生的原因.为了进一步探讨R62H导致RDC的分子基础,将PITX2构建至原核表达载体,诱导表达后纯化融合蛋白进行EMSA实验,显... 角膜环状皮样瘤(RDC)是一种呈常染色体显性遗传的角膜良性肿瘤,前期研究证明,PITX2基因的G185A突变(R62H)是导致RDC发生的原因.为了进一步探讨R62H导致RDC的分子基础,将PITX2构建至原核表达载体,诱导表达后纯化融合蛋白进行EMSA实验,显示R62H与DNA的结合能力并未明显下降.筛选稳定表达PITX2WT和R62H的HeLa细胞克隆,用流式细胞仪分析细胞周期,并用Quantitative Real-time PCR来检测细胞克隆的β-catenin和Cyclin D1的表达水平,结果发现稳定表达PITX2R62H的HeLa细胞的增殖活性低于PITX2WT,且β-catenin和CyclinD1的mRNA水平均比PITX2WT明显下降.由此推测,R62H突变使Wnt/β-catenin→PITX2信号途径发生改变,促使基因表达异常,导致细胞异常增生和角膜环状皮样瘤的形成. 展开更多
关键词 角膜环状皮样瘤(RDC) pitx2 转录因子 Β-CATENIN CYCLIND1
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转录因子PITX2的研究进展 被引量:3
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作者 王果 李智 周宏灏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第2期121-125,共5页
PITX2是属于Bicoid家族的转录因子,并且与另外两个高度同源的蛋白PITX1和PITX3构成了PTX亚家族。本文对PITX2基因和蛋白质的结构,表达与功能,与Wnt/β-catenin信号途径的关系以及突变所致遗传性疾病及其分子机制等进行了综述。
关键词 pitx2 转录因子 结构 功能 突变
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Pitx2基因在斑马鱼牙齿发育过程中早期表达的研究 被引量:3
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作者 李谨 王涛 +1 位作者 王娟 詹瑧 《口腔医学》 CAS 2010年第3期129-132,共4页
目的研究Pitx2基因在斑马鱼牙齿早期发育阶段的表达。方法利用RT-PCR技术直接克隆Pitx2特异性基因片段,制作针对Pitx2的基因探针,选取斑马鱼发育早期多个时段的胚胎进行整胚原位杂交。结果成功克隆Pitx2基因,合成针对Pitx2的基因探针,获... 目的研究Pitx2基因在斑马鱼牙齿早期发育阶段的表达。方法利用RT-PCR技术直接克隆Pitx2特异性基因片段,制作针对Pitx2的基因探针,选取斑马鱼发育早期多个时段的胚胎进行整胚原位杂交。结果成功克隆Pitx2基因,合成针对Pitx2的基因探针,获得Pitx2基因在斑马鱼早期发育阶段的表达情况。结论了解Pitx2基因在斑马鱼早期发育阶段中的表达情况。 展开更多
关键词 斑马鱼 pitx2 原位杂交
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PITX2 shRNA对卵巢癌细胞H08910裸鼠移植瘤凋亡的影响 被引量:1
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作者 王治鸿 王丽媛 段瑞云 《中国药物与临床》 CAS 2014年第9期1168-1171,共4页
目的探讨PITX2基因沉默对人卵巢癌细胞株H08910裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法将重组PITX2 shRNA plasmid转染人卵巢癌细胞株H08910细胞,通过裸鼠移植瘤实验观察PITX2基因沉默对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,同时,利用荧光定量聚合酶链反应(RT... 目的探讨PITX2基因沉默对人卵巢癌细胞株H08910裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法将重组PITX2 shRNA plasmid转染人卵巢癌细胞株H08910细胞,通过裸鼠移植瘤实验观察PITX2基因沉默对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,同时,利用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法检测PITX2基因沉默对caspase-3、cytochrome-c和caspase-9表达的影响。结果与对照组(空载体组和未转染组)相比,PITX2 shRNA plasmid转染组人卵巢癌细胞株H08910细胞生长速度减慢,肿瘤体积缩小(P<0.05),而且caspase-3、cytochrome-c和caspase-9的表达明显升高(P<0.05)。结论 PITX2基因沉默可通过促进肿瘤细胞的凋亡而抑制裸鼠移植瘤生长。 展开更多
关键词 基因沉默 卵巢肿瘤 细胞凋亡 pitx2
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牙鲆早期发育和变态期间Pitx2基因的表达(英文) 被引量:1
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作者 张俊玲 施志仪 鲍宝龙 《上海水产大学学报》 CSCD 2003年第S1期12-19,共8页
Pitx2基因被认为是脊椎动物中调节内脏器官左右不对称的关键转录因子。为进一步探讨牙鲆变态期间的左右不对称是否也受Pitx2的左特异活性调节,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),拟在变态的牙鲆的头部组织中克隆编码Pitx2基因的部分cDN... Pitx2基因被认为是脊椎动物中调节内脏器官左右不对称的关键转录因子。为进一步探讨牙鲆变态期间的左右不对称是否也受Pitx2的左特异活性调节,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),拟在变态的牙鲆的头部组织中克隆编码Pitx2基因的部分cDNA序列,并通过以18s rRNA为内标的半定量RT-PCR研究其在牙鲆早期发育和变态期间的表达情况。克隆和测序的结果表明Pitx2在牙鲆早期发育和变态期间也存在基因表达;而半定量的结果表明它的左特异性功能很可能在变态的早期阶段发挥作用。但是,牙鲆变态期间的右眼移动是否受Pitx2的左特异活性调控,以及变态期间的左右不对称和内脏器官的左右不对称是否拥有相同的分子机制,仍需进一步研究。 展开更多
关键词 pitx2 牙鲆 左右不对称 变态 半定量RT-PCR
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左右不对称信号分子Pitx2 被引量:2
7
作者 刘冀珑 谭燕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期3-5,共3页
同型框基因Pitx2在鸡、小鼠和爪蟾胚胎中不对称地表达在左侧板中胚层和衍生器官(如心脏、肠等)中.转录因子Pitx2看来是Shh和Nodal等信号分子的下游效应子.Pitx2的错误表达足以产生器官逆位和身体旋转逆向,... 同型框基因Pitx2在鸡、小鼠和爪蟾胚胎中不对称地表达在左侧板中胚层和衍生器官(如心脏、肠等)中.转录因子Pitx2看来是Shh和Nodal等信号分子的下游效应子.Pitx2的错误表达足以产生器官逆位和身体旋转逆向,人类若有Pitx2表达缺陷就可能导致Rieger综合征.Pitx2看来是脊椎动物介导左右不对称的关键且保守的信号分子. 展开更多
关键词 左右不对称 pitx2 脊椎动物
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DACT2、PITX2在结肠癌、腺瘤组织中的表达及意义 被引量:1
8
作者 牛昊书 陈吉 侯羽菲 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第7期789-792,共4页
目的检测DACT2和PITX2基因在正常结肠黏膜、结肠腺瘤及结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌发生、进展中的作用及其相互关系。方法采用qRT-PCR法检测DACT2和PITX2在不同结肠组织中的表达水平。结果DACT2在三组中的表达呈逐渐下降趋... 目的检测DACT2和PITX2基因在正常结肠黏膜、结肠腺瘤及结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌发生、进展中的作用及其相互关系。方法采用qRT-PCR法检测DACT2和PITX2在不同结肠组织中的表达水平。结果DACT2在三组中的表达呈逐渐下降趋势,差异有统计学意义(P<0.001),PITX2表达在三组中呈逐渐上升趋势,差异有统计学意义(P<0.001),DACT2与PITX2在三组中的表达均呈负相关。结论DACT2在结肠癌进展过程中可能发挥抑癌基因的作用,PITX2在结肠腺瘤-结肠癌过程中可能起到促进其发展的作用,二者之间的相互作用可能在结肠黏膜癌变过程中起到一定作用,联合检测可能为提高结肠癌早期诊断率及后续的治疗拓展了新思路。 展开更多
关键词 DACT2 pitx2 结肠腺瘤 结肠癌
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Pitx2对缺氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响
9
作者 王大强 王革新 +2 位作者 薛士鹏 张庆远 杜碧丽 《中西医结合心脑血管病杂志》 2021年第24期4280-4285,共6页
目的观察Pitx2对缺氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响。方法将心肌细胞H9c2分为对照组、模型组(缺氧处理)、Vector组(转染阴性对照载体,缺氧处理)、Pitx2组(转染Pitx2过表达载体,缺氧处理)。采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-qP... 目的观察Pitx2对缺氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响。方法将心肌细胞H9c2分为对照组、模型组(缺氧处理)、Vector组(转染阴性对照载体,缺氧处理)、Pitx2组(转染Pitx2过表达载体,缺氧处理)。采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)和免疫印迹法分别测定细胞Pitx2 mRNA和蛋白表达变化,四唑盐(MTT)法测定细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞凋亡情况,免疫印迹法测定细胞C-Caspase-3、C-Caspase-12和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达变化。将CHOP和Pitx2过表达载体共转染到心肌细胞H9c2中,测定细胞增殖、凋亡和C-Caspase-3、C-Caspase-12、CHOP表达变化。结果与对照组比较,模型组心肌细胞Pitx2 mRNA和蛋白表达水平下降,细胞增殖能力降低,细胞凋亡水平增加,细胞C-Caspase-3、C-Caspase-12和CHOP蛋白表达水平增加(P<0.05)。与Vector组比较,Pitx2组心肌细胞Pitx2mRNA和蛋白表达水平均升高,细胞增殖能力升高,细胞凋亡水平降低,细胞C-Caspase-3、C-Caspase-12和CHOP蛋白表达水平降低(P<0.05)。CHOP过表达载体可抑制Pitx2缺氧心肌细胞增殖,诱导细胞凋亡。结论上调Pitx2可抑制缺氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡,其作用机制与调控CHOP影响内质网应激有关。 展开更多
关键词 心肌细胞 pitx2 缺氧 凋亡 H9C2 实验研究
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斑马鱼心脏标记基因pitx2的多克隆抗体的制备 被引量:2
10
作者 王华 张云 +1 位作者 吴秀山 袁婺洲 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第2期98-101,共4页
pitx2基因是一类bicoid相关的同源异型框因子成员,介导心脏左右不对称发育和内脏器官的偏侧化.pitx2基因位于Nodal信号途径的下游,直接由Nodal信号分子控制.用PCR技术扩增斑马鱼pitx2基因的部分编码区,并将其插入到原核表达载体pGEX-4T-... pitx2基因是一类bicoid相关的同源异型框因子成员,介导心脏左右不对称发育和内脏器官的偏侧化.pitx2基因位于Nodal信号途径的下游,直接由Nodal信号分子控制.用PCR技术扩增斑马鱼pitx2基因的部分编码区,并将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和测序鉴定后,将重组质粒(pGEX-4T-1-pitx2)转入BL21感受态细胞,通过IPTG诱导表达融合蛋白,用GST珠亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体.获得了pitx2原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗pitx2多克隆抗体.提取斑马鱼不同器官和组织蛋白,用自制的多克隆抗体检测pitx2基因在斑马鱼中的表达情况,发现pitx2基因特异性地在心脏、脑、肌肉、小肠和肝脏表达,尤其在心脏中有很高的表达,表明制备的抗体特异性非常好. 展开更多
关键词 pitx2 融合蛋白 多克隆抗体
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Peters异常PITX2及PAX6基因型表型分析 被引量:1
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作者 孟永 卢国华 +2 位作者 谢阳 孙新成 黄丽琴 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期2118-2122,共5页
目的:分析中国人Peters异常(PA)患者的临床特征,研究Peters异常患者PITX2及PAX6基因变异情况。方法:选取2016/2019年在常州市第二人民医院及第三人民医院眼科就诊的15例Peters异常患者,并收集详细的相关临床资料。征得患者及其家系成员... 目的:分析中国人Peters异常(PA)患者的临床特征,研究Peters异常患者PITX2及PAX6基因变异情况。方法:选取2016/2019年在常州市第二人民医院及第三人民医院眼科就诊的15例Peters异常患者,并收集详细的相关临床资料。征得患者及其家系成员的同意后抽血制备基因组DNA,用聚合酶链反应(PCR)对致病基因PITX2及PAX6的编码区及其临接内含子进行扩增后,直接测序筛查中国人群Peters异常患者PITX2及PAX6基因变异,异源双链-单链构象多态性分析(HA-SSCP)的方法对突变患者及其家系成员及80例正常对照进行验证;分析比较国内已报道的Peters异常患者PITX2及PAX6基因突变并研究其相关表型。结果:Peters异常患者15例PITX2基因突变筛查结果发现了1种新PITX2的突变c.296delG(P.R99fsx56),导致该基因的功能异常,分析突变患者临床特征,该患者右眼诊断为Axenfeld-Rieger综合征(ARS),左眼诊断为Peters异常。而家系成员中该患者父母及无亲缘关系的正常对照者均未发现相同突变,故此突变为新生突变。PAX6基因突变筛查未能发现突变。结论:PA患者15例中检测到1个新PITX2基因突变,丰富了PITX2基因突变频谱,进一步明确了PA合并ARS眼病的临床特点,为该种少见眼病的临床诊断和发病原因提供了依据。 展开更多
关键词 Peters异常 AXENFELD-RIEGER综合征 pitx2基因 PAX6基因 突变
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先天性心脏病相关PITX2c基因新突变研究 被引量:2
12
作者 潘云 周宁 +2 位作者 赵红 郑桂芬 刘兴元 《国际心血管病杂志》 2015年第3期194-197,共4页
目的:研究先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)相关PITX2c基因的新突变。方法:收集150例CHD患者和200名正常对照者的外周静脉血标本,使用DNA纯化试剂盒分离基因组DNA。使用DNA聚合酶扩增PITX2c基因的编码区和剪接位点,应用DNA... 目的:研究先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)相关PITX2c基因的新突变。方法:收集150例CHD患者和200名正常对照者的外周静脉血标本,使用DNA纯化试剂盒分离基因组DNA。使用DNA聚合酶扩增PITX2c基因的编码区和剪接位点,应用DNA测序试剂盒在DNA分析仪上对扩增片段进行测序。将所测序列与GenBank数据库中的PITX2c基因序列进行比对以发现PITX2c基因突变。使用在线程序MUSCLE分析突变氨基酸的保守性,分别应用MutationTaster和PolyPhen-2分析突变氨基酸的致病性。结果:在1例散发性CHD患者发现了1个新的PITX2c基因杂合错义突变,即p.S101G突变,突变率约为0.67%。该错义突变不存在于200名正常对照者。跨物种PITX2c蛋白之氨基酸序列对比显示第101位的丝氨酸在进化上完全保守,致病性预测显示所发现的PITX2c基因变异是致病性突变。结论:本研究揭示了CHD相关PITX2c基因新突变,对于制定新的CHD防治策略具有潜在的意义。 展开更多
关键词 先天性心脏病 室间隔缺损 遗传学 转录因子 pitx2c
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PITX2突变导致非综合征型先天缺牙的遗传研究 被引量:1
13
作者 张亲 林师仪 +3 位作者 张婷婷 王慧娟 叶杨杨 张向宇 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期628-631,共4页
目的:研究1例非综合征型先天缺牙(non-syndromic tooth agenesis,NSTA)患者家系的遗传学病因。方法:采集先证者及家庭成员的外周血,利用全外显子组测序技术和生物信息学工具进行变异检测及分析。锁定先证者候选基因后,通过Sanger测序技... 目的:研究1例非综合征型先天缺牙(non-syndromic tooth agenesis,NSTA)患者家系的遗传学病因。方法:采集先证者及家庭成员的外周血,利用全外显子组测序技术和生物信息学工具进行变异检测及分析。锁定先证者候选基因后,通过Sanger测序技术验证变异位点。运用Protean、I-TASSER软件分别分析突变蛋白的二级结构和三维(3D)模型,并与野生型进行比较分析。结果:先证者及母亲均携带同一PITX2新发杂合移码突变(c.176delT,p.I59fsX149)。该突变改变同源结构域和OAR结构域,影响DNA结合活性及对下游基因的激活诱导能力。二级结构预测显示突变蛋白α螺旋数量减少,3D模型空间构象变化显著。结论:PITX2移码突变(c.176delT)可能是先证者患有NSTA的病因之一。本研究扩展了PITX2基因突变谱,为进一步探讨PITX2与NSTA之间的相关性提供临床与遗传学证据。 展开更多
关键词 先天缺牙 pitx2 全外显子组测序
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PITX2在牙齿早期发育中的作用 被引量:2
14
作者 陆琼琼 李谨 《口腔生物医学》 2011年第2期93-95,共3页
PITX2作为转录因子,在生物的早期发育中有很重要的作用。它与多个器官的发生发育都有着密切的联系,如心脏、血管、脑、肌肉、骨骼、眼睛等。而Pitx2对牙齿的影响则是通过Axenfeld-Rieger综合征发现的。本文就Pitx2与牙齿早期发育的某些... PITX2作为转录因子,在生物的早期发育中有很重要的作用。它与多个器官的发生发育都有着密切的联系,如心脏、血管、脑、肌肉、骨骼、眼睛等。而Pitx2对牙齿的影响则是通过Axenfeld-Rieger综合征发现的。本文就Pitx2与牙齿早期发育的某些相关基因之间相互作用进行综述。 展开更多
关键词 pitx2 牙齿早期发育 信号通道
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伊犁马PITX2基因多态性及其与产奶性状的关联分析
15
作者 帕孜拉·肉孜阿洪 于茜 +5 位作者 赵国艺 马海玉 刘玲玲 曹行 吕士鹏 刘武军 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第9期1-4,166,共5页
为了研究伊犁马垂体同型框转录因子2(paired-liked homeodomain transcription factor 2,PITX2)基因的多态性及其与产奶性状间的关系,试验采用PCR-SSCP和DNA测序技术,对80匹伊犁马PITX2基因的多态性进行研究,并利用SPSS 18.0软件中的Gen... 为了研究伊犁马垂体同型框转录因子2(paired-liked homeodomain transcription factor 2,PITX2)基因的多态性及其与产奶性状间的关系,试验采用PCR-SSCP和DNA测序技术,对80匹伊犁马PITX2基因的多态性进行研究,并利用SPSS 18.0软件中的General Linear Model(GLM)模型分析了PITX2基因与产奶性状的关系。结果表明:PITX2基因在乳用型伊犁马中存在多态性,在内含子区域g.115289715处缺失碱基A,产生三种基因型,即AA、AB和BB,经关联分析发现这三种基因型个体的产奶性状间存在显著关联。说明PITX2基因的多态位点有可能成为伊犁马产奶性状选育的分子标记。 展开更多
关键词 伊犁马 pitx2基因 多态性 产奶性状 DNA测序 PCR-SSCP
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pitx2基因早期过量表达对斑马鱼牙齿生长发育相关基因的影响
16
作者 陆琼琼 王娟 +1 位作者 赵庆顺 李谨 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期6-11,共6页
目的:研究pitx2基因早期过量表达对斑马鱼牙齿发育相关基因的影响。方法:利用RT-PCR技术克隆pitx2特异性基因片段;插入特异性酶切位点后以之为模板体外合成pitx2 mRNA。选取正常交配获得的斑马鱼胚胎,随机分为4组采用显微注射技术构建pi... 目的:研究pitx2基因早期过量表达对斑马鱼牙齿发育相关基因的影响。方法:利用RT-PCR技术克隆pitx2特异性基因片段;插入特异性酶切位点后以之为模板体外合成pitx2 mRNA。选取正常交配获得的斑马鱼胚胎,随机分为4组采用显微注射技术构建pitx2过表达模型:实验1组注射pitx2 mRNA200 pg/nL;实验2组注射pitx2 mRNA 100 pg/nL;实验3组注射YFP mRNA 100 pg/nL作为对照;实验4组为不注射任何基因作为野生型。分别于注射后24、48、72 h观察胚胎发育情况;利用RT-PCR检测5个与斑马鱼牙齿发育相关基因的表达情况。结果:成功克隆含有pitx2基因CDS的片段并体外合成mRNA。显微镜下观察发现:pitx2早期过量表达可造成胚胎发育停止、心包水肿、脊索变形和眼部发育畸形等形态学改变。相关基因检测显示,与对照组和野生型组相比,注射100 pg/nL pitx2 mRNA组bmp4表达明显下调(P<0.05);fgf8、lef1、runx2a表达均明显上调(P<0.05);dlx2b表达各组之间未见明显差异(P<0.05)。结论:pitx2早期过量表达对斑马鱼牙齿发育相关基因的表达有影响。 展开更多
关键词 斑马鱼 pitx2 显微注射 半定量RT-PCR
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Pitx2基因功能下调对斑马鱼牙齿早期发育相关基因的影响
17
作者 耿楠 张堃 李谨 《口腔医学》 CAS 2013年第2期78-83,共6页
目的通过Pitx2-Morpholino反义寡核苷酸显微注射方法沉默斑马鱼Pitx2基因,研究Pitx2基因早期功能下调对斑马鱼牙齿发育相关基因的影响。方法通过Morpholino反义寡核苷酸显微注射方法功能下调斑马鱼Pitx2基因,观察胚胎在72 h内的发育情... 目的通过Pitx2-Morpholino反义寡核苷酸显微注射方法沉默斑马鱼Pitx2基因,研究Pitx2基因早期功能下调对斑马鱼牙齿发育相关基因的影响。方法通过Morpholino反义寡核苷酸显微注射方法功能下调斑马鱼Pitx2基因,观察胚胎在72 h内的发育情况。并利用RT-PCR技术直接克隆Bmp4、Fgf8特异性基因片段,制作针对Bmp4、Fgf8的基因探针,对斑马鱼发育早期多个时段的胚胎进行整体原位杂交,观察Pitx2基因下调对Bmp4、Fgf8在斑马鱼腮弓表达的影响。结果成功合成Bmp4、Fgf8基因探针。显微镜下观察实验斑马鱼胚胎在72 h内的生长发育情况,发现经Morpholino显微注射斑马鱼胚胎出现发育迟缓或停止、心包水肿、脊索畸形、眼睛发育异常等形态学改变。原位杂交发现相对于野生型,Morpholino显微注射斑马鱼腮弓处Bmp4基因表达有所增强,Fgf8基因表达有所减弱。结论 Pitx2基因功能下调可使斑马鱼早期发育发生形态改变并使Bmp4基因表达增强,Fgf8基因表达减弱。 展开更多
关键词 斑马鱼 pitx2 MORPHOLINO 原位杂交
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高通量技术检测抑癌基因Pitx2静默后PanIN细胞中下游基因改变
18
作者 钱雨婷 王琪 许斌 《内科理论与实践》 2020年第4期261-267,共7页
目的:运用小鼠基因转录本的全基因表达谱芯片,研究Pitx2基因静默前后胰腺上皮内瘤变(pancreatic intraepithelial neoplasia,PanIN)细胞下游基因表达谱的变化。方法:应用小鼠全基因芯片检测Pitx2基因静默前后PanIN细胞基因表达谱的变化... 目的:运用小鼠基因转录本的全基因表达谱芯片,研究Pitx2基因静默前后胰腺上皮内瘤变(pancreatic intraepithelial neoplasia,PanIN)细胞下游基因表达谱的变化。方法:应用小鼠全基因芯片检测Pitx2基因静默前后PanIN细胞基因表达谱的变化,并运用实时荧光定量多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对部分芯片结果进行验证。结果:根据基因芯片筛选出差异倍数3倍以上的差异表达基因共97条。其中上调58条,涉及细胞增殖的基因包括Rac1、Ccr1、Fut9、PPP3CA、Sox5、Bmp7、Chtf18、Btg4、Flt4、Dscaml1和Pftk1;涉及细胞转移的基因包括Sesn1、Rpl7a、PPP3CA、Sox5、Bmp7、PIK3C2G、Cxcl12、Btg4和Kcnj14。下调39条,涉及细胞增殖的基因包括PPP2R2A、Nav1、PPP2R3C、Katnb1、Gpbp1、Nat3、Tgm5和PRKRA;涉及细胞转移的基因包括PPP2R2A、Lce1c、Hcn1、PPP2R3C、Tbxas1、Chrna1、Frmd5和Cdh7。其余基因涉及细胞周期、细胞死亡调控、细胞黏附、细胞转录活性、细胞转移酶活性。通过实时定量PCR对部分基因进行验证,显示基因芯片的结果与实时定量PCR验证结果基本一致。结论:通过基因芯片技术筛选出Pitx2基因静默前后PanIN细胞下游差异表达基因,为后续体内、外实验奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 基因表达谱 胰腺上皮内瘤变 pitx2基因 胰腺肿瘤
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Pitx2 suppression at meiotic stages associates with seasonal inhibition of testis development in Rattus norvegicus caraco
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作者 Lin TIAN Xixuan LI +6 位作者 Yaqi YING Lewen WANG Yanting QIAO Dawei WANG Ying SONG Ning LI Xiaohui LIU 《Integrative Zoology》 SCIE CSCD 2023年第3期543-551,共9页
The bicoid-related transcription factor 2(Pitx2)plays a crucial role in the development of many organs and tissues by affecting the mitotic cell cycle.Postnatal testis development is related to mitosis and meiosis in ... The bicoid-related transcription factor 2(Pitx2)plays a crucial role in the development of many organs and tissues by affecting the mitotic cell cycle.Postnatal testis development is related to mitosis and meiosis in mul-tiple cell types,but the role of Pitx2 gene in seasonal inhibition of testicular development remains unknown in rodents.We analyzed PITX2 protein and Pitx2 mRNA expression features using both laboratory and wild male Rattus norvegicus caraco.In postnatal testicle of laboratory colony,we found that PITX2 was expressed in Leydig cells,pachytene spermatocytes,round spermatids,and elongating spermatids rather than spermatogonia and lep-totene/zygotene spermatocytes.Pitx2b expression significantly increased along with the occurrence of pachytene spermatocytes and round spermatids,while decreased along with the processes of elongated spermatids.In wild male rats with similar testes weight,a significantly suppressed Pitx2b expression occurred with an active meiotic stage in the inhibited testes in autumn and winter,compared with the normally developing testes in spring and summer.These results indicate that Pitx2b expression suppression plays a crucial role in the seasonal inhibition of testis development. 展开更多
关键词 pitx2 postnatal testis development Rattus norvegicus seasonal inhibition
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3种致遗传病PITX2突变体功能的比较研究 被引量:1
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作者 王果 刘小平 +6 位作者 潘乾 梁德生 邬玲仟 戴和平 朱飞舟 夏昆 夏家辉 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第23期2607-2612,共6页
角膜环状皮样瘤(RDC)、虹膜发育不全(IH)和Axenfeld-Rieger综合征(ARS)都是常染色体显性遗传病,都可以由于一个转录因子PITX2的突变引起.在3种疾病中,RDC的症状最轻,IH其次,ARS最重.将分别引起RDC,IH和ARS的错义突变R62H,R84W和T68P定... 角膜环状皮样瘤(RDC)、虹膜发育不全(IH)和Axenfeld-Rieger综合征(ARS)都是常染色体显性遗传病,都可以由于一个转录因子PITX2的突变引起.在3种疾病中,RDC的症状最轻,IH其次,ARS最重.将分别引起RDC,IH和ARS的错义突变R62H,R84W和T68P定点地引入PITX2野生型cDNA序列中进行分子功能的比较研究.结果证明,3种突变体蛋白都可以在真核细胞中稳定表达,并且都定位在细胞核中.EMSA和转录激活研究显示,3种突变体功能保留情况不同,R62H在三者中保留了最多的活性,R84W也保留了小部分功能,而T68P则完全丧失了DNA结合和转录激活能力.这一结果证实了前人提出的假设,即PITX2突变体残留活性的多少决定了疾病表型的严重程度. 展开更多
关键词 转录因子 pitx2 突变体 功能分析
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