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非小细胞肺癌pl6/CDKN2基因失活的研究 被引量:20
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作者 安倩 董向阳 +4 位作者 张建军 黄进丰 李立 程书钧 高燕宁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期591-594,共4页
目的:分析中国人非小细胞肺癌中p16/CDKN2基因失活的情况,探讨该基因在肺癌发生中的作用。方法:选取与p16基因紧密连锁的D9S1748位点,对17例临床切除的原发性肺癌标本进行微卫星不稳定性分析,用甲基化特异性... 目的:分析中国人非小细胞肺癌中p16/CDKN2基因失活的情况,探讨该基因在肺癌发生中的作用。方法:选取与p16基因紧密连锁的D9S1748位点,对17例临床切除的原发性肺癌标本进行微卫星不稳定性分析,用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MSP)检测 pl6基因启动子区 CpG岛甲基化状况,用免疫组织化学法检测P16蛋白表达情况。结果:微卫星不稳定性分析结果表明,在13例D9S1748位点存在多态性的肿瘤DNA中有 9例(69 .2%)发生了杂合性缺失(loss of heterozygosity, LOH)。 MSP的结果显示,有 70. 6%(12/17)的肿瘤组织存在p16启动子区的异常高甲基化。在本研究中,82.4%(14/17)的肿瘤组织可以检测出一种或两种p16基因的异常改变。对此17例肿瘤标本进行的免疫组织化学分析显示,有 13例 P16蛋白表达阴性,其中 92 3%(12/13)存在一种或两种p16基因的异常改变。免疫组化结果与p16基因分子遗传学改变情况基本吻合。结论:作为一种抑癌基因,p16在多种肿瘤组织中都有异常改变。我们的研究表明,p16基因失表达是非小细胞肺癌? 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 p16/CDKN2基因 基因失活 肿瘤病理学
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GFP-pl6融合基因表达载体的构建
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作者 李华 刘维全 +2 位作者 崔振中 金春元 王太一 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期125-128,共4页
本文报道了以GFP(绿色荧光蛋白)基因为报告基因,pl6基因为目的基因,将pl6基因分别插入GFP基因的上游和下游,构建成GFP-pl6融合基因表达载体pCpl6G和pCGp16,并通过酶切、电泳技术对重组体进行了鉴定。
关键词 融合基因 表达载体 转基因动物模型 P16基因 GFP基因 CG 构建 目的基因 重组体 绿色荧光蛋白
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NSCLC患者血浆p16和MGMT基因甲基化检测及临床意义 被引量:7
3
作者 孔云明 金永堂 +5 位作者 薛绍礼 于在诚 徐迎春 陶文虎 汪亚松 侯勇 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期715-718,共4页
目的:检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血血浆中p16基因、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子的甲基化状态,探讨p16、MGMT基因启动子的异常甲基化在NSCL... 目的:检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血血浆中p16基因、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子的甲基化状态,探讨p16、MGMT基因启动子的异常甲基化在NSCLC筛查及早期诊断中的意义。方法:利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测NSCLC患者外周血血浆p16、MGMT基因启动子的甲基化状态。结果:65例NSCLC血浆样品中分别发现19例(29.23%)p16基因启动子异常甲基化和16例(24.62%)MGMT基因启动子异常甲基化,45例正常对照血浆组未检测到p16、MGMT基因启动子的异常甲基化(P<0.05),血浆中两基因甲基化检出率与NSCLC的分型及临床分期无明显相关性(P>0.05)。结论:利用巢式甲基化特异性PCR法检测外周血血浆中p16、MGMT基因启动子的甲基化,可为NSCLC的筛查、早期诊断及预后判断提供有价值的信息。 展开更多
关键词 非小细胞肺 P16基因 MGMT基因 DNA甲基化
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RASSF1A和p16基因甲基化在子宫颈癌组织中的表达及意义 被引量:14
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作者 林晓 徐军 王红琳 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期727-729,共3页
目的:探讨p16和RASSF1A基因异常甲基化在子宫颈癌组织中的表达及意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应法(methylation-specific PCR,MSP)对40例宫颈癌组织,80例宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织、20... 目的:探讨p16和RASSF1A基因异常甲基化在子宫颈癌组织中的表达及意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应法(methylation-specific PCR,MSP)对40例宫颈癌组织,80例宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织、20例正常宫颈组织作为对照组进行p16和RASSF1A基因异常甲基化检测。结果:p16和RASSF1A甲基化在正常组未见表达。宫颈癌组p16基因甲基化阳性率为40.0%,明显高于CIN组的12.5%,差异有统计学意义(χ2=11.88,P<0.05)。宫颈癌组RASSF1A基因甲基化阳性率为20.0%,高于CIN组的7.5%,差异有统计学意义(χ2=4.04,P<0.05)。宫颈癌组p16和RASSF1A基因甲基化阳性率为55.0%,明显高于宫颈CIN组的17.5%,差异有统计学意义(χ2=17.12,P<0.05)。结论:p16和RASSF1A基因启动子区异常甲基化与宫颈癌的生物学行为相关,可能为宫颈癌的早期辅助诊断和治疗提供帮助。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 甲基化 DNA 基因 p16 基因 RASSFIA
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乳腺癌组织中p16基因变异及CpG岛甲基化状态的研究 被引量:7
5
作者 曹新 魏钦俊 姜玉章 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期366-369,共4页
目的探讨p16基因在乳腺癌中的纯合缺失、突变和甲基化的改变及与乳腺癌发生、发展的关系。方法采用PCR缺失分析、PCR-SSCP及甲基化敏感内切酶-PCR分析方法检测p16基因在39例乳腺癌组织变化状况,并结合临床病理资料进行分析。结果39例乳... 目的探讨p16基因在乳腺癌中的纯合缺失、突变和甲基化的改变及与乳腺癌发生、发展的关系。方法采用PCR缺失分析、PCR-SSCP及甲基化敏感内切酶-PCR分析方法检测p16基因在39例乳腺癌组织变化状况,并结合临床病理资料进行分析。结果39例乳腺癌组织有6例出现p16基因纯合缺失,3例发生p16基因突变,p16基因变异频率为15.4%,5’CpG岛11例发生甲基化,甲基化率为28.2%。10例良性乳腺病组织中未发现p16基因改变和甲基化。p16基因变异频率、甲基化状态与临床分期和淋巴结转移密切相关。结论p16基因变异、甲基化是乳腺癌中常见的分子改变,它们在乳腺癌的发生、发展过程中扮演着重要的角色。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因 P16 突变 DNA甲基化
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人膀胱癌组织中p16与HPV的相关表达 被引量:5
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作者 范治璐 于彤 +2 位作者 刘用楫 黄俊梓 高泽斌 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2002年第3期133-135,共3页
目的 探讨膀胱癌组中抑癌基因p16及高危性人乳头瘤病毒之间的关系。方法 选取40例人膀胱癌标本,分别采用免疫组化染色方法-LSAB法检测p16及聚合酶链反应技术检测人乳头瘤病毒DNA。结果抑癌基因p16阳性表达率为52.5%(21/40),HPV-DNA阳... 目的 探讨膀胱癌组中抑癌基因p16及高危性人乳头瘤病毒之间的关系。方法 选取40例人膀胱癌标本,分别采用免疫组化染色方法-LSAB法检测p16及聚合酶链反应技术检测人乳头瘤病毒DNA。结果抑癌基因p16阳性表达率为52.5%(21/40),HPV-DNA阳性表达率为55.0%(22/40),9例标本p16与HPV-DNA同时表达阳性。结论 抑癌基因p16蛋白的表达随着膀胱癌病理分级、临床分期的上升其阳性表达率下降。HPV在病理分级低恶性的组织中表达阳性率高,说明HPV所致的膀胱癌大多数其分化程度较高。在病理分化较好、临床分期早期的同一膀胱癌的9份标本中,HPV-DNA与p16蛋白可同时表达阳性。抑癌基因p16与人乳头瘤病毒在膀胱癌的发生、发展过程中无明显相关性。 展开更多
关键词 膀胱癌 抑癌基因P16 HPV 表达 人乳头瘤病毒 免疫组化染色方法 LSAB法 聚合酶链反应
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河南林州地区贲门癌和癌旁组织中p16基因启动子甲基化及蛋白表达 被引量:1
7
作者 张梅 王立东 +8 位作者 王俊宽 吴会芳 郭涛 冯笑山 李吉林 焦新英 李江曼 李寒冰 范宗民 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第7期494-496,共3页
目的探讨贲门癌变过程中p16基因启动子区甲基化和p16蛋白表达变化特征和规律及其相互关系。方法采用甲基化特异PCR(MSP)及免疫组化方法,检测林州地区32例贲门癌患者癌组织、癌旁不典型增生组织和正常组织p16基因启动子区甲基化状态及蛋... 目的探讨贲门癌变过程中p16基因启动子区甲基化和p16蛋白表达变化特征和规律及其相互关系。方法采用甲基化特异PCR(MSP)及免疫组化方法,检测林州地区32例贲门癌患者癌组织、癌旁不典型增生组织和正常组织p16基因启动子区甲基化状态及蛋白表达情况。结果p16基因在癌组织中表达缺失18例(56%),不典型增生组织中表达缺失8例(73%);26例(81%)癌组织、7例(64%)不典型增生组织和18例(67%)正常组织发生了p16基因启动子区的甲基化。贲门癌组织中p16基因甲基化与表达缺失一致率为56%。差异无统计学意义,P>0.05。结论p16蛋白表达缺失可能是贲门癌变过程中的重要分子事件,p16基因启动子区甲基化可能是导致其蛋白表达缺失的机制之一。 展开更多
关键词 蛋白质p16/代谢 基因 P16 甲基化 胃肿瘤/遗传学 胃肿瘤/病理学 贲门
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胃癌组织中cyclin D1 P16和Rb蛋白表达的意义 被引量:3
8
作者 魏铜有 魏明霞 杨苏敏 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第2期234-235,共2页
正常细胞周期中,cyclin D1(细胞周期蛋白D1)与CDK4(细胞周期蛋白激酶)结合形成复合物促进细胞分裂增殖,p16和Rb抑制细胞分裂,从而保证机体细胞的正常生长。当这一促增生系统成分过表达以及抑制增生系统成分缺失或失活都会导致细胞增殖... 正常细胞周期中,cyclin D1(细胞周期蛋白D1)与CDK4(细胞周期蛋白激酶)结合形成复合物促进细胞分裂增殖,p16和Rb抑制细胞分裂,从而保证机体细胞的正常生长。当这一促增生系统成分过表达以及抑制增生系统成分缺失或失活都会导致细胞增殖失控而发生癌变。研究表明许多肿瘤中均有cyclin D1的过度表达及p16 Rb基因的缺失。我们用免疫组化方法检测了30例胃癌标本中cyclin D1,P16和Rb蛋白的表达,并与手术切缘正常粘膜组织进行比较,旨在探讨三者的相关性及其在胃癌形成中的作用。 1 材料和方法 1.1 材料 本院病理科1995/1996手术切除的原发性胃癌标本30例。 展开更多
关键词 胃肿瘤 免疫组织化学 CYCLIND1基因
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乳腺癌组织p16基因甲基化与ER、PR、HER2及p53表达的关系 被引量:2
9
作者 杨玉华 吕小梅 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第47期15-17,共3页
目的探讨乳腺癌组织中p16基因甲基化与相关受体表达的相关性,进一步提高乳腺癌的诊断水平。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测86份乳腺癌组织及40份乳腺癌患者血清中p16基因的甲基化状态;采用免疫组化SP法检测乳腺癌组织中雌激素受体(... 目的探讨乳腺癌组织中p16基因甲基化与相关受体表达的相关性,进一步提高乳腺癌的诊断水平。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测86份乳腺癌组织及40份乳腺癌患者血清中p16基因的甲基化状态;采用免疫组化SP法检测乳腺癌组织中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(HER2)及p53基因表达,分析各指标之间及与乳腺癌之间的关系。结果乳腺癌组织及血清中p16基因甲基化率分别为29.1%、27.5%;15例ER、PR、HER2均为阴性表达者(三阴乳腺癌),p16基因甲基化率为86.67%(13/16),非三阴乳腺癌71例,p16基因甲基化率为16.9%(12/71),P<0.01。p16基因甲基化与ER、PR蛋白表达呈负相关(r=-0.425、-0.512,P均<0.05),与HER2表达呈正相关(r=0.443,P<0.05);与p53表达无明显相关性。结论 p16基因甲基化是乳腺癌中常见的分子改变,其与ER、PR、HER2联合检测可作为乳腺癌早期诊治及预后判断的重要指标。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 乳腺癌 甲基化 P16基因 雌激素受体 孕激素受体 人类表皮生长因子受体2 抑癌基因P53
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Wt—p53/p16基因联合CD/5-FC系统对U251细胞化疗效果的研究 被引量:1
10
作者 谭泽明 张明宇 +4 位作者 方加胜 王俊 李文章 顾宏晨 王延金 《医学临床研究》 CAS 2009年第2期177-179,183,共4页
[目的]研究p53、p16基因联合胞嘧啶脱氨酶(CD)/5-氟胞嘧啶(5-FC)治疗神经胶质瘤的可行性。[方法]体外试验以Fe3O4磁性纳米颗粒(Fe3O4 magneticna noparticles,Fe3O4 MNP)为基因载体将质粒pCDNA3.1-p16、pYD5-p53,及pCMVCD转染... [目的]研究p53、p16基因联合胞嘧啶脱氨酶(CD)/5-氟胞嘧啶(5-FC)治疗神经胶质瘤的可行性。[方法]体外试验以Fe3O4磁性纳米颗粒(Fe3O4 magneticna noparticles,Fe3O4 MNP)为基因载体将质粒pCDNA3.1-p16、pYD5-p53,及pCMVCD转染入U251人胶质瘤细胞,给以不同浓度的5-FC,以MTT法检测细胞生长抑制率。[结果]成功以Fe3O4MNP为载体将wt-p53、wt-p16及CD基因转染U251细胞,并稳定表达。体外转染wt-p53、wt-p16基因都能明显提高CD/5-FC人对胶质瘤细胞的化疗效果。[结论]基于Fe3O4磁性纳米基因载体的p53、p16基因和CD/5-FC系统的联合基因治疗可作为临床上优化自杀基因治疗方案的一种可能选择,可以明显提高治疗效果。 展开更多
关键词 基因 p53 基因 p16 基因疗法 神经胶质瘤/治疗
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p16蛋白与星形细胞瘤生物学行为的相关性研究 被引量:3
11
作者 刘健 高方友 吴若秋 《贵州医药》 CAS 1999年第5期321-324,共4页
目的:探讨p16蛋白与人脑星形细胞瘤生物学行为的相关性。方法:采用免疫组织化学技术检测62例星形细胞瘤标本中p16、Rb、cyclinD1基因产物及Ki-67抗原的表达情况,探讨P16-cyclinDl/CDK4-pRb细胞周期调控通路的调控机制和p16蛋白与... 目的:探讨p16蛋白与人脑星形细胞瘤生物学行为的相关性。方法:采用免疫组织化学技术检测62例星形细胞瘤标本中p16、Rb、cyclinD1基因产物及Ki-67抗原的表达情况,探讨P16-cyclinDl/CDK4-pRb细胞周期调控通路的调控机制和p16蛋白与星形细胞瘤生物学行为的相关性。结果:(1)星形细胞瘤中pl6-cyclinD1/CDK4-pRb细胞周期调控通路存在异常调节和表达,以单个异常为主,占64.52%(40/62)。(2)p16蛋白表达缺失率为43、55%(27/62),恶性组(WHOⅢ-Ⅳ级)为65.63%(21/32),随病理分级的增高,缺失率增加(P<0.001);p16蛋白表达缺失者有较高的增殖标记指数(r=-026,P<0.05);p16蛋白表达与KPS评分呈正相关(r=0.44,P<0.001)。结论:p16、Rb、cyclinD1基因产物的异常表达和调节,尤其是p16蛋白缺失与星形细胞瘤发生发展密切相关,是反映星形细胞瘤恶性生物学行为的重要分子标志物之一。 展开更多
关键词 星形细胞瘤 P16蛋白 生物学行为 免疫组织化学
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外源基因转染对大肠癌细胞及放射敏感性的影响
12
作者 梁显军 刘铜军 +2 位作者 郭帅 高亚南 姜国峰 《中国实验诊断学》 2008年第5期586-588,共3页
目的探讨p16基因转染对大肠癌细胞生长及对放射敏感性的作用。方法以脂质体介导外源性P16基因转染大肠癌SWWC细胞系,照射后MTT法测定OD值,计算细胞生长抑制率。结果p16基因转染大肠癌SWWC细胞发生周期阻滞,照射后转染组细胞生长抑制率增... 目的探讨p16基因转染对大肠癌细胞生长及对放射敏感性的作用。方法以脂质体介导外源性P16基因转染大肠癌SWWC细胞系,照射后MTT法测定OD值,计算细胞生长抑制率。结果p16基因转染大肠癌SWWC细胞发生周期阻滞,照射后转染组细胞生长抑制率增加,与对照组有明显差异。结论p16基因转染对大肠癌SWWC细胞具有明显抑制作用,可提高大肠癌细胞对放射的敏感性。 展开更多
关键词 大肠癌 P16基因 转染 放疗敏感性
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胃癌组织p16基因及蛋白与胃癌生物学行为
13
作者 刘弋 朱勇 +1 位作者 王瑞祥 王光升 《中国肿瘤》 CAS 2000年第8期374-375,共2页
探讨胃癌组织是否存在细胞周期调控因子p16基因纯合性缺失; p16基因蛋白表达水平及其与胃癌生物学 行为的关系。[方法]用PCR方法检测胃癌组织中p16基因纯合性缺失状况;用免疫组化方法检测pl6蛋白的表达水平。[结果... 探讨胃癌组织是否存在细胞周期调控因子p16基因纯合性缺失; p16基因蛋白表达水平及其与胃癌生物学 行为的关系。[方法]用PCR方法检测胃癌组织中p16基因纯合性缺失状况;用免疫组化方法检测pl6蛋白的表达水平。[结果]8 例(26.7%)胃癌出现不同程度的p16基因缺失;15例(48%)胃癌出现pl6失、弱表达。5例(16%)出现p16过度表达。[结论]p16基 因纯合性缺失参与胃癌的发生发展;p16异常表达与胃癌生物学行为密切相关。 展开更多
关键词 胃癌 P16基因 PCR 细胞周期调控因子 免疫组化
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乳腺浸润性导管癌中survivin、P16蛋白的表达及其相关性
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作者 陈秀娇 张鹏飞 +1 位作者 蔡庆发 郑建盛 《山西医科大学学报》 CAS 2007年第3期221-225,共5页
目的检测survivin和P16蛋白在乳腺浸润性导管癌组织的表达,探讨其在乳腺癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例乳腺浸润性导管癌及15例癌旁正常组织中survivin、P16蛋白的表达。结果survivin蛋白在乳腺浸润性导管癌和... 目的检测survivin和P16蛋白在乳腺浸润性导管癌组织的表达,探讨其在乳腺癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例乳腺浸润性导管癌及15例癌旁正常组织中survivin、P16蛋白的表达。结果survivin蛋白在乳腺浸润性导管癌和癌旁正常组织中阳性表达率分别为76.0%(38/50)和0(0/15),具有显著性差异(P<0.05),且与淋巴结转移、临床分期、病理分级密切相关(P<0.05)。P16蛋白在乳腺浸润性导管癌、癌旁正常组织中阳性表达率分别为50.0%(25/50)和66.7%(10/15),无显著性差异(P>0.05);P16蛋白表达与患者发病年龄和病理分期密切相关(P<0.05)。Survivin和P16蛋白表达无明显相关性(P>0.05)。结论survivin、P16蛋白表达与乳腺癌的发生发展密切相关。survivin有望成为乳腺癌治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 存活素 基因 P16 免疫组织化学
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重组腺病毒载体转染p16基因对肝癌细胞的生长抑制作用 被引量:1
15
作者 程剑 冯振卿 苏长青 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期361-363,共3页
目的:通过腺病毒转染p16基因观察对肝癌SMMC-7721细胞的杀伤作用。方法:克隆人p16基因全长cDNA序列,构建携带p16基因的增殖缺陷型重组腺病毒p16(AdV-p16),以AdV-p16感染人肝癌SMMC-7721细胞,观察p16基因的表达及其对细胞的生长抑制或杀... 目的:通过腺病毒转染p16基因观察对肝癌SMMC-7721细胞的杀伤作用。方法:克隆人p16基因全长cDNA序列,构建携带p16基因的增殖缺陷型重组腺病毒p16(AdV-p16),以AdV-p16感染人肝癌SMMC-7721细胞,观察p16基因的表达及其对细胞的生长抑制或杀伤作用。结果:AdV-p16能介导外源基因p16在肝癌SMMC-7721细胞系中高效表达。在感染AdV-p16后随重复感染度(MOI)升高p16基因阳性表达率升高,四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT)实验结果表明,SMMC-7721细胞的生长受抑制。结论:腺病毒能够介导p16基因在肝癌细胞中高效表达,促进细胞周期阻滞和诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝肿瘤 P16基因 重组腺病毒 基因治疗 细胞凋亡
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MTS1/p16抑制基因的克隆及其对宫颈癌细胞系的影响 被引量:1
16
作者 武玲玲 司静懿 +3 位作者 刘世德 李昆 宋建波 宋国兴 《基础医学与临床》 CSCD 1998年第4期30-36,29,共8页
利用重组RTPCR方法从人胎盘组织中扩增多重肿瘤抑制基因(MTS1)全长cDNA片断,克隆测序后,亚克隆入哺乳动物高效表达质粒pCEP中。将表达质粒转染两种遗传背景不同的宫颈癌细胞系,发现外源基因MTS1/p16基... 利用重组RTPCR方法从人胎盘组织中扩增多重肿瘤抑制基因(MTS1)全长cDNA片断,克隆测序后,亚克隆入哺乳动物高效表达质粒pCEP中。将表达质粒转染两种遗传背景不同的宫颈癌细胞系,发现外源基因MTS1/p16基因的导入对HPV阳性的宫颈癌细胞系具有明显生长抑制作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 细胞周期 重组PCR 基因治疗 MTS1
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重组pAd/CMV/V5-DEST-p16载体的构建及其对人肝癌细胞的抑制作用
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作者 姚彬 胡勇 +1 位作者 熊自忠 李旭 《安徽医药》 CAS 2006年第11期846-848,共3页
目的构建pAd/CMV/V5-DEST-p16重组腺病毒载体,并观察野生型p16基因对人肝癌细胞SMMC7721株的抑制作用。方法合成人p16-INK4表达基因。构建pENTR 1A-p16质粒。通过LR反应,入口克隆pENTR 1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16 cDNA,取代... 目的构建pAd/CMV/V5-DEST-p16重组腺病毒载体,并观察野生型p16基因对人肝癌细胞SMMC7721株的抑制作用。方法合成人p16-INK4表达基因。构建pENTR 1A-p16质粒。通过LR反应,入口克隆pENTR 1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16 cDNA,取代目的载体pAd/CMV/V5-DEST中的ccdB基因,形成表达克隆pAd/CMV/V5-DEST-p16。测序证实质粒含有目的基因。PacI酶切后的重组腺病毒载体,通过脂质体2000介导,转染293A细胞,产生缺陷性的重组腺病毒。W estern blot分析显示在由重组腺病毒介导的野生型p16基因在肝癌细胞SMMC7721中能够表达蛋白。被感染的细胞的生长受抑制。结果构建了重组p16腺病毒载体,产生缺陷性的重组腺病毒,野生型p16基因对人肝癌细胞SMMC7721株有抑制作用。结论用通路克隆系统构建重组p16腺病毒载体稳定、可靠、方便,腺病毒能够介导野生型p16基因在肝癌细胞中表达,并抑制细胞的生长。 展开更多
关键词 重组腺病毒 P16基因 通路克隆系统 基因治疗
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原发性肝细胞肝癌发生发展中p16基因的遗传学改变 被引量:3
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作者 沈明明 周梅芳 +3 位作者 杨健 林彬 顾蒙曦 周肖英 《实用临床医药杂志》 CAS 2005年第5期49-51,共3页
目的研究人原发性肝细胞肝癌中pl6基因DNA水平上发生的遗传学改变。方法采用聚合酶链反应(PCR)和全自动序列分析的方法,研究84例肝癌和癌旁肝组织中pl6基因第1、2外显子纯合缺失和点突变的情况。结果84例肝癌标本中p16基因第1外显子缺失... 目的研究人原发性肝细胞肝癌中pl6基因DNA水平上发生的遗传学改变。方法采用聚合酶链反应(PCR)和全自动序列分析的方法,研究84例肝癌和癌旁肝组织中pl6基因第1、2外显子纯合缺失和点突变的情况。结果84例肝癌标本中p16基因第1外显子缺失9例,第2外显子缺失23例,其中有3例第1、2外显子共同缺失,总缺失率为34.5%。未发生基因缺失的病例,经过全自动序列分析,未发现点突变。结论原发性肝细胞肝癌中p16基因失活的主要机制是基因纯合缺失,点突变发生率可能非常低。而未发生基因缺失和突变的肝癌,以及发生p16蛋白阴性表达的癌旁肝组织,p16基因失活的原因可能是包括基因甲基化在内的其他遗传学改变引起的。 展开更多
关键词 原发性肝细胞肝癌 P16基因 纯合缺失 点突变
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肿瘤易感性与消化系统肿瘤易感基因 被引量:1
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作者 吕有勇 郭瑞芳 《基础医学与临床》 CSCD 1999年第5期10-16,共7页
The carcinogenesis and development is a progress of multi-gene alterations in the humangastric cancer (HGC). In order to determine the relation between the aberraion of these genes and gastriccancer, we chose c-met (7... The carcinogenesis and development is a progress of multi-gene alterations in the humangastric cancer (HGC). In order to determine the relation between the aberraion of these genes and gastriccancer, we chose c-met (7q3l), hMLHl (3p2l)、 E-cadherin (16q22.l) and HLA Ioci DQA1、 DR2、DR3、 DR4、 DR7、DR9 and detected their changes in 32 tumor specimens of inteStinal tyPe HGC and 4cell lines of gastric cancer by performing analysis of SSP/PCR PCR/SSCP and MSI technigUes. Our datashow that none point mutation was detected in c-met gene. We examined two microatllitos loci D3S 1298and D3S1561 in hMLH 1 gene and detected that 6 cases retan MSI (Microsatellitc Instability) and 2 casesof LOH (Loss of Heterozygosity) at D3S 1298 and 2 cases of MSI at D3S1561. We also examined E-cadherin gene at two microsatellites loci D 16S3083 and D 16S3095 close to the gche and for that 5 casesretain MSI and 1 case of LOH at D16S3O83 and no change at D16S3095. The Point mndon incidence ofHLA-DR4 loci is 9/20 (45%), higher than the 0ther 10ci in HLA- I. High frequen deletion, expressionderegulation and methylation of mtsl/pl6 gene were detected in cell lines and solid tomors from humangastric cancer patients.Our data showed that the point mutation of c-met gene is not-the main pattern of aiteration in intestinaltype HGC that is consistent with the previous results. E-cadherin and hMLHl are related to intestinaltype HGC but whether they are susceptibility gene still need further study. The point mutation of theHLA-Ⅱ loci DR4 is closely related to intestinal type HGC. Methylation pf mtsl/Pl6 gene 5 CpG islandmight be plays an important role in the carcinogenesis in HGC. 展开更多
关键词 消化道肿瘤 肿瘤易感基因 易感性
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宫颈脱落细胞中ki67、p16阳性表达的临床意义 被引量:1
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作者 刘爱民 陈益萍 杨若玲 《医学临床研究》 CAS 2012年第9期1678-1680,共3页
【目的】探讨宫颈脱落细胞中ki67抗原、p16基因的表达及意义。【方法】采取免疫组织化学的方法检测并比较宫颈脱落细胞标本129份[其中低度鳞状上皮内病变(LSIL)30份、高度鳞状上皮内病变(HSIL)34份、宫颈鳞状上皮细胞癌(SCC)35份... 【目的】探讨宫颈脱落细胞中ki67抗原、p16基因的表达及意义。【方法】采取免疫组织化学的方法检测并比较宫颈脱落细胞标本129份[其中低度鳞状上皮内病变(LSIL)30份、高度鳞状上皮内病变(HSIL)34份、宫颈鳞状上皮细胞癌(SCC)35份,正常宫颈脱落细胞30份]中ki67、p16的表达。【结果】正常对照组鳞状上皮ki67、p16表达均为阴性;SCC组的阳性表达率均为100%,其中,p16为强阳性表达,ki67以中等强度及强阳性表达为主;HSIL组的阳性表达率均为100%,p16以中等强度及强阳性表达为主,Ki67以中等强度阳性表达为主;LSIL组的阳性表达率均为70%,以弱及中等强度表达为主。【结论】宫颈脱落细胞中ki67、!016的阳性表达强弱程度与宫颈鳞状细胞病变严重程度成正相关。 展开更多
关键词 子宫颈 细胞学 KI-67抗原 分析 基因 p16 分析
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