Expression of c-erbB2 in Gestational Trophoblastic Disease and Its Clinical Significance

Summary: In order to explore a potential indicator of predicting the occurrence and development of gestational trophoblastic tumor, the expression of c-erbB2 oncogene in human normal placenta, hydatidiform mole and choriocarcinoma was investigated. The expression of c-erbB2 was detected immunohistochemically by monoclonal antibody against the gene on the formalin-fixed paraffin sections of 21 hydatidiform moles, 21 invasive moles, 20 choriocarcinomas and 30 normal placentas. Results showed that the expression level of c-erbB2 was significantly higher in gestational trophoblastic tumor than in hydatidiform mole and normal placenta of midterm and term pregnancy (P<0.05), while there was no significant difference between patients with gestational trophoblastic tumor of stage Ⅲ, Ⅳ and those of stage Ⅰ, Ⅱ. It was demonstrated that overexpression of c-erbB2 may closely associated with malignant transformation of hydatidiform mole, not only providing important insight into pathogenesis of gestational trophoblastic tumor, but also having an important significance for the early diagnosis and early treatment of gestational trophoblastic tumor.

非编码RNA和外泌体在妊娠期糖尿病发生机制中的作用及早期诊断价值

背景:近几年有很多关于外泌体非编码RNA与妊娠期糖尿病发生机制的研究,但缺乏不同来源尤其是胎盘来源外泌体的最新系统综述。目的:文章对微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA以及外泌体在妊娠期糖尿病中的变化情况及对疾病发生发展的可能作用进行综述,为临床妊娠期糖尿病的早期筛查与治疗提供潜在靶标。方法:从PubMed、Web of Science、中国知网、万方数据及维普数据库进行非编码RNA或外泌体非编码RNA与妊娠期糖尿病相关文献进行检索,最终纳入74篇文献进行综述。结果与结论:①非编码RNA通过调节各种生理功能参与了妊娠期糖尿病的发生发展,为妊娠期糖尿病的研究提供了新的方向。②外泌体在人体中广泛存在,红细胞、上皮细胞和胎盘细胞等均可分泌外泌体,这些不同来源外泌体中的非编码RNA被证明可以在妊娠期糖尿病的发病机制、诊断以及治疗方法中发挥一定的作用。③微小RNA与妊娠期糖尿病:外周血微小RNA在妊娠期糖尿病中的作用主要是影响滋养层细胞、胰腺β细胞功能以及妊娠期糖尿病血糖水平;胎盘微小RNA可反映妊娠期糖尿病的严重程度,并损伤滋养层细胞的功能。④长链非编码RNA与妊娠期糖尿病:外周血长链非编码RNA可以通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路诱导胰岛素抵抗并且有可能为妊娠期糖尿病的诊断与治疗提供新的思路;胎盘长链非编码RNA可以调控妊娠期糖尿病胎盘滋养层细胞增殖迁移,促进妊娠期糖尿病的发生发展。⑤环状RNA与妊娠期糖尿病:外周血和胎盘环状RNA可通过损伤胎盘滋养层细胞增殖迁移与代谢等功能诱导糖尿病的发生发展。⑥外泌体非编码RNA与妊娠期糖尿病:外周血外泌体非编码RNA可影响妊娠期糖尿病血糖水平和葡萄糖稳态,通过影响胎盘功能参与妊娠期糖尿病的发生发展。⑦非编码RNA有潜力成为妊娠期糖尿病早期诊断的标志物,此外工程化的外泌体能更好地实现妊娠期糖尿病的靶向治疗等,这些最新信息为妊娠期糖尿病的基础研究和临床转化提供了参考依据。⑧未来还需改进外周血外泌体的提取和纯化方法,并排除种族、饮食和体力活动等因素以提高结果的可重复性,而循环非编码RNA及外泌体在妊娠期糖尿病的预测和诊断中的临床应用还需要更多的前瞻性临床研究。

SHP-2对人绒毛膜滋养层细胞增殖、侵袭、迁移和PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响

目的探讨Src同源物2磷酸酶2(SHP-2)对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo增殖、侵袭、迁移和PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响。方法用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SHP-2在子痫前期(PE)组胎盘组织中的表达水平。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成实验、划痕闭合和Transwell分析检测敲低或过表达SHP-2对人绒毛膜滋养细胞(HTR-8/SVneo)增殖、集落形成、迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测侵袭相关蛋白的表达和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。结果HP-2在PE组胚胎组织中低表达。敲低SHP-2显著抑制HTR-8/SVneo细胞的增殖、集落形成、侵袭和迁移,此外,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达显著下调,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达显著上调,PI3K和AKT的磷酸化水平显著降低,然而,过表达SHP-2具有相反的效果。结论SHP-2在PE胎盘组织中低表达,SHP-2过表达可促进滋养层细胞的增殖、侵袭和迁移能力,提示SHP-2可能是临床治疗PE的潜在靶点。

细胞衰老与妊娠

细胞衰老是一种应激诱导的终末细胞周期停滞程序。衰老在许多生理和病理条件下的影响已经很明显。研究表明,细胞衰老在健康妊娠的发展和进展中起着决定性的作用。母胎组织(蜕膜和胎盘)的过早衰老与许多不良妊娠结局有关,包括复发性流产、复发性植入失败、胎儿生长受限和子痫前期。本文结合最新相关文献,综述细胞衰老及其与正常妊娠进展和不良妊娠结局的关系。

Coq4基因全敲除小鼠胚胎发育的表型分析

目的:通过分析辅酶Q生物合成蛋白4同系物(coenzyme Q biosynthesis protein 4 homolog,COQ4)的编码基因Coq4敲除(Coq4^(-/-))小鼠表型,探讨Coq4在小鼠胚胎发育中的作用。方法:引进Coq4基因全身杂合(Coq4^(+/-))小鼠模型,利用基因组PCR鉴定小鼠基因型。观察并记录Coq4^(+/-)小鼠后代出生情况;通过解剖、组织学和免疫荧光法,观察野生型(wild type,WT)和Coq4^(-/-)胚胎和胎盘组织的形态结构。结果:Coq4^(-/-)小鼠在胚胎日(embryonic day,E)7.5 d(E7.5)出现原肠胚形成障碍,于E10.5死亡。组织形态分析显示,与WT相比,Coq4^(-/-)小鼠胚胎发育严重迟缓,胎盘结构缺陷。免疫荧光染色分析发现,Coq4^(-/-)小鼠胎盘滋养层细胞侵袭能力减弱。结论:Coq4基因敲除导致小鼠发生胎盘缺陷和原肠胚形成障碍,Coq4为小鼠胚胎发育所必需的基因。

蜕膜自然杀伤细胞在胎盘形成过程中作用机制的研究进展

蜕膜自然杀伤(dNK)细胞占妊娠早期蜕膜免疫细胞的70%,是蜕膜中发现的最大的淋巴细胞亚群。在胎盘形成过程中,dNK细胞可以通过多种功能促进绒毛外滋养层细胞(EVTs)迁移到母体子宫并改变其血管,其中EVTs对子宫螺旋动脉的重塑对胎盘形成至关重要;dNK细胞还可以通过其细胞毒性作用防御胎盘感染,进而保证胎儿的健康生长和发育。本文就dNK细胞在胎盘形成过程中作用机制的最新研究进展进行简要总结,希望为日后的临床诊断和治疗提供理论依据。

内质网应激在缺氧诱导子痫前期胎盘滋养细胞模型中调控凋亡的作用及机制

目的研究内质网应激(ERS)在体外缺氧诱导子痫前期(PE)滋养细胞模型中调控凋亡的作用及机制。方法收集PE胎盘和健康胎盘,检测细胞凋亡率及ERS标志基因:葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、ERS凋亡基因C/EBP同源蛋白(CHOP)、磷酸化JNK(p-JNK)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-12(Cleaved caspase-12)的表达水平。培养胎盘滋养细胞HTR8/SVneo,采用低氧(1%O_(2))处理24 h诱导PE细胞模型,采用ERS激动剂处理细胞,在PE细胞模型诱导过程中转染CHOP siRNA或给予JNK拮抗剂、Caspase-12抑制剂,检测细胞增殖水平(D值)、凋亡率及GRP78、CHOP、p-JNK、Cleaved caspase-12的表达水平。结果PE胎盘细胞凋亡率及GRP78、CHOP、p-JNK、Cleaved caspase-12的表达水平高于健康胎盘(P<0.05),且细胞凋亡率与GRP78、CHOP、p-JNK、Cleaved caspase-12的表达水平呈正相关;PE组及ERS激动剂组细胞的D值低于对照组,凋亡率及GRP78、CHOP、p-JNK、Cleaved caspase-12的表达水平高于对照组(P<0.05);缺氧诱导PE模型过程中转染CHOP siRNA降低CHOP表达,给予JNK拮抗剂降低p-JNK表达,给予Caspase-12抑制剂降低Cleaved caspase-12表达后,细胞D值升高,凋亡率及GRP78的表达水平降低(P<0.05)。结论缺氧诱导PE滋养细胞模型中ERS,通过CHOP、JNK和Caspase-12介导细胞凋亡。

高原地区低体重儿胎盘形态及绒毛超微结构观察和研究

目的 :探讨高原地区缺氧对胎儿发育的影响及胎盘形态等特点。方法 :选择世居西宁地区汉族 ,5 0例低体重儿 (观察组 )及 5 0例正常体重儿 (对照组 )胎盘进行形态和组织结构观察。结果 :低体重儿胎盘重量、胎盘容积、胎盘厚度与对照组相比 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ,光镜观察四项指标与对照组比差异均有非常显著性 (P <0 .0 1)。电镜观察 :低体重儿组 ,合体滋养细胞表面微绒毛稀少变短 ,排列紊乱 ,粗面内质网扩张 ,滋养层基底膜不均匀增厚、毛细血管管腔明显狭窄 ,血管合体膜不明显 ,间质胶原增多。结论 :高原缺氧可引起胎盘形态和绒毛结构改变 ,导致胎盘转运功能下降 。

子痫前期胎盘床滋养细胞浸润程度及其螺旋动脉和微血管的变化

目的:研究子痫前期胎盘床滋养细胞的浸润程度及螺旋动脉和微血管的变化情况。方法:选择子痫前期轻度,子痫前期重度及正常妊娠产妇各20例。通过HE染色及免疫组织化学方法观察胎盘床底蜕膜和子宫浅肌层中滋养细胞的浸润程度及螺旋动脉和微血管的变化。结果3组滋养细胞的浸润程度的差异主要在子宫浅肌层,子痫前期重度组明显浅于子痫前期轻度组和正常对照组(均P<0.01);滋养细胞浸润密度自>1/2底蜕膜层及肌层内,子痫前期重度组明显低于子痫前期轻度组和正常对照组(均P<0.01)。胎盘床底蜕膜、子宫浅肌层螺旋动脉平均管腔面积在子痫前期重度组明显小于子痫前期轻度组及正常对照组,组间比较均有统计学意义(均P<0.01)。螺旋动脉平均管壁厚度在子痫前期重度组明显大于子痫前期轻度组及正常对照组(均P<0.05)。螺旋动脉生理性变化及病理性变化主要发生在子宫浅肌层:螺旋动脉有生理性变化的发生率在子痫前期重度组明显低于子痫前期轻度组和正常对照组(均P<0.01);病理性变化的发生率在子痫前期重度组高于子痫前期轻度组和正常对照组(均P<0.01)。子痫前期组中螺旋动脉的生理性变化与滋养细胞浸润深度和密度呈正相关(均P<0.05);病理性变化与滋养浸润深度及密度呈负相关(均P<0.05)。其生理性变化与子痫前期病情程度呈负相关(P<0.05);病理性变化与子痫前期病情程度呈正相关(P<0.05)。胎盘床滋养细胞浸润子宫浅肌层的深度和密度与子痫前期的病情程度呈负相关(均P<0.05)。正常妊娠胎盘床子宫浅肌层有62.50%的螺旋动脉管壁中可见滋养层细胞浸润,而子痫前期重度组产妇仅见27.50%(P<0.01)。胎盘床底蜕膜及子宫浅肌层微血管密度在子痫前期重度组明显低于子痫前期轻度组和正常对照组(P<0.01)。结论:子痫前期产妇胎盘床存在滋养细胞浅浸润。子痫前期产妇胎盘床滋养细胞浸润改变及胎盘床螺旋动脉的病理形态学变化主要发生在子宫浅肌层中,且与其病情的严重程度相关。子痫前期产妇胎盘床微血管密度自底蜕膜开始减少,提示子痫前期胎盘床微血管发育受阻。

马鞭草抗早孕作用的动物实验研究

给早孕小鼠灌服马鞭草提取液,光镜观察细胞生长情况,细胞的变化及微血管分布情况。观察其对早孕小鼠子宫、胎盘、胎仔的影响,并作形态描述。实验表明:马鞭草能明显抑制胚胎生长使其固缩死亡,胚胎重量0 .129 ±0 .075 g ,与空白对照组比较有显著差异( P< 0 .05) ;胎仔长0 .32 ±0 .14 cm ,与空白对照组比较有极显著差异( P< 0 .01) ,与米非司酮组比较无显著差异( P> 0 .05) 。光镜显示:胎盘滋养层细胞退变凋亡,可见核固缩,染色质向细胞核膜下集聚。光镜下采用NYD1000 型图像分析Q 系统测定胎盘组织微血管分布面积,明显小于空白对照组( P< 0 .01) ,与米非司酮组比较无显著差异( P> 0 .05) 。结果表明马鞭草的抗早孕可能与其抗孕酮作用有关。

先兆子痫患者母胎界面上细胞凋亡的研究

目的:研究先兆子痫患者母胎界面上细胞凋亡水平及凋亡相关分子的表达变化。方法:分别收集妊娠25、27、29、30和31周及足月分娩的正常妊娠者和先兆子痫患者的胎盘组织,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP刻痕末端标记法(TUNEL)检测母胎界面上细胞凋亡情况, 并行凋亡细胞定位;RT-PCR检测正常妊娠和先兆子痫胎盘组织中P53,Bcl-2和Bax的mRNA表达水平的差异。结果:正常妊娠和先兆子痫患者胎盘中发生凋亡的细胞数目都随孕周延长而逐渐增高,但先兆子痫的胎盘中细胞凋亡率明显高于正常妊娠者;正常妊娠胎盘中凋亡细胞主要为合体滋养层细胞,足月胎盘绒毛内血管内皮细胞亦有少量细胞凋亡,而先兆子痫胎盘中细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞和绒毛内血管内皮细胞均发生明显的凋亡;RT-PCR显示先兆子痫胎盘组织中P53和Bax的mRNA水平明显高于同期妊娠的正常胎盘,而Bcl-2水平显著降低。结论:正常妊娠过程中胎盘组织中只在有限部位出现少量细胞凋亡,而先兆子痫胎盘组织中细胞过度凋亡, 且凋亡细胞分布广泛,并伴有凋亡相关分子的表达上调。表明先兆子痫的发生与胎盘组织中滋养层细胞大量凋亡密切相关。

超常胎盘部位临床病理及免疫组化分析

目的 研究超常胎盘部位 (EPS)的临床病理及免疫组化特点。方法 应用免疫组化SP法对 5例EPS病变进行研究 ,并结合临床表现进行病理分析。结果 EPS是中间型滋养细胞在胎盘部位非破坏性地浸润肌层和血管壁 ,不形成肿块 ,HPL、CK、PLAP强 (+)或 (+) ,HCG弱 (+)或 (- ) ,Ki 6 7、p5 3均 (- )。结论 EPS与妊娠有关 ,是一个良性非肿瘤性病变 ,可导致产后大出血 ,明确诊断对临床有重要意义。

重度子痫前期患者胎盘组织中Notch1、Jagged1表达变化及意义

目的观察重度子痫前期患者胎盘组织Notch1、Jagged1 mRNA和蛋白表达变化,并探讨其意义。方法选择重度早发型子痫前期患者为A组,重度晚发型子痫前期患者为B组,正常孕妇为C组,各25例。均行剖宫产,取胎盘组织,用实时荧光定量PCR法检测胎盘组织Notch1、Jagged1 mRNA,用免疫组化法检测胎盘组织Notch1、Jagged1蛋白。结果与C组相比,A、B组Notch1、Jagged1 mRNA表达水平降低(P均<0.05);与B组相比,A组Notch1、Jagged1 mRNA表达水平降低(P均<0.05)。Notch1、Jagged1蛋白主要连续表达于绒毛外滋养细胞胞质及血管内皮细胞胞质。A、B、C组Notch1蛋白阳性表达率分别为36.67%、50.00%、83.33%,Jagged1蛋白阳性表达率分别为43.33%、50.00%、83.33%,Notch1、Jagged1蛋白阳性表达率A组低于B组,B组低于C组,P均<0.05。结论Notch1、Jagged1在重度子痫前期患者胎盘组织中呈低表达,二者可能参与重度子痫前期尤其是重度早发型子痫前期的发生。

精氨酸对怀孕母猪胎盘滋养层细胞调控作用研究进展

日粮中添加精氨酸可促进怀孕母猪胎盘生长发育,提高怀孕母猪繁殖性能。胎盘生长发育主要为滋养层细胞增殖、分化、侵润及融合等过程。因此,文章综述精氨酸及其代谢产物对滋养层细胞增殖、分化、生殖激素分泌和细胞生长因子表达调控作用及其相关信号通路影响等方面研究进展,旨在阐明精氨酸调控怀孕母猪胎盘滋养层细胞,促进怀孕母猪胎盘生长发育作用机理,以期为精氨酸在母猪繁殖营养应用提供科学依据。

人早孕绒毛组织的体外原代培养和人滋养细胞株的建立

目的:建立快速、有效的绒毛滋养细胞体外原代培养的方法以及建立人滋养细胞株和初步评价。方法:采用胰酶和胶原酶I混合消化法消化绒毛组织,用胰蛋白酶消化传代体外培养,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦方法对培养出的细胞进行形态和骨架评价。结果:显微镜下可见细胞呈多边形,细胞平铺生长,有细胞融合后形成的合体滋养层细胞;透射电镜下可见细胞表面的微绒毛丰富;胞质丰富,内质网扩张明显,有丰富的糖原颗粒、髓样小体和明显的脂滴,以及细胞间紧密的桥粒样结构连接;直接免疫荧光双标记染色检测到角蛋白18和波形蛋白均为阳性。结论:采用胰酶和胶原酶I混合消化法可获得较纯的滋养细胞,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦检测细胞外形和骨架,确定该体外传至56代的细胞株为滋养细胞株。

子宫螺旋动脉重铸障碍在复发性流产中的研究进展

复发性流产是一种常见的病理妊娠,其病因和发病机制至今尚未完全阐明。足够的子宫胎盘血供对于正常妊娠是至关重要的,这有赖于广泛的子宫螺旋动脉生理性重铸所形成高流量、低阻力的母胎血液循环系统。子宫螺旋动脉血流反映母胎之间的血液循环,是子宫与妊娠母体的终末分支,能提供充足的胎盘血流和养分,满足胚胎的生长发育。滋养细胞的侵袭及其介导的子宫螺旋动脉细胞的凋亡是重铸过程的两个关键环节,若重铸障碍则胎盘灌注量不足,继而胚胎缺血、缺氧,导致一系列病理妊娠。早期研究表明复发性流产患者蜕膜组织中滋养细胞侵袭减少,螺旋动脉重铸障碍,因此对复发性流产这一特征性病理改变产生的研究成为阐明病因的关键。

STOX1在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的研究STOX1在子痫前期和正常胎盘组织中蛋白和mRNA表达水平的变化,探讨其与子痫前期发病之间的关系。方法应用免疫组织化学、Western blot及实时定量PCR检测STOX1在20例子痫前期及20例正常胎盘中的表达水平。结果免疫组化结果显示:STOX1蛋白在17例子痫前期胎盘组织中呈高表达85%(17/20),明显高于正常胎盘组织(P<0.01)。实时定量PCR和Western blot结果显示:STOX1在子痫前期胎盘组织中mRNA和蛋白水平的表达均高于正常胎盘组织(t=8.608,P<0.01;t=14.659,P<0.01)。结论子痫前期胎盘组织中STOX1表达明显升高,可能与子痫前期的发生发展有关。

人胎盘组织和滋养层细胞膜联素V的检测

目的 检测膜联素V(AnnexinV)在人胎盘组织的表达及其分布 ,探讨乙肝病毒 (HepatitisBVirus ,HBV)感染胎盘细胞的可能方式。方法 收集血清学HBsAg阳性孕妇足月胎盘组织 39例、血清学HBsAg阴性孕妇足月胎盘组织 4例 ,将培养的滋养层细胞制成细胞爬片 ,用免疫组化方法检测胎盘组织和滋养层细胞中的AnnexinV。随机选取 7例胎盘组织采用免疫荧光标记方法结合激光共聚焦技术对AnnexinV进行重测。结果 AnnexinV存在于人类胎盘组织中 ,位于滋养层细胞、间质细胞及绒毛毛细血管内皮细胞的胞浆中。结论 胎盘中含有丰富的AnnexinV ,推测其可能是乙肝病毒进入滋养层细胞并感染胎儿的潜在受体。

刚地弓形虫感染对孕鼠胎盘细胞凋亡的影响

目的 探讨刚地弓形虫对孕鼠胎盘细胞凋亡及其相关基因bax、bcl-2表达的影响。方法 建立刚地弓形虫感染的孕鼠模型，采用胎盘组织压片及病理切片，观察胎盘组织的损伤情况；采用DNA缺口末端标记技术（TUNEL）检测胎盘细胞的凋亡情况；采用免疫组织化学法（SP法）观察细胞凋亡调控基因bax和bcl-2在胎盘细胞中的表达。结果 与对照组相比，随着感染时间的延长，感染组胎盘组织压片中可见弓形虫虫体逐渐增加，HE染色可见有大量的淋巴细胞浸润及凋亡小体；TUNEL证实感染组胎盘滋养层细胞凋亡显著增强（P〈0．05）；免疫组织化学结果显示，感染组胎盘滋养层细胞凋亡相关基因bax表达显著增强、bcl-2表达减弱（P〈0．05）。结论 刚地弓形虫侵入胎盘组织，可通过上调滋养层细胞bax基因表达，下调bcl-2基因表达而诱导胎盘滋养层细胞凋亡增加，从而影响胎盘组织结构和功能，导致不良妊娠。

山奈酚对BaP引起的人绒毛膜外滋养层细胞HTR8/SVneo凋亡的影响

目的:研究山奈酚对苯并芘(Ba P)引起的人绒毛膜外滋养层细胞HTR8/SV neo凋亡的影响。方法:通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察及测定,最终选取10μmol/L Ba P和0.01,0.1,1μmol/L山奈酚共同处理人HTR8/SV neo细胞48 h,光镜下观察不同浓度Ba P作用下细胞生长情况,吉姆萨(Gimesa)染色及Hochest33342荧光染色观察细胞凋亡情况,利用流式细胞术测定细胞凋亡率变化。结果:1流式细胞术测定结果表明Ba P单独作用细胞存活率为(72.58±0.29)%,与0.01,0.1,1μmol/L山奈酚同时作用时细胞存活率分别为(84.96±1.34)%、(89.54±1.64)%和(91.01±1.26)%,两者同时作用组细胞存活率均高于Ba P单独作用组,差异均有统计学意义(P<0.01)。2单独Ba P作用可引起细胞染色质浓缩,出现凋亡小体等典型凋亡形态、细胞核致密浓染、碎裂状。结论:山奈酚对Ba P引起的HTR8/SV neo细胞凋亡有明显的抑制作用。