心室辅助装置溶血测试中游离血红蛋白检测方法比较

目的评价溶血测试中游离血红蛋白检测的三种方法,得出一种最适合于心室辅助装置的方法。方法通过对比研究,在阐述联苯胺法、Harboe测试法和Cripps测试法测试血红蛋白含量的原理和方法基础上,对不同浓度的标准血红蛋白样本进行测试,描绘出血红蛋白标准液浓度与吸光度关系的标准曲线,对比分析三种方法在实验操作和结果差异性方面的优缺点。与此同时,对比1%和0.2%邻甲联苯胺溶液对联苯胺法的影响,并分析Harboe法中不同浓度稀释剂的影响(0.01%的碳酸钠溶液和0.1%的碳酸钠溶液)结果Cripps法实验重复性差,拟合系数较低(R^(2)=0.8019),并不能得到优质的标准曲线。联苯胺法和Harboe法实验重复性好,可以得到拟合效度高的标准曲线(R^(2)均大于0.99)。联苯胺法推荐使用1%邻甲联苯胺溶液,Harboe法中,0.01%的碳酸钠溶液更适用。但联苯胺法对试剂的要求很严格,要现配现用,并且测量结果对时间有依赖性。结论与其他测试方法相比,Harboe法可以弥补上述两种方法的不足,适用于实验室快速自动化分析,更适用于心室辅助装置的溶血测试。

新型左心辅助装置的体外溶血试验

目的 :观察研究在左心辅助情况下 ,不同流量 ,驱动压力 ,压缩时间比等条件下 ,对于血液破坏情况 .方法 :新鲜狗血注入肝素 ,达到完全肝素化 (ACT时间大于 4 5 0s) .在装有新型左心辅助泵的体外循环测试系统中 ,利用自制的动力驱动系统 ,分析不同压力 ,频率 ,流量下的血浆游离血红蛋白(FHb) ,血浆纤维蛋白原 (Fib)的变化 .结果 :在相同流量下 ,驱动压力越大FHb指标越高 ,Fib指标越低 .在平均血压固定下 ,改变压缩时间比为 0 .2 5～ 0 .4 5 ,发现在 0 .38有较低的FHb和较高的Fib结果 .而在驱动压力 ,压缩时间比固定的条件下 ,流量越大 ,对血液的破坏越大 .结论 :在流量固定情况下 ,越小有效驱动压力以及保持左心辅助的压缩比为 0 .38对血液破坏较少 .

二次重度离心制备法对冷沉淀凝血因子质量的影响

目的探讨一次或二次重度离心制备新鲜冰冻血浆(冷沉淀凝血因子原料浆)对冷沉淀凝血因子质量的影响。方法检测冷沉淀凝血因子中游离血红蛋白含量、Ⅷ因子和纤维蛋白原含量。全血40单位(每单位200 mL)分成对照组、实验组,每组n=20。按国家标准采集、离心和分离,再将实验组新鲜冰冻血浆(冷沉淀凝血因子原料浆)进行第二次离心和分离,同时放入-80℃深低温冰箱速冻,储存时间为14天。14天后经过离心法制备成冷沉淀凝血因子,分别进行残留血红蛋白、Ⅷ因子和纤维蛋白原含量的检测。结果实验组残留血红蛋白含量(17.64±5.60)mg/L,显著低于对照组(25.75±9.78)mg/L(t=0.035,P<0.05);实验组Ⅷ因子含量(53.26±6.08)IU/单位,合格率100%高于对照组(47.34±9.14)IU/单位、合格率80%(t=0.041,P<0.05);实验组纤维蛋白原含量(162±29.01)mg/单位,高于对照组(147.28±43.39)mg/单位,两组合格率均100%(t=0.38,P>0.05)。结论二次重度离心新鲜冰冻血浆(冷沉淀凝血因子原料浆)能使残留红细胞更少,使残留游离血红蛋白更低,可以提高冷沉淀凝血因子中Ⅷ因子的含量,从而提高冷沉淀凝血因子制备质量。

血浆外观目测比较色板的制作和应用

目的为确保对颜色偏红的血浆判断有明确的方法和指标,避免不合格的血浆发往临床,制作了血浆外观目测比较色板。方法将多人份混和血浆混合后分装,在血浆中定量加入不同量的血红蛋白,使得6个血浆袋中的游离血红蛋白浓度分别为0.05 g/L、0.10 g/L、0.15 g/L、0.20 g/L、0.25 g/L、0.29 g/L。拍照后制作成因溶血造成血浆外观异常的比较色板,工作人员将疑似溶血的血浆与比较色板进行目视比对,颜色深于0.25 g/L(游离血红蛋白浓度)的,判断该袋血浆不合格。结果共使用该比较色板对136 215袋血浆外观进行判断,其中发现疑似溶血的血浆为238袋。对238袋疑似血浆进行游离血红蛋白和总胆红素的检测。其中游离血红蛋白浓度≥0.25 g/L的有43袋,游离血红蛋白浓度<0.25 g/L的有195袋。结论该比较色板对于日常判断血浆异常外观起到重要作用,但造成血浆颜色异常的原因不止溶血一种,可进一步完善比较色板的制作。

健康学龄前儿童血浆氨基酸与血红蛋白含量

本文采用丹酰氯聚酰胺薄层分析法研究了６５名３—７岁健康儿童的血浆游离氨基酸和血红蛋白浓度。结果表明：（１）赖氨酸促进蛋白质合成不仅供机体生长需要，同样也供合成血红蛋白；（２）贫血前期已有血浆游离氨基酸的变化，继而出现贫血，提示儿童时期生长旺盛，应注重补充某些氨基酸消耗和补充维生素、叶酸、铁元素等造血原料。

缺铁性贫血患者红细胞内游离原卟啉、血浆铁和转运铁蛋白饱和度检测水平及临床意义

目的检测缺铁性贫血(IDA)患者红细胞内游离原卟啉(FEP)、血浆铁和转运铁蛋白饱和度(TSAT)水平,并探讨其临床意义。方法选取2019年12月至2022年1月西安医学院第一附属医院收治的205例IDA患者作为IDA组,另选取同期于我院体检中心体检的健康人群96例作为对照组,同时根据血红蛋白浓度将IDA组患者分为轻度贫血组(n=86)、中度贫血组(n=78)和重度贫血组(n=41),检测IDA组与对照组FEP、血浆铁、TSAT水平和血常规指标[血红蛋白浓度(HB)、红细胞计数(RBC)、平均血红蛋白量(MCH)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)],采用Pearson检验分析IDA组FEP、血浆铁和TSAT水平与血常规指标的相关性,并采用受试者工作曲线(ROC)分析FEP、血浆铁和TSAT检测水平对IDA患者的诊断效能。结果IDA组患者的HB、RBC、MCH、MCV明显低于对照组,RDW明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);IDA组患者的FEP水平明显高于对照组,血浆铁和TSAT水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度贫血组患者的FEP水平明显高于轻、中度贫血组,血浆铁和TSAT水平明显低于轻、中度贫血组,而中度贫血组患者的FEP水平明显高于轻度贫血组,血浆铁和TSAT水平明显低于轻度贫血组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson分析结果显示,IDA患者FEP水平与HB、RBC、MCH、MCV水平呈负相关(P<0.05),与RDW水平呈正相关(P<0.05);血浆铁、TSAT水平与HB、RBC、MCH、MCV水平呈正相关(P<0.05),与RDW水平负相关(P<0.05);经ROC分析结果显示,FEP、血浆铁和TSAT水平单独及联合诊断IDA的曲线下面积(AUC)分别为0.749、0.798和0.890、0.947,三者联合诊断价值最高。结论IDA患者FEP、血浆铁和TSAT水平与患者贫血程度密切相关,可作为IDA早期诊断的参考指标,三者联合诊断的效能较高,可为临床诊断IDA提供新思路。

7.5％高渗氯化钠对血浆游离血红蛋白浓度的影响

选用家兔46只,随机分为四组:(1) 正常容量输注4ml/kgHS组(n=11);(2) 失血性休克输注4ml/kg生理盐水(NS)组(n=2);(3) 休克后输注4ml/kg高渗氯化钠(HS)组(n=18);(4) 休克后输注10ml/kgHS组(n=5)。测定了前三组动物的平均动脉压(MAP)、红细胞(RBC)变形指数(DI)、RBCS0%溶血点、膜上Na^+-K^+-ATP酶活力及所有各组的血浆游离血红蛋白浓度(FHB)和RBC平均体积(MCV)。结果显示,血容量正常时HS对血浆FHB无明显影响;给失血性休克动物输注HS后MAP显著提高,MCV显著缩小,同时FHB显著提高,大剂量组FHB提高更明显,提示RBC破坏增加;失血性休克后出现的DI及膜上Na^+-K^+-ATP酶活力下降和50%溶血点显著右移均无显著改善。认为休克后RBC变形性下降、脆性增加、膜内外渗透平衡调节功能下降,在此基础上应用HS,使MCV在短时间内发生变化,是RBC破坏增加的重要原因。

采供血机构血浆游离血红蛋白室间质评结果分析

我省采供血机构质控实验室室间质评活动始于2005年,至今已经12年了。随着《血站技术操作规程》的更新改版,血液质量控制检查项目做了调整,我们开展的室间质评项目也随着做了调整,目前开展的项目有血细胞计数（RBC、WBC、PLT、Hb、HCT）检测、总蛋白检测、Ⅷ因子活性（FⅧ：C）检测、纤维蛋白原（Fbg）和亚甲蓝检测,上述项目检测结果都有陆续报道,今年我们新增了血浆游离血红蛋白检测项目。

三波长比色法测定血浆游离血红蛋白的探讨

目的:应用三波长比色法测定血浆游离血红蛋白,并与邻-甲联苯胺法相比较,探讨该方法的可行性。方法:将不同浓度的血红蛋白(Hb)标准应用液分别加入到配制好的Tris-HCl缓冲稀释液的试管中,混匀后分别在380 nm、415 nm、450 nm比色,按公式算Hb的含量,并与邻-甲联苯胺法进行对照。结果:该法线性范围为(0～800)mg/L,最低检出限为2.25 mg/L。2种不同浓度的Hb应用液批内重复性试验(CV)结果分别为3.28%、1.52%,批间重复性试验(CV)结果分别为5.44%、3.51%;回收率实验结果分别为98.1%、102.6%;对照实验回归方程Y=0.989(1.023X+0.218),γ=0.989。结论:三波长比色法实验结果重复性好、准确度高、线性好,且操作简单,所用试剂无污染,为检测血浆游离血红蛋白提供较好的方法选择。

先天性心脏病患儿行心肺转流术时血浆游离血红蛋白及术后免疫功能分析

目的分析先天性心脏病患儿行心肺转流术时血浆游离血红蛋白表达情况及术后免疫功能。方法选择徐州医科大学附属儿童医院心胸外科同组手术医师连续82例先天性心脏病择期行心脏畸形矫形手术患儿为研究对象,术中动脉阻断后均行心肺转流术,分析患儿手术结果情况、术时的血浆改为游离血红蛋白(FHb)表达及术后免疫功能指标情况,并采用Spearman秩相关分析术时血浆FHb表达及术后免疫功能指标的相关性。结果 82例心肺转流术患儿均顺利停机,1例患儿延迟关胸,5例患儿术后二次气管插管,2例患儿术后腹膜透析治疗;82例患儿手术效果满意,均恢复良好出院。82例心肺转流术患儿术中FHb平均表达水平(46.81±7.83)mg/L,但在心肺转流前、心肺转流后10 min、心肺转流后30 min、关胸前这四个时刻点患儿的FHb均依次提升(P<0.05)。与手术前比较,术后1 h的免疫球蛋白G(IgG)、IgA、IgM和T细胞亚群细胞(CD3^(+)、CD4^(+)、CD14^(+))均下降,CD8^(+)均提升(P<0.05)。术时血浆FHb表达与IgG(r=-0.812,P<0.001)、IgA(r=-0.779,P<0.001)、IgM(r=-0.846,P<0.001)、CD3^(+)(r=-0.917,P<0.001)、CD4^(+)(r=-0.903,P<0.001)、CD^(+)14(r=-0.829,P<0.001)呈负相关,与CD8^(+)呈正相关(r=0.886,P<0.001)。结论术时血浆游离血红蛋白表达水平异常与先天性心脏病行心肺转流术患儿术后免疫功能异常存在相关性,值得临床重视与关注。