LncRNA PVT1对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞活性的影响及其机制

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变体异位基因1(PVT1)对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法 收集41例DLBCL病人和15例淋巴结反应性增生(RLH)病人的组织标本,体外培养人正常B淋巴细胞GM12878和人DLBCL细胞(OCI-Ly3、U2932、TMD8),对TMD8细胞进行转染,将其分为control组(只转染Lipofectamine-2000)、si-NC组(转染si-NC)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、si-PVT1组(转染si-PVT1)、miR-145-5p inhibitor组(转染miR-145-5p inhibitor)、si-PVT1+miR-145-5p inhibitor组(转染si-PVT1和miR-145-5p inhibitor)。应用qRT-PCR方法检测各组细胞PVT1 mRNA和miR-145-5p表达,Western Blot方法检测CDK6蛋白表达,CCK-8法检测TMD8细胞增殖,流式细胞术检测TMD8细胞周期变化,Transwell实验检测TMD8细胞迁移和侵袭能力,RNA pull down和双荧光素酶报告基因法验证PVT1、miR-145-5p与细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)的靶向关系。结果 DLBCL组织PVT1 mRNA、CDK6蛋白的表达水平高于RLH组织,miR-145-5p表达低于RLH组织(t=14.264~24.445,P<0.05)。与GM12878细胞比较,OCI-Ly3、U2932、TMD8细胞中PVT1 mRNA、CDK6蛋白表达均增加,miR-145-5p表达均减少(F=69.557~234.718,P<0.05)。6组细胞PVT1 mRNA、miR-145-5p、CDK6蛋白表达及增殖率、G0/G1期细胞比例、S期细胞比例、迁移和侵袭细胞数差异有统计学意义(F=25.589~319.150,P<0.05);与control组比较,si-PVT1组细胞PVT1 mRNA、CDK6蛋白、增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量降低,miR-145-5p表达、G0/G1期细胞比例升高(P<0.05),miR-145-5p inhibitor组呈相反变化(P<0.05);下调miR-145-5p表达可减弱敲低PVT1对TMD8细胞恶性生物学行为的抑制作用(P<0.05)。过表达PVT1 mRNA增高CDK6蛋白表达、细胞增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量,降低miR-145-5p表达、G0/G1期的细胞比例(F=38.025~327.887,P<0.05)。miR-145-5p是PVT1的靶基因,且miR-145-5p可靶向下调CDK6表达。结论 敲低PVT1可抑制DLBCL细胞恶性生物学行为,其作用机制可能与调控miR-145-5p/CDK6轴有关。

血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平与急性呼吸窘迫综合征患儿病情及预后的关系

目的探究血清长链非编码RNA INK4位点反义非编码RNA(lncRNA ANRIL)、长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1)水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿病情及预后的关系。方法选取124例确诊的ARDS患儿为患病组,另选取124例同期体检健康者为对照组。ARDS患儿根据病情严重程度分为重度组(34例)、中度组(42例)和轻度组(48例);ARDS患儿根据预后情况分为预后不良组(55例)和预后良好组(69例)。采用荧光定量聚合酶链反应测定血清中lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平。采用Logistic回归分析法分析ARDS患儿发生预后不良的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平对ARDS患儿发生预后不良的预测价值。结果患病组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度组、中度组和重度组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平随病情严重程度升高(P<0.05)。预后不良组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平、氧合指数(OI)、呼吸频率、急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);OI、呼吸频率、lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1为患儿发生预后不良的影响因素(P<0.05)。血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平预测ARDS患儿发生预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.737,截断值分别是11.35、4.36,二者联合预测的AUC为0.876。二者联合预测的AUC优于血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平单独预测(P<0.05)。结论ARDS患儿的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平均上调,且lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1为患儿发生预后不良的影响因素,二者联合预测的价值较高。

缺血性疾病患者血清lncRNA PVT1和FOXM1表达水平及联合心脏磁共振延迟强化成像与预后的关系

目的 探讨缺血性疾病患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)和叉头框转录因子M1(FOX M1)表达水平及联合心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像(LGE-MRI)与预后的关系。方法 选取2021年2月-2022年2月我院收治的缺血性心脏病患者118例即为研究组,随访一年根据随访过程中是否发生主要心脏不良事件(MACE),分为MACE组32例,无MACE组86例。同期选择在我院体检健康的志愿者118例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA PVT1的相对表达量。采用酶联免疫吸附试验(E LISA)检测FOXM1水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1对缺血性心脏病患者预后发生MACE的预测价值。结果 研究组患者DBP、SBP、TG、TC、 LDL-C、GLU水平与对照组相比显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,研究组的血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者DBP、SBP、TC、LDL-C水平显著升高, HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。MACE组的LGE-MRI阳性数量显著高于无MACE组(P<0.)05。与LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1单独预测相比,三者联合预测MACE发生的AUC更高(Z=7.221,P<0.001;Z=7.737,P<0.001;Z=7.091,P<0.001)。结论 缺血性心脏病预后发生MACE的患者血清lncRNA PVT1和FOXM1水平呈高表达,二者联合LGE-MRI对MACE的发生有一定的预测价值。

circPVT1靶向调控miR-195-5p/SOX9轴影响结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化

目的:探究环状RNA浆细胞瘤变体易位1(circPVT1)靶向调控微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养人正常结肠上皮细胞NCM-460、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)至对数期,将SW480细胞分为对照组(正常培养SW480细胞不进行转染)、空载质粒组(转染空载质粒)、circPVT1沉默组[转染circPVT1小干扰RNA(siRNA)质粒]、miR-195-5p过表达组[转染miR-195-5p模拟物(mimics)质粒]、SOX9沉默组(转染SOX9 siRNA质粒)、circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组(转染circPVT1 siRNA和miR-195-5p siRNA质粒)。各组转染相应质粒后培养48 h。荧光定量PCR法检测NCM-460细胞、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)和各组SW480细胞circPVT1、miR-195-5p、SOX9 mRNA的表达;噻唑蓝和流式细胞仪分别检测各组SW480细胞增殖和凋亡;蛋白印迹法检测各组SW480细胞SOX9、凋亡和EMT相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9的靶向关系。结果:与NCM-460细胞比较,SW480细胞、HCT116细胞、HCT29细胞、LOVO细胞、SW620细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达显著升高,miR-195-5p表达显著降低(P<0.05);其中,SW480细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达最高,miR-195-5p表达最低;故选择SW480细胞进行后续实验。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组circPVT1、SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低,miR-195-5p表达显著升高(P<0.05);miR-195-5p过表达组miR-195-5p表达显著升高,SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);SOX9沉默组SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组、miR-195-5p过表达组、SOX9沉默组细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。与circPVT1沉默组比较,circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组miR-195-5p、凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著降低,SOX9 mRNA及蛋白、细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著升高(P<0.05)。circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9存在靶向调控关系。结论:沉默circPVT1可以靶向上调miR-195-5p表达,抑制SOX9表达,进而抑制SW480细胞增殖和EMT进程,促进其凋亡。

基于lncRNA PVT1表达分析银杏内酯B对ITP患者B淋巴细胞及Treg/Th17免疫失衡的影响

目的探讨银杏内酯B对原发性免疫血小板减少症(ITP)患者长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)、B淋巴细胞和调节性T淋巴细胞/辅助性T淋巴细胞17(Treg/Th17)免疫失衡的影响及其相关性。方法依据双盲法将2021年5月至2023年5月廊坊市中医医院收治的130例ITP患者分为对照组(65例)和观察组(65例)。对照组给予长春地辛治疗,观察组给予银杏内酯B治疗,两组均治疗4周。比较两组患者临床疗效;比较两组患者治疗前后lncRNA PVT1表达、B淋巴细胞亚群[CD19^(+)、B1淋巴细胞]比例、Treg/Th17免疫失衡细胞因子[白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)];分析lncRNA PVT1表达与CD19^(+)、B1淋巴细胞比例以及IL-17、IL-21水平的相关性。结果研究过程中对照组失访7例,观察组失访5例,最终分组为对照组58例,观察组60例。治疗后两组患者lncRNA PVT1表达、IL-17、IL-21水平以及CD19^(+)、B1淋巴细胞比例较治疗前均有所降低(P<0.05),观察组治疗后lncRNA PVT1表达、IL-17、IL-21水平以及CD19^(+)、B1淋巴细胞比例明显低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,观察组临床疗效更优(P<0.05)。lncRNA PVT1表达与CD19^(+)、B1淋巴细胞、IL-17、IL-21水平均呈正相关(P<0.05)。结论银杏内酯B对ITP患者具有较高临床疗效,可以显著改善其lncRNA PVT1表达、B淋巴细胞比例、Treg/Th17免疫失衡细胞因子水平,值得临床推广。

PVT1通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化的研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在调控子宫内膜基质细胞纤维化中的病理生理作用及分子机理。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人子宫内膜基质细胞(HESCs)中PVT1、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、转化生长因子-β1(TGF-β1)、SMAD2及SMAD3的表达水平。结果PVT1过表达促进HESCs增殖(P<0.05),而PVT1沉默抑制HESCs增殖(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中上调胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达(P<0.05),而PVT1被敲除时,胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中可以进一步上调TGF-β1/SMAD信号相关基因(TGF-β1、SMAD2、SMAD3)的表达(P<0.05)。当PVT1被敲除时,TGF-β1/SMAD信号相关基因胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。PVT1可诱导HESCs上清液中TGF-β1的产生(P<0.05)。结论PVT1可通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化而产生胶原蛋白。同时,PVT1可能是一个用于治疗子宫内膜粘连的新靶点。

IS患者血清lncRNA PVT1、miR-214水平与继发性癫痫的相关性分析

目的 探讨缺血性脑卒中(IS)患者血清长链非编码RNA变异性浆细胞瘤异位1 (lncRNA PVT1)、微小RNA-214 (miR-214)水平与继发性癫痫的相关性。方法 选取2018年6月至2021年6月眉山心脑血管病医院神内八科收治的280例IS患者作为研究对象,根据患者1年内是否发生继发性癫痫,分为单纯IS组(212例)和继发性癫痫组(68例),根据癫痫的严重程度分为轻度癫痫组(19例),中度癫痫组(33例),重度癫痫组(16例)。另选取同时期来眉山心脏血管病医院神经八科体检的150例健康者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定所有受试者血清lncRNA PVT1、miR-214水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)水平;经Pearson法分析lncRNA PVT1与miR-214的相关性,及两者与IL-1 β、IL-6、TNF-α的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响IS患者是否发生继发性癫痫的有关因素。结果 与对照组比较,单纯IS组和继发性癫痫组患者血清lncRNAPVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05);与单纯IS组比较,继发性癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05)。与轻度癫痫组比较,中度癫痫组和重度癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05);与中度癫痫组比较,重度癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P <0.05)。继发性癫痫组患者血清lncRNA PVT1与IL-1 β、IL-6、TNF-α均呈正相关(P <0.05),血清miR-214与IL-1 β、IL-6、TNF-α均呈负相关(P <0.05),血清lncRNA PVT1与miR-214水平也呈负相关(P <0.05)。多因素Logistic回归分析表明,IL-1 β、IL-6、TNF-α、lncRNA PVT1及miR-214均与IS患者继发性癫痫的发生有关(P <0.05)。结论lncRNA PVT1水平升高及miR-124水平降低与IS患者继发性癫痫的发生有关,可作为评估IS患者发生继发性癫痫的血清标志物。

LncRNA PVT1在肝癌中的研究进展

肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,死亡率亦很高,给我们国家带来了极大的经济社会负担。近年的研究发现长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)参与了肝癌的细胞增殖、迁移、侵袭、转移等过程。本文对lncRNA浆细胞瘤变异易位基因1(plasmacytoma variant translocation gene 1,PVT1)概述的基础上,重点阐述lncRNA PVT1在肝癌的发生、进展、转移等方面的作用。

长链非编码RNA PVT1异常表达对肝癌细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(PVT1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖和迁移侵袭过程的影响及潜在调控机制。方法检测HCC肿瘤组织和细胞中PVT1和微小RNA-488-3p(miR-488-3p)的表达水平。将MHCC97-H细胞分为Control组(空白未处理)、siRNA组(转染阴性对照siRNA-NC)、siRNA-PVT1组(干扰PVT1表达)和siRNA-PVT1+miR-488-3p inhibitor组(干扰PVT1表达同时抑制miR-488-3p表达)。MTT、划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测MHCC97-H细胞的增殖、迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验验证PVT1与miR-488-3p之间的靶向关系。结果PVT1在HCC组织和细胞中表达水平增高(P<0.05),miR-488-3p在HCC组织和细胞中表达水平降低(P<0.05)。与siRNA组相比,siRNA-PVT1组MHCC97-H细胞增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数量均降低(P<0.05);与siRNA-PVT1组相比,siRNA-PVT1+miR-488-3p inhibitor组MHCC97-H细胞增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数量均增加(P<0.05)。PVT1能够靶向负调控miR-488-3p。结论PVT1在HCC组织和细胞系中异常高表达,干扰PVT1表达可能通过上调miR-488-3p表达抑制HCC的增殖、迁移和侵袭。

下调环状RNA Hsa-circ-PVT1对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭及血管生成作用机制的影响

目的:探讨环状RNA浆细胞瘤变体易位1(Hsa-circ-PVT1)对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭和血管生成的影响,以及其对微小RNA145(miR-145)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)基因的调控机制。方法:qRT-PCR检测子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1、miR-145表达。双荧光素酶实验检测Hsa-circ-PVT1和miR-145的关系。生物信息数据库TargetScanHuman、miRDB、miRactDB预测miR-145的下游靶点。细胞分组:Hsa-circ-PVT1-inhibitor-NC+miR-145-antagomir-NC+si-MAPK1-NC(NC)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor(inhibitor)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-antagomir(inhibitor+antagomir)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-miR-145-antagomir+si-MAPK1(inhibitor+antagomir+si)、正常细胞(normal组)。EDU检测各组细胞增殖,Transwell小室检测各组细胞侵袭能力;小管形成实验检测各组细胞血管生成能力;Western blot法检测各组细胞中MAPK1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,miR-145表达明显下降,双荧光素酶证实Hsa-circ-PVT1靶向miR-145的表达,miR-145下游靶标为MAPK1。与normal组Y14细胞相比,inhibitor组细胞增殖、侵袭及血管新生的性能明显降低,inhibitor+antagomir组能部分逆转这一抑制作用,而inhibitor+antagomir+si组能部分恢复这一作用,差异均有统计意义(均P<0.05)。结论:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,Hsa-circ-PVT1能靶向miR-145调控MAPK1表达,抑制Hsa-circ-PVT1表达能明显抑制间质细胞的增殖、侵袭及血管生成。

慢性乙型病毒性肝炎病人血浆中LncRNA PVT1、微RNA-31-5p表达水平与炎症损伤程度的相关性分析

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1()、微RNA-31-5p(miR-31-5p)在慢性乙型病毒性肝炎(CHB)病人血浆中的表达情况,并分析其与炎症损伤程度的关系。方法选取东莞市人民医院2019年12月至2020年12月确诊的180例CHB病人为CHB组,所有病人均行肝穿刺活检,根据CHB病人炎症损伤程度分为G1组(66例),G2组(58例),G3组(41例),G4组(15例),根据肝纤维化程度进行分组,无明显肝纤维化(S0,S1)组(64例),明显肝纤维化组(S2,S3)(78例),早期肝硬化(S4)组(38例)。同时选取55例健康者为对照组。收集CHB组和对照组的一般资料,分别检测两组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-10、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)等指标水平;采用实时荧光定量PCR法对血清中LncRNA PVT1、miR-31-5p表达水平进行检测,Pearson法分析LncRNA PVT1、miR-31-5p表达的相关性。结果CHB病人血清中LncRNA PVT1(1.52±0.31、1.93±0.47、2.57±0.63、3.42±1.03)表达水平高于对照组0.68±0.23,且LncRNA PVT1表达水平随着炎症损伤程度加重而升高,miR-31-5p表达水平(0.85±0.22、0.79±0.18、0.63±0.14、0.50±0.11)低于对照组0.96±0.24,且miR-31-5p表达水平随着炎症损伤程度加重而降低,差异有统计学意义(P<0.05);CHB组病人TNF-α(108.13±30.32)ng/L、IL-6(68.50±22.59)ng/L、IL-1β(358.92±36.80)ng/L、IL-10(75.25±18.99)ng/L、Hs-CRP(11.22±3.15)mg/L、ALT(57.13±9.34)U/L、AST(37.86±5.56)U/L、GGT水平(33.21±10.62)U/L均显著高于对照组[(38.49±19.88)ng/L、(19.12±3.21)ng/L、(169.05±5.24)ng/L、(16.56±2.34)ng/L、(1.68±0.56)mg/L、(24.62±7.95)U/L、(22.32±4.26)U/L、(26.94±8.32)U/L](P<0.05);CHB组病人血清中LncRNA PVT1表达与TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、Hs-CRP、ALT、AST、GGT均呈正相关(P<0.05),miR-31-5p与TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、Hs-CRP、ALT、AST、GGT均呈负相关(P<0.05);CHB病人血清中LncRNA PVT1、miR-31-5p的表达呈明显负相关(r=−0.36,P<0.05)。结论CHB病人血清中LncRNA PVT1表达升高,miR-31-5p表达降低,且二者均与炎症损伤程度有关。

LncRNA PVT1在非小细胞肺癌中的表达及其与脑转移的相关性

目的探讨长非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤变异易位1(PVT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达情况,并分析其与脑转移的关系。方法选取2018年1月至2022年6月在南京市溧水区人民医院就诊并确诊为NSCLC患者95例为研究对象,根据是否发生脑转移,分为发生脑转移组(n=40)和未发生脑转移组(n=55);随机选取同期健康人群50例为对照组。收集临床资料,采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清及癌组织中lncRNA PVT1水平,Spearman法分析血清lncRNA PVT1表达水平与脑转移发生的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA PVT1水平对NSCLC患者发生脑转移的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析NSCLC患者发生脑转移的影响因素。结果与未发生脑转移组比较,发生脑转移组患者血清及癌组织中lncRNA PVT1水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清中lncRNA PVT1水平与NSCLC患者脑转移呈正相关(r=0.618,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清lncRNA PVT1水平诊断诊断NSCLC患者发生脑转移的曲线下面积为0.859(95%CI 0.773~0.922),灵敏度为80.00%,特异度为87.27%;多因素Logistic回归分析结果显示,lncRNA PVT1、临床分期、淋巴结转移、分化程度均与NSCLC患者发生脑转移有关(P<0.05)。结论发生脑转移的NSCLC患者血清及癌组织中lncRNA PVT1表达水平升高,检测血清lncRNA PVT1表达水平可用于诊断NSCLC患者脑转移的发生。

LncRNA PVT1调控miR-1207-5p/FMNL2对HL-60细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(LncRNA PVT1)对HL-60细胞生物学行为及柔红霉素敏感性的影响。方法将HL-60细胞分为对照组、miR-NC组、PVT1-siRNA组、miR-1207-5p inhibitor组和miR-1207-5p mimic组。除对照组细胞不处理外,其余各组细胞分别将miR-NC,PVT1-siRNA,miR-1207-5p inhibitor,miR-1207-5p mimic转染到HL-60细胞中。采用萤光素酶检测试剂分析LncRNA PVT1对微小RNA-1207-5p(miR-1207-5p)和同源形成素样蛋白2(FMNL2)的调控作用,CCK-8法检测细胞存活率,改良Matrigel Boyden室测定法测定细胞侵袭性,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞术检测细胞凋亡率,MTT法检测细胞对柔红霉素敏感性,实时逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测miR-1207-5p和FMNL2 mRNA表达水平,免疫印迹(Western blot)法检测FMNL2蛋白表达水平。结果萤光素酶分析结果显示,LncRNA PVT1与miR-1207-5p、miR-1207-5p与FMNL2均存在靶向调节作用;与对照组比较,PVT1-siRNA组LncRNA PVT1表达水平显著降低(P<0.05),miR-1207-5p表达水平显著升高(P<0.05)。与对照组比较,miR-1207-5p inhibitor组细胞存活率、迁移率、侵袭数均显著降低,细胞凋亡率、FMNL2 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);miR-1207-5p mimic组细胞存活率、迁移率、侵袭数均显著升高,细胞凋亡率、FMNL2 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与对照组比较,相同质量浓度(0,0.5,1,2,4,8μg/mL)柔红霉素作用下PVT1-siRNA组HL-60细胞活力均显著升高(P<0.05)。结论沉默LncRNA PVT1可使miR-1207-5p表达增加,从而抑制FMNL2表达,导致HL-60细胞恶性生物学行为概率升高,同时降低细胞对柔红霉素的敏感性。

晚期NSCLC放疗前后血清circPVT1和miR-486-5p水平变化及临床意义

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗前后血清环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(circPVT1)、微小RNA-486-5p(miR-486-5p)水平变化及对放疗疗效的评估价值。方法研究纳入137例晚期NSCLC患者作为NSCLC组,另选取健康体检者140例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清circPVT1、miR-486-5p表达水平,比较放疗前后及不同放疗疗效患者血清circPVT1和miR-486-5p水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circPVT1、miR-486-5p水平对放疗疗效的诊断价值。结果与对照组相比,NSCLC组放疗前血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);经Targetscan在线分析显示,circPVT1与miR-486-5p有靶向关系;鳞癌与腺癌NSCLC患者放疗前血清circPVT1、miR-486-5p表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);与TNM分期Ⅲ期患者相比,Ⅳ期患者血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗后患者血清circPVT1表达水平降低,miR-486-5p表达水平升高(P<0.05)。与放疗有效组相比,无效组放疗前和放疗后血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗有效组和无效组在放疗后均显示血清circPVT1水平降低,而miR-486-5p水平升高(P<0.01)。血清circPVT1、miR-486-5p联合诊断放疗无效的AUC为0.918(95%CI:0.859~0.958),敏感度为80.65%,特异度为88.00%,联合诊断效能优于单独诊断。结论血清circPVT1、miR-486-5p水平对晚期NSCLC放疗疗效有一定评估价值。

非酒精性脂肪肝病患者血清LncRNA PVT1表达水平与胰岛素抵抗及肝纤维化的相关性研究

目的 探讨非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者血清长链非编码RNA(long noncoding RNA,Lnc RNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation gene 1,PVT1)表达水平与胰岛素抵抗和肝纤维化的相关性。方法 选择2020年8月~2022年4月西安市第九医院收治的143例NAFLD患者为观察对象(NAFLD组),选择同期性别、年龄相匹配的健康志愿者(肝功能检测、肝脏超声检查结果均正常)140例为对照组,收集入组人员资料及血清指标,采用RT-q PCR检测血清Lnc RNA PVT1表达,Pearson分析NAFLD患者血清Lnc RNA PVT1与胰岛素抵抗、肝纤维化指标的相关性,Logistic回归分析影响NAFLD患者发生肝纤维化的因素。结果 NAFLD组血清AST(52.21±11.33 U/L),ALT(42.36±8.42 U/L),FBG[8.23(5.31~10.90)mmol/L],HOMA-IR[2.31(1.52~3.95)],TC(5.31±1.05 mmol/L),TG(1.89±0.93 mmol/L),LDL-C(3.51±0.92 mmol/L),PCⅢ(121.55±21.32μg/L),CⅣ(78.56±15.42μg/L),LN(110.36±25.41μg/L)和HA水平(93.15±16.85μg/L)均高于对照组[24.35±8.53 U/L,28.62±6.35 U/L,5.34(9.65~6.71)mmol/L,1.68(1.26~2.61),4.26±0.53 mmol/L,1.23±0.35 mmol/L,2.82±0.75 mmol/L,95.34±12.63μg/L,54.34±8.37μg/L,84.21±16.55μg/L和82.43±14.26μg/L],而HDL-C(1.12±0.36 mmol/L)水平低于对照组(1.43±0.39 mmol/L),差异均有统计学意义(t/χ2=5.771~23.332,均P <0.001);NAFLD组患者血清Lnc RNA PVT1表达水平为1.79±0.52,高于对照组的1.05±0.18,差异有统计学意义(t=15.929,P <0.001),HOMAIR> 2.69的NAFLD患者血清Lnc RNA PVT1表达水平为2.18±0.45,显著高于HOMA-IR≤2.69患者血清Lnc RNA PVT1表达水平(1.46±0.48),差异有统计学意义(t=9.188,P <0.001);S0~S4期NAFLD患者血清Lnc RNA PVT1表达水平分别为1.41±0.35,1.72±0.40,2.01±0.33,2.31±0.32和2.62±0.24,且随着肝纤维化分期增加,血清Lnc RNA PVT1表达水平不断升高,差异有统计学意义(F=57.799,P <0.05);相关性分析显示,NAFLD患者血清Lnc RNA PVT1与FBG,HOMA-IR,TC,TG,LDL-C,PCⅢ,CⅣ,LN和HA呈正相关性(r=0.498,0.488,0.550,0.422,0.435,0.451,0.404,0.525,0.421,均P <0.001),与HDL-C呈负相关(r=-0.534,P <0.001);Logistic回归分析显示,HOMA-IR和Lnc RNA PVT1是NAFLD患者发生肝纤维化的独立危险因素(P <0.05)。结论 NAFLD患者血清Lnc RNA PVT1表达水平升高,与胰岛素抵抗、肝纤维化相关,可能成为评估NAFLD患者病情的指标。

lncRNA PVT1对前列腺癌细胞增殖 及侵袭、迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法传代培养人前列腺癌细胞DU145、人正常前列腺上皮细胞RWPE-1(以下分别称DU145、RWPE-1细胞),采用RT-qPCR法检测DU145、RWPE-1细胞lncRNA PVT1 mRNA表达。将DU145细胞随机分为观察组和对照组,分别转染lncRNA PVT1 siRNA和Negative Control siRNA,经G418筛选获得稳转细胞株,采用RT-qPCR法检测lncRNA PVT1 mRNA表达,采用Western blotting法检测lncRNA PVT1蛋白表达,采用MTT法检测培养12、24、36、48、60、72 h细胞增殖活性,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果DU145细胞lncRNA PVT1 mRNA相对表达量明显高于RWPE-1细胞(t=7.938,P<0.01)。观察组lncRNA PVT1 mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组(t分别为5.053、18.110,P均<0.01)。观察组培养60、72 h时细胞增殖活性均低于对照组同期(P均<0.01),而两组培养12、24、36、48 h时细胞增殖活性比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组穿膜细胞数和细胞迁移率均低于对照组(t分别为6.982、11.782,P均<0.05)。结论前列腺癌细胞lncRNA PVT1高表达,下调lncRNA PVT1表达可抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。

乳腺癌组织LncRNA PVT1 ABCG2 mRNA表达与病理特征间关系及KM曲线分析

目的:探讨乳腺癌组织长链非编码RNA浆细胞瘤异位变异基因1(LncRNA PVT1)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)mRNA表达与病理特征间关系及KM曲线分析。方法:选取2017年1月至2018年12月我院接受手术治疗的80例乳腺癌患者的病例资料;术中留取乳腺癌组织和癌旁组织(距病灶2 cm),比较癌组织及癌旁组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达,分析癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达与病理特征的相关性,COX回归分析乳腺癌患者术后复发的影响因素,比较不同癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达患者无病生存期。结果:癌组织LncRNA PVT1(0.076±0.011)、ABCG2 mRNA(3.27±0.45)表达高于癌旁组织(0.003±0.001)、(0.82±0.26)(t=59.114、42.165,P<0.05);癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05);复发者癌组织LncRNA PVT1(0.084±0.010)、ABCG2 mRNA(3.75±0.59)表达高于未复发者(0.074±0.009)、(3.13±0.47)(t=4.048、4.644,P<0.05);COX回归分析显示,癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA高表达均为术后复发独立危险因素(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA高表达者术后3年无病生存率低于低表达者(P<0.05)。结论:乳腺癌患者癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA异常高表达,且与病理特征及无病生存期相关,有望成为新的治疗靶点。

lncRNA PVT1沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及STAT3通路的影响

目的:研究沉默变异性浆细胞瘤异位1(plasmacytoma heterotopic 1,PVT1)基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、信号转导及转录活化因子(STATs)3通路的影响。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞株,设计PVT1 siRNA序列,转染细胞,分为siRNA组、阴性对照组(NC)、空白对照组(BC),利用qRT-PCR检测各组细胞PVT1相对表达量,利用MTT法检测细胞增殖情况,利用划痕实验检测细胞迁移能力,利用Transwell实验检测细胞侵袭能力,利用WB法检测STAT3通路相关蛋白表达情况。结果:转染后,siRNA3组细胞中PVT1表达水平较BC组与NC组显著降低(P<0.05);转染后,与BC组与NC组比较,siRNA3组细胞增殖率较BC组与NC组显著降低(P<0.05),迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05),p-STAT3蛋白,MMP2、MMP9、CD44、PCNA蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:沉默PVT1可能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭,其具体机制可能与STAT3信号通路有关。

LncRNA PVT1在骨科疾病中的研究进展

在当今的老龄化社会,与老年人相关的骨科疾病发病率越来越高,严重威胁了人类健康。长链非编码RNA(lncRNA)属于非编码RNA,在多种疾病的发生和发展中扮演了重要角色。浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)是其中一种lncRNA,已有研究表明PVT1在骨科疾病中发挥了重要作用,有望成为骨关节炎、类风湿性关节炎和骨肉瘤等骨科疾病的治疗靶点成为诊断、预后以及耐药性的生物标志物。本文就国内外PVT1在骨科疾病中的研究进展进行综述,以期为骨科的基础研究以及临床实践提供理论依据。

PVT1基因在胃癌患者血液中的表达及其临床意义

目的:检测人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)在胃癌患者血液中的表达水平及临床常用肿瘤标志物的含量,探讨PVT1与肿瘤标志物和临床分期分级的关系。方法:采集2015年1月至12月石河子大学医学院一附院收住院的51例胃癌、63例慢性萎缩性胃炎患者与54名正常人外周静脉血,提取血液总RNA。实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测血液中PVT1 mRNA表达水平;电化学发光法检测胃癌患者血清中AFP、CEA、CA19-9的含量。结果:PVT1 mRNA在胃癌、慢性萎缩性胃炎患者血液中的表达量较高,胃癌组与正常组相比PVT1 mRNA表达量差异有统计学意义(t=0.000,P<0.01),慢性萎缩性胃炎组与正常组相比PVT1 mRNA表达量差异也有统计学意义(t=0.000,P<0.01),但是胃癌患者与慢性萎缩性胃炎患者比较其差异无统计学意义(t=0.459,P>0.05)。PVT1 mRNA表达与淋巴结转移有明显相关(r=0.024,P<0.05)。此外,PVT1 mRNA的表达与血清肿瘤标记物CA19-9具有相关性(r=0.429,P<0.01)。结论:PVT1 mRNA在胃癌、慢性萎缩性胃炎患者血液中表达高于正常人,且与CA19-9具有相关性,提示PVT1 mRNA可能成为胃癌早期诊断及预后的分子标志物之一。