不同炮制方法对桔梗皂苷D含量的影响

本研究旨在比较不同炮制方法对桔梗皂苷D含量的影响。采用HPLC-ELSD法测定不同炮制方法加工的新鲜桔梗以及桔梗饮片中桔梗皂苷D含量。结果表明,用不同炮制方法炮制桔梗饮片后,桔梗皂苷D含量依次是姜汁制>酒制>生品>百合制>米泔水制>蜜制>醋制>炒制。用不同炮制方法炮制鲜桔梗后,桔梗皂苷D含量依次是醋制>酒制>生制>姜汁制>蜜制>炒制>百合制>米泔水制。不同炮制方法对桔梗皂苷D含量有影响,在炮制过程中,不同浓度的辅料对桔梗皂苷D含量亦有影响。

桔梗皂苷D增强人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa对奥沙利铂的敏感性

目的探讨桔梗皂苷D对人直肠癌耐药细胞株SW1463/奥沙利铂(Oxa)化学治疗敏感性的增强作用。方法取人直肠癌细胞系SW1463,建立稳定的耐奥沙利铂细胞株SW1463/Oxa。将构建成功的人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa随机分为桔梗皂苷D组、Oxa组、桔梗皂苷D+Oxa组和对照组。MTT法检测细胞增殖曲线;RT-qPCR检测脱氧核糖核酸甲基转移酶3a(DNMT3a)、磷酸化组蛋白γ-H2AX、DNA双链修复蛋白RAD51、信号传导子和转录激活子3(STAT3)信使核糖核酸(mRNA)表达;Western blot检测细胞DNMT3a、γ-H2AX、RAD51、STAT3蛋白表达及磷酸化STAT3(p-STAT3)水平。结果成功构建人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa;与对照组和Oxa组比,桔梗皂苷D组和桔梗皂苷D+Oxa组细胞增殖能力、DNMT3a、RAD51、STAT3 mRNA和蛋白表达以及p-STAT3水平降低(P<0.05),γ-H2AX mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论桔梗皂苷D能增强人直肠癌耐药细胞株SW1463/Oxa对Oxa的化疗敏感性,推测是通过抑制DNMT3a、RAD51、STAT3的表达,促进γ-H2AX的表达实现此作用的。

A new triterpenoid saponin from the roots of Platycodon grandiflorum

A new triterpenoid saponin, 3-O-β-D-glucopyranosyl 16-oxo-platycodigenin 28-O-β-D-apiofuranosyl-（1 → 3）-β-D-xylopyra- nosyl-（1→4）-α-L-rhamnopyranosyl-（1 → 2）-α-L-arabinopyra-nosyl ester, was isolated from the roots of Platycodon grandiflorum, together with three known saponins, including platycodin D, deapio platycoside E and platycoside E. The structure of the new compound, named 16-oxo-platycodin D, was elucidated on the basis of spectroscopic data.

桔梗皂苷D对大鼠急性脑梗死后神经功能障碍和认知功能障碍的改善作用

目的探索桔梗皂苷D对大鼠缺血性卒中后神经功能障碍和认知功能障碍的保护作用及其机制。方法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,随后利用桔梗皂苷D的治疗研究其对脑缺血/再灌注损伤后神经功能障碍和认知功能障碍的保护作用。动物随机分为伪手术组,急性脑梗死组,急性脑梗死低剂量桔梗皂苷D治疗组,急性脑梗死高剂量桔梗皂苷D治疗组。治疗10 d后,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色用于测量脑缺血体积。采用Longa评分法行神经学检查和Morris水迷宫试验评估神经功能和认知功能。通过免疫荧光检测轴突蛋白MAP2表达量和利用Western blot检测脑组织中铁死亡相关蛋白的表达。结果桔梗皂苷D的治疗能有效减少MCAO大鼠脑缺血体积,改善神经功能,提高记忆和学习能力。桔梗皂苷D上调了海马组织中MAP2蛋白的表达,伴随着铁死亡相关通路蛋白的抑制及铁含量的降低。结论桔梗皂苷D治疗改善MCAO大鼠的神经功能和认知功能缺损,其潜在的作用机制与其对铁死亡信号通路的调节有关。本研究将为缺血性卒中的治疗提供新的途径。

HPLC法测定不同采收期及不同部位桔梗中桔梗皂苷D含量

为寻找和合理利用桔梗资源及控制生药质量 ,用HPLC法测定春秋两季采挖的桔梗中桔梗皂苷D以及不同部位中桔梗皂苷D的含量。结果表明 :秋季 9、10月份桔梗中桔梗皂苷D的含量最高 ;不同部位中以根部含量最高 ,根皮茎叶中有痕量 ,花果实中未检测到。色谱条件 :分析柱为HypersilNH2 (4 4mm×2 0 0mm) ,甲醇∶异丙醇 =38∶6 2为流动相 ,检测波长 2 10nm ,流速 0 8mL/min ,进样量在 0 1～ 1 9μg范围内 ,线性关系良好 ,r =0 9998,回收率 96 86 %。

应用RP-HPLC法测定不同产地中桔梗皂甙D

用反相高效液相色谱（ＲＰ－ ＨＰＬＣ） 分析方法对常用中药桔梗中主要有效成分桔梗皂甙Ｄ（ｐｌａｔｙｃｏｄｉｎＤ） 进行了研究，考察了流动相对分离的影响，选择以Ｃ１８ 为色谱分析柱，乙腈－ 磷酸盐缓冲液为流动相，检测波长为２１０ ｎｍ ，进样量在２－０ ～３２－０ μｇ 之间呈良好线性关系，平均回收率为９８－１３ ％ ，ＲＳＤ 为２－３ ％ 。

不同产地桔梗药材HPLC指纹图谱及桔梗皂苷D含量测定研究

目的:建立桔梗药材的HPLC指纹图谱并测定桔梗皂苷D的含量。方法:采用RP-HPLC法,以Hypersil C18柱(250mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.05 mol/L H3PO4溶液进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm(桔梗皂苷D含量测定为206 nm),柱温30℃。结果:以桔梗皂苷D为参照物峰,确定了12个共有峰,建立了18批药材的共有图谱,并比较了样品中桔梗皂苷D的含量。结论:所建立的HPLC指纹图谱及含量分析方法均具有较好的重现性,两者结合为桔梗药材质量控制提供了新的方法。

RP-HPLC法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量

目的：建立桔梗中桔梗皂苷D的高效液相测定法。方法：应用反相高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量,流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钾（磷酸调pH为3.0）（29∶71）,流速为0.7mL/m in,检测波长为206nm。结果：回归方程为：Y=462.90X＋12.49,r=0.9999,在0.0150-0.1496mg范围内有良好的线性关系,加样回收率为100.91%。结论：该方法简便,灵敏度高,为桔梗质量标准的研究提供了科学依据。

桔梗同源四倍体株系的鉴定和桔梗皂甙D含量的比较

对组织培养条件下诱导获得的桔梗 (PlatycodongrandiflorumA .DC)四倍体株系 ,进行了农艺性状的鉴定 ,同时采用HPLC ELSD测定了其桔梗皂甙D的含量。结果表明 :在供试的 2 1个桔梗四倍体株系中 ,18个株系的桔梗皂甙D含量高于二倍体株系 ;9个株系的单株产量高于二倍体株系 ;15个株系的桔梗皂甙D的生产量高于二倍体株系。这一结果为今后进一步选育出产量高。

不同干燥方法对桔梗中桔梗皂苷D含量的影响

目的考察不同干燥方法对桔梗中桔梗皂苷D含量的影响。方法采用反相-高效液相色谱法测定桔梗皂苷D的含量。结果不同干燥方法加工的桔梗中桔梗皂苷D的含量由高到低依次为:80℃烘干>60℃烘干>微波后晒干>晒干。结论不同干燥方法对桔梗中桔梗皂苷D含量有一定影响。

HPLC法测定不同产地桔梗的桔梗皂苷D含量

采用HPLC法测定了不同产地、不同生长年限的桔梗样品中桔梗皂苷D的含量。结果显示:不同产地、不同生长年限的桔梗样品中桔梗皂苷D含量差别较大;桔梗样品中桔梗皂苷D的含量与其生长年限呈正相关;以山东淄博3年生桔梗中的桔梗皂苷D含量最高。

电喷雾串联质谱法鉴定桔梗皂苷D

改进了桔梗皂苷D的提取、分离及鉴定方法 .首次利用大孔树脂脱糖脱色及薄层硅胶作色谱系介质 ,并首次利用电喷雾质谱对目标化合物进行跟踪分析 。

RP-HPLC法测定桔梗地上部分桔梗皂苷D的含量

目的:建立桔梗地上部分桔梗皂苷 D 的测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,以 Hypersil ODS2色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μxm),乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长210 nm,柱温20℃,以外标法检测。结果:桔梗皂苷 D 进样量在0.8～6.4μg范围内呈良好线性关系,平均回收率(n=5)为97.8%。结论:本方法准确可靠,可作为桔梗地上部分桔梗皂苷 D 的质量控制依据。

桔梗提取物中桔梗皂苷D的反相高效液相色谱检测方法研究

目的建立桔梗提取物中桔梗皂苷D的高效液相色谱（HPLC）检测方法。方法采用RP—HPLC法、蒸发光散射检测器（ELSD）测定桔梗皂苷D含量。色谱柱为Agilent ODS（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈：0．5％乙酸溶液=28：72，流速1．0ml／min；检测器为WatersELSD2420。结果桔梗皂苷D在0．015625～0．25mg／ml范围内与峰面积具有良好的线性关系，r=0．9996。桔梗皂苷D平均回收率为98．25％，RSD为1．18％。结论通过6批不同的桔梗提取物的含量测定，证明该方法简便、准确、可靠。

HPLC-ELSD法测定桔梗饮片中8种桔梗皂苷的含量

采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）法,以C18（4.6 mm×250 mm,5μm）为色谱柱,水-乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,PL-ELSD 2100为检测器,外标法定量,以桔梗皂苷D为标准品建立了以8种主要成分为质量控制指标的含量测定方法,并对该法进行方法学考察.结果表明：桔梗皂苷D含量在4.168～20.84μg范围与峰面积呈线性关系,检测的精密度RSD为0.958%,稳定性RSD为1.33%,重复性RSD为2.98%,添加回收率平均值为95.60%,RSD为1.91%.该方法灵敏、准确,重复性好,回收率高,操作简便,可用于桔梗饮片的质量控制.

HPLC-ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量

首次采用高效液相 蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗〔Platycodongrandiflorum (Jacq .)A .DC .〕中桔梗皂苷D含量 ,以C18(5 μm ,4.6mm× 2 5 0mm)为色谱柱 ,V(乙腈 )∶V(水 ) =2 8∶72为流动相 ,流速 0 .7mL/min ,以ELSD 5 0 0为检测器 ,外标法定量。结果表明 :桔梗皂苷D在 0 3～ 2 4μg范围内呈线性 ,回收率为 99 5 7% (n =5 ) ,RSD为1 10 %。对 8种不同来源的桔梗材料和 2 0个四倍体株系桔梗皂甙D含量的测定说明 ,此法是测定桔梗皂苷D的较佳方法 。

桔梗皂苷D对氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞氧化损伤的作用

为检测桔梗皂苷D对氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的内皮细胞氧化损伤的作用,利用OxLDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立细胞氧化损伤模型,分别以0.5、0.75、1mg/mL桔梗皂苷D(PD)处理,测定培养液一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞动脉细胞黏附分子(VCAM-1)和细胞黏附分子(ICAM-1)的表达;同时进行单核细胞与内皮细胞的黏附实验。结果表明:PD能显著增大细胞培养液NO浓度(P<0.01),显著降低MDA水平(P<0.01),减少VCAM-1和ICAM-1分子的表达(P<0.01)及单核细胞与内皮细胞的黏附作用(P<0.01)。说明PD能抑制OxLDL诱导的内皮细胞氧化损伤。

高效液相色谱法检测桔梗中的皂苷D*

建立了桔梗中皂苷D的HPLC快速测定方法.以甲醇为提取剂,超声波处理法提取皂苷D,以乙腈—水（体积比25∶75）为流动相,以C18为色谱柱,保留时间定性,峰面积定量.在该实验条件下皂苷D质量浓度在4.62~85.20μg/mL范围内呈线性相关,R2=0.999 6,回归方程y=2.871 7x＋0.343 2,检出限为2.31μg/mL,样品的加标回收率为92.86%~95.12%,RSD为1.2%.该法样品处理简单、快速,检测灵敏度高,重现性好,适合测定桔梗中皂苷D的质量分数.

不同栽培年限川桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的含量比较

目的:建立测定川桔梗中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D含量的方法,探索不同栽培年限川桔梗药材中2种指标成分的差异。方法:采用紫外-可见分光光度法测定川桔梗中桔梗总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定川桔梗中桔梗皂苷D的含量;比较一年生、两年生及三年生各10份川桔梗药材中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D的含量。结果:一年生、二年生、三年生川桔梗药材中桔梗总皂苷含量的平均值分别为2.47%、3.01%、2.47%;桔梗皂苷D含量的平均值分别为0.23%、0.27%、0.33%;即一年生的样品中2种指标的含量均较低,二年生样品的桔梗总皂苷含量最高,三年生样品桔梗皂苷D的含量最高。结论:不同栽培年限的川桔梗药材的指标性成分含量具有一定差异,但二者间并未呈现相关性,建议选用栽培年限为二年生或三年生的药材。

桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的超声波提取工艺

分别以水和甲醇为提取溶剂,研究超声波法提取桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的工艺条件。采用正交试验法,考察提取次数(A)、料液比(B)、提取时间(C)、超声功率(D)对桔梗总皂苷和桔梗皂苷D提取率的影响。以水为提取溶剂时,超声提取桔梗总皂苷的影响顺序:提取次数>超声功率>料液比>提取时间,最优组合A3B3C3D2;提取桔梗皂苷D的影响顺序:超声功率>料液比>提取次数>提取时间,最优组合A2B3C1D1。以甲醇为提取溶剂时,超声提取桔梗总皂苷的影响顺序:提取次数>超声功率>提取时间>料液比,最优组合A3B2C1D3;提取桔梗皂苷D的影响顺序:提取时间>提取次数>料液比>超声功率,最优组合A2B1C2D3。