小刺猴头多糖联合5-氟尿嘧啶对Hela细胞的抑制作用

目的研究体外单独应用小刺猴头菌多糖及联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用。方法水提醇沉法得到小刺猴头液体深层发酵浸膏多个糖组分,经MTT筛选获得小刺猴头菌多糖最优组分Hep2。设置空白、Hep2、Hep2+5-Fu、5-Fu组进行MTT实验及细胞周期检测。结果 Hep2单独给药及联合给药都能抑制Hela细胞增殖;Hep2组出现G1期阻滞现象;联合给药组发生了S期和G2/M期阻滞。结论 Hep2可以明显抑制Hela细胞的增殖,并且与5-Fu联合使用对Hela细胞产生协同抑制作用。

小刺猴头菌液体深层发酵浸膏多糖HFP及HFA的抗肿瘤活性

目的对从小刺猴头菌液体深层发酵浸膏中提取的多糖HFP及HFA的抗肿瘤活性进行初步研究。方法 MTT法测定HFP和HFA对体外培养的人肝癌细胞SMMC7721、人肺腺癌细胞SPC-A-1和人胃癌细胞SGC7901的生长情况。预防性及治疗性给S180荷瘤小鼠灌服HFP和HFA,测定小鼠瘤重、体重、脾重及胸腺重,并计算抑瘤率、脾系数及胸腺系数。结果 HFP和HFA对体外培养的3种肿瘤细胞均表现出一定的抗肿瘤活性,但HFP的抑制作用好于HFA。HFP可抑制小鼠体内S180实体瘤的生长,且预防组的抑瘤率高于治疗组,HFP组的脾系数和胸腺系数明显高于CTX组。结论 HFP和HFA在体外及体内均具有一定的抗肿瘤活性,且HFP的作用好于HFA。

小刺猴头发酵多糖对肉鸡胆固醇沉积的影响

本试验旨在研究小刺猴头发酵多糖(HFP)对肉鸡血清、肌肉、肝脏、心脏、肌胃、粪便中胆固醇含量的影响。试验选用1日龄AA肉鸡240只,随机分为4个处理,每个处理3个重复,每个重复20只,分别饲喂含HFP为0、0.1%、0.3%、0.5%的饲粮,试验时间为42d。结果表明,在不同日龄阶段(14、28、42日龄),与对照组相比,饲粮中添加0.3%和0.5%水平的HFP可显著降低肉鸡血液中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的含量(P<0.05),显著增加血液中高密度脂蛋白胆固醇含量(P<0.05);0.3%和0.5%水平HFP添加组肉鸡的胸肌、腿肌和肝脏中胆固醇含量均显著低于对照组(P<0.05),0.5%水平HFP添加组肉鸡肌胃中胆固醇含量显著低于对照组(P<0.05),饲粮中添加HFP对肉鸡心脏胆固醇水平没有显著影响(P>0.05);与对照组相比,饲粮中添加不同水平的HFP能够显著增加肉鸡粪便中胆汁酸的排泄(P<0.05),0.3%和0.5%水平的HFP添加组肉鸡粪便中胆固醇含量也显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,肉鸡饲粮中添加HFP可能通过增加肉鸡粪便中胆固醇和胆汁酸的排泄,从而降低肉鸡肌肉、肝脏、肌胃中胆固醇的含量。

响应面法优化小刺猴头菌寡糖的纯化工艺研究

采用盐析法对小刺猴头菌寡糖进行纯化,在pH值、硫酸铵饱和度和溶液浓度3个单因素试验的基础上,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理,以粗多糖中的蛋白去除率为指标响应值作响应面和等高线,分析各个因素的显著性和交互作用,得出利用硫酸铵盐析法去除寡糖中杂蛋白的工艺条件为:pH值为5.91,硫酸铵饱和度为57%,溶液浓度为4%。

小刺猴头菌发酵浸膏多糖体外抗氧化活性分析

为研究小刺猴头菌[Hericium caput-medusae(Bull.:Fr.)Pers]发酵浸膏多糖的抗氧化活性。以工厂化小刺猴头菌发酵浸膏为原料,采用透析法分级,DEAE sepharose fast flow柱层析纯化,分别获得粗多糖组分HFCP1和中性多糖HFCP1-1;通过PMP柱前衍生-高效液相色谱法和红外光谱法对单糖组成和结构进行分析,单糖组成均以葡萄糖和半乳糖为主。化学法检测多糖抗氧化活性,结果显示:HFCP1和HFCP1-1清除羟基自由基、超氧阴离子自由基、2,2′-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(2,2′-azinobis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate,ABTS+)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)的IC50值分别为7.66和6.77mg/mL、6.16和5.30mg/mL、0.63和0.85mg/mL、0.39和2.62mg/mL。以RAW264.7细胞建立H2O2诱导损伤模型,细胞抗氧化结果表明:HFCP1和HFCP1-1处理组与模型组相比均显著增强细胞活力(P<0.05),浓度为100和200mg/L时MDA含量与模型组相比均显著下降(P<0.05);HFCP1浓度为100和200mg/L时与模型组相比显著增加SOD和GSH-Px的活性(P<0.05);HFCP1-1浓度为200mg/L时与模型组相比显著增加SOD活性(P<0.05);也能增加GSH-Px的活性,但未达到显著水平(P>0.05)。

小刺猴头菌发酵浸膏寡糖的制备及其对肠道菌群体外生长的影响

目的制备小刺猴头菌发酵浸膏寡糖,并检测其对肠道菌群体外生长的影响。方法采用酶降解、酸降解两种方法制备小刺猴头菌发酵浸膏寡糖,通过葡聚糖凝胶层析法与荧光辅助糖电泳法(fluorophore assisted carbohydrate electrophoresis,FACE)进行分离分析,并观察不同降解条件产物对大肠埃希菌和鼠李糖乳杆菌体外生长的影响。结果最佳酶降解反应条件为料液比1∶45,反应温度50℃,反应时间5 h,选取还原糖得率低(21.67%)、中(32.33%)、高(36.11%)3组寡糖产物,分别命名为HFP-M1、HFP-M2、HFP-M3;最佳酸降解反应条件为反应温度25℃,pH 3,反应时间1 h,选取还原糖得率低(39.72%)、中(44.93%)、高(48.25%)3组寡糖产物,分别命名为HFP-S1、HFP-S2、HFP-S3;层析结果显示,酸降解寡糖比酶降解寡糖相对分子质量小;FACE分析显示,在32%的凝胶浓度下,酶降解寡糖可分离出较明显的条带,而酸降解寡糖条带不太清晰;两种方法降解获得的6种寡糖均能显著抑制大肠埃希菌的繁殖,促进鼠李糖乳杆菌的生长,且效果优于小刺猴头菌发酵浸膏多糖。结论采用酶降解和酸降解两种方法制备的小刺猴头菌发酵发酵浸膏寡糖对大肠埃希菌的繁殖具有抑制作用,对鼠李糖乳杆菌的生长均有促进作用。本实验为大分子小刺猴头菌发酵浸膏多糖及其降解产物应用于医药保健或功能性食品的开发提供了实验依据。

盐析法纯化猴头菌多糖工艺条件的研究

利用响应面法对猴头菌子实体的纯化工艺进行优化.在单因素试验基础上选取主要的试验因素与水平,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,依据回归分析确定各工艺条件的影响因素,以粗多糖中的蛋白去除率为指标响应值作响应面和等高线.在分析各个因素的显著性和交互作用后,得出利用硫酸铵法去除多糖中杂蛋白的条件为:pH值为5.01,硫酸铵饱和度为41%,溶液浓度为4%.