冬虫夏草(Cordyceps sinensis)菌丝体固体发酵粉化学成分的分析

本研究对一种冬虫夏草(Cordycepssinensis)菌丝体固体发酵粉的化学成份进行了分析,包括粗成份,生物活性成份,脂肪酸,氨基酸,金属元素等。冬虫夏草菌丝体固体发酵粉中3′-脱氧腺苷含量40.81μg/g、腺苷含量745.4μg/g;甘露醇的含量为165.8mg/g,多糖含量为157.3mg/g;谷氨酸,天门冬氨酸,苯丙氨酸是三大类主要氨基酸;不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚油酸,油酸为主。和文献记录的结果相比,虫草发酵粉中3′-脱氧腺苷,甘露醇的含量明显高于冬虫夏草子实体中相应成份的含量;各种氨基酸的含量和水平与冬虫夏草子实体中相应氨基酸的含量和水平相当;虫草发酵粉中的其它化学成份和冬虫夏草子实体中相应成份基本一致。

Cordycepssinensis CAMT63341液态发酵多糖对小鼠若干行为学指标及免疫器官指数的影响

为评价虫草菌(Cordyceps sinensis)CAMT 63341液态发酵多糖对小鼠生长、情绪、认知和免疫的影响,将60只健康雄性昆明小鼠随机分成空白对照、灵芝多糖对照和Cordyceps sinensis CAMT 63341发酵多糖高、中、低剂量饲喂组连续喂养30 d,然后行高架十字迷宫、穿梭箱、迟发型超敏反应实验,并记录小鼠体质量和免疫器官指数。结果表明:与空白对照组相比,Cordyceps sinensis CAMT 63341发酵多糖可剂量依赖性促进小鼠生长,增加高架迷宫开放臂次数和延长停留时间,增强穿梭箱实验中主动回避能力和缩短被动回避潜伏期,提升胸腺和脾脏器官指数,其中,高剂量组达到显著(P<0.05)或极显著水平(P<0.01),接近灵芝多糖对照组,提示Cordyceps sinensis CAMT 63341液态发酵多糖具有一定的促进生长、改善情绪、增强认知和提升免疫功能。

快速消解-电感耦合等离子体质谱法测定虫草菌粉中9种元素

建立了一种快速消解-电感耦合等离子体质谱法测定发酵虫草菌粉中钾、镁、钙、锰、锌、铅、镉、铝、砷9种元素的含量。采用纯硝酸快速消解发酵虫草菌粉标准物质样品后,冷却,定容后利用电感耦合等离子体质谱法进行测定。结果表明,以锗、铟、铋元素作为内标,9种元素的质量浓度在0~50 mg/L范围内与吸光度具有较好的线性关系,线性相关系数均不小于0.998,检出限为0.010~0.038 mg/kg,定量限为0.042~0.125 mg/kg。对发酵虫草菌粉样品进行测定,9种元素加标回收率为96.8%~109.3%,测定结果的相对标准偏差为1.03%~6.98%(n=6)。该方法可用于大批量发酵虫草菌粉检测钾、镁、钙、锰、锌、铅、镉、铝、砷含量。

中华白僵菌产胞内粗多糖提取及发酵条件优化

本文采用单因素试验、正交实验、Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验以及Box-Behnken实验对中华白僵菌(Beauveria sinensis)产孢内粗多糖浸提条件与发酵条件进行优化。结果显示,经正交实验优化后,中华白僵菌产胞内粗多糖提取含量提升37.0%,经Box-Behnken实验优化后确定最佳发酵条件为:可溶性淀粉添加量5%、酵母浸膏添加量2.5%、装液量100 mL/250 mL、初始pH值5.5、温度27℃、转速160 r/min,多糖最高产量为(31.5±1.0)mg/g,对比优化前提高了57.5%。

冬虫夏草液体发酵生产多糖和菌丝体的研究

本实验采用液体发酵冬虫夏草生产菌丝体和多糖。通过单因素试验,确定利用蔗糖酵母膏液体培养基发酵生产多糖和菌丝体的最佳条件为:接种量5%、温度26℃、培养时间4d,通气流量1L/min。

冬虫夏草液体发酵产胞外多糖的实验条件

为提高虫草多糖产率,优化了冬虫夏草液体发酵条件。最佳发酵条件为:葡萄糖30 g/L,豆粕20 g/L,MgSO42 g/L,KH2PO44 g/L,pH值为7.0,接种量10%,培养温度24℃,摇床转速140 r/min。在此条件下,胞外多糖的最高产量为3.928 g/L。利用液体发酵生产胞外多糖,可有效地缩短生产周期。

响应面分析法优化发酵虫草菌粉多糖的提取工艺

【目的】采用响应面分析法优化发酵虫草菌粉多糖的提取工艺。【方法】在单因素实验的基础上选取因素与水平,根据中心组合实验Box-Behnken设计原理采用3因素3水平的响应面分析法设计实验。【结果】各因素对多糖提取率的影响次序为:提取温度>提取时间>料液比;通过经典分析确定了发酵虫草菌粉最佳提取工艺为:提取温度为95℃,料液比为1∶21,提取时间为73 min。在这样的环境下发酵虫草菌粉多糖提取率理论值为4.31%,实际提取率为(4.20±0.1)%。【结论】响应面分析法用于优化发酵虫草菌粉多糖的提取工艺可行,建立的数学模型与实验数据相符。

发酵虫草菌粉对DEN致大鼠肝损伤的保护作用及TGF-β1/Smads通路的影响

目的:探讨发酵虫草菌粉(fermented cordyceps sinensis powder,CS)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝损伤的保护作用及对TGF-β1/Smads通路的影响。方法:无特定病原体(SPF级)健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠48只,体质量(180±20) g,随机分为4组:对照组、模型组、CS治疗组与CS溶媒组,每组12只。模型组:灌胃给予10 mg/kg DEN每周5次共8周,构建慢性肝损伤模型;对照组:灌胃给予与模型组相同体积的生理盐水; CS治疗组:在建模4周后灌胃给予80 mg/kg CS每周5次共8周; CS溶媒组:灌胃给予与CS组相同体积的5%甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液。实验结束后,麻醉,脊椎脱臼法处死大鼠,收集血液,紫外分光光度法检测各组大鼠血清中AST、ALT以反映肝功能; H&E染色观察肝组织形态变化,Masson染色观察胶原沉积情况;改良Nycodenz法分离各组大鼠原代肝星状细胞(HSC),RT-qPCR检测肝组织与HSC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子(TGF)-β1、Smad3、Smad7 mRNA的表达水平; Western blot检测肝组织Smad3与Smad7蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠血清中AST、ALT含量显著升高,H&E染色结果显示肝脏组织形态显著改变,Masson染色结果显示胶原沉积增多;与模型组相比,CS治疗四周能显著降低肝损伤大鼠血清中升高的AST、ALT水平,改善其肝脏病理损伤程度,减少肝脏中胶原沉积。RT-qPCR结果显示,CS可减少肝损伤大鼠组织及HSC中α-SMA、TGF-β1 mRNA表达水平,增加Smad7mRNA表达水平; CS溶媒组各项检测指标均与模型组无差异;此外,Western blot结果显示,CS可下调肝损伤大鼠肝组织Smad3蛋白的表达,上调Smad7。结论:CS可显著改善DEN诱导的大鼠肝损伤,该作用可能与CS上调Smad7,并抑制TGF-β1/Smads通路有关。

用高效液相色谱法柱前衍生化测定发酵虫草菌粉氨基酸成分

采用高效液相色谱法对经2,4-二硝基氟苯衍生化后的氨基酸有效分离,外标法测定了发酵虫草菌粉中各种氨基酸含量,结果表明该法操作简便、结果良好;发酵虫草菌粉含有丰富的氨基酸,氨基酸总量高达37％。

发酵虫草菌粉抗大鼠肝纤维化作用及机理研究

目的探讨发酵虫草菌粉抗大鼠肝纤维化作用及作用机理。方法将30只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和虫草组,采用40%四氯化碳(CCl4)每周2次皮下注射6周制作大鼠肝纤维化模型,经灌胃给药6周后,在麻醉状态下采血,检测大鼠血清肝功能和肝纤维化指标、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)。结果与模型组比较,虫草组肝脏纤维化程度明显减轻,谷丙转氨酶(ALT)降低和白蛋白(ALB)升高作用明显(P<0.05),同时非常显著改善肝纤维化指标、MMP-1及TIMP-1(P<0.01)。结论发酵虫草菌粉具有抗肝纤维化作用且与升高MMP-1及降低TIMP-1有关。

KI溶液对冬虫夏草生物量及多糖含量的影响

研究不同浓度KI溶液对冬虫夏草液体发酵液中虫草生物量和虫草多糖含量的影响,筛选出提高虫草生物量及虫草多糖含量的最优KI浓度.将不同浓度的KI溶液添加到虫草液体发酵培养基中,测定虫草生物量,提取虫草多糖,用苯酚-硫酸法对其含量进行检测.结果表明,在冬虫夏草液体发酵液中,添加KI溶液能明显提高虫草生物量及虫草多糖含量,当KI质量浓度为5mg/mL时,虫草生物量质量浓度达31.64mg/mL,菌丝体长势很强,胞内多糖含量为26.4mg/g,胞外多糖质量浓度为3.6mg/mL,为最优浓度梯度.冬虫夏草发酵培养过程中添加KI溶液能明显提高虫草生物量及虫草多糖含量.

虫草多糖的制备、性质及应用

从冬虫夏草的发酵工艺,虫草多糖的提取方法,虫草多糖的分子结构、功能及发展趋势等方面对近年来研究的成果做了简要概述。

发酵虫草菌粉多糖成分的理化性质及其对ConA抑制L-O_2细胞增殖活性的影响

目的:将发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖进行分离纯化,并观察纯化产物对ConA抑制人正常肝细胞(L-O_2细胞株)增殖活性的拮抗作用。方法:发酵虫草菌粉(Cs-4)通过水提醇沉、复溶、透析、浓缩、冷冻干燥得粗多糖,采用DEAE-纤维素离子交换、sephadex-G-100柱色谱分离纯化粗多糖,MTT法检测细胞增殖活性。结果:发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖经分离纯化得到均一成分,命名为CSMP-60-B-I。高效凝胶渗透色谱法测得其相对峰高分子量为32 336 Da。毛细管电泳测得单糖组成为木糖-阿拉伯糖-葡萄糖-半乳糖-甘露糖(0.09∶0.20∶1.00∶3.70∶3.58)。高浓度ConA能抑制L-O_2细胞增殖,而加入CSMP-60-B-I后,这种抑制作用大大减弱。结论:发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖的分离纯化产物CSMP-60-B-I对ConA抑制L-O_2细胞增殖活性有拮抗作用,提示其可能有保肝作用。

天然与发酵虫草菌丝体中多糖组份及活性比较

为找出发酵虫草菌丝体与天然虫草菌丝体的差异,对其多糖成分、含量进行比较研究,并利用细胞增殖实验对生物活性进行分析比较。发酵虫草存在两种多糖,分子量分别为3 682 k Da和166 k Da;天然虫草多糖存在3种多糖,分子量分别为400 k Da,215 k Da和127 k Da。细胞活性实验表明,发酵虫草多糖和天然虫草多糖均对脾细胞增殖的具有促进作用,且发酵虫草多糖对脾细胞增殖促进作用稍优于天然虫草多糖。两种多糖均可降低肿瘤上清液对小鼠脾细胞的体外增殖的抑制作用,两者无显著性差异;加入虫草多糖的各种肿瘤上清液的TGFβ1的分泌量明显降低,两种虫草多糖都能够抑制肿瘤细胞的生长增殖,但无显著性差异。说明两种多糖的生物活性没有明显差异。

近5年天然冬虫夏草与发酵虫草菌粉药理研究进展

冬虫夏草是我国传统名贵滋补中药材,具有提高人体免疫力、抗氧化、抗炎、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤等作用。然而,受诸多因素影响,天然冬虫夏草的产量难以满足人们日益增长的需求。1987年以来,国内相继研发出发酵虫草菌粉。经实验证明具有与天然冬虫夏草相似的有效成分和药理作用,其单方或复方制剂已广泛应用于临床和保健食品中,取得了一定的经济效益和社会效益。本文综述了近5年天然冬虫夏草与发酵虫草菌粉药理研究进展,旨在为其研究与开发提供有价值的参考。

功能肽、发酵虫草菌粉和多酚枣粉对断奶仔猪饲料中常规替抗组分的替代效果研究

试验旨在研究在日粮中添加功能肽、发酵虫草菌粉和多酚枣粉替代常规替抗组分对断奶仔猪生长性能、抗氧化和免疫功能的影响。选取672头体况良好、断奶日龄和体重相近的“杜×长×大”三元杂交仔猪,随机分为4组,每组6个重复,每个重复28头仔猪。对照组仔猪饲喂常规替抗成分的基础日粮(商品粮),试验组分别使用1 kg/t功能肽、3 kg/t发酵虫草菌粉和2 kg/t多酚枣粉替代基础日粮的常规替抗成分。结果显示:与对照组相比,功能肽组、发酵虫草菌粉组和多酚枣粉组仔猪的末重均具有增加趋势(P=0.05);多酚枣粉组仔猪的平均日增重显著高于其他组(P<0.05);虫草菌粉组仔猪的料重比显著低于功能肽组(P<0.05);多酚枣粉组仔猪的死淘率和腹泻率高于其他组。虫草菌粉组和多酚枣粉组仔猪血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于功能肽组(P<0.05)。研究表明,日粮中使用功能肽、虫草菌粉和多酚枣粉替代常规替抗组分能够提升断奶仔猪的生长性能;虫草菌粉和多酚枣粉能够提升仔猪免疫力。

虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对化学性肝损伤的辅助保护作用

目的:观察虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对急性肝损伤小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝细胞变性及坏死程度的影响。方法:采用CCl_4诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,将动物随机分成5组,分别是空白对照组,模型对照组,虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物低、中、高剂量组(3个剂量组分别为1.11、3.33、10.00 g/kg BW),检测血清ALT、AST值,并取肝脏作病理切片,观察肝脏的病理损伤情况。结果:虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物高剂量组能明显降低CCl_4急性肝损伤小鼠血清ALT值,减轻肝细胞坏死程度。结论:虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对化学性肝损伤有辅助保护功能。

虫草蝙蝠蛾拟青霉（C1501）发酵菌粉、灵芝提取物及葛根提取物对化学性肝损伤的辅助保护作用

目的:观察虫草蝙蝠蛾拟青霉(C1501)发酵菌粉、灵芝提取物及葛根提取物(简称CGP)对急性肝损伤小鼠谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、肝细胞变性及坏死程度的影响。方法:采用CCl4诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,将动物随机分成5组,分别是空白对照组,模型对照组,CGP实验设计按人体推荐量的5倍、10倍和30倍,即每日337.5 mg/(kg·bw),675 mg/(kg·bw)和2 025 mg/(kg·bw)为低、中、高剂量组,检测血清ALT、AST值,并取肝脏作病理切片,观察肝脏的病理损伤情况。结果:以337.5、675、2 025 mg/kg BW剂量的CGP灌胃给予小鼠36天,并以四氯化碳造成急性肝损伤模型,CGP提取物675 mg/(kg·bw)、2 025 mg/(kg·bw)剂量组的ALT、AST均低于模型对照组,差异具有统计学意义(*P<0.05)。337.5 mg/(kg·bw)、675 mg/(kg·bw)、2 025 mg/(kg·bw)三个剂量组的肝细胞气球样变与模型对照组比较,差异具有统计学意义(**P<0.01);2 025 mg/(kg·bw)剂量组肝细胞水样变程度低于模型对照组,差异具有统计学意义(**P<0.01);675 mg/(kg·bw)、2 025 mg/(kg·bw)剂量组的肝细胞坏死程度低于模型对照组,差异具有统计学意义(*P<0.05)。结论:虫草蝙蝠蛾拟青霉(C1501)发酵菌粉、灵芝提取物及葛根提取物(CGP)对化学性肝损伤有辅助保护功能。

虫草联合复方ɑ-酮酸对维持性血液透析患者营养状况的影响

目的探讨发酵虫草菌粉联合复方ɑ-酮酸及低蛋白饮食对维持血透析患者营养状况影响的观察。方法观察60例血液透析患者治疗前后营养指标(BMI、握力、ALB、Hb、PA、TG、CHO、CRP)、血生化指标(Scr、血钙、血磷、血钾)。结果两组治疗前后ALB、Hb、PA、TG、CHO、CRP、血钙、血磷均较治疗前好转,其中治疗组ALB、PA明显优于对照组。结论发酵虫草菌粉联合复方ɑ-酮酸及低蛋白饮食能改善维持性血液透析患者营养状况、血脂代谢、钙磷代谢及微炎症状态。

HPLC法测定发酵冬虫夏草菌丝粉中麦角甾醇的含量

通过样品处理及检测条件优化,建立发酵冬虫夏草菌丝粉麦角甾醇的HPLC检测方法。结果表明,采用C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(98∶2)为流动相,检测波长280 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温为35℃,进样量为20μL,麦角甾醇浓度为10.36~103.6μg·mL^-1时,浓度与峰面积呈线性关系;加标回收率为98.5%,相对标准偏差为0.79%。